CC BY
3
4.Зайцева Л.АЛдиссертация: Актуальная лексика образовательной сферы современной России, Мичуринск-2015,
5.Закон «об Образовании в РФ» № 27Э-ФЗ от 29.12.2012 \ст.13,15
6.Кузьминов Я., ректор ВШЭ ГУ /Новости-Интерфакс, 2013
7.Приказ Минтруда и соцзащиты РФ №1115н от 25.12.2014 профессиональный стандарт "Педагог (воспитатель, учитель)" будет применяться с 1.01.2017
8.Тропина И. А., к. филол. н., доцент РГМУ Минздрава РФ\ Семантические инновации как средство обогащения языка http://scjournal.ru/articles/issn_1997-2911_2015_8-2_52.pdf
9.Указ Президента РФ № № 597 «О мероприятиях по реализации государственной социальной политики» от 7.05.2012 г.
УДК 619:578. 831.3
Дубовой А.С.
с.н.с. отдел вирусологии и опухолевых болезней птиц
Самусева Г.Н.
с.н.с. отдел вирусологии и опухолевых болезней птиц
Сморчкова Т.Н.
н.с. отдел вирусологии и опухолевых болезней птиц ВНИВИП филиал ФНЦ «ВНИТИП» РАН Россия, г. Санкт-Петербург ИЗУЧЕНИЕ ПРОДОЛЖИТЕЛЬНОСТИ ИМУННОГО ОТВЕТА ПРОСЛЕ ПРИМЕНЕНИЯ АССОЦИИРОВАННОЙ
ИНАКТИВИРОВАННОЙ ВАКЦИНЫ ПРОТИВ МЕТАПНЕВМОВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ ПТИЦ И РЕСПИРАТОРНОГО МИКОПЛАЗМОЗА Аннотация. Цель работы - изучение продолжительности иммунного ответа после применения ассоциированной эмульгированной инактивированной вакцины против метапневмовирусной инфекции птиц и респираторного микоплазмоза (МПВИ+РМП), в водную фракцию которой введен синтетический сополимер в качестве дополнительного стимулятора иммуногенеза. Цыплят одной группы иммунизировали вакциной, в состав которой входил синтетический сополимер, цыплят второй группы -аналогичным препаратом, но без сополимера (референс-вакцина). В течение 12 месяцев оценивали поствакцинальный уровень иммунного ответа. Исследования показали, что экспериментальная вакцина индуцирует выработку антител более высокого уровня на протяжении всего срока наблюдения.
Ключевые слова: адъювант, синтетический сополимер, инактивированная вакцина, метапневмовирусная инфекция птиц, респираторный микоплазмоз птиц.
Abstract. The main purpose was to study the persistence of the immune response after inoculation associated emulsified inactivated vaccine against avian metapneumovirus infection and avian mycoplasmoses, with a synthetic copolymer in the water phase as an additional stimulant of immunogenesis. One group of chickens were immunized by the vaccine with a synthetic copolymer, while another - by the same one, but without a synthetic copolymer (reference vaccine). Post-vaccination immune response was assessed within 12 months. The results obtained in the present study showed that the experimental vaccine induces the production of antibodies more higher level throughout the observation period.
Key words: adjuvant, synthetic copolymer, inactivated vaccine, avian metapneumovirus infection, avian mycoplasmoses.
Введение
Адъюванты это вещества или комплекс веществ различной химической природы, которые действуя неспецифически, повышают специфический иммунный ответ. Известно большое количество веществ, имеющих различный химический состав и происхождение, которые способны оказывать адъювантное действие [1, 4]
В качестве адъювантов используют гидроокись или фосфат алюминия, водно-масляные эмульсии, липосомы, продукты микобактерий, сапонины, декстраны, полимеры, липополисахариды, лимфокины, микрокапсулы и др. Большинство авторов выделяют два основных вектора действия адъювантов: 1. на антиген - через изменение свойств антигена, 2. на организм - путем стимуляции функций иммунной системы последнего Механизм адъювантного действия во многом еще остается невыясненным. Выяснение механизма иммунного ответа затрудняется сложностью и гетерогенностью строения антигенов и адъювантов. В настоящее время установлено, что адъюванты взаимодействуют с наиболее важными
антигенпрезентирующими клетками (макрофагами, клетками Лангерганса, дендритными клетками) и эффекторными клетками (плазматическими клетками, естественными киллерами), Т-хелперами и клетками воспаления (полиморфно-ядерными базофилами, эозинофилами) [2, 3, 4, 5].
