CC BY
38
«Дни иммунологии в СПб 2017» Immunology Days in St. Petersburg 2017
Медицинская Иммунология Medical Immunology (Russia)/Meditsinskaya Immunologiya
ного и антиоксидантного эффектов, вследствие чего он может быть рекомендован в качестве эффективного препарата для лечения гиперурикемии и подагры.
2. Сочетание противовоспалительных, антиоксидант-ных и выраженных гиполипидемических свойств делает целесообразным применение IL-1ra при атеросклерозе и дислипидемиях как препарата, влияющего одновременно на все основные звенья патогенеза.
3. IL-1ra в тестах приподнятого крестообразного лабиринта и открытого поля проявляет анксиолитическое действие без угнетения ЦНС. На модели резерпиновой депрессии IL-1ra проявляет антидепрессивную активность на уровне имипрамина. Таким образом, IL-1ra может быть использован в терапии депрессий и неврозов.
4. Показано наличие у IL-1ra ноотропных свойств. Сочетание антиамнестической и противовоспалительной активности IL-1ra делает возможным использование препарата при болезни Альцгеймера и других заболеваниях ЦНС.
5. IL-1ra обладает противоотечным действием, задерживает рост опухоли, удлиняет время жизни экспериментальных животных.
6. Показано, что IL-1ra проявляет выраженный про-тивосудорожный эффект и может быть использован в качестве противосудорожного препарата для лечения эпилепсии и др.
ИССЛЕДОВАНИЕ КЛИНИКО-ИММУНОЛОГИЧЕСКИХ ЭФФЕКТОВ ИММУНОМОДУЛЯТОРОВ В КОМПЛЕКСНОМ ЛЕЧЕНИИ БОЛЬНЫХ С ВНЕБОЛЬНИЧНОЙ ПНЕВМОНИЕЙ
Кажарова С.В., Коровкина Е.С., Костинов М.П.
ФГБУ «Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова», Москва, Россия
Введение. Внебольничная пневмония (ВП) — широко распространенное заболевание у взрослых, занимающее ведущее место в структуре заболеваемости и смертности от инфекционных заболеваний в развитых странах. Рост числа антибиотикополирезистентных штаммов микроорганизмов диктует необходимость поиска новых подходов к терапии и реабилитации больных с различными воспалительными заболеваниями системы органов дыхания.
Цель. Изучение иммунологической эффективности иммуномодулирующих препаратов у пациентов с тяжелой и среднетяжелой формами ВП.
Материалы и методы. В исследование вошло 60 пациентов в возрасте от 18 до 70 лет (средний возраст 53,15±3,18) с диагнозом «внебольничная пневмония среднетяжелого и тяжелого течения», находившиеся на госпитальном лечении с 2016-2017 гг. Пациенты были распределены на три группы, методом случайной выборки: 1 группа (n = 20) получали терапию препаратом Брон-хо-ваксом в сочетании с базисной антибактериальной и симптоматической терапией; 2 группа (n = 20) получали препарат Азоксимера бромид в сочетании с базисной антибактериальной и симптоматической терапией; контрольная группа (n = 20) проводилась только базисная антибактериальная и симптоматическая терапия.
Проведенное обследование: клинический анализ крови с подсчетом лейкоцитарной формулы и СОЭ на 1 и 13 дни заболевания. Для верификации диагноза пневмонии всем больным было проведено рентгенологическое исследование в 1 и 13 дни. Для оценки качества жизни все пациенты заполняли дневники самоконтроля. Также производился забор сыворотки для дальней-
шего определения цитокинового профиля и острофазовых белков воспаления.
Результаты. При анализе данных клинического анализа крови выявлено: достоверное снижение количества лейкоцитов периферической крови во всех группах пациентов на 13 день заболевания, более выраженная динамика снижения уровней лейкоцитов наблюдалась в группе № 1. При анализе содержания палочкоядерных нейтро-филов более выраженная динамика снижения уровне наблюдалась в группе № 2. При анализе данных СОЭ более выраженная динамика снижения уровня наблюдалась в группе № 1.
Заключение. Применение азоксимера бромида и брон-хо-ваксома является эффективным и безопасным средством коррекции иммунных нарушений при назначении по соответствующей схеме в комплексе с антибактериальными препаратами. При применении азоксимера бромида наблюдается более ранняя положительная динамика клинических симптомов, что позволяет сделать вывод о повышении эффективности лечения тяжелой пневмонии при включении азоксимера бромида в состав комплексной терапии. Использование препаратов азоксимера бромида и бронхо-вак-сом повышает эффективность антибактериальной терапии, сопровождается положительной клинической динамикой. Таким образом, включение иммуномодуляторов в состав комплексной терапии ВП клинически обосновано.
