CC BY
13
32
материалы конференции «отечественные противоопухолевые препараты»
материалы и методы. В качестве модели использована линия К562 с химерной тирозинкиназой Bcr-Abl.
результаты. Гибель клеток К562 происходит при действии наномолярных или субнаномолярных концентраций PF-114. Для линий Bcr-Abl-отрицательных лейкозов PF-114 значительно менее активен. Гибели клеток К562 предшествует задержка клеточного цикла в фазе G1. Даже кратковременное (2 ч) воздействие PF-114 на клетки К562 приводило к снижению доли клеток с фосфорилирован-ным CrkL — важнейшим субстратом Bcr-Abl. Через 24 ч воздействия регистрировали нарушение фосфорилирова-ния транскрипционных факторов семейства STAT и изменение активности митогенактивируемых протеинкиназ. Апоптоз, вызываемый PF-114, сопровождается активацией каспаз 3 и 9, а также протеолитическим расщеплением поли(АДФ-рибоза)полимеразы.
Заключение. PF-114 преимущественно токсичен для клеток ХМЛ, проявляет высокую специфичность к патогенетически важной внутриклеточной мишени и активирует каскады гибели клеток. Эти результаты, наряду с установленным ранее подавлением мутантных форм Bcr-Abl и благоприятными фармакологическими характеристиками, обусловили возможность проведения I фазы клинического исследования пациентов с Ph+ ХМЛ в хронической фазе или фазе акселерации с резистентностью к предшествующей терапии хотя бы одним ингибитором Bcr-Abl 2-го поколения, с непереносимостью одобренных ингибиторов Bcr-Abl или с наличием мутации T315I в гене Bcr-Abl (NCT02885766). Предварительные данные говорят об активности препарата в целевой группе пациентов, включая ХМЛ с мутацией T315I, а также о благоприятном профиле безопасности.
Н.И. Игнатова, И.Н. Дружкова, В.В. Дуденкова, М.М. Лукина, Е.В. Загайнова
изучение структуры коллагена в опухолях колоректального рака и модельных системах in vitro
ФГБОУ ВО НижГМА Минздрава России, Нижний Новгород, Россия
введение. Структурирование волокон коллагена, основного компонента матрикса опухолей, ведет к изменению механических свойств опухоли и ее прогрессии. Однако роль стромальных клеток при формировании опухолевого матрикса не до конца установлена.
Цель исследования. Изучение структуры коллагена в образцах колоректального рака (КРР), полученных от пациентов, и разработка трехмерной in vitro модели опухоли для понимания роли взаимодействия стромальных и опухолевых клеток в процессе формирования специфической структуры опухолевого матрикса.
материалы и методы. В работе использованы образцы колоректальной опухоли, полученные от пациентов в ходе операции (первичного очага и метастазов в печень). Эксперименты in vitro проводились на культурах клеток КРР человека, также были исследованы клетки нормальных тканей человека (фибробласты) и опухольассоциирован-ные фибробласты. Клетки выращивали в условиях моно-и кокультур. Была разработана трехмерная модель опухо-
ли на основе коллагенового геля с использованием культур клеток КРР человека и фибробластов. Структуру коллагена исследовали посредством генерации второй гармоники (ГВГ), позволяющей оценить степень анизотропии коллагена (лазерный сканирующий микроскоп LSM-710, Carl Zeiss, Германия, и установки MPT-flex, GenLab, Германия).
результаты. Анализ ГВГ-изображений депарафиниро-ванных срезов опухолей кишки и метастазов КРР в печень показал, что в опухоли ГВГ-сигнал выше, волокна коллагена имеют большую толщину и протяженность, наблюдается выраженная линейная упорядоченность коллагеновых волокон с преобладанием выделенного направления. На границе опухоли и нормальной ткани сохраняется выраженная линейная упорядоченность, однако направление волокон меняется. В нормальной ткани (слизистая кишки, печень) ГВГ-сигнал ниже, волокна коллагена тоньше и расположены хаотично. Показано, что монокультура опухолевых клеток in vitro практически не способна структурировать коллагеновый гель, регистрируется низкий ГВГ-сигнал, структура геля не визуализируется. Монокультура стромальных клеток и кокультура опухолевых и стро-мальных клеток способны структурировать коллагеновый гель, однако образуемые ими структуры различаются. При совместном культивировании опухолевых и стромальных клеток волокна коллагена собирались в пучки большого диаметра и протяженности, при этом были ориентированы в одном направлении, в то время как в монокультуре стромальных клеток волокна имели меньший диаметр и формировали сеть. Для объективной оценки различий в структуре коллагена были выбраны математические статистические параметры, позволяющие проводить количественный анализ ГВГ-изображений.
Заключение. Установлено, что структура коллагена в опухолях КРР отличается. Волокна коллагена в опухоли и на границе имеют большую толщину и линейную упорядоченность, чем в нормальной ткани слизистой и паренхимы. Разработана трехмерная модель опухоли на основе коллагенового геля, позволяющая проследить динамику структурирования коллагена и оценить его оптические свойства. Установлено, что для эффективного структурирования коллагена необходимо взаимодействие опухолевых и стромальных клеток.
Работа выполнена при финансовой поддержке РФФИ,
грант № 17-00-0019.
Е.В. Игнатьева, И.В. Ярцева, М.В. Дмитриева, З.С. Шпрах
определение содержания инкара в моделях инъекционной лекарственной формы после стерилизующей фильтрации
ФГБУ«НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва, Россия
введение. Инкар — соединение класса гликозилиндо-локарбазолов, впервые синтезированное в ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России. По механизму биологического действия соединение относится к ингибиторам протеинкиназы-С и представляет интерес для терапии злокачественных новообразований.
Спецвыпуск / том 17 / 2018
РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