При изготовлении инактивированных вакцин широко применяются адъюванты, позволяющие значительно повышать иммуногенную и антигенную активность препаратов, а также увеличивать продолжительность иммунного ответа. Использование адъювантов позволяет уменьшить дозу антигена в вакцине, увеличить иммуногенность «слабых» антигенов, предотвращать конкуренцию антигенов в комбинированных вакцинах, увеличивать скорость развития и продолжительность иммунного ответа у привитых животных, индуцировать защитные свойства слизистых оболочек [6].
Анализ литературных данных показывает, что в настоящее время интенсивно проводятся исследования, направленные на разработку новых и улучшение существующих адъювантных систем.
Цель настоящей работы - изучение продолжительности иммунного ответа после применения ассоциированной эмульгированной инактивированной вакцины против (МПВИ+РМП), в водную фракцию которой введен синтетический сополимер в качестве дополнительного стимулятора иммуногенеза.
Материалы и методы
В исследованиях были использованы масляный адъювант отечественного производства АБ-М4 (В/М), антиген метапневмовируса птиц (МПВ) с биологической активностью 107,0 ТЦД50/см3, определенной до инактивации, антиген Mycoplasma gallisepticum (MG) в концентрации 109 КОЕ/см3 (колонеобразующих единиц), определенной до инактивации, цыплята 45-суточного возраста, наборы для выявления антител к МПВ и к MG иммуноферментным методом производства фирмы BioChek, 1%-ный раствор синтетического сополимера.
При изготовлении образцов инактивированных вакцин против МПВИ+РМП эмульсию получали методом гомогенизации водного и масляного компонентов в соотношении 30:70 с помощью гомогенизатора Ultraturrax T-25.
Антигенную активность и продолжительность иммунного ответа оценивали по титрам поствакцинальных антител в ИФА в соответствии с инструкцией по применению набора. Для этого цыплят опытных групп (по 20 голов в каждой) иммунизировали изготовленными образцами вакцин, инокулируя одну дозу вакцины, составляющую 0,5 см3/гол., оставляя 10 голов цыплят качестве чистого контроля. Через 30 дней после иммунизации и далее ежемесячно от цыплят всех групп брали кровь, получали сыворотку и проводили исследования в ИФА. Срок наблюдения составил 12 месяцев с момента иммунизации.
Результаты исследований
Для изготовления образцов вакцин сначала антигены МПВ и MG смешивали а равных количествах. Затем, к смеси антигенов для первой вакцины добавляли раствор синтетического сополимера до конечной концентрации 0,05%, а в смесь антигенов для второй вакцины вместо синтетического сополимера вводили такой же объем стерильного физиологического раствора.
На базе адъюванта АБ-М4 были изготовлены следующие образцы вакцин:
1. Вакцина ассоциированная эмульгированная инактивированная против МПВИ+РМП с добавлением в водную фазу препарата раствор синтетического сополимера в конечной концентрации 0,05% (МПВИ+РМП+Сополимер);
2. Вакцина ассоциированная эмульгированная инактивированная против МПВИ+РМП (референс-препарат).
При исследовании в ИФА вакцину считали антигенно активной, если через 30 дней после вакцинации у 80% привитых цыплят пробы сывороток имели титры по компонентам МПВ и MG не менее, чем в 2 раза выше минимального положительного титра, указанного в инструкции набора BioChek при отрицательном иммунном фоне или не менее, чем в 2 раза превышали уровень положительного иммунного фона, и при этом прирост титров антител у цыплят контрольной группы за период опыта не наблюдался.
Результаты исследований образцов вакцин №1, №2, на антигенную активность и продолжительность иммунного ответа представлены на рис.1 и
2.
