CC BY
28
5. Краевский Н. А., Смояьяппиков А. В., Саркисов Д. С. (ред.) //Па-тологоанатомическая диагностика опухолей чсвовска. Руководство для врачей. 4-е изд. — М., 1993. —Т. 1.
6. Патрик С. В., Райхлин Н. Т., Серре Г., Смедтс Ф. II Арх. пат. —
1995. — № 5.—С. 47—53.
7. Петров С. В., Райхлин Н. Т., Серре Г., Смедтс Ф. //Там же. —
1996. — № 2.— С. 13—21.
8. Райхлин Н. Т., Денисов В. Н. // Вопр. онкол. — 1973. —№ 19. — С. 3—10.
9. Райхлин Н. Т. II Вести. АМН СССР. — 1974. — № 7. — С. 23—27.
10. Райхлин Н. Т., Давид Г., Лапиш К. (ред.)//Ультраструктура опухолей человека. Руководство для диагностики. — М., 1981.
11. Райхлин Н. Т. //Вопр. онкол. — 1984. — №. 30.—С. 114—119.
12. Райхлин Н. Т. II Общая патология человека. Руководство. 2-е изд. /Под ред. А. И. Струкова, В. В. Серова, Д. С. Саркисова. — М., 1990.—Т. 2.— С. 327—335.
13. Райхлин Н. Т., Петров С. В. //Актуальные проблемы онкоморфологии. Сборник научных трудов к 100-летию со дня рождения проф. М. Ф. Глазунова /Под ред. Н. М. Аничкова, А. Е. Колосова. — Санкт-Петербург; Киров. — 1996.—С. 100—109.
© Коллектив авторов, 1998 УДК 616-006.04-084:612.396.11
Н. И. Шеренешева, В. Е. Финько, Ф. Ф. Бланко,
Т. А. Алиева, Е. Н. Бедрина, И. А. Гоголева,
Т. И. Клочкова
ИЗУЧЕНИЕ ВЛИЯНИЯ ЦИННАБАРИНА НА КАНЦЕРОГЕНЕЗ У КРЫС, ИНДУЦИРОВАННЫЙ 3-(1-а-Ь-АРАБИН0ПИРАН03ИЛ)-1-МЕТИЛ-
1-НИТРОЗОМОЧЕВИНОЙ
НИИ экспериментальной диагностики и терапии опухолей
Среди высокомолекулярных соединений, ОТНОСЯЩИХСЯ к группе полисахаридов, найдены вещества, обладающие выраженной противоопухолевой активностью в сочетании с иммуномодулирующим действием на Т-лимфоцитарную фракцию крови, например известный противоопухолевый препарат лентитан [1, 2, 4]. В литературе [7, 8], посвященной химиотерапии рака, имеются указания на противоопухолевую активность полисахаридов, выделенных из высших растений, грибов, лишайников, бактерий, дрожжей. Известно, что полисахариды, выделенные из природных источников, часто оказывают антиметастатическое и антиканцерогенное действие [2]. Показана выраженная противоопухолевая активность в сочетании с иммуномодулирующим действием на экспериментальных опухолях мышей полисахарида циннабарина, выделенного из культуры клеток базидального гриба Ркпорогт стпаЬагтш [3]. Все вышеизложенное явилось основанием для изучения особенностей канцерогенного действия 3-(1 -а-Ь-арабинопиранозил)-1 -метил-1 -нитрозомочевины (АМНМ), отечественного противоопухолевого препарата, у крыс в условиях продолжительного введения циннабарина.
Материалы и методы. Химические вещества: циннабарин — полисахарид, выделенный из культуральной смеси, полученной в результате ферментации гриба Р!спорогш стпаЬагтих. АМНМ — отсчсст-
14. Романенко А. М., Воробьева Л. Р. // Арх. пат.— 1995.— № 4. —С. 38-42.
15. Смирнов А. В., Соколова И. Н. // Там же. — № 5. — С. 14—21.
