CC BY
8
Для оценки воспроизводимости результатов по предложенной методике и оценки •ее чувствительности готовили 4 стандартных раствора с концентрацией стронция 1 мг/м3 из разных навесок его хлорида. Из каждого стандартного раствора готовили путем разведения серии растворов хлорида стронция различных концентраций: 2,5, 5, 10, 25 и 50 мкг/мл.
Через заборную иглу горелки пламенного фотометра, начиная с наименьшей концентрации в ацетиленово-кислородное пламы вводили стандартные растворы. На диаграммной бумаге самописца отмечали показания прибора. Полученные данные зависимости интенсивности возникающего фотопотока от концентрации стронция в пробе апроксимизировали методом наименьших квадратов до прямолинейной. Апроксимизи-рованная прямая выражалась уравнением:
/= —0,238 + 56,66 С, (2)
где / — интенсивность фотопотока; С — концентрация стронция в пробе (в мкг/мл). При этом получена ошибка уравнения, равная 1,128, а среднеквадратичное отклонение — 1,221.
На основании полученного уравнения мы вывели теоретическую чувствительность методики, равную 0,42 мкг/мл (/ =0 при С=0,42 мкг/мл), что хорошо согласуется с полученными нами эмпирическими данными. Точность метода составляет 2,25%.
Воспроизводимость опыта в различных интервалах определяемых концентраций мы определяли по следующим метрологическим характеристикам: коэффициенту вариации, рассчитываемому по формуле (3) и показателю точности из формулы (4).
Э-Уп
V = 100% --(3)
X '
где V — коэффициент вариации в процентах; — среднеквадратичная ошибка среднего арифметического; п — число определений; X — среднее арифметическое.
5- у
Р= 100%--^- или Р=гг7=* (4)
X уп
где Р — показатель точности опыта (в %).
При определении концентрации солей стронция от 2,5 до 10 мкг/мл коэффициент вариации колеблется от 27,33 до 8,2% при среднем значении 15,45±5,85, увеличиваясь на малых значениях измеряемой интенсивности фотопотока. В диапазоне концентраций от 10 до 50 мкг/мл коэффициент вариации был стабилен и колебался от 8,2 до 8,75% при среднем значении 8,39±2,99%. В интервале от 2,5 до 10 мкг/мл точность повышалась с 6,83±2,46 до 2,05±0,72%, а в диапазоне от 10 до 50 мкг/мл точность опыта находилась на одном уровне — 2,1±0,74%.
Таким образом, учитывая то, что воспроизводимость опыта считается удовлетворительной при коэффициенте вариации не более 10%, а точность опыта не должна превышать 5%, мы рекомендуем работать по данной методике в диапазоне от 5 мкг/мл и выше. При этом средний коэффициент вариации в интервале от 5 до 50 мкг/мл составляет 9±3,31% при точности опыта 2,25+0,79%. Работа в данном интервале концентраций позволяет определятьТсоединения стронция в воздухе производственных помещений на уровне ПДК и ниже.
Поступила 2/ХП 1978 г.
УДК 628.312:576.851.315
Э. А. Москвитина, Д. Т. Ширяев, Л. В. Иванова, А. И. Талалаев,
А. А. Шапошников
ИЗУЧЕНИЕ ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ ВОЕЬЬОУ1В1иО ВАСТЕРЮУОЦив С ХОЛЕРНЫМИ ВИБРИОНАМИ В СТОЧНОЙ ВОДЕ
Научно-исследовательский противочумный институт, Ростов-на-Дону
Целью наших исследований являлось выделение штаммов Вс1е11оу1Ьпо Ьас1е-гюуогиэ (бделловибрио бактериоворус) в натурных условиях, выявление среди них наиболее активных в отношении холерных вибрионов Эль-Тор серотипов Огава, Инаба и определение взаимодействия бделловибрио, обладающих высокой лктической активностью, с холерными вибрионами в нативной и автоклавированной сточной воде. Одной из задач наших исследований являлся также показ возможности использования бделловибрио бактериоворус как естественного биологического агента обеззараживания сточных вод на этапах биологической очистки или в замкнутой канализационной системе.
Для выделения бделловибрио бактериоворус применяли метод выращивания бделловибрио с использованием микроба-хозяина в состоянии пониженной жизне-
деятельности (Ф. X. Ибрагимов н соавт.: Ф. X. Ибрагимов). В качестве тест-микроба использовали кишечную палочку (Е. соН 469) и холерные вибрионы Эль-Тор серотипа Ииаба 8860 и Огава 9596. Исследования проводили в весенне-летний сезон. Для выделения бделловибрио бактериоворус брали воду из Дона, Темерника, в местах сброса неочищенных хозяйственно-бытовых сточных вод и на различных этапах биологической очистки. В опытах использовали 0,7% агар-агаровый гель рН 7,2—7,4, среду Гелена, рН 7,4 и агар Мартена рН 7,2.