9000
вооо
7000
| 6000
±
5 едоо
X
= ЮМ
я
t 3000
■
~ гооо
юоо
о |
1234 56 7Я№ 10 11 11 М«. После вякиевя iiiifi —+— Аг МПВ+СоПйти, -в-АгМПИ -*-][MSim фон q|> ИОВ И
Рис. 1 Динамика выработки антител к МПВ после вакцинации цыплят образцами вакцин: № 1- вакцина против МПВИ+РМП+Сополимер и № 2-вакцина против МПВИ+РМП
Рис. 2 Динамика выработки антител к MG после вакцинации цыплят образцами вакцин: № 1- вакцина против МПВИ+РМП+Сополимер и № 2-вакцина против МПВИ+РМП
Как видно из приведенных графиков, иммунный ответ по компонентам МПВИ и РМП выше у вакцины №1, в состав которой был введен синтетический сополимер. Заключение
Таким образом, проведенные исследования показывают, что синтетический сополимер обладает адъювантными свойствами и позволяет усиливать иммунный ответ, индуцируемый масляным адъювантом при их сочетанном применении в инактивированной вакцине против МПВИ+РМП. Экспериментальная вакцина индуцирует выработку антител более высокого уровня на протяжении всего срока наблюдения.
Использованные источники:
1.Aguilar J. C. Vaccine adjuvants revisited / J.C. Aguilar, E. G. Rodriguez // Vaccine. - 2007. - № 25.- Р. 3752-3762
2.Cox J.C., Coulter A.R. Adjuvants - a classification and review of their modes of action // Vaccine. -1997. - Vol.15. - №3. - P. 248-256.
3.Petrovsky N. Vaccine adjuvants: current state and future trends / N. Petrovsky, J. C. Aguilar // Immunology and Cell Biology. - 2004. Vol. 82. - № 5. -Р. 488-496.
4.Rajput Z.I. Adjuvant effects of saponins on animal immune responses / Z. I. Rajput, Song-hua Hu, Chen-wen Xiao et al // Zhejiang Univ Sci B. - 2007. - Vol. 8. - № 3. - P. 153-161
5.Shakya A.K. Polymers as immunological adjuvants: An update on recent developments / A. K. Shakya, K. S. Nandakumar // J. BioSci. Biotech. - 2012. -Vol.1 - № 3. - P. 199-210
6.Singh M. Invited review recent advances in veterinary vaccine adjuvants / M. Singh, D.T. O'Hagan // Int J Parasitol. - 2003. - Vol.33. № 5-6. -P. 469-478.
УДК 619:578.834.11
Дубовой А.С.
с.н.с. отдел вирусологии и опухолевых болезней птиц
Самусева Г.Н.
с.н.с. отдел вирусологии и опухолевых болезней птиц ВНИВИП филиал ФНЦ «ВНИТИП» РАН Россия, г. Санкт-Петербург ПОВЫШЕНИЕ АНТИГЕННОЙ АКТИВНОСТИ ИНАКТИВИРОВАННОЙ ВАКЦИНЫ ПРОТИВ ИНФЕКЦИОННОГО БРОНХИТА КУР ИЗ ВАРИАНТНОГО ИЗОЛЯТА
Цель работы - изучение антигенных свойств инактивированной эмульгированной вакцины против инфекционного бронхита кур (ИБК) из вариантного изолята, в водную фракцию которой добавлена гидроокись алюминия (ГОА), как дополнительного адъюванта. Проведенное сравнительное изучение антигенных свойств вакцины против ИБК инактивированной эмульгированной, изготовленной на базе масляного адъюванта (МА), и аналогичной, но содержащей ГОА в составе водной фракции, показало увеличение иммунного ответа, индуцируемое МА и ГОА при их сочетанном применении.
Ключевые слова: инфекционный бронхит, изолят, вариантный штамм, инактивированная вакцина, гидроокись алюминия.
The main purpose was to study the antigenic properties of inactivated emulsified vaccine against avian infectious bronchitis (IB) based on variant isolate with introduced aluminium hydroxide in the aqueous fraction as an additional adjuvant. A comparative study of the antigenic properties of the inactivated emulsified vaccine against IB and the same vaccine, but containing aluminium hydroxide in the aqueous fraction showed an increase in immune response induced by an oil adjuvant and aluminium hydroxide in their combined use.
Key words: avian infectious bronchitis, isolate, variant strain, adjuvant, inactivated vaccine, aluminium hydroxide.
Инфекционный бронхит кур (ИБК) - высококонтагиозная болезнь, проявляющаяся поражением респираторного тракта, а также мочеполовой системы птиц [2,8]. Экономический ущерб, причиняемый ИБК, складывается из убытков от гибели и вынужденной выбраковки птицы, длительного снижения яйценоскости у кур, снижения качества инкубационных и пищевых яиц, затрат на препараты, а также за счет снижения качества мясной продукции. Возбудитель ИБК - РНК-содержащий вирус, принадлежащий к семейству Coronaviridae. К вирусу ИБК восприимчивы
