Научная статья на тему 'Изучение свойств спермы баранов в культуральных средах для оплодотворения in vitro'

Изучение свойств спермы баранов в культуральных средах для оплодотворения in vitro Текст научной статьи по специальности «Сельское и лесное хозяйство»

46
8
Поделиться
Ключевые слова
СПЕРМА / АГГЛЮТИНАЦИЯ / ЭКСТРАКОРПОРАЛЬНОЕ ОПЛОДОТВОРЕНИЕ / БАРАНЫ / ПИТАТЕЛЬНЫЕ СРЕДЫ

Аннотация научной статьи по сельскому и лесному хозяйству, автор научной работы — Беляев В.А., Шахова В.Н., Гвоздецкий Н.А., Левченко В.М., Каниболоцкая А.А., Таралова П.К., Зинченко Д.А.

Рационное использование интенсивных методов воспроизводства стада позволит повысить продуктивность овец и рентабельность отрасли в целом. Одним из таких методов является экстракорпоральное оплодотворение (ЭКО). Для успешного проведения процедуры экстракорпорального оплодотворения важным требованием является наличие качественных питательных сред, позволяющих сохранить генетический материал и способствующие дальнейшему развитию зиготы. Основным требованием к средам для спермы, является способность сред не вызывать их агглютинацию.

Похожие темы научных работ по сельскому и лесному хозяйству , автор научной работы — Беляев В.А., Шахова В.Н., Гвоздецкий Н.А., Левченко В.М., Каниболоцкая А.А., Таралова П.К., Зинченко Д.А.,

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

Текст научной работы на тему «Изучение свойств спермы баранов в культуральных средах для оплодотворения in vitro»

В остальных лимфоидных узелках обнаруживалось четко выраженное разделение на корковую и мозговую зоны. Диаметр мозговой зоны у цыплят группы II меньше, чем в группе I на 19,0 % (P>0,95) - 144,2±12,58 мкм и 121,6±10,58 мкм соответственно. Тимусные тельца были представлены в основном многоклеточными формами в количестве 3,6±0,4 шт. и 3,2±0,5 шт. в группах I и II.

Таким образом, у петушков по сравнению с курочками независимо от возраста родительского стада тимус крупнее, что логично обусловлено разным уровнем обмена веществ и темпами роста.

Список литературы

1. Морфология иммунной системы птиц: научное издание / под.ред. Е. В. Зайцевой. Брянск: Изд-во «Ла-домир», 2011. -с 110.

2. Епимахова Е.Э, Трухачев В.И., Резервы воспроизводства и стартового выращивания птицы // Palmarium Academic Publishing. Saarbrücken, Deutschland (Германия). 2014-.с 267.

3. Тимус и его значение для организма птиц/ сб. науч. трудов.// А.П. Стрельников.- 1975.-с. 48-51.

4. Александрова Т.С. Совершенствование оценки и технологических приемов выращивания цыплят бройлеров: автореф. дис....канд.с-х.наук /СтГау.Ставрополь,2014.

UDC 577.2;619;636.018.033.035 STUDYING THE PROPERTIES OF RAM SPERM IN CULTURE MEDIA FOR IN VITRO FERTILIZATION

Belyaev V.A.,1 Dr.Sc.(Vet.), Shakhova V.N., Ph.D. (Bio), Gvozdetskiy N.A., a graduate student, Levchenko V.M., a graduate student, Kanibolotskya A.A. ,a graduate student , Taralova P.K., a graduate student, Zinchenko D.A., a graduate student

ФГБОУ ВО «Ставропольский государ- FSBEI HE «Stavropol State Agrarian ственный аграрный университет, г Став- University» , Stavropol, Russia рополь, Россия.

dorohin.2012@inbox.ru Аннотация: рационное использование Abstract: the use of intensive methods of интенсивных методов воспроизводства diet herd reproduction will increase the стада позволит повысить продуктив- productivity and profitability of the sheep

УДК 577.2;619;636.018.033.035 ИЗУЧЕНИЕ СВОЙСТВ СПЕРМЫ БАРАНОВ В КУЛЬТУРАЛЬНЫХ СРЕДАХ ДЛЯ ОПЛОДОТВОРЕНИЯ IN VITRO

Беляев В.А., д.в.н., Шахова В.Н., ассистент, Гвоздецкий Н.А., аспирант, Левченко В.М., аспирант, Каниболоцкая А.А., аспирант, Таралова П.К., аспирант, Зинченко Д.А., аспирант

