CC BY
21
DOI: 10.24412/1815-3917-2021-2-29-35
К 40-летию разработки в СССР первых тест-систем для лабораторной диагностики вирусного гепатита А
Об успехах в разработке методов лабораторной диагностики вирусного гепатита А в бывшем Советском Союзе
М.И.Михайлов*, М.К.Мамедов2
1НИИ вакцин и сывороток им. И.И.Мечникова, г.Москва, Российская Федерация; 2Отделение биомедицины Международной экоэнергетической академии, г.Баку, Азербайджан
Резюме: Статья посвящена первым успехам в области лабораторной диагностики вирусного гепатита А, достигнутых к 1981 г в бывшем СССР. Авторы вспоминают об исследованиях, проведенных в Институте вирусологии им.Д.И.Ивановского АМН СССР и в Институте полиомиелита и вирусных энцефалитов им.М.П.Чу-макова АМН СССР. Здесь были разработаны радиоиммунологический и иммуноферментный методы выявления специфических маркеров инфекции, вызванной вирусом гепатита А. Ключевые слова: вирусный гепатит А, лабораторная диагностика.
Для цитирования: Михайлов М.И., Мамедов М.К. К 40-летию разработки в СССР первых тест-систем для лабораторной диагностики вирусного гепатита А: Об успехах в разработке методов лабораторной диагностики вирусного гепатита А в бывшем Советском Союзе. Биомедицина (Баку). 2021;19(2):29-35. DOI: 10.24412/ 1815-3917-2021-2-29-35.
Поступила в редакцию: 11.02.2021. Принята в печать: 23.04.2021.
On the 40th anniversary of the development in the USSR of the first test systems for laboratory diagnostics of viral hepatitis A
Concerning successes in elaboration methods of viral hepatitis A laboratory diagnostics in the former Soviet Union
Mikhailov M.I.1, Mamedov M.K.2
n.I.Mechnikov's Scientific Research Institute of Vaccines and Serums, Moscow, Russian Federation; 2Department of Biomedicine, International Ecoenergy Academy, Baku, Azerbaijan
Abstract: The article is devoted to first successes in the field of laboratory diagnostics of viral hepatitis A achieved in former USSR in 1981. The authors recollected investigations performed in D.Ivanovsky's institute ofvirology of USSR Academy of medical sciences and in M.Chumakov's institute of poliomyelitis and viral encephalitis of USSR Academy of medical sciences. There radioimmunoassay and enzymeimmunoassay for detection of specific markers of infection caused with hepatitis A virus were carried out. Key words: viral hepatitis A, laboratory diagnostics.
For citation: Mikhailov M.I., Mamedov M.K. On the 40th anniversary of the development in the USSR of the first test systems for laboratory diagnostics of viral hepatitis A: Concerning successes in elaboration methods of viral hepatitis A laboratory diagnostics in the former Soviet Union. Biomedicine (Baku). 2021;19(2):29-35. DOI: 10.24412/1815-3917-2021-2-29-35.
Received: 11.02.2021. Accepted: 23.04.2021.
Для корреспонденции: М.К.Мамедов
Профессор, доктор медицинских наук, отделение биомедицины, Международная экоэнергетическая академия, г.Баку, Азербайджан.
ORCID: https://orcid.org/0000-0002-9777-1914 E-mail: m.mamedov@inbox.ru
Corresponding author: Mamedov M.K
Mamedov M.K.
Professor, Doctor of Medical Sciences, Biomedicine Department, International Ecoenergy Academy, Baku, Azerbaijan. ORCID: https://orcid.org/0000-0002-9777-1914 E-mail: m.mamedov@inbox.ru
Этот очерк мы посвятили нашим коллегам по совместной работе, которые занимаясь проблемой лабораторной диагностики вирусного гепатита А (ГА), еще 40 лет назад сумели разработать и приспособить для применения в тогдашних условиях самые современные в то время лабораторные методы обнаружения антигена вируса ГА (ВГА) в фекалиях и в объектах окружающей среды, а также антител к этому вирусу (anti-HAV) в сыворотках крови.
Дело в том, что факт идентификации ВГА в 1973 г с помощью иммуноэлектронной микроскопии (ИЭМ), мало пригодной для широкого применения в практике, стал стимулом для разработки более доступных методов обнаружения этого вируса и антител к нему.
