CC BY
9
32
материалы конференции «отечественные противоопухолевые препараты»
материалы и методы. В качестве модели использована линия К562 с химерной тирозинкиназой Bcr-Abl.
результаты. Гибель клеток К562 происходит при действии наномолярных или субнаномолярных концентраций PF-114. Для линий Bcr-Abl-отрицательных лейкозов PF-114 значительно менее активен. Гибели клеток К562 предшествует задержка клеточного цикла в фазе G1. Даже кратковременное (2 ч) воздействие PF-114 на клетки К562 приводило к снижению доли клеток с фосфорилирован-ным CrkL — важнейшим субстратом Bcr-Abl. Через 24 ч воздействия регистрировали нарушение фосфорилирова-ния транскрипционных факторов семейства STAT и изменение активности митогенактивируемых протеинкиназ. Апоптоз, вызываемый PF-114, сопровождается активацией каспаз 3 и 9, а также протеолитическим расщеплением поли(АДФ-рибоза)полимеразы.
Заключение. PF-114 преимущественно токсичен для клеток ХМЛ, проявляет высокую специфичность к патогенетически важной внутриклеточной мишени и активирует каскады гибели клеток. Эти результаты, наряду с установленным ранее подавлением мутантных форм Bcr-Abl и благоприятными фармакологическими характеристиками, обусловили возможность проведения I фазы клинического исследования пациентов с Ph+ ХМЛ в хронической фазе или фазе акселерации с резистентностью к предшествующей терапии хотя бы одним ингибитором Bcr-Abl 2-го поколения, с непереносимостью одобренных ингибиторов Bcr-Abl или с наличием мутации T315I в гене Bcr-Abl (NCT02885766). Предварительные данные говорят об активности препарата в целевой группе пациентов, включая ХМЛ с мутацией T315I, а также о благоприятном профиле безопасности.
Н.И. Игнатова, И.Н. Дружкова, В.В. Дуденкова, М.М. Лукина, Е.В. Загайнова
изучение структуры коллагена в опухолях колоректального рака и модельных системах in vitro
ФГБОУ ВО НижГМА Минздрава России, Нижний Новгород, Россия
введение. Структурирование волокон коллагена, основного компонента матрикса опухолей, ведет к изменению механических свойств опухоли и ее прогрессии. Однако роль стромальных клеток при формировании опухолевого матрикса не до конца установлена.
Цель исследования. Изучение структуры коллагена в образцах колоректального рака (КРР), полученных от пациентов, и разработка трехмерной in vitro модели опухоли для понимания роли взаимодействия стромальных и опухолевых клеток в процессе формирования специфической структуры опухолевого матрикса.
материалы и методы. В работе использованы образцы колоректальной опухоли, полученные от пациентов в ходе операции (первичного очага и метастазов в печень). Эксперименты in vitro проводились на культурах клеток КРР человека, также были исследованы клетки нормальных тканей человека (фибробласты) и опухольассоциирован-ные фибробласты. Клетки выращивали в условиях моно-и кокультур. Была разработана трехмерная модель опухо-
ли на основе коллагенового геля с использованием культур клеток КРР человека и фибробластов. Структуру коллагена исследовали посредством генерации второй гармоники (ГВГ), позволяющей оценить степень анизотропии коллагена (лазерный сканирующий микроскоп LSM-710, Carl Zeiss, Германия, и установки MPT-flex, GenLab, Германия).
результаты. Анализ ГВГ-изображений депарафиниро-ванных срезов опухолей кишки и метастазов КРР в печень показал, что в опухоли ГВГ-сигнал выше, волокна коллагена имеют большую толщину и протяженность, наблюдается выраженная линейная упорядоченность коллагеновых волокон с преобладанием выделенного направления. На границе опухоли и нормальной ткани сохраняется выраженная линейная упорядоченность, однако направление волокон меняется. В нормальной ткани (слизистая кишки, печень) ГВГ-сигнал ниже, волокна коллагена тоньше и расположены хаотично. Показано, что монокультура опухолевых клеток in vitro практически не способна структурировать коллагеновый гель, регистрируется низкий ГВГ-сигнал, структура геля не визуализируется. Монокультура стромальных клеток и кокультура опухолевых и стро-мальных клеток способны структурировать коллагеновый гель, однако образуемые ими структуры различаются. При совместном культивировании опухолевых и стромальных клеток волокна коллагена собирались в пучки большого диаметра и протяженности, при этом были ориентированы в одном направлении, в то время как в монокультуре стромальных клеток волокна имели меньший диаметр и формировали сеть. Для объективной оценки различий в структуре коллагена были выбраны математические статистические параметры, позволяющие проводить количественный анализ ГВГ-изображений.
