CC BY
6
изменения тучных клеток у опытных животных данных групп развиваются по пути повышения их функциональной активности. Наряду с обычными формами в пленочных препаратах опытных животных встречаются дегенеративные и распадающиеся на конгломераты тучные клетки: при воздействии 1,2-ДХП их число незначительно, как и в эксперименте с ТХЭ; при воздействии смеси трех веществ встречается множество таких клеток, что соответствует картине, наблюдаемой в системе тучных клеток при действии ТХП.
Анализируя экспериментальный материал, можно сказать, что при воздействии хлор-производных углеводородов, как при раздельном, так и комбинированном введении, в системе тучных клеток можно отметить общую закономерность — изменения развиваются по пути повышения функциональной активности тучных клеток, выражающейся в изменении их морфологии и повышении индекса дегрануляцин.
Дегрануляция тучных клеток является проявлением физиологической адаптации (Ю. Н. Соловьев и Д. М. Демина; В. П. Казначеев) в условиях нормальной жизнедеятельности организма. Усиление процесса и степени дегрануляцин в опыте под влиянием химического воздействия является проявлением напряжения тучноклеточной системы, направленного на восстановление утраченного равновесия внутренней среды организма. Все эксперименты отмечают также появление в системе тучных клеток дегенеративных и распадающихся форм, что говорит о развитии в какой-то мере реакций повреждения. Увеличение числа дегенеративных и распадающихся на конгломераты тучных клеток при воздействии 1,2,3-ТХП и смеси указывает на большее повреждающее действие на систему тучных клеток этих факторов, нежели всех остальных, в условиях данного эксперимента. Влияние смеси хлорпроизводных углеводородов на тучные клетки подкожной соединительной ткани вызывает изменения в системе тучных клеток, имеющие одинаковую направленность с таковыми при раздельном действии веществ, и степ^ль напряженности этих изменений в том и другом случаях сопоставима.
Выводы
1. На воздействие 1,2-ДХП, 1,2,3-ТХП, ТХЭ система тучных клеток отвечает изменениями однонаправленного характера, проявляющимися в повышении функциональной активности тучных клеток (реакция адаптации) и появлении дегенеративных и распадающихся на конгломераты тучных клеток (реакция повреждения).
2. Смесь трех веществ действует на уровне одного из ингредиентов.
ЛИТЕРАТУРА. Казначеев В. П. — В кн.: Вопросы физиологии и патологии гепарина. Новосибирск, 1965, с. ИЗ—144.— Соловьев Ю. Н., Демина Д. М. — «Арх. пат.», 1964, № 8, с. 63—64. — Тарасова К. И. — «Гиг. и сан.», 1975, № 11, с. 106—109.
Поступила 8/У1 1976 г.
УДК в 16.36-02:[в 15.917:547.4 12.721.6
Кандидаты мед. наук H. Г. Курышева, |Д. Я- Экштат\, С. С. Казанина
К МЕХАНИЗМУ ГЕПАТОТРОПНОГО ДЕЙСТВИЯ 1,1,2,3-ТЕТРАХЛОРПРОПЕНА ;
Новосибирский научно-исследоватльский санитарный институт
Хронический эксперимент, проведенный нами на уровне доз 1/20о и »/.„„о ЛД 50* показал, что 1,1,2,3-тетрахлорпропен при длительном поступлении в организм обладает выраженным гепатотоксическим действием, вызывая нарушение мочевинообразовательной, экскреторной, белково- и гликогенсинтезирующих функций печени и снижению в ткани печени фермента глюконеогенеза—глюкозо-6-фосфатазы.
