CC BY
36
11. Schulman J.L., Palese P. Virulence factors of influenza A virus. WSN virus neuraminidase required for plaque production in MDBK cells. J. Virol. 1977; 24: 170 - 176.
12. Li Sh., Schulman J., Itamura S., Palese P. Glycosilation of neuraminidase determines the neurovirulence of influenza A/WSN/33 virus. J. Virol. 1993; 67: 6667 - 6673.
13. Snyder M.H., Betts R.F., DeBorde D. et al. Four viral genes independently contribute to attenuation of live influenza A/Ann Arbor/6/60 (H2N2) cold-adapted reassortant virus vaccines. J. Virol. 1988; 62 (2): 488 - 495.
14. Parks Ch.L., Latham Th., Cahill A. et al. Phenotypic properties resulting fromdirected gene segment reassortment between wild-type A/Sydney/5/97 influenza virus and the live attenuated vaccine strain. J. Virol. 2007; 367: 275 - 287.
К вопросу о значении нанобактерий в медицине и биологии
(продолжение)
А.Г. Кутихин1 ([email protected]), Е.Б. Брусина1, 2 ([email protected]), А.Е. Южалин2 ([email protected])
1ГБОУ ВПО «Кемеровская государственная медицинская академия» Минздрава России
2ФГБУ «НИИ комплексных проблем сердечно-сосудистых заболеваний» Сибирского отделения РАМН, г. Кемерово
Резюме
Кальцифицирующиеся наночастицы (нанобактерии; частицы, подобные нанобактериям; нанобы) были открыты более 25 лет назад, тем не менее природа их остается неизвестной. До настоящего времени никому так и не удалось достоверно выяснить, являются ли они мельчайшей самореплицирующейся формой жизни на Земле или представляют собой лишь минерально-белковые комплексы, не имеющие отношения к живым существам. Сторонники обеих точек зрения располагают рядом аргументов в пользу своих гипотез. Тем не менее в результате эпистемологического анализа, проведенного в этой статье, все аргументы, приводимые в пользу гипотезы о нанобактериях как о минерально-белковых комплексах, могут быть отвергнуты на основании проведенных исследований. Таким образом, опубликованные данные позволяют предположить биологическую природу кальцифицирующихся наночастиц. Единственным препятствием для признания кальцифицирующихся наночастиц живыми организмами на данный момент является отсутствие достоверно правильно секвенированного генома. Более того, очевидно, что кальцифицирующиеся наночастицы играют важную роль в этиопатогенезе многих заболеваний, и эта связь не зависит от их природы. Следовательно, появление кальцифицирующихся наночастиц в организме является патологическим, а не физиологическим процессом. В статье также приводятся классификация кальцифицирующихся наночастиц и перечень новых направлений в исследовании их роли в биологии и медицине.
Ключевые слова: кальцифицирующиеся наночастицы; нанобактерии; частицы, подобные нанобактериям; заболевания; инфекционные агенты
On the Significance of Nanobacteria in Medicine and Biology
A.G. Kutikhin1 ([email protected]), E.B. Brusina12 ([email protected]), A.E. Yuzhalin2 ([email protected]) 1State Budgetary Educational Institution of Higher Professional Training «Kemerovo State Medical Academy» of the Ministry of Healthcare of the Russian Federation
2«Research Institute for Complex Issues of Cardiovascular Diseases» under the Siberian Branch of the Russian Academy of Medical Sciences, Kemerovo Abstract
Nanobacteria were discovered more than 25 years ago; nevertheless, their nature is still poorly known. To date nobody was able to credibly define them either as smallest self-replicating life form on Earth, or as mineralo-protein complexes without any relation to living creatures. Proponents of both hypotheses possess numerous arguments to support their theories. The only obstacle to establish nanobacteria as living organisms is an absence of sequenced genome. Moreover, it is clear that nanobacteria, regardless of their nature, play an important role in etiopathogenesis of various diseases. Therefore, emergence of nanobacteria in the organism is a pathological, not a physiological, process. The classification of nanobacteria and new directions of the further investigations devoted to the their role in medicine and biology are proposed.
Key words: calcifying nanoparticles, nanobacteria, mineralo-protein complexes, diseases, a pathological process
Роль кальцифицирующихся наночастиц в этиопатогенезе заболеваний
Многими авторами были получены результаты, подтверждающие участие КН в этиопатогенезе
различных заболеваний, особенно связанных с патологической кальцификацией (см. табл. 3). Martel и соавт. [6] выдвинули гипотезу о некорректности использования широко применяемой Y-облученной
Таблица 3.