ИЗУЧЕНИЕ ТРОМБОГЕННОГО ПОТЕНЦИАЛА ИНФУЗИОННЫХ ПРЕПАРАТОВ ИММУНОГЛОБУЛИНОВ ЧЕЛОВЕКА КАК ОБЯЗАТЕЛЬНЫЙ ЭЛЕМЕНТ ОЦЕНКИ БЕЗОПАСНОСТИ ИММУНОГЛОБУЛИНОТЕРАПИИ
Корнилова О.Г., Борисевич И.В., Олефир Ю.В., Мовсесянц А.А.
ФГБУ«Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Министерства здравоохранения РФ, Москва, Россия
Введение. Вероятность возникновения тромбоэмбо-лических осложнений, включая инсульт, инфаркт миокарда, тромбоэмболию легочной артерии и тромбоз глубоких вен/артерий, является нежелательным эффектом внутривенной иммуноглобулинотерапии. Ранее эти осложнения связывали исключительно с повышением вязкости крови при введении препарата, а возможным способом их исключения являлось соблюдение режима дозирования и скорости инфузии. В настоящее время установлено, что переносимость препаратов иммуноглобулинов человека, в числе прочего, зависит от содержания в них остаточных количеств факторов свертывания крови и от их влияния на кинетику образования тромбина. В связи с этим, международные и российские фармакопейные требования предусматривают необходимость доказательства отсутствия тромбогенного потенциала готовой формы препаратов иммуноглобулинов человека.
Цель. Обосновать параметры и критерии оценки тромбогенного потенциала и изучить соответствие препаратов иммуноглобулинов человека отечественного производства их значениям.
Материалы и методы. Образцы препаратов иммуноглобулинов человека для внутривенного введения отечественного производства, методы системного анализа и документальной экспертизы, клоттинговые и хромогенные методы.
Результаты. Для оценки тромбогенного потенциала препаратов обоснованы следующие параметры: изменение кинетики образования тромбина стандартной
2017, Т. 19, Специальный выпуск 2017, Vol. 19, Special Issue
Иммуномодуляторы эндогенной и экзогенной природы Immunomodulators of endogenous and exogenous nature
(нормальной) плазмы крови человека в тесте генерации тромбина; активность прокоагулянтных факторов свертывания крови (II, VII, IX, X, XI); а так же изменение неактивированного частичного тромбопластинового времени стандартной плазмы крови человека. Критериями оценки являются максимальное количество тромбина в тесте генерации тромбина, не превышающее 350 нМоль, латентный период (лаг-фаза) генерации не менее 11 мин., период образования максимального количества тромбина — не менее 19 мин., активность фактора Xfe, не превышающая 10 мМЕ/мл, факторов II, VII, IX, X и калликреина — менее 50 мМЕ/мл, а также отсутствие уменьшения времени образования сгустка в стандартной плазме крови человека. Выявлено, что в исследованных образцах препаратов иммуноглобулинов человека четырех отечественных производителей остаточное содержание факторов свертывания крови IX, Ка, VII не превышает установленный предел, активность факторов II и X не проявляется, установлено наличие в образцах антитромбина III в количестве более
1 МЕ/мл, латентный период генерации тромбина и период образования максимального количества тромбина не превышает 3 мин. Полученные результаты свидетельствуют о низком тромбогенном потенциале этих образцов.
Заключение. Обоснованные параметры и критерии могут быть использованы для подтверждения безопасности препаратов иммуноглобулинов человека для внутривенного введения в части оценки их возможного негативного влияния на свертывающую систему крови пациента. Тромбогенный потенциал изученных образцов препаратов иммуноглобулинов человека отечественного производства соответствует международным стандартам качества.