Уже в 1975 г F.Hollinger c шавторами pазpабо-тали первую лабораторную тест-систему радиоиммунологического метода (РИМ) [1]. На ее основе уже в 1976 г фирма Abbott Lab (США) начала производство коммеpческих набоpов реагентов "HAVAB", позволяющих диагностировать ГА путем выявления anti-HAV. Вскоре аналогичные наборы стали производиться и в странах западной Европы.
Однако, такие наборы имели достаточно высокую стоимостью и не приобретались медицинскими учреждениями бывшего СССР (небольшое их количество закупалось лишь для оснащения крупных научных центров). Между тем, в конце 70-х гг почти 80% всех заболеваний вирусными гепатитами в СССР связывалось именно с ГА, что повышало значимость вопроса об обеспечении здравоохранения доступными методами лабораторной диагностики этого заболевания [2].
Поэтому на повестке стояла задача по разработке соответствующих лабораторно-диагности-ческих тест-систем и их использованию, как основы для начала производства в стране необходимого количества реагентов для диагностики ГА, доступных для широкого применения в клинической работе и в эпидемиологических наблюдениях.
Такие разработки в СССР начались в 1978 гг в двух крупнейших в то время и находящихся в Москве научных центрах вирусологического профиля Академии медицинских наук СССР: в Институте вирусологии им. Д.И.Ивановского (ИВ) и в Институте полиомиелита и вирусных энцефалитов (ИПВЭ).
В ИВ работала лаборатория, занимавшаяся исследованиями по проблеме вирусного гепатита В и в то время возглавляемая профессором В.А.Ананьевым. По личной инициативе директора ИВ академика В.М.Жданова именно здесь с 1978 г Н.В.До-
рошенко и доктор медицинских наук В.М.Стаханова разрабатывали тест-систему РИМ, способную выявлять антиген ВГА в фекалиях и anti-HAV в крови. В этой работе участвовали Г.К.Заиров, Д.М.Брагинский и другие сотрудники ИВ.
Лабораторию оснастили нужным оборудованием и, в том числе, счетчиком гамма-излучения Quantum фирмы Abbott, а ученых снабдили ранее аттестованными в научных лабораториях США образцами антигена ВГА и препаратами IgG, содержащими anti-HAV в высоком титре.
"Конъюгат" anti-HAV и радиоактивного изотопа йод-125 был получен хлораминовым методом. Внутренние поверхности поливиниловых пробирок сенсибилизировали антителами, заполняя их раствором IgG, содержащим anti-HAV. Итак, тест-систему РИМ воспроизводили по классической схеме ли-гандного иммуноанализа с использованием антител, связанных с радиоактивной "меткой" [3].
Многократно воспроизведя эту тест-систему в модельных опытах по индикации в исследуемых материалах как ВГА, так и anti-HAV, ученые ее оптимизировали, а затем испытали в процессе проведения клинико-диагностических и эпидемиологических исследований. Полученные при этом данные, легшие в основу диссертации Н.В.Дорошенко, показали, что метод способен выявлять антиген ВГА и "суммарные" anti-HAV в сыворотке крови. Используя предварительную обработку сывороток дитиотреитолом (разрушающим молекулы IgM) метод приспособили и для детекции в крови anti-HAV, относящихся к IgM и являющихся маркером наличия у обследуемых лиц острого ВГА [4].
Было продемонстрировано, что по важнейшим характеристикам тест-система приближалась к коммерческой тест-системе HAVAB. Это позволяло на ее основе начать производство диагностических наборов, укомплектованных основными реагентам, которыми можно будет снабжать учреждения, способные вести исследования на ГА.
В 1981 г была подготовлена соответствующая техническая документация, и было решено такие наборы производить в среднеазиатском регионе, где заболеваемость ГА была наиболее высокой. В 1982 г в г.Ташкенте на предприятии "Изотоп", с участием сотрудников ташкентского филиала ИВ, началось экспериментальное производство наборов, которое, однако, вскоре остановилось в силу ряда моментов.