16. Трояновский С. М., Банников Г. М. II Промежуточные фила-менты в норме и патологии /ИНТ ВИНИТИ. Сер. «Общие проблемы физико-химической биологии». — М., 1989.
17. Франк Г. А., Казесалу Я. С.-В., Пийрсоо А. О. и др.//Арх. пат. — 1992. — № 3. — С. 12—16.
18. Azar Н. //Pathology of human neoplasms. An alias of diagnostic electron microscopy. — New York, 1988.
19. De Lellis R. A. II Diagnostic immunohistochemistry. — New York, 1988.
20. Fischer-Wasels В. II Allgcmeinc Geschulstlehrc. — Hdb. Norm. Pathol. Physiol., Bethc. — 14/2. — Berlin, 1927.
21. Ramaekers F., Smedis F. Vooijs G. P. II Current Persp. in Molecular and Cellular Oncology /Ed. D. Spandidos. — London, 1992.— P. 285—318.
22. Taylor C. R., Cote R. J. (Eds) II Immunomicroseopy: a diagnostic tool for the surgical pathologist. — 2-nd Ed. — Philadclhia, 1994.
Поступила 09.06.97 / Submitted 09.06.97
N. I. Sherenesheva, V. E. Finko, F. F. Blanko,
T. A. Aliyeva, E. N. Bedrina, I. A. Gogoleva,
T. I. Klochkova
STUDY OF CINNABARIN EFFECT ON 3-(l-a-L-ARABINOPYRANOSYL)-l-METHYL-l NITROSOUREA-INDUCED CARCINOGENESIS IN RATS
Research Institute of Experimental Diagnosis and Therapy of Tumors
Many polysaccharides demonstrate marked antitumor and T-lymphocyte immunomodulation activities, e. g. a well-known antitumor agent lentinan [1, 2, 4]. Publications on cancer chemotherapy [7, 8] report of antitumor activity of polysaccharides extracted from plants, fungi, lichens, bacteria, yeast. Natural polysaccharides are known to produce antimetastatic and an-ticarcinogenic effects [2]. Experiments on mice demonstrated antitumor and immunomodulating activities of a polysaccharide cinnabarin extracted from fungus Picnporus cinnabarinus [3]. We studied carcinogenic effects of domestic antitumor drug 3-(l-a-L-arabinopyra-nosyl)-l -methyl-1 nitrosourea (AMNU) as administered against the background of cinnabarin chronic administration to rats.
Materials and Methods. Chemical substanccs: polysaccharidc
cinnabarin extracted from culture medium resulting from Picnporus cinnabarinus fermentation. AMNU, a domestic antitumor drug synthesized at the N.N.Blokhin CRC RAMS.
Animals: white mongrel female rats of CRC RAMS breed with a baseline body weight 180-200 g were kept in plastic cages 5 animals each and led by a standard diet. 65 rats were divided into 4 groups. Groups 1 and 2 (20 females each) received AMNU once intravenously at 250 mg/kg body weight. Groups 2 (20) and 3(15) received cinnabarin at 50 mg/kg body weight with feed. Group 4 (10) were intact control. Cinnabarin treatment was started at 1 month before AMNU and continued for 2 months. Body weight measurement was performed
Experimental Investigations
венный противоопухолевый препарат, синтезированный в ОНЦ им.
Н. Н. Блохина РАМН.