РАЗРАБОТКА ПРЕПАРАТА ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ПСОРИАЗА НА ОСНОВЕ РЕКОМБИНАНТНОГО РЕЦЕПТОРНОГО АНТАГОНИСТА ИНТЕРЛЕЙКИНА-36 (IL-36ra) ЧЕЛОВЕКА
Колобов А.А.1, 2, Кондратьева Е.В.1, Кудлинг Т.В.1, Карасев М.М.1, Калинин Р.С.1, Протасов Е.А.1, Нимирицкий П.П.1, 2, Стефанов В.Е.1, 2, Александров Г.В.1, Петров А.В.1, Симбирцев А.С.1
1ФГУП«Государственный научно-исследовательский институт особо чистых биопрепаратов» ФМБА РФ, Санкт-Петербург, Россия
2 Санкт-Петербургский государственный университет, Санкт-Петербург, Россия
Введение. Генерализованный пустулезный псориаз (ГПП) — это редкая, в некоторых случаях смертельно опасная форма псориаза, которая вызывается рядом мутаций в гене рецепторного антагониста интерлейкина-36 (IL-36ra), сопровождающихся его сниженной экспрессией или активностью. Введение экзогенного IL-36ra могло бы применяться для лечения ГПП и других форм псориаза.
Цель и задачи. Цель данной работы — проведение доклинических исследований лекарственного средства для лечения псориаза на основе рекомбинантного IL-36ra человека. Задачи данной работы включали в себя создание плазмидных векторов для экспрессии гена IL-36ra, создание штамма-продуцента IL-36ra на основе E. coli, разработку методов очистки и хранения IL-36ra и доклинические исследования активности и токсичности IL-36ra.
Материалы и методы. Поскольку для полной биологической активности IL-36ra необходимо отщепление инициаторного остатка метионина, нами был получен
штамм-продуцент IL-36ra на основе E. coli, трансформированный плазмидами, несущими гены IL-36ra и ме-тионинаминопептидазы (МАП) E. coli. Была разработана методика культивирования штамма-продуцента IL-36ra в ферментерах. Была разработана схема хроматографи-ческой очистки IL-36ra на анионообменном сорбенте GE Q и гидрофобном сорбенте Tosoh Butyl-650. Была разработана композиция его готовой лекарственной формы. Была подобрана эффективная доза препарата. Были исследованы фармакокинетика и острая токсичность препарата на мышах, крысах и кроликах.
Результаты. Разработанная методика культивирования штамма-продуцента IL-36ra и его дальнейшей очистки позволяет получать с 1 литра бактериальной культуры до 40 мг очищенного IL-36ra с примесью < 5% его формы, содержащей неотщеплённый N-концевой остаток метионина. Показана способность полученного препарата IL-36ra купировать индуцированный псориазоподобный фенотип у мышей в дозе 0,5 мг/кг при подкожном введении. Дозы препарата до 200 мг/ кг не токсичны для грызунов и зайцеобразных. Препарат апирогенен и не оказывает местно-раздражающего действия.
Заключение. Полученный препарат рекомбинантно-го рецепторного антагониста интерлейкина-36 (IL-36ra) человека эффективно купирует псориазоподобный фенотип у мышей и не демонстрирует острой токсичности в дозах до 200 мг/кг, что в тысячи раз превосходит расчетную терапевтическую дозу для человека. Методика получения IL-36ra пригодна для промышленного масштабирования. После окончания доклинических испытаний препарат может быть испытан на людях.
КОЛИЧЕСТВЕННОЕ СОДЕРЖАНИЕ АКТИВАТОРА ПРЕКАЛЛИКРЕИНА В ОТЕЧЕСТВЕННЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТАХ АЛЬБУМИНА ЧЕЛОВЕКА
Кривых М.А., Корнилова О.Г., Жук И.Е.
ФГБУ«Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Министерства здравоохранения РФ, Москва, Россия
Введение. Количественное определение содержания активатора прекалликреина является одним из ключевых показателей качества, определяющих специфическую безопасность таких инфузионных препаратов крови, как альбумин человека. С присутствием в указанных препаратах активатора прекалликреина связывают возможные нежелательные реакции в виде гипотензии. До настоящего времени лекарственные препараты альбумина человека отечественного производства не подвергались контролю качества на содержание активатора прекалликреина ни в процессе производства, ни при выпуске готового лекарственного препарата. Всемирная организация здравоохранения рекомендует проводить определение содержания активатора прекалликреина в препаратах крови человека, включая альбумин. Фармакопейной статьей «Альбумин человека» ФС.3.3.2.0006.15 Государственной фармакопеи Российской Федерации XIII издания впервые в отечественной фармацевтической практике установлены требования по содержанию активатора прекал-ликреина на уровне не более 35 МЕ/мл.
