УДК 582.711: 582.711.71
RESEARCH ARTICLE 3. Medical sciences
Corresponding Author: Nesterova Nadezhda Viktorovna - Ph.D, docent of the Department of Pharmaceutical Science I.M. Sechenov First Moscow State Medical University (Sechenov
University)
E-mail: nesterova_n_v_1@staff.sechenov. ru
© Gerasimova D.D., Nesterova N.V., Biryukova N.V., Birykova E.O. - 2023
I Accepted: 24.04.2023
http://dx.doi.org//10.26787/nydha-2686-6838-2023-25-4-108-114
ИЗУЧЕНИЕ МАКРО- И МИКРОДИАГНОСТИЧЕСКИХ ПРИЗНАКОВ ЛИСТЬЕВ ЕЖЕВИКИ НЕКОТОРЫХ КУЛЬТИВИРУЕМЫХ СОРТОВ
Герасимова Д.Д., Нестерова Н.В., Бирюкова Н.В., Бирюкова Е.О.
ФГАОУ ВО «Первый МГМУ имени И.М. Сеченова» (Сеченовский Университет), г. Москва, Российская Федерация
Аннотация. Согласно данным литературы, можно сказать о присутствие в сырье листья ежевики ряда ценных биологически-активных веществ, что делает данное сырье перспективным и интересным для дальнейших исследований. Учитывая отсутствие на сегодняшний день нормативной документации на сырье листья ежевики и существенное разнообразия сортоформ данного растения, актуальным являются исследования, направленные на анализ показателей подлинности сырья. В ходе исследования был проведен сравнительный анализ диагностических признаков ежевики сортов «Агавам» и «Торнлесс Эвергрин» по внешним характеристикам. Анализ внешних признаков осуществляли в соответствии с требованиями, предъявляемыми по ОФС.1.5.1.0003.15 Листья, микродиагностический анализ выполнялся по ОФС.1.5.3.0003.15 Техника микроскопического и микрохимического исследования лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов. У микропрепаратов с поверхности листьев сорта «Агавам» эпидермис был представлен извилистыми клетками, присутствовало значительное количество длинных извитых одноклеточных волосков, было выявлено наличие вместилищ с цветным содержимым, установлены поверхностные устьичные комплексы аномоцитного типа, а также собрание углублённых устьиц преимущественно на обратной стороне листа. При рассмотрении микропрепарата с поверхности листовой пластинки, принадлежащей сорту «Торнлесс Эвергрин» выявлены клетки эпидермиса многоугольной формы. Заметны выраженные вместилища с цветным содержимым, также обнаружены устьичные комплексы аномоцитного тип, крупные извитые одноклеточные и многоклеточные волоски. Результаты работы могут быть отображены в соответствующих разделах разрабатываемой нормативной документации.
Ключевые слова: листья ежевики, макродиагностический анализ, микродиагностический анализ, культурное растение, плодовое растение, качество листьев, морфологические признаки, ежевика сорта «Агавам», ежевика сорта «Торнлесс Эвергрин».
STUDY OF MACRO- AND MICRODIAGNOSTIC SIGNS OF BLACKBERRY LEAVES OF SOME CULTIVATED VARIETIES
Gerasimova D.D., Nesterova N.V., Biryukova N.V., Birykova E.O.