Животные, белых беспородных крыс-самок разводки ОНЦ РАМН с исходной массой тела 180—200 г содержали в пластиковых клетках по 5 особей на стандартной диете. Животные (65 крыс) были разделены на 4 группы. Крысам 1-й и 2-й групп (по 20 самок в каждой) вводили АМНМ однократно внутривенно в дозе 250 мг/кг массы тела. Крысы 2-й (20 самок) и 3-й (15 самок) групп получали цин-набарин в дозе 50 мг/кг массы тела с кормом. Крысы 4-й группы (10 самок) служили интактным контролем. Введение циннабарина в пищевой рацион крыс начинали за 1 мес до введения АМНМ и продолжали в течение 2 мес. Ежемесячно животных взвешивали. Опыт закончили через 11 мес после начала введения циннабарина. Оставшиеся в живых к концу опыта крысы были умерщвлены эфиром. Все животные были подвергнуты патологоанатомичсскому исследованию. Кусочки опухоли для гистологического исследования фиксировали в 10% растворе формалина, заключали в парафин. Срезы окрашивали гематоксилином и эозином. Результаты статистически обрабатывали стандартными методами [5], вычисляя средние значения, доверительные интервалы средних и достоверность различий между средними по критерию Стыодента. При оценке антиканцерогенного действия циннабарина полученные результаты подвергали статистическому анализу с использованием критерия у} с поправкой Йейтса для ограниченного числа животных.
Результаты и обсуждение. Изменения показателей массы тела подопытных крыс практически не отличались от таковых в группе соответствующего контроля на протяжении всего опыта. К концу опыта показатели массы тела для 1-й группы составили 255 ±2,5, для 2-й — 260 + 3,0, для 3-й — 255 + 4,3, для 4-й — 260 + 4,2 г. Введение циннабарина не влияло на выживаемость крыс.
Индукция опухолей. У крыс, получивших только цип-набарин (3-я группа) и у интактных крыс (4-я группа) опухолей обнаружено не было. У одной крысы, погибшей в ранние сроки опыта через неделю после введения АМНМ, наблюдались множественные точечные кровоизлияния в паренхиматозных органах. Данные по индукции опухолей представлены в таблице. Как видно из таблицы, опухоли развились у крыс 1-й и 2-й групп. Первая опухоль была обнаружена в 1-й группе на 237-й день, во 2-й группе на 308-й день (различия статистически недостоверны, р = 0,6). Опухоли были обнаружены у 6 из 19 крыс 1-й группы и у 7 из 19 крыс
2-й группы, что составило соответственно 32 и 36%. Статистическая обработка полученных результатов показала, что существенных различий в общей частоте опухолей между группами не было. Опухоли локализовались преимущественно в почках, значительно реже в других органах и тканях. Гистологически они соответствовали мезенхимным опухолям с различными тканевыми дифференцировками. Внутривенное однократное введение АМНМ в дозе 250 мг/кг массы тела индуцировало опухоли почек у 3 (16%) из 19 крыс 1-й группы. У крыс 2-й группы, получивших АМНМ совместно с циннабарином, частота этих новообразований была в 2 раза выше, чем при введении только канцерогена (соответственно 32 и 16%). Локализация и морфология опухолей в обеих группах были характерны для канцерогенного действия АМНМ при использованной схеме се введения [6]. Циннабарин не оказал влияния на локализацию и гистологическую структуру индуцированных АМНМ опухолей. Полученные результаты свидетельствуют об отсутствии защитного эффекта циннабарина в отношении канцерогенеза, индуцированного АМНМ у крыс. Следует
Таблица Table
Влияние циннабарина на канцерогенез у крыс, индуцированных АМНМ
Cinnabarin effect on AMNU-induced carcinogenesis in rats
Число фыс и препарат
Крысы 1-я группа (л = 19), АМНМ 2-я группа (п = 19), АМНМ + циннабарин
С опухолями1 / Tumor-bearing 6(32) 7 (36)*
С несколькими опухолями2 Bearing several tumors 1 (16,6) 2 (28,6)*
С мезенхимной опухолью почки Renal mesenchymal tumor-bearing 3(16) 6 (32)*
С фиброаденомой молочной железы Breast fibrous adenoma-bearing 1 2
С саркомой кожи и подкожной клетчатки Cutaneous and subcutaneous cellular tissue sarcoma-bearing 1 1
С саркомой тонкой кишки Small intestinal sarcoma-bearing 1 1
Group 1 (п = 19), AMNU Group 2 (п = 19)
Rats AMNU + cinnabarin
No. of rats and drugs
Примечания. 1По отношению к количеству крыс, доживших до обнаружения первой опухоли. 2 По отношению к количеству крыс с опухолью. В скобках указано процентное соотношение. * р > 0,05 по сравнению с 1-й группой (критерий X2).