Связь кальцифицирующихся наночастиц с различными заболеваниями
Год, автор, ссылка Заболевание метод выявления связи между кальцифи-цирующимися наночастицами и заболеванием
Kajander et al. (1998) [14] Нефролитиаз Серологический, бактериоскопический, бактериологический
Ciftcioglu et al. (1999) [15] Нефролитиаз Серологический, бактериоскопический, бактериологический
Hjelle et al. (2000) [16] Поликистоз почек Серологический, бактериоскопический, бактериологический
Sedivy et al. (2003) [44] Формирование псаммомных телец в злокачественных опухолях яичника Серологический
Hudelist et al. (2004) [17] Формирование псаммомных телец в злокачественных опухолях яичника Серологический
Khullar et al. (2004) [18] Нефролитиаз Серологический, бактериоскопический, бактериологический
Maniscalco et al. (2004) [39] Кальцификация коронарных артерий Серологический
Miller et al. (2004) [19] Кальцификация коронарных артерий и сердечных клапанов Серологический, бактериоскопический, бактериологический
Pretorius et al. (2004) [46] ВИЧ-инфекция Серологический
Puskas et al. (2005) [23] Атеросклеротические бляшки Серологический, бактериоскопический, бактериологический
Shoskes et al. (2005) [34] Хронический простатит III типа/ синдром хронической тазовой боли Серологический
Wen et al. (2005) [45] Холецистолитиаз Серологический, бактериоскопический, бактериологический
Kumar et al. (2006) [20] Бляшки Рэндалла Серологический, бактериоскопический, бактериологический
Shiekh et al. (2006) [24] Кальцификация почечных канальцев Бактериологический (животная модель)
Wang et al. (2006) [21] Черные пигментные желчные камни Серологический, бактериоскопический, бактериологический (животная модель)
Agababov et al. (2007) [47] Патологическая кальцификация плаценты Бактериоскопический
Bratoz-Perez et al. (2008) [40] Кальцификация аортальных клапанов Бактериоскопический, бактериологический
Ciftcioglu et al. (2008) [30] Бляшки Рэндалла Серологический, бактериоскопический, бактериологический
Schwartz et al. (2008) [29] Кальцификация артерий с поврежденным эндотелием Бактериоскопический, бактериологический (животная модель)
Zhou et al. (2008) [35] Простатит III типа Серологический, бактериоскопический, бактериологический
Candemir et al. (2010) [41] Кальцификация митрального кольца Серологический
Chen et al. (2010) [31] Нефролитиаз Серологический, бактериоскопический, бактериологический
Hu et al. (2010) [42] Кальцификация сердечных клапанов при ревматической болезни сердца Серологический, бактериоскопический, бактериологический
Hu et al. (2010) [32] Нефролитиаз Бактериоскопический, бактериологический (животная модель)
Shen et al. (2010) [36] Простатит III типа Бактериоскопический, бактериологический (животная модель)
Zhang et al. (2010) [37] Интерстициальный цистит/синдром болезненного мочевого пузыря Серологический, бактериоскопический, бактериологический
Zhang et al. (2010) [38] Тестикулярный микролитиаз Серологический, бактериоскопический, бактериологический
Tulunay Kaya et al. (2011) [43] Кальцификация коронарных артерий Серологический
сыворотки крови в качестве компонента среды для культивирования КН, мотивируя это тем, что используемое для ее стерилизации Y-излучение неэффективно. Однако во всех остальных приводимых ниже работах Y-излучение в аналогичной дозе успешно выполняло свою роль, препятствуя образованию КН в контрольных средах (а значит, стерилизуя сыворотку и в опытных средах). Кроме того, Mathew и соавт. [26] обнаружили, что КН способны культивироваться и в бессывороточных средах.
Первой по хронологии и наиболее изученной является связь КН с возникновением нефролитиа-за, показанная в 1998 году Kajander и соавт. [14], которые выявили во всех 30-ти исследованных почечных камнях специфические антигены КН, а также смогли выделить и культивировать из этих образцов собственно сами КН. Эти данные были далее подтверждены в работе Ciftcioglu и соавт. [15], которые путем использования нескольких методов (иммуноокрашивание без культивирования и с культивированием в клеточной культуре фибро-бластов млекопитающих, оценка инкорпорации Ca и 85Sr, бактериоскопические и бактериологические методы) показали в 97,2% исследованных почечных камней наличие КН. Кроме того, они предложили гипотезу - о том, что кальцифицирующиеся наночастицы могут служить этиологическим агентом нефролитиаза. Гипотеза основана на следующих положениях [15]:
В абсолютном большинстве почечных камней удалось идентифицировать КН, а также выделить и культивировать их.
Практически все почечные камни содержат в своем составе апатит, являющийся компонентом минеральной оболочки КН.
Кальцифицирующиеся наночастицы - единственный известный агент, продуцирующий апатит, депонирующийся в почках.
Кальцифицирующиеся наночастицы, выделенные из почечных камней, при культивировании образовывали новые почечные камни.
Меченные радиоактивным технецием (99mTc) кальцифицирующиеся наночастицы, введенные кроликам внутривенно, обладали ренотропностью, попадая также в мочу.