В данном исследовании были выяснены роль печени в метаболизме 1,1,2,3-тетра-хлорпропена и влияние стимуляторов активности микросомальных ферментов на гепато-токсическое действие 1,1,2,3-тетрахлорпропена. Опыты проводили на беспородных белых крысах-самцах весом 200—220 г, которых разделили на 4 группы. В 1-ю группу вошли контрольные животные, крысам 2-й группы вводили внутрибрюшинно фенобарбитал в дозе 100 мг на 1 кг веса в течение 2 дней; крысам 3-й группы вводили через зонд в желудок 1,1,2,3-тетрахлорпропен в дозе 535 мг/кг Q/t ЛД80) в виде масляного раствора; крысам 4-й группы — 1,1,2,3-тетрахлорпропен в той же дозе через сутки после последней инъекции фенобарбитала. Крыс забивали через 24 и 48 ч после введения 1,1,2,3-тетрахлорпропена. В каждый срок исследовали не менее 8 животных. В сыворотке крови определяли активность следующих ферментов: аланина — КФ 2.6.1.2 (АЛТ) и аспартата — 2.6.1.1 (ACT) аминотрансфераз — по методу Reitman и Frenkel, сорбитолдегидрогеназы — КФ 1.1.1.14 (СДГ) с помощью оптического теста Варбурга, глюкозо-6-фосфатазы (КФ 3.1.3.9) в ткани печени — по Swanson. Для морфологических исследований печень животных фиксировали в 10% нейтральном формалине, заливали в парафин, срезы окрашивали гематоксилин-эозином.
Показатели активности ферментов сыворотки крови и ткани печени при остром отравлении
1,1,2,3-тетрахлорпропеном
с з В в
>. I-0.0 u а
?? л
Xh .
X = «
О. V х а ж в
ч
К х
•5я
V в
АЛТ. мкг ПК ua 1 мл сыворотки
ACT. мкг ПК на 1 мл сыворотки
СДГ
ед. на 1 мл сыворотки
тМ субстрата на 1 л печени
Гяюкозо-6-фосфатаза, тМР на 1 г печени
1-Я
2-Я
3-Я
4-я
24 24 24
48
24
48
8 10 9
8
8
342:2,1 40,6—2,6 862:14 Р, <0,001 150^:9,2 Pt <0,001 348=!= 24 Pt <0,001 Ps<0.001 313—20,3 Pa<0,001 Ps<0,001
872=5,8 892=4,2 108=tl5
195^:20 P,<0,01 348— 26 Рг< 0,001 Ps<0,001 346=:= 29 P2<0,001 P3< 0,02
0,8^:0,25 0,952=0,25 71,02:14.5 Pi <0,001 87,02:10,7 Рг <0,001 2262:24 P2<0,001 Ps<0,001 722=6.5 Pa<0,001
9.012=0,37 8,72:0,32 8,32:0,58
6,12=0,33 Pi <0,001 6,572:0,43 Pa<0,01 Ps< 0,05 3,072:0,3 P,<0,001 Ps<0,001
5,642:0,5
5,082:0,24
5,152:0,34
3,882:0,06 Pi <0,001 2,822=0,51 Pa<0,02 Я »<0,02
3,02=0,14 Pa<0,001 P,<0,001
Примечание. Р,, Р„ и Р3 — соответственно сравнение с 1, 2 и 3-й группами. ПК — пировиноградная кислота.
1,1,2,3-Тетрахлорпропен в дозе Va ЛД60 через 24 ч вызывал по сравнению с контролем повышение в сыворотке крови активности ферментов АЛТ, ACT, СДГ (см. таблицу). Спустя 48 ч гиперферментемия нарастала. Так, активность АЛТ в сыворотке крови увеличивалась в 2 раза по сравнению с предыдущим сроком исследования н составляла 440% по отношению к контролю. Активность ACT составила 200% относительно контроля, активность СДГ возросла с 61 ед. на 1 мл крови до 87. Через 48 ч наблюдалось достоверное снижение в ткани печени активности глюкозо-6-фосфатазы на 31%.
При гистологическом исследовании у большинства животных отмечались явления мелкокапельной жировой дистрофии печени. Только у 1 крысы из 5 развилась острая токсическая дистрофия с фокальными центрилобулярными некрозами без заметной жировой дистрофии.