Notes. 1, per cent of the number of animals surviving tumor onset. 2, per cent of the number of tumor-bearing rats. Numbers in parentheses show per cent. *, p > 0.05 as compared to group 1 (x2-test).
daily. The experiment was ended at 11 months after cinnabarin start. The survivors were sacrificed by etherization. All the animals underwent autopsy. Tumor fragments for histological study were fixed in 10% formalin and embedded in paraffin. The sections were stained with hematoxylin and cosin. Statistical analysis of results was performed by standard methodologies [5], the analysis including calculation of mean values, their confidence intervals and analysis of differences by Student’s test. Findings concerning cinnabarin anticarcinogenic effcct were analyzed using x2_lcsl wilh the Yates correction for a limited number of animals.
Results and Discussion. Changes in body weight in test and control animals were similar during the whole study. By the end of the experiment the body weights were 255 ±2.5 g in group 1, 260 + 3.0 g in group 2, 255 + 4.3 g in group 3, 260±4.2 g in group 4. Cinnabarin treatment had no effect on animal survival.
Tumor induction. The rats receiving cinnabarin alone (group 3) and intact rats (group 4) developed no tumors. One rat, having died early after experiment start, i.e. at 1 week after the first AMNU dose, presented with multiple point bleedings in parenchymatous sites. The table summarizes data concerning tumor induction. As seen, the tumors developed in rats from groups 1 and 2. The first neoplasm was discovered on day 237 in group 1 and on day 308 in group 2 (the differences are not statistically significant, p — 0.6). Tumor development was observed in 6 of 19 rats from group 1 and in 7 of
отметить факт некоторого увеличения числа животных с опухолью в группе крыс, получивших канцероген совместно с циннабарином. Причем если в случае общей частоты возникновения новообразований это увеличение было незначительным (36% против 32%), то действие циннабарина на индуцированные АМНМ опухоли почек было более выражено (32% против 16%). Однако сделать вывод об усилении циннабарином химического канцерогенеза почек у крыс, индуцированных АМНМ, не позволяют результаты статистического анализа, свидетельствующие о том, что эти различия являются недостоверными.
ЛИТЕРАТУРА /REFERENCES
1. Беспалое В. Г. // Экспср. онкол. — 1994. — Т. 16, № 1. — С. 3—11.
2. Бланко Ф. Ф., Дерябин В. В., Пименов А. А., Бовина Е. В. //Антибиотики и мед. биотсхнол. — 1987. —Т. 32, № 12. —С. 925—938.
3. Бланко Ф. Ф.11 А. с. № 1775896 от 15.07.92.
4. Ермольева 3. В., Павышии С. М. // Актуальные вопр. соврем, онкол. — 1970. № 2. — С. 297—299.
5. Турусов В. С., Парфенов Ю. Д. /I Методы выявления и регламентирования химических канцерогенов. — М., 1986.
6. Шеренешева Н. И., Финько В. Е., Клочкова Т. И. // Бюл. экспср. биол. — 1996. —№ 4. —С. 453—455.