I.M. Sechenov First Moscow State Medical University (Sechenov University), Moscow, Russian Federation
Abstract. According to the literature, we can say about the presence of a number of valuable biologically active substances in the raw blackberry leaves, which makes this raw material promising and interesting for further research. Taking into account the lack of regulatory documentation for raw blackberry leaves and a significant variety of varieties of this plant, studies aimed at analyzing the authenticity of raw materials are relevant. In the course of the study, a comparative analysis of diagnostic signs of blackberry varieties "Agavam" and "Tornless Evergreen " was carried out by external characteristics. The analysis of external signs was carried out in accordance with the requirements of the General Pharmacopoeia Article.1.5.1.0003.15 Leaves, microdiagnostic analysis was performed according to the General Pharmacopoeia Article.1.5.3.0003.15 Technique of microscopic and microchemical research of medicinal plant raw materials and medicinal plant preparations. In micro-preparations
E-ISSN 2686-6838
from the surface of the leaves of the Agavam variety, the epidermis was represented by sinuous cells, a significant number of long convoluted unicellular hairs were present, the presence of receptacles with colored contents was revealed, surface stomatal complexes of the anomocyte type were established, as well as a collection of deep stomata mainly on the reverse side of the leaf. When examining a micropreparation from the surface of a leaf blade belonging to the Thornless Evergreen variety, polygonal epidermis cells were identified. Pronounced receptacles with colored contents are noticeable, stomatal complexes of the anomocytic type, large convoluted unicellular and multicellular hairs are also found. The results of the work can be displayed in the relevant sections of the regulatory documentation being developed.
Keywords: blackberry leaves, macrodiagnostic analysis, microdiagnostic analysis, cultural plant, fruit plant, leaves quality, morphological characteristics, Agavam variety, Thornless Evergreen variety.
Ежевика - стелющийся или прямостоячий полукустарник рода Rubus (Рубус). Растение семейства Rosaceae (Розоцветные)
характеризуется многолетними ползучими корневищами, однолетними вегетативными побегами, двухлетними деревянистыми длинными стеблями (до 2-3 м), покрытыми восковым налётом, который придаёт им сизый оттенок. На цветоножке, черешках листьев, нижней стороне листовой пластинки и жилке могут присутствовать острые шипы (в зависимости от принадлежности к тому или иному сорту)
Листья тройчатые, с ромбическими яйцевидными пильчатыми листочками и характерными шипами; расположены на черешках. Средний листочек черешковый, крупнее двух боковых, почти сидячих.
Крупные белые цветки - пятираздельные, типичные для семейства Rosaceae (Розоцветные). Цветение охватывает период с июня по июль, иногда продолжается до поздней осени. Плод -сочная кисло-сладкая многокостянка, (плод, состоящий из многочисленных отдельных костяночек, сросшихся основаниями) с сизым налётом, фиолетово-красного или чёрно-фиолетового цвета по мере созревания соответственно. Сбор плодов преимущественно приходится на июль-август
Ежевика широко распространена в европейской части России, окультурена и выращивается в Западной Сибири, Средней Азии, на Кавказе и Крымском полуострове. Дикорастущая ежевика встречается на хорошо освещённых и увлажнённых местах: на просеках и опушках, в оврагах, по берегам водоёмов. Нередко может быть обнаружена среди прочих лесных кустарников.
Ценность растительного сырья
характеризуется наличием ряда биологически активных веществ [2,3,4].
Лекарственным сырьём служат зрелые плоды, цветки, корневища и листья ежевики. В период сбора листочки подвергаются бережной обработке, направленной на поддержание
целостности растительного сырья. Сохранение естественного цвета по завершении высушивания гарантирует качество сырья и эффективность его использования в лечебных целях.
Учитывая отсутствие на сегодняшний день нормативной документации на сырье листья ежевики и существенное разнообразия сортоформ данного растения, актуальным являются исследования, направленные на анализ показателей подлинности сырья.
Целью работы стало изучение макро- и микродиагностических признаков листьев ежевики для диагностики подлинности ЛРС и дальнейшей разработки разделов «Анализ внешних признаков листьев ежевики», «Микроскопия листьев ежевики».
Материалы и методы исследования.
Исследования проводили с использованием высушенных листьев, преждевременно заготовленных от культивируемых растений -кустарников ежевики сорта «Агавам» и ежевики сорта «Торнлесс Эвергрин», выращенных в условиях умеренного климата на территории России. Анализ анатомического строения листьев проводили в соответствии с ОФС.1.5.1.0003.15 Листья и ОФС.1.5.3.0003.15 Техника микроскопического и микрохимического исследования лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов. Анализ макродиагностических признаков проводили с использованием измерительной линейки при дневном освещении. Анализ микродиагностических признаков проводили с использованием микроскопа медицинского Микмед-5 вар. 2 (со светодиодом).