Во-первых, использованный изотоп 125-I имел период полураспада около месяца и срок пригодности наборов быстро истекал. Во-вторых, эти наборы могли применяться лишь в учреждениях, оснащенных лабораторными гамма-счетчиками,
которые в СССР не производились. И, в-третьих, работа с радиоактивным изотопом требовали специальных условий и обеспечения защиты персонала, а также правильной утилизации загрязненных им материалов. Все это требовало дополнительных расходов, признанных недостаточно обоснованными.
В последующие годы сотрудники лаборатории гепатита ИВ использовали этот метод при проведении целого ряда эпидемиологических наблюдения [5, 6]. Часть полученных при этом результатов, как и описание самого РИМ, была отражена в известной монографии ученых ИВ, изданной в 1986 г [7]. Разумеется, что разработка РИМ в ИВ имела важное научное значение и этот метод еще много лет использовался сотрудниками лаборатории гепатита как эталонный метод выявления ВГА и апй-ИАУ. В то же время, разработанный в ИВ РИМ, к сожалению, не нашел широкого применения в практике и, так и не смог "выйти" за пределы ИВ.
В то же время авторы этого метода продолжали заниматься проблемой ГА. Позже Н.В.Дорошенко защитил докторскую диссертацию и работал в ИВ, а В.М.Стаханова стала профессором и в последние годы жизни возглавляла лабораторию гепатитов.
В силу изложенных выше обстоятельств решающее значение для разработки в СССР методов лабораторной диагностики ГА, а также дальнейшего изучения этой инфекции имело создание в 1977 г в ИПВЭ хорошо оснащенной оборудованием лаборатории, которой предстояло заниматься проблемой ГА.
Для работы в этой лаборатории в качестве старших научных сотрудников были приглашены кандидат медицинских наук А.Г.Анджапаридзе, ранее занимавшийся изучением онкогенных вирусов и С.С.Савинская, защитившая в ИПВЭ диссертацию по проблеме полиомиелита.
Руководитель лаборатории доктор медицинских наук М.С.Балаян, посетив ряд научных центров США, ведущих исследования по ГА, пришел к мысли о том, что самым перспективным для лабораторной диагностики ГА является иммуноферме-нтный метод (ИФМ).
Тест-система ИФМ, выявляющая антиген ВГА и апй-ИАУ, была разработана в 1976 г в одном из Национальных институтов здоровья США [8].
Вскоре именно такую тест-систему ИФМ, С.С.Савинская и А.Ф.Сито воспроизвели в лаборатории ИПВЭ, используя реагенты и материалы, в основном, привезенные из США. Одновременно, уже в 1978 г А.Г.Анджапаридзе наладил в ИПВЭ использование методики ИЭМ, а через год начал
применение новой модификации этого метода [9].
Располагая этими двумя методами обнаружения ВГА, ученые ИПВЭ поставили перед собой цель - на основе отечественных материалов и реагентов разработать тест-систему ИФМ, пригодную для диагностики ГА, причем доступную для использования в типовой вирусологической лаборатории. За основу такой тест-системы была взята более специфичная методика постановки ИФМ, разработанная W.Duermeyer, работавшим в лаборатории голландской компании Organon Int [10].
Для достижения этой цели предстояло решать ряд конструктивных задач: получить достаточное количество ВГА; найти отечественные носители "твердой фазы" (ТФ); наладить метод выделения IgG из сывороток, содержащих anti-HAV, и изготовления из него иммуноферментного конъюгата (ИФК) и т.д.
В 1979 г в ИПВЭ была воспроизведена устойчивая репродукция ВГА в клеточной системе in vitro [11]. Однако для оптимизации ИФМ были нужны достаточно большие количества антигена ВГА. Поэтому, с помощью разработанного ИФМ и параллельно с помощью ИЭМ был проведен скрининг ВГА в фекалиях его потенциальных носителей. В итоге, был найден образец с очень высоким содержанием вируса (в дальнейшем он более 10 лет использовался в лаборатории как "стандартный" антиген ВГА) [12].
Первоначально в качестве носителей ТФ использовали лунки микротитраторных поливинилх-лоридных планшетов, закупленных в ЧССР - в них проводили все этапы ИФМ. Только для оценки интенсивности окраски конечных растворов их из лунок переносили в кюветы спектрофотометра и определяли экстинкцию этих растворов. Отметим, что производство планшетов с плоскодонными лунками специально для постановки ИФМ в СССР было начало лишь через несколько лет, одновременно с появлением вертикальных "ридеров", позволяющих оценивать результаты ИФМ (путем фо-тометрирования растворов) непосредственно во всех 96 лунках и печатать их на бумажной ленте.