Заключение. Установлено, что структура коллагена в опухолях КРР отличается. Волокна коллагена в опухоли и на границе имеют большую толщину и линейную упорядоченность, чем в нормальной ткани слизистой и паренхимы. Разработана трехмерная модель опухоли на основе коллагенового геля, позволяющая проследить динамику структурирования коллагена и оценить его оптические свойства. Установлено, что для эффективного структурирования коллагена необходимо взаимодействие опухолевых и стромальных клеток.
Работа выполнена при финансовой поддержке РФФИ,
грант № 17-00-0019.
Е.В. Игнатьева, И.В. Ярцева, М.В. Дмитриева, З.С. Шпрах
определение содержания инкара в моделях инъекционной лекарственной формы после стерилизующей фильтрации
ФГБУ«НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва, Россия
введение. Инкар — соединение класса гликозилиндо-локарбазолов, впервые синтезированное в ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России. По механизму биологического действия соединение относится к ингибиторам протеинкиназы-С и представляет интерес для терапии злокачественных новообразований.
материалы конференции «отечественные противоопухолевые препараты»
33
Цель исследования. Оценка пропускающей способности фильтров для стерилизующей фильтрации при разработке инъекционной лекарственной формы (ЛФ) инкара.
Материалы и методы. Образцы моделей ЛФ инкара. Фильтры: нейлоновый (Н); полиэфирсульфоновый (ПЭС); поливинилиденфторидовый (ПВДФ); из сложных эфиров целлюлозы (СЭЦ); поликарбонатный (ПК). Спектрофото-метрия.
Результаты исследования. Одним из основных требований к лекарственным препаратам для внутривенного введения является стерильность, которая может достигаться различными методами. При разработке технологии получения ЛФ инкара для стерилизации выбран метод стерилизующей фильтрации. Пропускающую способность фильтров для стерилизующей фильтрации оценивали на 2 моделях ЛФ, включающих коллидон различной молекулярной массы: коллидон 12 PF (Мм = 2500) и коллидон 17 PF (Мм = 9000). Пропускающую способность фильтров оценивали, определяя содержание активного вещества в модели ЛФ до и после фильтрации методом спектрофо-тометрии. В качестве аналитического сигнала использовано поглощение при длине волны 320 нм. Было показано, что в области от 270 до 400 нм у растворов коллидона 12 PF и коллидона 17 PF соответствующей концентрации поглощение отсутствует, то есть присутствие коллидона не мешает определению основного вещества. На 1-м этапе для проведения стерилизующей фильтрации моделей ЛФ применяли 2 вида фильтров — ПЭС и Н. При сравнении пропускающей способности фильтров показано, что фильтр ПЭС пропускает больше вещества, чем фильтр Н, а пропускающая способность фильтров практически не зависит от молекулярной массы коллидона. Отношение пропускающей способности ПЭС/Н составило 3,5 %. Для дальнейших исследований была выбрана модель, в состав которой входит коллидон 17 РЕ На этой модели испытывали пропускающую способность фильтров из разных фильтрующих материалов. Пропускающая способность фильтров, полученная в опыте, составила для Н — 98 %; ПЭС — 97,7 %; ПВДФ - 97,2 %; СЭЦ - 97,4 %; ПК - 97,2 %. Полученные данные свидетельствуют о том, что все испытанные фильтры пропускают не менее 97 % основного вещества, однако минимальные потери инкара отмечены при использовании Н- и ПЭС-фильтров.