В дальнейшем эта гипотеза была подтверждена результатами исследования Khullar и соавт. [18], которые обнаружили КН в 62% почечных камней, выявленных в индийской популяции при помощи серологических (реакция иммунодиффузии по Оух-терлони), бактериоскопических и бактериологических методов. Kumar и соавт. [20], используя целый ряд серологических, бактериоскопических, бактериологических, геномных и протеомических методов, показали вероятную роль КН в этиопатогене-зе бляшек Рэндалла, являющихся предшественниками почечных оксалатно-кальциевых камней. В дальнейшем результаты их работы были подтверждены данными Ciftcioglu и соавт. [30], которые серологически, бактериоскопически и бактериологи-
чески выявили кальцифицирующиеся наночастицы приблизительно в 70 - 90% образцов тканей почечных сосочков, пораженных бляшками Рэндалла (использованные методы обладали различной чувствительностью и специфичностью). Аналогичные результаты были получены при анализе сыворотки крови этих пациентов [30]. К тому же Chen и со-авт. [31] показали наличие кальцифицирующихся наночастиц в сыворотке крови 92% пациентов с нефролитиазом и отсутствие таковых в сыворотке крови индивидов контрольной группы, однако следует отметить недостаточную выборку в данной работе (24 индивида в опытной группе и 3 - в контрольной). Hu и соавт. [32] продемонстрировали способность КН вызывать нефролитиаз у крыс, при этом терапия тетрациклином, обладающим как специфическим антибактериальным (ингиби-рование белкового синтеза), так и хелатирующим действием препятствовала образованию почечных камней. Ранее схожие результаты на крысах были также получены Shiekh и соавт. [24], однако выборка крыс в их исследованиях была недостаточной (3 опытных и 3 контрольных крысы). Вдобавок в их работе не исследовалось действие тетрациклина на формирование почечных камней [24]. Что касается других болезней почек, то Hjelle и соавт. [16] обнаружили у пациентов с поликистозом почек кальцифицирующиеся наночастицы бактериоскопически и серологически в 100% случаев (8 случаев из 8 и 13 случаев из 13 соответственно), а бактериологически - в 84,6% случаев (11 случаев из 13). Роль КН в этиологии этого заболевания остается неясной, поскольку других подобных работ проведено не было, однако известно, что нефролитиаз встречается у больных поликистозом почек в несколько раз чаще, чем в среднем в популяции [33].
Кроме того, исследовалась роль КН в этиопато-генезе хронического простатита III типа. Shoskes и соавт. [34] выявили, что comET-терапия (тетрациклин + ЭДТА + смесь нутриентов) в течение трех месяцев в 80% случаев приводит к улучшению состояния пациентов с простатитом (резистентным к другой терапии) на 25% и даже более чем в половине случаев выше -50% (согласно разработанному Национальным институтом здоровья (США) индексу симптомов хронического простатита). У 60% пациентов, по результатам трансректального ультразвукового исследования, размер камней уменьшился как минимум вдвое [34]. Sl^skes и соавт. также удалось обнаружить антигены или антитела к КН в 60% образцов сыворотки крови и в 40% образцов мочи [34]. В 2008 году Zhou и соавт. [35] провели плацебо-контролируемое исследование по результатам терапии против КН на большей выборке пациентов с хроническим простатитом III типа, резистентным к другому лечению. После проведения курса comET-терапии КН были обнаружены бактериоскопически-ми и бактериологическими методами в секрете простаты лишь у 16,7% пациентов (изначально этот показатель составлял 62,5%), в то время как в
моче больных кальцифицирующиеся наночастицы не были обнаружены вообще (до терапии они были выявлены в моче 12,5% обследуемых) [35]. В плацебо-группе статистически достоверного снижения частоты выявления КН в секрете простаты и моче больных не наблюдалось [35]. Аналогичные результаты были получены в отношении улучшения состояния пациентов, согласно его анализу с использованием разработанного Национальным институтом здоровья индекса симптомов хронического простатита [35]. Это позволило авторам предположить участие КН в этиологии хронического простатита III типа и предложить этиотропную терапию против них как эффективный способ лечения этого заболевания [35]. Наконец, в 2010 году Shen и соавт. [36] продемонстрировали влияние КН на развитие хронического простатита III типа на животной модели, вводя их крысам трансуретрально. Спустя одну-две недели после начала эксперимента у крыс, которым были введены КН, отмечались острые воспалительные изменения простаты, через четыре недели - хронические воспалительные изменения этого органа [36]. По окончании восьмой недели у 70% (7 из 10) крыс в железистой части простаты наблюдались микроскопические камни [36]. Ничего из вышеперечисленного у контрольных крыс выявлено не было [36]. Содержание IL-1ß и TNF-a в тканях простаты крыс, которым ввели КН, было выше, чем у контрольных животных
[36]. Таким образом, роль КН в этиологии хронического простатита III типа была подтверждена экспериментально [36].