Результаты и обсуждения.
Макродиагностический анализ позволил выявить диагностические характеристики исследуемых объектов, принадлежащих двум разным сортам ежевики. На основании результатов была создана таблица, в которой приведена сравнительная характеристика внешних признаков (табл. 1)
Таблица 1
Сравнительная характеристика внешних признаков листьев ежевики сортов «Агавам» и
«Торнлесс Эвергрин».
Диагностический признак
Характеристика признака
Лист сорта «Агавам» (рис.1)
Лист сорта
«Торнлесс Эвергрин» (рис.2)
Методика определения
Объекты исследования
Рис. 1. Сложный лист ежевики сорта Агавам
Рис. 2. Сложный лист ежевики сорта Торнлесс Эвергрин_
1. Строение листовой пластинки
2. Форма
сложный
сложный
яйцевидная
яйцевидная
Визуально, при дневном освещении на белом листе бумаги._
3. Размер
длина до 7,5 -8 см, ширина до 6 см
длина до 9 см ширина до 6,5 см
С использованием измерительной линейки_
4. Наличие черешка, его размер
простой, 8,5 см
простой, 7 см
Визуально, при дневном освещении на белом листе бумаги, с использованием измерительной линейки._
сетчатое, перистое
сетчатое, перистое
5. Характеристика жилкования
Визуально, при дневном освещении на белом листе бумаги.
6. Характеристика края листа
мелкопильчатый
мелкопильчатый
присутствует выраженное опушение
7. Наличие опушения
нет
4
4
E-ISSN 2686-6838
w
7 .тР. ^И^И
8. Цвет светло-зеленый светло-зеленый
9. Запах слабый, мягкий слабый, мягкий При растирании между пальцами.
10. Вкус Специфический травяной Специфический травяной При разжевывании, не проглатывая, в водном извлечении.
Table 1
Comparative characteristics of the external signs of blackberry leaves of the varieties "Agavam" and "Tornless
Evergreen".
Diagnostic feature Characteristic of the feature Method of determination
Leaf of the variety "Agavam" (Fig.1) Leaf of the "Tornless Evergreen" variety (Fig. 2)
Objects of research
Fig. 1. A complex blackberry leaf of the Agavam variety
Fig. 2. A complex blackberry leaf of the Thomless Evergreen variety_
1. The structure of the leaf blade
2. Form
difficult
difficult
ovoid
ovoid
Visually, in daylight on a white sheet of paper_
3. Size
length up to 7.5-8 cm, width up to 6 cm
length up to 9 cm width up to 6.5 cm
using a measuring ruler
4. The presence of a petiole, its size
simple, 8.5 cm
simple, 7cm
Visually, in daylight on a white sheet of paper, using a measuring ruler_
reticulated, feathery
reticulated,
feathery
5. Characteristics of venation
Visually, in daylight on a white sheet of paper.
6. Characteristic of the edge of the sheet
finely filleted
finely filleted
4
2023. Vol. 25. № 4
Issue Doi: 10.26787/nydha-2686-6838-2023-25-4
—--—-
there is a pronounced pubescence
7. The presence of pubescence no
1 ¿-^ a
j .4 .
8. Colour light green light green
9. Smell weak, soft weak, soft When rubbing between the fingers
10. Taste Specific herbal Specific herbal When chewing, without swallowing, in aqueous extraction
Макродиагностический анализ проведён в соответствии с требованиями ОФС.1.5.1.0003.15 Листья.
Также для изучения листьев был проведен микродиагностический анализ. Приготовление микропрепарата и проведение микроскопии было осуществлено в соответствии с требованиями ОФС.1.5.3.0003.15 Техника микроскопического и микрохимического исследования лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов.