Используя указанный ИФМ, исследователи провели скрининг сывороток крови с высоким титром anti-HAV - из них методом гель-фильтрации в сефадексе выделяли IgG, который периодатным методом связывали с пероксидазой, получая ИФК. Эту работу вела Т.А.Насташенко, а позднее и проходивший в ИПВЭ научную стажировку выпускник 1-го московского мединститута А.Е.Анненков. В начале ИФК получали, используя пероксидазу фирмы "Sigma" (США), но позднее последнюю заменили ферментом, полученным на отечественном
БИОМЕДИЦИНА | т.19*№2*2021 / Б10МЕ01С1ПЕ | У01.19*^2*2021
ИСТОРИЯ БИОМЕДИЦИНЫ / HISTORY OF BЮMEDICINE
DOI: 10.24412/1815-3917-2021-2-29-35
Вера Михайловна Александр Георгиевич Светлана Степановна
Стаханова Анджапаридзе Савинская
предприятии "Олайне" в Латвии.
Интересно, что помимо ИФМ, в лаборатории разрабатывался и вариант РИМ, который воспроизводился на сеточках электронного микроскопа с иммобилизованным на них вирусом. Такой подход позволял не только просматривать материал с помощью ИЭМ, но и регистрировать специфичность результата с помощью РИМ [13].
Сотрудники лаборатории показали, что сыворотки крови реконвалесцентов ГА содержат очень высокий титр anti-HAV [14]. Это позволило сенсибилизировать ТФ антителами не из раствора IgG, а из сывороток, путем их приведения в контакт с ТФ на протяжение 16-18 часов. Лишь лунки, предназначенные для выявления anti-HAV, относящихся к IgM сенсибилизировали противовидовыми антителами к мю-цепям молекул IgM из, так называемых, "анти-мю" сывороток.
Интересно, что при сравнении результатов исследования на ВГА с помощью ИФМ и ИЭМ одних и тех же материалов обнаружилось, что ИФМ "давал" позитивный результат при исследовании образцов фекалий, в которых ИЭМ не всегда выявлял частицы ВГА.
Оказалось, что подобные неспецифические реакции были связаны с неким компонентом фекалий и устранялись добавлением в ИФК сыворотки крови лиц, ранее не болевших ГА [15].
Хотя разработанный ИФМ по характеристикам оказался сопоставимым с уже упоминавшимися коммерческими наборами, он мог использоваться лишь в специализированной лаборатории. Между тем был нужен методически упрощенный вариант ИФМ, который мог бы применяться в типовой лаборатории практического профиля.
Такая модификация ИФМ в ИПВЭ была разработана уже в 1981 г [16]. Ее основу составили сенсибилизированные антителами полистироловые шарики, способность которых адсорбировать IgG была специально оценена [17]. Эти шарики помещали в небольшие стекляные пробирки - это позволяло учитывать результаты исследования визуально, с помощью цветного компаратора-колориметра, состоящего из ряда таких же пробирок с окрашенными растворами 2,3-диаминофеназина (в который "превращается" о-фенилендиамина, использованный в качестве субстрата пероксидазы) [18, 19]. Более того, оказалось, что "покрытые" антителами шарики в растворе сывороточного альбумина сохраняют иммуносорбентные свойства не менее месяца. Это позволило их сенсибилизировать заранее и, таким путем, сократить длительность самого исследования до нескольких часов [20, 21].
Надо иметь ввиду, что разработанный в ИПВЭ ИФМ и его модифицированный вариант, нашли научно-практическое применение. Так, их использовали при выявлении ВГА в сточных водах и при определении титра anti-HAV в разных сериях коммерческого препарата сывороточного IgG человека [21], при этиологической "расшифровке" случаев групповой заболеваемости гепатитом в нескольких городах [22, 23], а также при оценке возрастной иммуноструктуры населения г.Москвы и других городов и регионов СССР [24, 25, 26, 27].