Что касается других заболеваний мочевыдели-тельной системы, Zhang и соавт. [37] выдвинули предположение об участии КН в этиологии интер-стициального цистита и синдрома болезненного мочевого пузыря, серологически, бактериоскопи-чески и бактериологически выявив КН в 47,8% (11 из 23) образцов ткани мочевого пузыря у пациентов с этим заболеванием и продемонстрировав значительное улучшение симптомов заболевания (вплоть до полного их устранения) у 90,9% (10 из 11) этих больных в результате терапии тетрациклином (орально и интравезикально). Кроме того, после такого лечения КН были обнаружены в ткани мочевого пузыря лишь у 27,3% (3 из 11) пациентов
[37]. Эта же группа авторов выдвинула гипотезу о возможной роли КН в этиологии тестикулярного микролитиаза, при помощи серологических, бак-териоскопических и бактериологических методов обнаружив КН в 58,8% (10 из 17) образцов спермы пациентов с этим заболеванием в сравнении с 5,9% (1 из 17) образцов, полученных от индивидов контрольной группы [38].
Также в ряде работ исследовалось влияние КН на этиопатогенез сердечно-сосудистых заболеваний. Так, Maniscalco и соавт. [39] при помощи серологических тестов выявили, что comET-терапия (1500 мг ЭДТА в ректальных суппозиториях ежедневно однократно, 500 мг тетрациклина перо-
рально ежедневно однократно и смесь различных нутриентов общеукрепляющего действия в порошке перорально однократно) в течение четырех месяцев может быть эффективна при ишемической болезни сердца, снижая кальцификацию коронарных артерий, которая предположительно вызывается депонированием в них КН (известно, что они чувствительны как к тетрациклину, так и к ЭДТА). Miller и соавт. [19] серологически, бактериоскопи-чески и бактериологически обнаружили КН в каль-цифицированных аневризмах, сердечных клапанах, бляшках сонных и бедренных артерий, однако не выявили их в некальцифицированных аневризмах, сделав вывод о том, что КН могут вызывать кальцификацию сердечных клапанов и кровеносных сосудов. Схожие результаты получили Puskаs и соавт. [23], которые серологически идентифицировали КН в 64,3% (9 из 14) случаев атеросклеро-тических бляшек сонных артерий и аорты, однако не выявили их в пяти контрольных образцах этих сосудов. Кроме того, им удалось выделить и культивировать КН в 26 из 42-х кальцифицированных склеротических образцов аорт и сонных артерий. В сочетании полученные данные позволили авторам предположить участие КН в этиологии атеросклероза (в частности, в кальцификации кровеносных сосудов) [23]. Bratoz-Perez и соавт. [40] обнаружили КН в 48 из 75-ти (64%) аортальных клапанов со стенозом путем использования бактериоскопиче-ских и бактериологических методов, при этом не выявив КН в здоровых клапанах (0 из 8).
В 2008 году Schwartz и соавт. [29] продемонстрировали токсичность КН для артерий на животной модели (кролики). Повреждая сонные артерии на одной стороне и используя контралатеральные сонные артерии в качестве контрольных, они затем тестировали их на восприимчивость к экспозиции введенными внутривенно солевым раствором, КН или декальцифицированными наночастицами [29].
Экспонированные КН поврежденные артерии подвергались окклюзии, иногда с последующей канализацией, при этом КН из почечных камней образовывали кальцификаты внутри окклюзиро-ванного сосуда [29]. Декальцифицированные наночастицы из почечных камней индуцировали в поврежденных артериях минимальную эксцентрическую гиперплазию интимы (как и солевой раствор), в то время как декальцифицированные наночастицы из кальцифицированных артерий вызывали умеренную гиперплазию или окклюзию с канализацией и кальцификатами [29]. Таким образом, КН могут способствовать окклюзии и кальцификации поврежденных артерий [29], при этом важно, что они вызывают патологические процессы в сосудах и без минеральной оболочки (см. выше). Артерии с неповрежденным эндотелием были устойчивы к воздействию КН [29]. Candemir и соавт. [41] в эпидемиологическом исследовании при помощи ИФА обнаружили связь между титром антител к КН и риском развития кальцификации митрального коль-
ца, а также толщиной кальцификата, предположив следующие механизмы этой ассоциации:
• Колонизация митрального клапана КН индуцирует иммунный ответ против них, способствуя развитию воспаления и дальнейшей кальци-фикации, замыкая «порочный круг». Кальци-фицирующиеся наночастицы после колонизации могут и сами образовывать кальцификаты в окружающих тканях.