Предварительное введение фенобарбитала выззало резкое изменение токсичности 1,1,2,3-тетрахлорпропе:1а. Так. из 32 крас 4-й группы погибли 15. в то время как в 3-й группе погибли 3 крысы из 20. Причем ведущим в изменении токсичности явилось усиление гепатотропного действия 1,1,2,3-тетрахлорпропена. Как видно из таблицы, фенобарбитал, введенный внутрибрюшинно, сам по себе не вызывал значительных изменений активности изучаемых ферментов. Но при комбинации его с 1,1,2,3-тетрахлорпропеном отмечено значительно более интенсивное изменение активности всех изучаемых ферментов. Через 24 ч активность АЛТ у животных 4-й группы была в 4 раза выше, СДГ — в 3 раза выше, чем при той же дозировке 1,1,2,3-тетрахлорпропена в 3-й группе. Активность глюкозо-6-фосфатазы снизилась на 45%. Через 48 ч активность ферментов АЛТ, ACT и глюкозо-6-фосфатазы была примерно на том же уровне (см. таблицу). В то же время активность СДГ снизилась в 3 раза, но лишь по сравнению с исследованием, проведенным через 24 ч после затравки. Параллельное исследование активности этого фермента в ткани печени показало резкое снижение его в этом органе: содержание СДГ в печеночных клетках было в 21/а раза ниже как по сравнению с контролем, так и с активностью фермента, через 24 ч СДГ содержится преимущественно в печени, концентрация ее в других органах весьма незначительна, и увеличение ее активности в сыворотке крови рассматривается как специфический показатель поражения паренхимы печени (Gerlach; А. А. Покровский). Резкое увеличение активности СДГ, наблюдаемое через 24 ч после введения 1,1,2,3-тетрахлорпропена у животных, индуцированных фенобарбиталом, указывает на развитие глубоких некротических процессов в паренхиме печени. Это в свою очередь, по-видимому, привело к существенному снижению фермента в ткани печени и опосредственно в сыворотке крови через 48 ч после введения яда. Патоморфологические исследования подтверждают эти соображения. Так, через 24 ч в печени всех крыс этой группы наблюдалась картина острой токсической дистрофии со множественными центрилобулярными некрозами в фазе карио-рексиса и плазмокоагуляции вокруг центральных вен. Далее следовал узкий пояс фукси-нофилыюй дегенерации гепатоцитов с кариопикнозом, на периферии дольки имелись явления вакуольной дистрофии. Все эти процессы развивались на фоне выраженной гиперемии.
Известно, что фенобарбитал избирательно стимулирует активность ферментов мембран эндоплазматического ретикулума печени, метаболизирующих чужеродные вещества (Rem-шег). При этом активизируется широкий спектр реакций гидроксилирования, образования глюкоронидов и днэстерификацин (Remmer и соавт.). По данным Orrenius, П. В. Сергеева и соавт., в индуцированной барбитуратами печени резко возрастает скорость метаболизма лекарственных веществ и ядов.
Это позволяет сделать заключение, что 1,1,2,3-тгтрахлорпропен метаболизнруется ферментами электронотранспортиой цепи, локализованной в мембранах эндоплазматиче-:кого ретикулума, так же как и четыреххлористый углерод, в более токсичный метаболит (Suarez и соавт.; Cornish и соавт.), накопление которого и приводит к повреждению мембранных структур клетки. Гепатотропное действие 1,1,2,3-тетрахлорпропена и его токсичность находятся в прямой зависимости от активности микросомальных ферментов. Так, в наших исследованиях та же доза 1,1,2,3-тетрахлорпропена (1/3 ЛД&0) оказалась абсолютно смертельной для крыс, которым предварительно вводили фенобарбитал из расчета 75 мг/кг в течение 5 дней.
В связи с возможностью воздействия 1,1,2,3-тетрахлорпропена на организм на фоне действия других ядов и лекарственных препаратов, являющихся индукторами микросомальных ферментов, изучение биохимических механизмов их взаимовлияния имеет важное значение для прогнозирования токсичности и опасности 1,1,2,3-тетрахлорпропена.