Сопоставление результатов сочетанного применения разных методов выявления ВГА и апй-ИДО привело сотрудников лаборатории к выводу о том, что оптимальным из них является именно ИФМ [28].
Нельзя не отметить и то, что именно благода-
ря этим методам, стало возможным успешное осуществление в ИПВЭ исследований, которые дополнили ряд важных патогенетических особенностей ГА (динамику экскреции вируса, закономерности продукции апй-ИАУ разныхличных классов, частоты течения в субклинических формах и др.) и привели к идентификации вариантов ВГА, отвечавших за развитие ГА у обезьян. Особое значение эти методы имели и в дальнейшем в процессе проведенной в стенах ИПВЭ большой работы, завершившейся созданием вакцины против ГА [29].
Благодаря наличию этих методов лаборатория в СССР несколько лет выполняла функции методического центра, в который для освоения этих методов сюда приезжали исследователи из других городов СССР и, даже, из некоторых социалистических стран.
Нельзя не отметить и то, что наличие в лаборатории хорошо налаженных методов ИЭМ и ИФМ и соответствующих навыков у ее сотрудников позволило впервые осуществить визуализацию и идентификацию вируса, не являвшегося ВГА, но передающегося энтеральным путем. Здесь же за короткое время была разработана первая тест система ИФМ для диагностики инфекции, вызванной этим вирусом, который в 1990 г был признан вирусом гепатита Е [25].
Вскоре лаборатория ИПВЭ получила между-
народную известность и статус Центра, сотрудничающего с ВОЗ, а ее руководитель выдвинулся в ряд наиболее авторитетных и признанных в мире ученых в области изучения энтеральных вирусных гепатитов. Оставаясь заместителем директора ИП-ВЭ, он до конца жизни руководил лабораторией.
Однако за эти годы состав ее сотрудников изменился - вскоре после описанных событий ушла из жизни С.С.Савинская. В 1987 г А.Г.Анджапард-зе защитил докторскую диссертацию и на протяжении более 20 лет работал в азиатском бюро ВОЗ, занимая руководящие позиции в ряде странах. В 1990 г Т.А.Насташенко защитила диссертацию и переехала в США. А.Е.Анненков, закончил стажировку в ИПВЭ и занялся иммунологией. Защитив диссертацию, он получил приглашение на работу и уехал в Великобританию.
В заключение хотелось бы отметить, что изложенное выше составляет лишь одну из страниц в истории развития медицинской вирусологии в бывшем СССР. Но именно они позволят молодым исследователям сегодня лучше представить себе те, далекие от идеальных, условия, в которых, вопреки изолированности от мировой науки и, несмотря на ограниченность оснащения научным оборудованием, успешно работали наши соотечественники, порой добиваясь международного признания значимости своих научных изысканий.
Литература / References
1. Hollinger F.B., Bradley D.W., Maynard J.E., Dreesman G.R., Melnick J.L. Detection of hepatitis A viral antigen by radioimmunoassay. J. Immunol. 1975;115(5):1464-6. PMID: 51893.
2. Жданов В.М., Пакторис Е.А. Вирусные гепатиты. Ж. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 1979;1:26-31. PMID: 218401.
Zhdanov VM, Paktoris EA. [Viral hepatitis]. Zh Mikrobiol Epidemiol Immunobiol. 1979;(1):26-31. PMID: 218401. (In Russian).
3. Чард Т. Радиоиммунологические методы. М.:Мир, 1981; 248 с.
Chard T. [Radioimmunological methods]. M .: Mir, 1981; 248 p. (In Russian).
4. Дорошенко Н.В. Радиоиммунологический метод определения специфических маркеров гепатита А. Ав-тореф....дисс. кандидата медицинских наук. М.1980:25 с.
Doroshenko N.V. [Radioimmunologicheskiy metod opredeleniya specificheskikh markerov gepatita A]. Avtoref....diss. kandidata medicinskih nauk. M.1980:25 p. (In Russian).
5. Дорошеннко Н.В., Алексеева И.Л., Заиров Г.К. и др. Определение вируса гепатита А в фекалиях больных в динамике инфекционного процесса. Вопросы вирусологии. 1982;27(3):308-11. PMID: 6289528.