• Кальцифицирующиеся наночастицы могут изменять состав и количество нормальной микрофлоры в регионе колонизации, что может приводить к развитию бактериальной инфекции и формированию биопленок. Кроме того, каль-цификация сама по себе способствует колонизации этого региона другими бактериями, возможно, потенциально патогенными.
Hu и соавт. [42] серологически, бактериоскопи-чески и бактериологически выявили связь между КН и кальцификацией сердечных клапанов при ревматической болезни сердца. В их работе КН были идентифицированы в 89,6% кальцифициро-ванных образцов (26 из 29) и ни в одном из контрольных [42]. Наконец, Tulunay Kaya и соавт. [43] методом ИФА показали связь между титром антител к КН, с одной стороны, и риском и тяжестью кальцификации коронарных артерий - с другой. Таким образом, результаты всех проведенных работ по изучению связи КН с патологической каль-цификацией сердечных клапанов и кровеносных сосудов позволяют сделать вывод о ее вероятном существовании.
В ряде исследований также изучалась связь КН с другими заболеваниями, сопровождающимися патологической кальцификацией. Так, Sedivy и соавт. [44] выявили антигены КН в 100% случаев (в 7 образцах из 7) злокачественных опухолей яичника, в которых были найдены псаммомные тельца, представляющие собой микрокальцификаты. В то же время в ткани злокачественных новообразований яичника без псаммомных телец антигены КН отсутствовали [44]. Эти результаты были полностью подтверждены позднее в работе Hudelist и соав. [17], которые идентифицировали антигены КН в 8-ми злокачественных опухолях яичника из 8, содержащих псаммомные тельца, и не выявили их ни в одной опухоли из 10, в которых не было этих микрокальцификатов. Интересно, что в этом исследовании авторам удалось также выделить мРНК КН из всех опухолевых образцов с псаммомными тельцами, в то время как все попытки сделать это в случае с опухолями без псаммомных телец оказались безуспешными [17].
Wen и соав. [45] показали, что антигены КН статистически достоверно чаще встречаются в сыворотке крови больных холецистолитиазом (31,6%) по сравнению с контрольной группой (8%). Кроме того, в этой работе было выявлено, что слизистая желчного пузыря при холецистолитиазе инфици-
руется КН в 35% случаев [45]. У 42,5% пациентов антигены КН выявлялись в желчи, однако они отсутствовали в слизистой желчного пузыря, тем самым позволяя предположить, что слизистая желчного пузыря обладает способностью предотвращать инфильтрацию КН, однако при их проникновении в слизистую, подслизистую КН могут образовывать кальцификаты и вызывать фиброз желчного пузыря [45].
В работе Wang и соав. [21] было показано, что КН, выделенные из желчи пациентов с холецистолитиазом, в 80% случаев (8 из 10) при введении в желчный пузырь вызывали у кроликов образование черных желчных пигментных камней, в то время как кристаллы гидроксиапатита и среда для культивирования КН приводили к появлению таких камней лишь в 20% случаев (2 из 10). Тем самым эти авторы показали, что КН могут быть причиной холецистолитиаза (в частности, черных желчных пигментных камней) и неорганические кристаллы гидроксиапатита сами по себе неэквивалентны КН в способности индуцировать развитие этой патологии [21], что согласуется с результатами исследования Schwartz и соав. [29], которые также показали на животной модели, что гидроксиапатит не может быть полностью ответствен за патогенное действие КН.
Pretorius и соав. [46] исследовали частоту наличия антигенов и антител к КН у ВИЧ-инфицированных и здоровых женщин из Южной Африки. Согласно результатам их работы, антитела к КН выявлялись у 85% ВИЧ-инфицированных женщин, а антигены - у 7,5%, в то время как в контрольной группе эти показатели были равны 5% как для антител, так и для антигенов [46]. Интересно, что среди детей ВИЧ-инфицированных матерей 70% имели в своей крови антигены к КН, по результатам ИФА, причем уровень антигенов в их крови был выше, чем в крови их матерей [46]. У двоих детей с диагностированной ВИЧ-инфекцией отмечались наивысшие уровни данных антигенов в крови, причем кровь их матерей также содержала в себе эти антигены [46]. Полученные данные позволили авторам предположить оппортунистический характер вызываемой КН инвазии [46], а также возможность трансплацентарной или перинатальной передачи КН от матерей к детям. Наконец, бактериоскопически была также показана возможная роль КН в этиологии патологической кальцификации плаценты [47].
Дальнейшие исследования в области изучения КН могут идти по следующим направлениям: 1. Фундаментальные исследования, направленные на:
• выделение нуклеиновых кислот КН с последующим секвенированием их генома, что позволит сделать окончательный вывод о КН как о наименьшей самореплицирующейся форме жизни на Земле, а также на изучение различных свойств КН (в том числе патогенных);
• изучение особенностей иммунного ответа против КН;
• разработку новых методов идентификации КН и диагностику вызываемых ими заболеваний (к примеру, на выделение новых специфических антигенов, получение новых специфических моноклональных антител или новых сред для культивирования, а также на разработку новых методов окраски).