ность овец и рентабельность отрасли в целом. Одним из таких методов является экстракорпоральное оплодотворение (ЭКО). Для успешного проведе-

industry. One such method is in vitro fertilization (IVF). For the success of in vitro fertilization procedure, an important requirement is the availability of high-

ния процедуры экстракорпорального quality culture media, help to preserve оплодотворения важным требованием the genetic material and contribute to the

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

является наличие качественных питательных сред, позволяющих сохранить генетический материал и способствующие дальнейшему развитию зиготы. Основным требованием к средам для спермы, является способность сред не вызывать их агглютинацию.

further development of the zygote. The main requirement to the media for sperm, is the ability of media do not call them agglutination.

Ключевые слова: сперма, агглютина- Keywords: sperm agglutination, in vitro ция, экстракорпоральное оплодотво- fertilization, sheep, culture media рение, бараны, питательные среды

В проектировании генетической стратегии на определённом сельскохозяйственном предприятии должна быть разработана племенная программа или цель. В современных условиях кризиса особенно остро встаёт проблема импортозамещения, поэтому развитие такой стратегически важной отрасли для Ставропольского края, как овцеводство, становится всё более актуальной задачей и требует тщательной проработки программ по воспроизводству [1-5]. Рационное использование интенсивных методов воспроизводства стада позволит повысить продуктивность мелких домашних животных и рентабельность отрасли в целом [6], к таким методам относится экстракорпоральное оплодотворение. К сожалению, в овцеводстве Российской Федерации этот метод не применяется в связи с его сложностью и отсутствием серьезных научных исследований[7].

Технология выполнения оплодотворения в «пробирке» предусматривает решение серьезных научных задач: получить и подготовить сперму и яйцеклетку для успешного проведения ЭКО [8].

Технология оплодотворения «in vitro» отличается от искусственного осеменения по многим ключевым пунктам. Во-первых, оплодотворение происходит вне организма самки, а во-вторых, желательно использовать свежеполученную сперму [5].

Решая проблему подготовки спермы барана, мы столкнулись с рядом серьезных проблем, главной из которых являлась интенсивная агглютинация спермиев после попадания в специализированную среду.

Проблему агглютинации в случае со стандартной процедурой искусственного осеменения решают глубокой заморозкой, а для ЭКО готовят специальные среды для очистки и сохранения спермиев. При проведении патентного поиска было выявлено, что единственной средой для сохранения спермы при эко являлась среда SOFw. Но при внесении её в спермы, мы отмечали 60 % агглютинацию[3,4].

Исходя из этого, целью нашей работы явилась разработка методики подготовки спермы баранов для процедуры экстракорпорального оплодотворения овец.

Материалы и методы: экспериментальные исследования проводили в период с сентября 2013 по январь 2016 года на базе кафедры физиологии, хирургии и акушерства ФГБОУ ВО «Ставропольский государственный аграрный университет» и научно-диагностического и лечебно-ветеринарного центра. Исследования были проведены в лаборатории вспомогательных репродуктивных технологий и лаборатории экстракорпорального оплодотворения.

Объектом исследования служили бараны северо - кавказской породы в возрасте 2 - 3 лет в количестве 6 голов, животные были подобраны по принципу аналогов. Условия содержания и кормления всех баранов за период опыта были одинаковыми. Клинические, биохимические, гематологические исследования были проведены по общим методикам.

Результаты работы: Для подготовки спермы к оплодотворению мы использовали разработанную нами комбинированную методику, согласно которой, свежеполученная сперма предварительно вносится в ГЦЖ среду, после чего переносится в среду SOFw , далее применяется технология «swim up» с целью удаления семенной плазмы и, в итоге, мы получаем максимально полноценную фракцию прогрессивно подвижных спер-миев.

Агглютинация спермиев в группе контроля (не разбавленная) составляла 3,4%, а при внесении в среду SOF w отмечали 59,1% агглютинации. Разработанная нашими

учеными методика позволила снизить агглютинацию до 1,4 %.

Выводы и заключение: В ходе анализа степени агглютинации нами установлено, что при помещении спермиев в среду SOF w агглютинация на 58,2% больше, чем при их помещении в ГЦЖ-среду. Тем не менее, после проведения процедуры «swim up» в среде SOF w степень агглютинация спермиев снижается на 14,7 %, а в SOF w + ГЦЖ среде увеличивается на 1,6 %. Однако, анализ показателя агглютинации указывает на то, что после проведения процедуры «swim up» агглютинация в среде SOF w + ГЦЖ в 14 раз меньше, чем при помещении спермиев сразу в среду SOF w.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

Список литературы:

1. Багиров В.А. /Фертильность сперматозоидов и состояние хроматина /Сельскохозяйственная биология. -2012. - №2. с. 3 - 12.