Определение взаимодействия штаммов бделловибрио бактериоворус с холерными вибрионами в нативной н автоклавированной сточной воде при температуре 22 и 37°С проводили путем добавления в нее холерных вибрионов из расчета 4,0-10® микробных клеток в миллиметрах и бделловибрио бактериоворус с индексом от 4,8-106 до 6,2Х Х105 БОЕ/мл. Контролем служили те же пробы, но с добавлением только холерных вибрионов или бделловибрио в тех же количествах. Через каждые сутки в опытных и контрольных пробах определяли количество клеток холерных вибрионов по методике подсчета живых микроорганизмов (Дж. Мейнелл и Э. Мейнелл) и индекс бделловибрио (Ф. X. Ибрагимов).
Контроль проб на наличие паразитических микроорганизмов проводили в фазо-во-контрастном микроскопе. Специфичность лизиса подтверждали наличием в пробе бделловибрио с характерным для них типом подвижности. Коли-титр, коли-индекс, общую микробную обсемененность и физико-химические свойства сточных вод определяли в соответствии с существующими методиками (Ю. Ю. Лурье и А. И. Рыбникова). Статистическую обработку материала выполняли по методам И. П. Ашмарина и А. А. Воробьева.
Для выделения бделловибрио бактериоворус исследовали 86 проб из различных объектов внешней среды. Сточные воды характеризовались щелочной реакцией среды (от 7,1 до 7,6), присутствием аммонийного (от 2,0 до 10,0 мг/л), нитритного (от0,002 до 0,2 мг/л) азота, сульфатов (323,0—396,4 мг/л), окисляемость кислорода в пробах колебалась от 31,1 до 47,5 мг/л, микробное число — от 9800 до 270 000, а коли-титр— от 0,0001 до 0,000004.
Бделловибрио бактериоворус были выделены из 42 (48,6%) проб, при этом наибольшее количество паразитических микробов содержалось в сточных водах на этапах очистки (в 73,3% проб). Индекс бделловибрио колебался от 3,0-103 до 1,3-106 БОЕ/мл. Процент выделения бделловибрио на холерных вибрионах составлял 56%, а на кишечной палочке — 47,4%, что свидетельствовало о более выраженной литической активности выделенных штаммов в отношении холерных вибрионов.
Среди 42 выделенных штаммов бделловибрио бактериоворус отобрали 7, обладающих наибольшей литической активностью в отношении холерных вибрионов Эль-Тор серотина Огава и Инаба. Об этом свидетельствовало отсутствие даже единичных клеток холерных вибрионов при совместном вегетаровании через 4—5 сут, в то время как в контроле (без бделловибрио) число холерных вибрионов оставалось значительным (4,0-104—5,0-10» в 1 мл).
Один из этих штаммов — бделловибрио бактериоворус 68НС-4 — использован в опытах по взаимодействию с холерными вибрионами в сточной воде. В нативной сточной воде гибель холерных вибрионов серотипа Огава наступала на 4-е сутки, титр бделловибрио при этом колебался от 3,4-104 до 6,4'104 БОЕ/мл. Литическое действие бделловибрио на штаммы холерных вибрионов серотипа Инаба проявлялось на 3—4-е сутки при титре 7,0-104 и 1,4-104 БОЕ/мл. В эти же сроки наступала гибель холерных вибрионов в контроле.
Из сточной воды, куда вносили двухкомпонентную систему паразит — хозяин, были выделены бделловибрио бактериоворус, вода также характеризовалась высокой микробной обсемененностью (от 1,7-104 до 2,4-103), поэтому, на наш взгляд, гибель холерных вибрионов Эль-Тор обоих серотипов в нативной сточной воде происходила в одни и те же сроки как в опытных, так и в контрольных пробах, с одной стороны, за счет литического действия бделловибрио бактериоворус, с другой — за счет антагонистического действия сопутствующей микрофлоры и бделловибрио, содержащихся в исследуемой воде.
В автоклавированной сточной воде достаточно четко определилось литическое действие бделловибрио на холерные вибрионы Эль-Тор обоих серотипов при температуре 22 и 37°С, о чем свидетельствовала гибель холерных вибрионов Эль-Тор серотипа Инаба и Огава на 7—10-е сутки при 22°С и на 4—6-е сутки при 37°С. При 22°С гибель холерных вибрионов наступала при титре бделловибрио 3,7-104 и 4,6-104 БОЕ/мл, а при 37°С титр равнялся соответственно 5,1-10* и 2,4-10е БОЕ/мл. В контрольных пробах холерные вибрионы сохранялись до 10 сут, количество их оставалось на уровне от 1.5-103 до 1,0-10« в 1 мл.