Заключение. На основании проведенных исследований в качестве фильтрующего материала в технологии получения модели инъекционной ЛФ инкара были выбраны Н- и ПЭС-фильтры.
В.Н. Капинус, М.А. Катан, Е.В. Ярославцева-Исаева, И.С. Спиченкова, Н.И. Сокол ФАКТОРЫ РИСКА РАЗВИТИЯ РЕЦИДИВОВ БАЗАЛЬНО-КЛЕТОЧНОГО РАКА КОЖИ ПОСЛЕ ПРОВЕДЕНИЯ ФОТОДИНАМИЧЕСКОЙ ТЕРАПИИ С ФОТОСЕНСИБИЛИЗАТОРОМ «ФОТОЛОН» МРНЦим. А.Ф. Цыба — филиал ФГБУ«НМИЦ радиологии» Минздрава России, Обнинск, Калужская область, Россия
Введение. В онкологической практике накоплен значительный опыт применения различных методов терапии новообразований кожи, однако с учетом частоты,
вариабельности, локализации ни один из методов не является 100 % эффективным для всех форм базально-клеточ-ного рака кожи (БКРК). На эффективность наиболее часто применяемых методов лечения БКРК влияют такие параметры как размер опухоли, локализация новообразования, наличие или отсутствие предшествующего лечения.
Цель исследования. Оценка и изучение факторов риска развития рецидивов БКРК после проведения фотодинамической терапии (ФДТ) с фотосенсибилизатором (ФС) «Фотолон».
Материалы и методы. Для решения поставленной задачи было сформировано 2 группы (методом случайной выборки из всей совокупности больных, которым проводилась ФДТ по поводу БКРК): группа 1, состоящая из 118 пациентов, у которых развились рецидивы заболевания, и группа 2 — 203 пациента, у которых не было клинических и морфологических признаков рецидива БКРК на сроках наблюдения от 6 мес до 5 лет. Для проведения ФДТ использовали ФС фотолон в дозе 1,0—1,2 мг/кг, лазерный аппарат «Латус-2» (662 нм). Проводили дистанционное лазерное облучение опухолевой ткани в дозах 200—300 Дж/см2 при плотности мощности 300—400 мВт/см2, с формированием одного или нескольких полей облучения. Пациентов оценивали по полу, возрасту, возрастным группам, размерам опухолевых новообразований, по наличию или отсутствию предшествующего лечения, а также по виду предшествующего лечения (лучевая терапия, коагуляции, ФДТ).
Результаты. Исследуемые группы были сопоставимы по полу и возрасту, в группе 1 (с рецидивом после ФДТ) у мужчин и у женщин всех возрастных групп достоверно преобладали опухоли размером >2 см (г = 5,07, р <0,00001). Кроме того, в этой же группе преобладали пациенты, которым ранее проводилось лечение, и у этих же пациентов достоверно преобладали опухоли размером >2,0 см (г = 4,85, р <0,00001). Также была выявлена следующая закономерность: у больных с диагностированным рецидивом после ФДТ достоверно преобладали опухоли размером >2 см у пациентов с предшествующим лучевым лечением (г = 3,53, р <0,00002), коагуляциями (г = 1,68,р <0,05), ФДТ (г = 1,97, р <0,03).
Заключение. По результатам проведенного исследования можно сделать выводы, что факторами риска развития рецидивов БКРК после проведения ФДТ с ФС «Фотолон» у мужчин и женщин во всех возрастных группах являются: размеры злокачественного новообразования >2 см, предшествующее лечение и в большей степени проведение лучевой терапии, в меньшей степени — коагуляции, ФДТ.
Н.А. Карпов, С.Р. Мефёдова, А.А. Белоглазкина, А.А. Барашкин, М.Е. Кукушкин, А.Г. Мажуга, Е.К. Белоглазкина, Н.В. Зык
СИНТЕЗ И БИОЛОГИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ НА ОСНОВЕ ДИСПИРОПРОИЗВОДНЫХ ДЛЯ ТЕРАПИИ РАКОВЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ
Химический факультет МГУ им. М.В. Ломоносова, Москва, Россия
Введение. На сегодняшний день злокачественные новообразования занимают 2-е место среди причин смертности