2. Дьяконов, Л.П. Животная клетка в культуре (Методы и применение в биотехнологии). / Под общ. ред. проф. Дьяконова Л.П. М.: Издательство «Спутник+», 2009. 656 с.

3. Salamon, S. Storage of ram semen / S. Salamon, W.M.C. Maxwell // Animal Reproduction Science. 2000. - № 69. р. 77-111.

4. Cognie, Y. Current status of embryo technologies in sheep and goat / Y. Cognie, G. Baril, N. Poulin, P. Mermillod // Theriogenology. 2003. № 59. p. 171 - 188.

5. Трансплантация зародышей у овец/ В.И.Трухачев, В.Я.Никитин, В.М.Михайлюк, Н.В.Белугин, Н.А.Писаренко, В.С.Скрипкин. // Российский Ветеринарный Журнал. М.: КолосС. 2007.36 с.

7. Watson A.D., Berliner J.A., Hama S.Y., et al. Protective effect of high density lipoprotein associated paraoxonase. Inhibition of the biological activity of minimally oxidized low density lipoprotein. //- J Clin Invest. - 1995. Dec;96(6):2882-91.

8. Пат. 2436299 Российская Федерация, МПК: A01N 1/02 , A61D 19/02, C12N 5/02. Среда для криоконсерва-ции спермы козлов/ Аксенова П.В., Айбазов А.-М. заявитель и патентообладатель Ставропольский научно-исследовательский институт животноводства и кормопроизводства Российской академии. № 2010118373/13 ; заявл. 06.05.2010 ; опубл. 20.12.2011. 9 с.

9. The Effect of Macromolecule Source and Type of Media During in vitro Maturation of Sheep Oocytes on Subsequent Embryo Development. / A. Shirazi, M. A. Ardali, E. Ahmadi, H. Nazari., M. Mamuee, B. Heidari. // J. Reprod. Infertil. 2012. Vol. 13, № 1. Р 13-19.

УДК 573.6.086.83:615.33 UDC 573.6.086.83:615.33

ОБОСНОВАНИЕ ПРИМЕНЕНИЯ RATIONALE FOR THE USE OF MICRO

МИКРО- И НАНОКАПСУЛИРОВАННЫХ AND NANO-ENCAPSULATED FORMS ФОРМ ЛЕКАРСТВЕННЫХ OF DRUGS IN VETERINARY MEDICINE

ПРЕПАРАТОВ В ВЕТЕРИНАРИИ

Беляев В.А.,1 д.в.н. Шахова В.Н.,1 Belyaev V.A.,1 Dr.Sc.(Vet.), Shakho-к.б.н., Ковалев Д.А.2, к.х.н., Писаренко va V.N.,1 Ph.D. (Bio), Kovalev D.A.2, С.В.2, к.х.н. Каниболоцкая А.А.1, аспи- Ph.D.(Chem), Pisarenko S.V.2 , Ph.D. рант, Таралова П.К.1, аспирант, Сыч .(Chem), Kanibolotskya A.A.1 ,a graduate Л.Ф., аспирант1 student , Taralova P.K.1 , , Sych L. F. 1a

1 ФГБОУ ВО «Ставропольский государ- graduate student

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

ственный аграрный университет, г. Став- 1 FGBOU HE « Stavropol State Agrarian рополь, Россия. University , Stavropol, Russia .

2 ФКУЗ «Ставропольский научно-иссле- 2 FSHA « Stavropol Research Institute довательский противочумный институт» for Plague Control « Rospotrebnadzor , Роспотребнадзора, г. Ставрополь, Рос- Stavropol, Russia .

сия.

E-mail:dorohin.2012@inbox.ru Перед ветеринарной наукой стоит Before the veterinary science is a large большое количество нерешенных за- number of unsolved problems that can be дач, которые могут быть решены с solved with the help of nanotechnology помощью нанотехнологии - науки, ко- - the science, which is one of the торая является одной из самых стре- fastest growing among a wide variety of мительно развивающихся, среди боль- interdisciplinary sciences. The review шого разнообразия describes the developed system of drugs