7. Chihara G. S. // Canccr Res. — 1970. — Vol. 30. — P. 2776—2779.
8. Sasaki T„ Takasuku N. // Carbohidr. Res. — 1976, — N 2. — P. 99—104.
Поступила 14.05.97 / Submitted 14.05.97
© Коллектив авторов, 1998 УДК 618.14-006.36-085.357-082.9
И. О. Смирнова, И. М. Валуева, И. С. Буренин,
О. Г. Кривошеев
ЭНДОКРИНОТЕРАПИЯ САРКОМЫ МАТКИ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ
НИИ экспериментальной диагностики и терапии опухолей
Известно, что основным методом лечения саркомы матки является хирургическое вмешательство, однако меноррагия и анемия, сопровождающие развитие этих опухолей, требуют предварительных, до оперативного лечения, консервативных мероприятий [3]. Клиническими наблюдениями было установлено, что у больных опухолями матки при введении агонистов гонадолиберина удается избежать анемии [4], причем в некоторых случаях это объясняли снижением уровня эстрогенов, вследствие чего размеры опухоли уменьшались [2, 5, 6]. Наряду с этим в эксперименте выявлена гормоночувствительность саркомы матки: по нашим предварительным данным, под влиянием агонистов люлиберина уменьшаются размеры опухолей, 17-оксипрогестерона капронат (17-ОКП) в 3 раза снижает частоту индуцированных опухолей матки, а при введении эстрадиола дипропионата или при повышенном уровне эндогенных эстрогенов рост этих опухолей резко стимулируется [1, 8]. Все это позволяет предполагать, что саркомы матки могут реагировать на гормональные воздействия, поэтому задача нашего исследования сводилась к разработке эффективных методов эндокринной терапии саркомы матки в эксперименте с использованием регуляторных пептидов, антиэсгрогенов и прогестинов.
Материалы и методы. Исследование проводили на самках мышей линии СВА массой 22—25 г с перевиваемой саркомой матки, первично
19 rats from group 2, i. e. 32% and 36%, respectively. There were no significant differences in tumor rate between groups 1 and 2.
The tumor sites were mostly kidneys, rarer other organs and tissues. By histology they were mesenchymal tumors with a variety of tissue differentiation types. An intravenous single administration of AMNU at 200 mg/kg body weight induced renal tumors in 3 (16%) of 19 rats in group 1. In group 2 receiving AMNU together with cinnabarin the tumor occurrence was twofold as great as in group 1 (32% vs 16%). The tumor sites and morphology were characteristic of AMNU induction [6]. Cinnabarin failed to influence sites or histology of the AMNU-induced tumors. Our findings suggest that cinnabarin does not provide protection against AMNU-induced carcinogenesis. Of note is a somewhat increased tumor occurrence in rats receiving the carcinogen and cinnabarin. It should also be emphasized that though the increase in total carcinogenesis was not great (36% vs 32%), the cinnabarin effect on AMNU-induced renal carcinogenesis was much more marked (32% vs 16%). However, the conclusion that cinnabarin enhances AMNU-induced renal carcinogenesis in rats can hardly be made since the differences were not statistically significant.
I. O. Smirnova, I. M. Valuyeva, I. S. Burenin,
O. G. Krivosheyev
ENDOCRINE THERAPY FOR EXPERIMENTAL UTERINE SARCOMA
Research Institute of Experimental Diagnosis and Therapy of Tumors
Surgery is the principal modality of treatment for uterine sarcoma, though menorrhagia and anemia accompanying this disease require preliminary preoperative therapy [3]. It was clinically demonstrated that anemia in patients with tumors of the womb may be countered by administration of gonadoliberin agonists [4], in some cases the effect is supposedly due to decrease in estrogen level and consequent reduction in tumor size [2, 5, 6]. As demonstrated experimentally the tumor is sensitive to hormones.
Uterine sarcoma: luliberin antagonists reduce tumor size; administration of 17-oxyprogesterone capronate (17-OPC) results in a 3-fold fall in uterine tumor induction, while administration of estradiol dipropionate or increased endogenous estrogen levels enhance the tumor growth [1, 8]. These observations suggest that sarcoma of the womb may respond to hormones. The purpose of this study was to develop effective endocrine therapy for experimental uterine sarcoma including regulatory peptides, antiestrogens and progestines.
Materials and Methods. The study was performed in CBA female micc with a body weight 22-25 g bearing a transplanted sarcoma of the uterus primarily induccd by the method described in [10]. The induccd uterine sarcoma was transplanted into intact CBA female micc, at 2 weeks the animals were decapitated to remove the tumor, which was further triturated and transplanted into intact micc as suspension in medium 199. The tumor-bearing micc received different