Doroshenko NV, Alekseeva IL, Zairov GK, et al. [Determination of hepatitis A virus in the feces of patients in the dynamics of the infectious process]. Vopr Virusol. 1982;27(3):308-11. PMID: 6289528. (In Russian).
6. Дорошенко Н.В. Стаханова В.М., Коломиец Ф.Ф. Распространенность антител к вирусу гепатита А среди здорового населения различных регионов СССР. Мат-лы V Всероссийского съезда микробиологов и эпидемиологов. М. 1985;317-318.
Doroshenko N.V. Stahanova V.M., Kolomiec F.F. [Rasprostranennost antitel k virusu gepatita A sredi zdorovogo naseleniya razlichnykh regionov SSSR]. Mat-ly V Vserossiyskogo syezda mikrobiologov i epidemiologov. M. 1985;317-318. (In Russian).
7. Жданов В.М., Ананьев В.А., Стаханова В.М. Вирусные гепатиты. М.: Медицина, 1986; 256 с.
Zhdanov V.M., Ananyev V.A., Stakhanova V.M. [Virusnye gepatity]. M.: Medicina, 1986; 256 p. (In Russian).
8. Mathiesen L.R., Feinstone S.M., Wong D.C., Skinhoej P., Purcell R.H. Enzyme-linked immunosorbent assay for detection of hepatitis A antigen in stool and antibody to hepatitis A antigen in sera: comparison with solid-phase radioimmunoassay, immune electron microscopy, and immune adherence hemagglutination assay. J Clin Microbiol. 1978;7(2):184-193. DOI: 10.1128/jcm.7.2.184-193.1978
9. Анджапаpидзе А.Г., Тольская Е.А., Балаян М.С. Новая модификация метода иммуноэлектронной микроскопии для выявления вируса гепатита А. Вкусные гепатиты. М. 1980; 10-13.
Andjaparidze A.G., Tolskaya Y.A., Balayan M.S. [Novaya modifikaciya metoda immunoelektronnoy mikroskopii dlya vyyavleniya virusa gepatita A]. Virusnye gepatity. М. 1980; 10-13. (In Russian).
10. Duermeyer W. Application of ELISA in the diagnosis and epidemiology of hepatitis A. Amsterdam: Rodopi. 1980; 218 p.
11. Балаян М.С., Анджапаpидзе А.Г., Тольская Е.А., Колесникова М.С. О возможности воспроизведения инфекции вируса гепатита А в клеточных системах. Вопросы вирусологии. 1979;6:675-6. PMID: 230649.
Balaian MS, Andzhaparidze AG, Tol'skaia EA, Kolesnikova MS. [Possibility of reproducing hepatitis A viral infection in cell systems]. Vopr Virusol. 1979;6:675-6. PMID: 230649. (In Russian).
12. Анджапаpидзе А.Г., Савинская С.С., Мамедов М.К. и др. Виpусологические находки в матеpиалах от больных с диагнозом инфекционный гепатит. В^усы и вкусные инфекции человека. М. 1981; с.217.
Andjaparidze A.G., Savinskaia S.S., Mamedov M.K. et al. [Virusologicheskie nakhodki v materialakh ot bol'nykh s diagnozom infekcionniy gepatit]. Virusy i virusnye infekcii cheloveka. M. 1981; p.217. (In Russian).
13. Анджапаpидзе А.Г., Балаян М.С. Насташенко Т.А. Комбинация радиоиммунологического и имуноэле-ктронномикроскопического методов для обнаружения вируса гепатита А. Вопросы вирусологии. 1983;28(4):65-9. PMID: 6314673.
Andzhaparidze AG, Balaian MS, Nastashenko TA. [Combination of radioimmunological and immunoelectron microscopic methods for detecting hepatitis A virus]. Vopr Virusol. 1983;28(4):65-9. PMID: 6314673. (In Russian).
14. Andjaparidze AG, Tolskaya EA, Kolesnikova MS, Balayan MS. Antibody response in hepatitis A and some other enteroviral infections: quantitative comparison. Acta Virol. 1984;28(1):53-5. PMID: 6143497.
15. Tolskaya EA, Savinskaya SS, Balayan MS, Andzhaparidze AG, Kolesnikova MS. Enzyme-immunoassay in the diagnosis of human hepatitis A: specific and non-specific reactions. Acta Virol. 1983;27(1):43-50. PMID: 6133430.