2. Экспериментальные исследования на животных моделях и эпидемиологические исследования, направленные на выявление новых связей КН с этиопатогенезом различных заболеваний, а также на поиск, исследования и апробацию новых способов лечения заболеваний, ассоциированных с КН. Следует отметить необходимость увеличения выборки в таких эпидемиологических исследованиях, поскольку в большинстве проведенных работ она недостаточно велика, чтобы точно оценить силу выявленной связи, и, кроме того, необходимо комбинирование различных методов идентификации КН (к примеру, серологических, бактериоскопических и бактериологических) в биоматериалах. Это может быть справедливо и в отношении экспериментов на животных моделях, в ходе которых также необходимо составлять несколько контрольных групп для выявления особенностей действия минерализованных и деминерализованных КН, а также для сравнения вызываемых ими эффектов с действием, вызываемым кристаллами гидроксиапатита.
3. Экологические, гигиенические и фармакологические исследования, направленные на развитие новых способов профилактики заболеваний, ассоциированных с КН.
Выводы
1. Проведенный эпистемологический анализ позволяет сдвинуть баланс между гипотезами о физико-химической и биологической природе КН в сторону последней, снова делая релевантным термин «нанобактерии», однако в то же время очевидно, что дискуссии о природе КН будут вестись до того времени, пока не будет достоверно правильно секвенирован их геном.
2. Очевидно, что КН играют важную роль в эти-опатогенезе многих заболеваний, и эта связь никак не зависит от того, являются ли они физико-химическим феноменом или имеют био-
логическую природу, хотя результаты проведенных эпидемиологических и экспериментальных исследований на животных моделях свидетельствуют в пользу второй гипотезы.
3. Появление КН в организме - процесс патологический, а не физиологический.
4. Актуальной проблемой изучения КН является разработка эффективных методов этиотропно-го лечения связанных с ними заболеваний, а также специфических способов профилактики и диагностики. В частности, существующие методы серологической диагностики обладают недостаточной специфичностью вследствие перекрестной реактивности антител к антигенам КН с белками биологических сред, имеющиеся бактериоскопические методы слишком сложны, дороги и трудоемки, а бактериологические -слишком затратны по времени. Релевантность геномного метода (ПЦР) серьезно ставится под сомнение вследствие проблем со специфичностью имеющихся праймеров к предполагаемым нуклеотидным последовательностям КН, а развитие протеомических методов находится лишь в начальной стадии. Перспективными можгут быть получение новых, более специфичных антигенов и моноклональных антител к антигенам КН, а также разработка новых сред для более быстрого их культивирования (это также способно облегчить использование бактерио-скопического метода, так как при появлении микроскопических колоний возможен их анализ через световой микроскоп с окраской по фон Косса, что значительно доступнее и дешевле анализа с применением электронной микроскопии). Достоверное секвенирование генома, несомненно, приведет к появлению специфичных праймеров и развитию геномных методов диагностики.
5. Необходимы дальнейшие исследования чувствительности и резистентности КН к различным антимикробным препаратам, используемым в практике как для антибиотикотерапии, так и для дезинфекции, а также по изучению возможности профилактики заболеваний, ассоциированных с КН (с позиций экологии, гигиены и химиопрофилактики). Такой комплекс мер позволит снизить экономические потери, заболеваемость, инвалидизацию и смертность от заболеваний, ассоциированных с КН, а также повысить качество жизни больных. ш
Литература
1. Cisar J.O., Xu D.Q., Thompson J. et al. An alternative interpretation of nanobacteria-induced biomineralization. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2000; 97: 11511 - 11515.
2. Drancourt M., Jacomo V., L pidi H. et al. Attempted isolation of Nanobacterium sp. microorganisms from upper urinary tract stones. J. Clin. Microbiol. 2003; 41: 368 - 372.
3. Urbano P., Urbano F. Nanobacteria: facts or fancies? PLoS Pathog. 2007; 3: e55.
4. Raoult D., Drancourt M., Azza S. et al. Nanobacteria are mineralo fetuin complexes. PLoS Pathog. 2008; 4: e41.
5. Martel J., Young J.D. Purported nanobacteria in human blood as calcium carbonate nanoparticles. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2008; 105: 5549 - 5554.
6. Martel J., Wu C.Y., Young J.D. Critical evaluation of gamma-irradiated serum used as feeder in the culture and demonstration of putative nanobacteria and calcifying nanoparticles. PLoS One. 2010; 5: e10343.
7. Wu C.Y., Martel J., Young D., Young J.D. Fetuin-A/albumin-mineral complexes resembling serum calcium granules and putative nanobacteria: demonstration of a dual inhibition-seeding concept. PLoS One. 2009; 4: e8058.