ЛИТЕРАТУРА. Покровский A.A. (ред.) — В кн.: Биохимически? методы исследования в клинике. М., 1969, с. 158. — Сергеев П. В., Ведерникова Н. Н., Майский А. И. и др.— «Фармакол. и токсикол.», 1973, № 3, с. 365— 371. — Cornish И. Н., Ling В. Р., Barth М. L. — «Am. industr. Hyg. Ass. J.», 1973. v, 34. p, 487—492.—G e г I а с h U.—«Kün. Wschr,», 1957, Bd 35, S. 1144—1147,— Orrenius S. — In.: Cirrhosis and Other Toxic Hepatopathias. Skandia International Symposium 5th Alcoholic. Stockholm, 1971, p. 161—169. — R e m m e г H.— «Naunyn — Schmiedeberg's Arch. exp. Path. Pharmakol.», 1959, Bd 237, S. 296—307. — Remmer H., Schenkman J., Estabrook R. W. et a. — «Molec. Pharmacol.», 1966, v. 2, p 187—190. — Suarez K. A., Carlson G P., F u 1 1 e г G. С. et a. — « Toxicol. appl. Pharmacol.», 1972, v. 23, p. 171—177.
rr Поступила 12/1 1976 Г.
УДК 613.631.4:546.7*
Л. Н. Попов
ИЗУЧЕНИЕ ВЛИЯНИЯ МАЛЫХ КОНЦЕНТРАЦИЙ АЭРОЗОЛЯ МЕТАЛЛИЧЕСКОГО КОБАЛЬТА НА ОРГАНИЗМ ЖИВОТНЫХ В ГИГИЕНИЧЕСКОМ ЭКСПЕРИМЕНТЕ
Московский научно-исследовательский институт гигиены им. Ф. Ф. Эрисмана
При изучении хронического действия малых концентраций аэрозоля металлического кобальта мы провели 3-месячную хроническую круглосуточную ингаляционную затравку беспородных белых крыс-самок в горизонтальных камерах. Для затравки животных выбирали следующие концентрации: 0,5 мг/м3 — 1-я группа (ПДК для производственных помещений), 0,05 мг/м3 — 2-я группа, 0,005 мг/м3 — 3-я группа, 0,001 мг/м3 — 4-я группа. Контролем служили крысы, не подвергавшиеся затравки. Для определения концентраций аэрозоля металлического кобальта в камерах использовали метод хроматографического раздельного определения кобальта, никеля и меди в атмосферном воздухе (Н. А. Маркина, 1972).
Вес животных является интегральным показателем состояния организма в условиях кобальтовой интоксикации. А. О. Войнар (1960), Т. М. Созиева и др. указывают, что кобальт может влиять на рост и развитие животных. В наших исследованиях отмечено статистически достоверное (Р <С 0,05) увеличение веса крыс 3-й группы (концентрация 0,005 мг/м3). Это, по-видимому, можно объяснить влиянием кобальта как микроэлемента на белковый, углеводный обмен и окислительно-восстановительные процессы в организме.
Функциональное состояние центральной нервной системмы мы изучали по изменению скрытого времени безусловной рефлекторной оборонительной реакции с помощью методики, разработанной М. И. Гусевым и А. А. Минаевым. Установлено, что хроническое действие аэрозоля металлического кобальта вызывает достоверное увеличение (Я < 0,01; Р> 0,001; Р> 0,001) скрытого времени рефлекса в первых 3 группах животных. Количество эритроцитов н гемоглобина в периферической крови экспериментальных животных мы определяли с помощью фотоэлектрического эритрогемометра модели 065. Действие кобальта в малых концентрациях на кроветворную функцию экспериментальных животных носило фазовый характер. Через 2 нед от начала затравки у животных первых 3 групп выявлена некоторая тенденция к снижению количества гемоглобина по отношению к контролю. По истечении месяца затравки у крыс 1-й и 2-й групп происходило достоверное увеличение (Р > 0,01) уровня гемоглобина, а через \11г мес—достоверное снижение (Р 0,01) этого показателя. Более выраженное повышение уровня гемоглобина у животных отмечено через 2 мес затравки при вдыхании кобальта в концентрации 0,5 мг/м3 и через 21/2 и 3 мес при вдыхании кобальта в концентрации 0,05 мг/м3. В камере с концентрацией кобальта 0,005 мг/м3 достоверное увеличение (Я> 0,001) уровня гемоглобина у животных отмечено через 21/2 мес затравки с последующим снижением до контрольного уровня.
4 Гигиена и санитария Иг 4
97