При рассмотрении микропрепарата с поверхности листьев сорта «Агавам» (рис. 1) были идентифицированы характерные анатомо-диагностические признаки.
Эпидермис представлен извилистыми клетками, зафиксировано наличие длинных извитых одноклеточных волосков (рис. 3), в ткани листа содержится большое количество вместилищ с цветным содержимым (рис. 4, 5). Установлены поверхностные устьичные комплексы аномоцитного типа, а также собрание углублённых устьиц преимущественно на обратной стороне листа (рис. 6).
Рис. 3. Клетки эпидермиса; простые одноклеточные волоски
Fig. 3. Epidermis cells; simple unicellular hairs
Рис. 4. Вместилища с цветным содержимым Fig. 4. Containers with colored contents
Рис. 5. Жилка листа; вместилища с цветным содержимым
Fig. 5. Leaf vein; receptacles with colored contents
2023. Vol. 25. № 4
Issue Doi: 10.26787/nydha-2686-6838-2023-25-4
E-ISSN 2686-6838
Рис. 6. Поверхностные и углублённые устьичные комплексы аномоцитного типа; вместилища с цветным содержимым
Fig. 6. Surface and deep stomatal complexes of the anomocyte type; receptacles with colored contents
При рассмотрении микропрепарата с поверхности листовой пластинки,
принадлежащей сорту «Торнлесс Эвергрин» (рис. 2) выявлены клетки эпидермиса многоугольной формы. Присутствуют выраженные вместилища с цветным содержимым (рис.7). Обнаружены устьичные комплексы аномоцитного типа (рис.8), крупные извитые одноклеточные и многоклеточные волоски (рис.9).
Рис. 7. Жилка листа; вместилища с цветным содержимым
Fig. 7. Leaf vein; receptacles with colored contents
Рис. 8. Устьичные комплексы аномоцитного типа Fig. 8. Stomatal complexes of the anomocyte type
Рис. 9. Одноклеточные и многоклеточные волоски
Fig. 9. Unicellular and multicellular hairs
Вывод. Согласно данным научной литературы, листья ежевики обладают потенциальной фармакологической активностью, которая преимущественно объясняется присутствием полифенольных соединений, в том числе флавоноидов и танинов. Исследуемое растение -оптимальный источник биологически активных веществ, перспективный объект для расширения базы лекарственного сырья, заслуживающий внимание экспертов в области растительной медицины. В ходе изучения научной литературы, отражающей состояние изученности
исследуемого лекарственного сырья,
зафиксировано отсутствие подробной нормативной документации. В связи с этим были проведены макро- и микродиагностический анализы листьев ежевики, позволившие диагностировать подлинность ЛРС, выделить основные анатомо-диагностические признаки. Установленные данные рекомендуются к дальнейшему использованию при создании соответствующих разделов разрабатываемой нормативной документации.
REFERENCES
БИБЛИОГРАФИЧЕСКИМ СПИСОК
[1]. Ilyina M.B. Sergunova E.V. Microscopic analysis of the raw materials of Blackberry blue (Rubus caesius L.) Proceedings of the VII International Scientific and Methodological Conference of Pharm.education 2022. Voronezh. VSU Publishing House 2022. p.252Guillermo Omar Rocabado, Luis Miguel Bedoya, Maria Jose Abad, Paulina Bermejo. Rubus - A Review of its Phytochemical and Pharmacological Profile, March 2008Natural Product Communications 3(3):423-436
[2]. Guillermo Omar Rocabado, Luis Miguel Bedoya, Maria Jose Abad, Paulina Bermejo. Rubus - A Review of its Phytochemical and Pharmacological Profile, March 2008Natural Product Communications 3(3):423-436
[1]. Ильина М.Б. Сергунова Е.В. Микроскопический анализ сырья Ежевики сизой (Rubus caesus L.) Сборник трудов VII Международной научно-методической конференции фарм.образование 2022. Воронеж. Издательский дом ВГУ 2022. c.252
[2]. Guillermo Omar Rocabado, Luis Miguel Bedoya, Maria Jose Abad, Paulina Bermejo. Rubus - A Review of its Phytochemical and Pharmacological Profile, March 2008Natural Product Communications 3(3):423-436
[3]. D. A. Abdul and S. N. Majeed, "Identification of antioxidant compounds in red raspberry (Rubus idaeus) fruit in Kurdistan region (North Iraq)," IOSR Journal of Applied Chemistry, vol. 2, no. 3, pp. 06-10, 2012.