8. Young J.D., Martel J., Young D. et al. Characterization of granulations of calcium and apatite in serum as pleomorphic mineralo-protein complexes and as precursors of putative nanobacteria. PLoS One. 2009; 4: e5421.
9. Young J.D., Martel J., Young L. et al. Putative nanobacteria represent physiological remnants and culture by-products of normal calcium homeostasis. PLoS One. 2009; 4: e4417.
10. Kumon H., Matsumoto A., Uehara S. et al. Detection and isolation of nanobacteria-like particles from urinary stones: long-withheld data. Int. J. Urol. 2011; 18: 458 - 465.
11. Schlieper G., Kruger T., Heiss A., Jahnen-Dechent W. A red herring in vascular calcification: «nanobacteria» are protein-mineral complexes involved in biomineralization. Nephrol. Dial. Transplant. 2011 Sep 29. [Epub ahead of print.]
12. Maniloff J. Nannobacteria: size limits and evidence. Science 1997; 276 (5320): 1776.
13. Glass J.I., Assad-Garcia N., Alperovich N. et al. Essential genes of a minimal bacterium. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2006; 103: 425 - 430.
14. Kajander E.O., Ciftioqlu N. Nanobacteria: an alternative mechanism for pathogenic intra- and extracellular calcification and stone formation. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1998; 95: 8274 - 8279.
15. Ciftcioglu N., Bjorklund M., Kuorikoski K. et al. Nanobacteria: an infectious cause for kidney stone formation. Kidney Int. 1999; 56: 1893 - 1898.
16. Hjelle J.T., Miller-Hjelle M.A., Poxton I.R. et al. Endotoxin and nanobacteria in polycystic kidney disease. Kidney Int. 2000; 57: 2360 - 2374.
17. Hudelist G., Singer C.F., Kubista E. et al. Presence of nanobacteria in psammoma bodies of ovarian cancer: evidence for pathogenetic role in intratumoral biomineralization. Histopathology. 2004; 45: 633 - 637.
18. Khullar M., Sharma S.K., Singh S.K. et al. Morphological and immunological characteristics of nanobacteria from human renal stones of a north Indian population. Urol. Res. 2004; 32: 190 - 195.
19. Miller V.M., Rodgers G., Charlesworth J.A. et al. Evidence of nanobacterial-like structures in calcified human arteries and cardiac valves. Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 2004; 287 (З): 1115 - 1124.
20. Kumar V., Farell G., Yu S. et al. Cell biology of pathologic renal calcification: contribution of crystal transcytosis, cell-mediated calcification, and nanoparticles. J. Investig. Med. 2006; 54: 412 - 424.
21. Wang L., Shen W., Wen J. et al. An animal model of black pigment gallstones caused by nanobacteria. Dig. Dis. Sci. 2006; 51: 1126 - 1132.
22. Zhou H.D., Li G.Y., Yang Y.X. et al. Intracellular co-localization of SPLUNC1 protein with nanobacteria in nasopharyngeal carcinoma epithelia HNE1 cells depended on the bactericidal permeability increasing protein domain. Mol. Immunol. 2006; 43: 1864 - 1871.
23. Puskas L.G., Tiszlavicz L., Rozga Z. et al. Detection of nanobacteria-like particles in human atherosclerotic plaques. Acta Biol. Hung. 2005; 56: 233 - 245.
24. Shiekh F.A., Charlesworth J.E., Kim S.H. et al. Proteomic evaluation of biological nanoparticles isolated from human kidney stones and calcified arteries. Acta Biomater. 2010; 6: 4065 - 4072.
25. Kajander E.O., Ciftcioglu N., Aho K., Garcia-Cuerpo E. Characteristics of nanobacteria and their possible role in stone formation. Urol. Res. 2003; 31: 47 - 54.
26. Mathew G., Mckay D.S., Ciftioglu N. Do blood-borne calcifying nanoparticles self-propagate? Int. J. Nanomedicine. 2008; 3: 265 - 275.
27. Sommer A.P., Hassinen H.I., Kajander E.O. Light-induced replication of nanobacteria: a preliminary report. J. Clin. Laser. Med. Surg. 2002; 20: 241 - 244.
28. Ciftioglu N., Miller-Hjelle M.A., Hjelle J.T., Kajander E.O. Inhibition of nanobacteria by antimicrobial drugs as measured by a modified microdilution method. Antimicrob. Agents Chemother. 2002; 46: 2077 - 2086.
29. Schwartz M.A., Lieske J.C., Kumar V. et al. Human-derived nanoparticles and vascular response to injury in rabbit carotid arteries: proof of principle. Int. J. Nanomedicine. 2008; 3: 243 - 248.
30. Ciftioglu N., Vejdani K., Lee O. et al. Association between Randall's plaque and calcifying nanoparticles. Int. J. Nanomedicine. 2008; 3: 105 - 115.