16. Мамедов М.К., Анджапаpидзе А.Г., Балаян М.С. Разpаботка угощенной модификации энзимоимму-носоpбентного метода обнаpужения в^уса гепатита А и антигена к нему. Вкусные гепатиты. Под ред. В.М.Жданова и Е.М Кетиладзе. М. 1983; с.17-22.
Mamedov M.K., Andjaparidze A.G., Balaian M.S. [Razrabotka uproshhennoy modifikacii enzimoimmunosor-bentnogo metoda obnaruzheniya virusa gepatita A i antigena k nemu]. Virusnye gepatity. Eds. V.M.Zhdanov and E.M Ketiladze. M. 1983; p.17-22. (In Russian).
17. Мамедов М.К. Hекотоpые закономеpности адсоpбции иммуноглобулина G повеpхностью полис-тиpоловых шаpиков. Иммунология. 1985;1:19-21.
Mamedov M.K. [Nekotorye zakonomernosti adsorbcii immunoglobulina G poverkhnost'yu polistirolovykh sharikov]. Immunologiya. 1985;1:19-21. (In Russian).
18. Mamedov M.K., Savinskaya S.S., Balayan M.S. Simplified ELISA for detection of hepatiis A virus antigen and its antibodies. Hepatitis Scietific Memoranda. 1984;6:6-8.
19. Мамедов М.К., Анджапаpидзе А.Г. Ускоpенное обнаpужение специфических иммуноглобулинов класса М ^отив в^уса гепатита А энзимоиммуносоpбентным методом. Эпидемиология, специфическая диагностика и пpофилактика вкусных гепатитов. Таллин. 1983; 89-90.
Mamedov M.K., Andjaparidze A.G. [Uskorennoe obnaruzhenie specificheskikh immunoglobulinov klassa M pro-tiv virusa gepatita A enzimoimmunosorbentnym metodom]. Epidemiologiya, specificheskaya diagnostika i profilakti-ka virusnykh gepatitov. Tallin. 1983; 89-90. (In Russian).
20. Мамедов М.К., Балаян М.С., Анджапаpидзе А.Г. Способ обнаpужения в^уса гепатита и антител к нему. Авторское свидетельство СССР на изобpетение N.1076121; Бюлл. ВНИИ ГПЭ N.8 от 28.02. 1984. Режим доступа: https://patentimages.storage.googleapis.com/a5/54/f5/bd38e9cd5e0b01/SU1076121A1.pdf
Mamedov M.K., Balaian M.S., Andjaparidze A.G. [Method of detecting hepatitis virus a and antibodies to the latter]. USSR' Patent for Invention N.1076121; Bull. VNIIGPE N.8 from 28.02.1984. Available at: https://patentim-ages.storage.googleapis.com/a5/54/f5/bd38e9cd5e0b01/SU1076121A1.pdf
21. Мамедов М.К. Модифициpованный энзимоиммуносоpбентный метод для ускоpенного обнаpужения в^уса гепатита А и антител пpотив него. Автореф....дисс. кандидата мед. наук. М. 1983; 22 с.
Mamedov M.K. [Modificirovanniy enzimoimmunosorbentniy metod dlya uskorennogo obnaruzheniya virusa gepatita A i antitel protiv nego]. Avtoref....diss. kandidata med. nauk. M. 1983; 22 p. (In Russian).
22. Савинская С.С., Анджапаридзе А.Г. Балаян М.С. и др. Опыт обследования больных инфекционным гепатитом с применением методов обнаружения вируса. Ж. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии.
1979;7:96-100. PMID: 224627.
Savinskaia SS, Andraparidze AG, Balaian MS, et al. [Experience in examining infectious hepatitis patients by using a viral detection method]. Zh Mikrobiol Epidemiol Immunobiol. 1979;7:96-100. PMID: 224627. (in Russian).
23. Савинская С.С., Анненков А.Е. Анджапаpидзе А.Г. и др. Водная вспышка гепатита А на севере Якутской АССР. Вопр. региональной гигиены, санитарии и эпидемиологии. Якутск. 1981, 81-85.
