CC BY
7
Повышение антигенной активности инактивированной эмульгированной вакцины против метапневмовирусной инфекции и респираторного микоплазмоза птиц
Дубовой A.C.,
с.н.с. отдела вирусологии Самусева Г.Н.,
с.н.с. отдела вирусологии
ВНИВИП филиал ФНЦ «ВНИТИП» РАН E-mail: [email protected]
ВВЕДЕНИЕ
Ацъюванты это вещества или комплекс веществ различной химической природы, которые действуя неспецифически, повышают специфический иммунный ответ. Известно большое количество веществ, имеющих различный химический состав и происхождение, которые способны оказывать адъювантное действие [1, 4]
В качестве адъювантов используют гидроокись или фосфат алюминия, водно-масляные эмульсии, липосомы, продукты микобактерий, сапонины, декстраны, полимеры, липополисахариды, лимфокины, микрокапсулы и др. Большинство авторов выделяют два основных вектора действия адъювантов: 1. на антиген — через изменение свойств антигена, 2. на организм — путем стимуляции функций иммунной системы последнего Механизм адъювантного действия во многом еще остается невыясненным. Выяснение механизма иммунного ответа затрудняется сложностью и гетерогенностью строения антигенов и адъювантов. В настоящее время установлено, что адъюванты взаимодействуют с наиболее важными антигенпрезентирующими клетками (макрофагами, клетками Лангерганса, дендритными клетками) и эффекторными клетками (плазматическими клетками, естественными киллерами), Т-хелперами и клетками воспаления (полиморфно-ядерными базофилами, эозинофилами) [2, 3, 4, 5].
При изготовлении инактивированных вакцин широко применяются адъюванты, позволяющие значительно повышать иммуногенную и антигенную активность препаратов, а также увеличивать продолжительность иммунного ответа. Использование адъювантов позволяет уменьшить дозу антигена в вакцине, увеличить иммуногенность «слабых» антигенов, предотвращать конкуренцию антигенов в комбинированных вакцинах, увеличивать скорость развития и продолжительность иммунного ответа у привитых животных, индуцировать защитные свойства слизистых оболочек [6].
Анализ литературных данных показывает, что в настоящее время интенсивно проводятся исследования, направленные на разработку новых и улучшение существующих адъювантных систем.
Цель настоящей работы — изучить антигенные свойства эмульгированной инактивированной вакцины против МПВИ и РМП птиц, в водную фракцию которой введен синтетический сополимер в качестве дополнительного стимулятора иммунногенеза.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
В исследованиях были использованы масляный адъювант отечественного производства АБ-М4 (В/М), антиген метапневмовируса птиц (МПВ) с биологической активностью 106'25 ТЦДбо/см3,
определенной до инактивации, антиген Mycoplasma gallisepticum (MG) в концентрации 109 КОЕ/см3, цыплята 45-суточного возраста, наборы для выявления антител к МПВИ и к MG иммуноферментным методом производства фирмы BioChek, 1%-ный раствор синтетического сополимера.
При изготовлении образцов инактивированных вакцин против МПВИ и РМП эмульсию получали методом гомогенизации водного и масляного компонентов в соотношении 30:70 с помощью
гомогенизатора Ultraturrax Т-25.
Антигенную активность иммунного ответа оценивали по титрам поствакцинальных антител в ИФА в соответствии с инструкцией по применению соответствующего набора. Для этого цыплят опытных групп (по 10 голов в каждой) иммунизировали изготовленными образцами вакцин, инокулируя одну дозу вакцины, составляющую 0,5 см3/гол., оставляя 10 голов цыплят качестве чистого контроля. Через 30 дней после иммунизации от цыплят всех групп брали кровь, получали сыворотки и проводили исследования в ИФА.
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
На базе адъюванта АБ-М4 были изготовлены следующие образцы вакцин:
№ 1. Вакцина против МПВИ и РМП инактивированная эмульгированная, содержащая в составе водной фракции синтетический сополимер в конечной концентрации 0,05%.
№ 2. Вакцина против МПВИ и РМП инактивированная эмульгированная.
Вакцина № 2 выступала в роли референс-препарата. Вышеуказанными препаратами были провакцинированны по 10 голов цыплят 45 дневного возраста, 10 голов цыплят были оставлены в качестве чистого контроля.
Результаты исследований образцов вакцин № 1 и № 2 на антигенную активность представлены на рис.1.
юооо
£ 9000 a S000
й ТО00
I 6000
^ 5000 х
5 4000 -
I 3000 5 2000 В, юоо о
МПВИ РМП □ Аг+сол. Э А г ■ Иннун. Фон по МПВИ
Рис.1 Динамика выработки антител к МПВ и MG после вакцинации цыплят образцами вакцин № 1 и № 2
Уровень иммунного ответа, оцениваемый по титрам антител как к МПВ, так и к MG птиц в ИФА, у препарата № 1 — вакцины против МПВИ и РМП инактивированной эмульгированной, содержащей в составе водной фракции синтетический сополимер, значительно выше по сравнению с референс-препаратом № 2- стандартной вакциной против МПВИ и РМП инактивированной эмульгированной.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Таким образом, проведенные исследования показывают, что синтетический сополимер обладает адъювантными свойствами и позволяет усиливать иммунный ответ, индуцируемый масляным адъювантом при их сочетанном применении в инактивированной вакцине против МПВИ и РМП.
ЛИТЕРАТУРА
1. Aguilar J. C. Vaccine adjuvants revisited / J.C. Aguilar, E. G. Rodriguez//Vaccine. — 2007. — №25 - P. 3752-3762
2. Cox J.C., Coulter A.R. Adjuvants - a classification and review of their modes of action // Vaccine. — 1997, — Vol.15. — № 3, —P. 248-256.
3. Petrovsky N. Vaccine adjuvants: current state and future trends / N. Petrovsky, J. C. Aguilar // Immunology and Cell Biology. — 2004. Vol. 82. — № 5. —P. 488-496.
4. Rajput Z.I. Adjuvant effects of saponins on animal immune responses / Z. I. Rajput, Song-hua Hu, Chen-wen Xiao et al //Zhejiang Univ Sci B. — 2007. — Vol. 8. — № 3. — P. 153-161
5. Shakya A.K. Polymers as immunological adjuvants: An update on recent developments / A. K. Shakya, K. S. Nandakumar II J. BioSci. Biotech. — 2012. — Vol.1 — № 3. — P. 199-210
6. Singh M. Invited review recent advances in veterinary vaccine adjuvants I M. Singh, D.T. O'Hagan // Int J Parasitol. — 2003. — Vol.33. № 5-6. —P. 469-478.