31. Chen L., Huang X.B., Xu Q.Q. et al. Cultivation and morphology of nanobacteria in sera of patients with kidney calculi. Beijing Da Xue Xue Bao. 2010; 42: 443 - 446.
32. Hu W.G., Wang X.F., Xu T. et al. Establishment nephrolithiasis rat model induced by nanobacteria and analysis of stone formation. Beijing Da Xue Xue Bao. 2010; 42: 433 - 435.
33. Torres V.E., Wilson D.M., Hattery R.R., Segura J.W. Renal stone disease in autosomal dominant polycystic kidney disease. Am. J. Kidney Dis. 1993; 22: 513 - 519.
34. Shoskes D.A., Thomas K.D., Gomez E. Anti-nanobacterial therapy for men with chronic prostatitis/chronic pelvic pain syndrome and prostatic stones: preliminary experience. J. Urol. 2005; 173: 474 477.
35. Zhou Z., Hong L., Shen X. et al. Detection of nanobacteria infection in type III prostatitis. J. Urol. 2008; 71: 1091 - 1095.
36. Shen X., Ming A., Li X. et al. Nanobacteria: a possible etiology for type III prostatitis. J. Urol. 2010; 184: 364 - 369.
37. Zhang Q.H., Shen X.C., Zhou Z.S. et al. Decreased nanobacteria levels and symptoms of nanobacteria-associated interstitial cystitis/painful bladder syndrome after tetracycline treatment. Int. Urogynecol. J. 2010; 21: 103 - 109.
38. Zhang Q.H., Lu G.S., Shen X.C. et al. Nanobacteria may be linked to testicular microlithiasis in infertility. J. Androl. 2010; 31 (2): 121 - 125.
39. Maniscalco B.S., Taylor K.A. Calcification in coronary artery disease can be reversed by EDTA-tetracycline long-term chemotherapy. Pathophysiology. 2004; 11: 95 - 101.
40. Bratos-Perez M.A., Sanchez P.L., Garcia de Cruz S. et al., Grupo AORTICA (Grupo de Estudio de la Estenosis A rtica). Association between self-replicating calcifying nanoparticles and aortic stenosis: a possible link to valve calcification. Eur. Heart J. 2008; 29: 371 - 376.
41. Candemir B., Ertas F.S., Kaya C.T. et al. Association between antibodies against calcifying nanoparticles and mitral annular calcification. J. Heart Valve Dis. 2010; 19: 745 - 752.
42. Hu Y.R., Zhao Y., Sun Y.W. et al. Detection of nanobacteria-like material from calcified cardiac valves with rheumatic heart disease. Cardiovasc. Pathol. 2010; 19: 286 - 292.
43. Tulunay Kaya C., Sinan Ertas F., Hasan T. et al. Anticalcifying nanoparticle antibody titer is an independent risk factor for coronary artery calcification. Coron. Artery Dis. 2011; 22: 394 - 400.
44. Sedivy R., Battistutti W.B. Nanobacteria promote crystallization of psammoma bodies in ovarian cancer. APMIS. 2003; 111: 951 954.
45. Wen Y., Li Y.G., Yang Z.L. et al. Detection of nanobacteria in serum, bile and gallbladder mucosa of patients with cholecystolithiasis. Chin. Med. J. 2005; 118: 421 - 424.
46. Pretorius A.M., Sommer A.P, Aho K.M. et al. HIV and nanobacteria. HIV Med. 2004; 5: 391 - 393.
47. Agababov R.M., Abashina T.N., Suzina N.E. et al. Link between the early calcium deposition in placenta and nanobacterial-like infection. J. Biosci. 2007; 32: 1163 - 1168.
короткой строкой
Риск заболеть коклюшем у привитых цельноклеточной или ацеллюлярной вакциной крупномасштабное когортное исследование в США
В исследовании участвовало 263 496 человек от 8 до 20 лет с известным прививочным анамнезом. Исследователями было обнаружено, что ацеллю-лярная вакцина даже при 5 прививках не обеспечивает столь длительной защиты от коклюша, как одна доза цельноклеточного препарата. Хотя введение 6-й дозы ацеллюлярной вакцины неколько улучшает ситуацию, но в любом случае не достигается того защитного эффекта, который обеспечивает цельноклеточная вакцина.
Таким образом, в ходе данного крупномасштабного когортного исследования было установлено, что при использовании исключительно ацеллюлярной коклюшной вакцины отмечается увеличение риска возникновения коклюша в популяции.
Источник: Witt M.A., Arias L., Katz RH., Truong E.T., Witt D..J. Reduced Risk of Pertussis among Persons Ever Vaccinated with Whole Cell Pertussis Vaccine Compared to Recipients of Acellular Pertussis Vaccines in a Large US Cohort. Clin. Infect. Dis. 2013; 56: 1248 - 54.