Savinskaia S.S., Annenkov A.E. Andzhaparidze A.G. et al. [Vodnaya vspyshka gepatita A na severe Yakutskoy ASSR]. Vopr. regional'noy gigieny, sanitarii i epidemiologii. Yakutsk. 1981, 81-85. (In Russian).
24. Савинская С.С., Мамедов М.К., Анненков А.Е., Горкина З.А. Антитела к вирусу гепатита А у заболевших гепатитом лиц из организованного трудового коллектива./ Современные проблемы эпидемиологии кишечных инфекций. Мат-лы научн. конфеpенции филиала ЦНИИ эпидемиологии. Астрахань. 1983; 61-65.
Savinskaia S.S., Mamedov M.K., Annenkov A.E., Gorkina Z.A. [Antitela k virusu gepatita A u zabolevshikh gepatitom lic iz organizovannogo trudovogo kollektiva]. Sovremennye problemy epidemiologii kishechnykh infekciy. Materials of the Scientific conference of Central Scientific Research Institute of Epidemiology branch. Astrakhan. 1983; 61-65. (In Russian).
25. Савинская С.С., Тольская Е.А., Балаян М.С. Антитела к вирусу гепатита А у здорового населения Москвы. Ж. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 1982;5:34-37. PMID: 6285646.
Savinskaia SS, Tolskaia EA, Balaian MS. [Antibodies to the hepatitis A virus in the healthy population of Moscow]. Zh Mikrobiol Epidemiol Immunobiol. 1982;5:34-7. PMID: 6285646. (in Russian).
26. Мамедов М.К., Алиев Г.З., Бадьфханова А.С. и др. Частота выявления антител к в^усу гепатита А у группы взpослых жителей г.Баку. Пеpспективы иммунопpофилактики эпидемических заболеваний. Под ред. Б.Х.Вафакулова. Мат-лы научн. конфеpен. Узбекского НИИ вакцин и сывороток. Ташкент. 1983; 38-40.
Mamedov M.K., Aliyev G.Z., Badyrkhanova A.S. et al. [Chastota viyavleniya antitel k virusu gepatita A u grup-py vzroslykh zhiteley g.Baku]. Perspektivy immunoprofilaktiki epidemicheskikh zabolevaniy. Eds. B.Kh.Vafakulov. Materials of the scientific conference of Uzbekistan Scientific Research Institute of vaccines and serums. Tashkent. 1983; 38-40. (In Russian).
27. Савинская С.С., Балаян М.С., Вакар Е.И. и др. Показатели популяционного иммунитета к вирусу гепатита А в разных географических регионах. Ж. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 1986;1:55-58. PMID: 3010605.
Savinskaia SS, Balaian MS, Vakar EI, Zak MR, Martinez S. [Indices of collective immunity to the hepatitis A virus in different geographical regions]. Zh Mikrobiol Epidemiol Immunobiol. 1986;1:55-8. PMID: 3010605. (In Russian).
28. Мамедов М.К., Балаян М.С., Анджапаpидзе А.Г. Совpеменные методы обнаpужения в^уса гепатита А и антител пpотив него. Ж. микpобиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 1982;10:3-10. PMID: 6295031.
Mamedov MK, Balaian LS, Andzhaparidze AG. [Current methods of detecting the hepatitis A virus and its antibodies]. Zh Mikrobiol Epidemiol Immunobiol. 1982 Oct;(10):3-10. PMID: 6295031. (In Russian).
29. Мамедов М.К., Михайлов М.И. К 40-летию идентификации в^уса гепатита А. В м^е вкусных гепатитов. 2014;1:6-13. Режим доступа: https://mirvirgepatitov.ru/download/mir-vir-hep_2014_n.1.pdf
Mamedov M.K., Mikhailov M.I. [То 40-th anniversary of hepatitis A virus identification]. V mipe vipusnyh gepatitov. 2014;1:6-13. Available at: https://mirvirgepatitov.ru/download/mir-vir-hep_2014_n.Lpdf (In Russian).
30. Михайлов М.И., Шахгильдян И.В., Онищенко Г.Г. Энтеральные вирусные гепатиты. М.: ВУНМЦ Росз-дава. 2007; 349 с.
Mikhailov M.I., Shahgil'dian I.V., Onishhenko G.G. [Enteral'nye virusnye gepatity]. M.: VUNMC Roszdava. 2007.