E-ISSN 2686-6838
[3]. D. A. Abdul and S. N. Majeed, "Identification of antioxidant compounds in red raspberry (Rubus idaeus) fruit in Kurdistan region (North Iraq)," IOSR Journal of Applied Chemistry, vol. 2, no. 3, pp. 06-10, 2012.
[4]. D. Dujmovic Purgar, B. Duralija, S. Voca, A. Vokurka, and S. Ercisli, "A comparison of fruit chemical characteristics of two wild grown Rubus species from different locations of Croatia," Molecules, vol. 17, no. 9, pp. 10390-10398, 2012.
[4]. D. Dujmovic Purgar, B. Duralija, S. Voca, A. Vokurka, and S. Ercisli, "A comparison of fruit chemical characteristics of two wild grown Rubus species from different locations of Croatia," Molecules, vol. 17, no. 9, pp. 10390-10398, 2012.
Author Contributions. Gerasimova D.D. - analysis of the data obtained and writing the text of the work, Nesterova N. V. - concept
and design of the study, Biryukova N. V. - statistical analysis of information, Biryukova E.O. - analysis of scientific literature
Conflict of Interest Statement. The authors declare no conflict of interest.
Gerasimova D.D, - ORCID ID 0009000470150829
Nesterova N. V. - SPIN ID: 3402-4931, ORCID ID: 0000-0002-9752-9757
Birykova N.V. - SPIN ID: 3408-0190, ORCID ID: 0000-0001-9560-2802
Birykova E.O. - SPIN ID: 3408-0190, ORCID ID: 0000-0001-9560-2802
For citation: Gerasimova D.D., Nesterova N.V., Biryukova N.V., Birykova E.O. STUDY OF MACRO- AND MICRODIAGNOSTIC SIGNS OF BLACKBERRY LEAVES OF SOME CULTIVATED VARIETIES. // Medical & pharmaceutical journal "Pulse". - 2023;25(4):108-114. http://dx.doi.org//10.26787/nydha-2686-6838-2023-25-4-108-114.
Вклад авторов. Герасимова Д.Д. - анализ полученных данных и написание текста работы, Нестерова Н.В. - концепция и дизайн исследования, Бирюкова Н.В. - статистический анализ информации, Бирюкова Е.О. - анализ научной литературы
Заявление о конфликте интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Герасимова Д. Д. -ORCID ID: 0009000470150829
Нестерова Н.В. - SPIN ID: 3402-4931, ORCID ID: 0000-0002-9752-9757
Бирюкова Н.В. - SPIN ID: 3408-0190, ORCID ID: 0000-0001-9560-2802
Бирюкова Е.О. - SPIN ID: 3408-0190, ORCID ID: 0000-0001-9560-2802
Для цитирования: Герасимова Д.Д., Нестерова Н.В., Бирюкова Н.В., Бирюкова Е.О. ИЗУЧЕНИЕ МАКРО- И МИКРОДИАГНОСТИЧЕСКИХ ПРИЗНАКОВ ЛИСТЬЕВ ЕЖЕВИКИ НЕКОТОРЫХ КУЛЬТИВИРУЕМЫХ СОРТОВ // Медико-фармацевтический журнал "Пульс". 2023;25(4):108-114. http://dx.doi.org//10.26787/nydha-2686-6838-2023-25-4-108-114.