Кривая титра бделловибрио бактериоворус при взаимодействии с холерными вибрионами имела вид изломанной линии с периодическим повышением и понижением. Наличие бделловибрио после гибели холерных вибрионов, культивируемых при 22 и 37°С подтвердило способность паразитических бактерий развиваться за счет разрушенных клеток хозяина.
Таким образом, лизис клеток холерных вибрионов при взаимодействии с бделловибрио бактериоворус происходил наиболее эффективно при 37°С, т. е. при температуре, наиболее оптимальной для роста и размножения холерных вибрионов.
Время установления максимального значения соотношения паразит — хозяин ■является показателем скорости процесса взаимодействия в системе (А. В. Афиногенова и В. А. Ламбина). В наших опытах соотношение паразит — хозяин устанавливалось наиболее быстро при взаимодействии бделловибрио и холерных вибрионов Эль-Тор серотипа Инаба и Огава при 37°С. Так, если через 1 сут инкубации при этой температуре соотношение паразит — хозяин для холерных вибрионов Эль-Тор серотина Огава было равно 0,2-10®, для холерных вибрионов Эль-Тор серотипа Инаба—0,3-105, то при температуре 22° С оно соответственно равнялось 0,7-103 и 0,8-103. Максимальное соотношение паразит — хозяин устаналивалось при взаимодействии бделловибрио с холерными вибрионами при 37°С на 3-й, а при 223С — на 7-е сутки, т. е. при снижении температуры инкубации для установления максимального сооГношения требуется больше времени. Этим, на наш взгляд, можно объяснить более поздние сроки гибели холерных вибрионов при 22°С, чем при 37°С.
Выводы
1. Из сточной воды выделены штаммы бделловибрио бактериоворус, обладающие высокой литической активностью по отношению к холерным вибрионам Эль-Тор серотипа Огава 9596 и Инаба 8860.
2. При взаимодействии бделловибрио бактериоворус с холерными вибрионами Эль-Тор серотипа Огава и Инаба в автоклавированной сточной воде антагонистическое действие паразита проявлялось на 4—6-е сутки при 37°С и на 7—10-е сутки— при 22°С.
3. В нативной сточной воде гибель холерных вибрионов Эль-Тор обоих серотипов наступала на 3—4-е сутки при 22°С как в опытных, так и в контрольных пробах. В связи с этим возможность использования бделловибрио бактериоворус в качестве биологических агентов для обеззараживания сточных вод от холерных вибрионов требует дальнейшего изучения.
ЛИТЕРАТУРА
Афиногенова А. В., Ламбина'В. А.— Микробиология, 1977, вып. 4, с. 741—745. Ашмарин И. П., Воробьев А. А. Статистические методы в микробиологических
исследованиях. Л., 1962. Ибрагимов Ф. X., Илюхин А. А., Меркина Е. Н. и др.— В кн.: Проблемы особо
опасных инфекций, 1976, вып. 4 (50), с. 66—67. Ибрагимов Ф. X,— Лабор. дело, 1978, № 7, с. 427—428.
■Лурье Ю. Ю., Рыбникова А. И. Химический анализ производственных сточных вод. М., 1974.
Мейнелл Дж., Мейнелл Э. Экспериментальная микробиология. М., 1967, с. 33—68«
Поступила 16/1X 1978 Г.
УДК 612-053.5 + 613.9551:371.711
Н. М. Молчанова, И. Б. Топоркова
ФИЗИОЛОГО-ГИГИЕНИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА РЕЖИМА ДНЯ УЧАЩИХСЯ 1-го КЛАССА ШКОЛЫ ПОЛНОГО ДНЯ
Ленинградский педагогический институт им. А. И. Герцена
В последние годы в нашей стране начали открываться экспериментальные школы нового типа — школы полного дня (М. Сысоева и В. Кутьев), которые проф. Э. Г. Ко-стяшкин считает школами будущего. Внедрение научно обоснованного режима в школах полного дня имеет особое значение, поскольку учащиеся этих школ испытывают большое нервное напряжение вследствие длительного пребывания в условиях коллектива. Между тем, как пишет В. Подобед, до настоящего времени нет научно обоснованного режима дня для школ полного дня и разработка его особенно актуальна.
Наши исследования проведены во втором полугодии 1977/78 учебного года в 1-м классе ленинградской школы № 345, где 43 ученика (24 девочки и 19 мальчиков).
В данной работе представлены результаты статистической обработки материалов двух серий исследований (1336 наблюдений), проведенных при двух вариантах режима дня (см. таблицу). Показатели работоспособности, полученные в течение дня, сравнивали с фоном (работоспособность до уроков). Достоверность разности средних считали существенной при Р<0,05.
Первый вариант режима (принят в школе для 1-х классов) имеет ряд гигиенических недостатков: имеется малый промежуток времени между первым (дома) и вторым (в школе) завтраком, ранний обед, недостаточное пребывание на свежем воздухе
