CC BY
10
^ В результате изучения влияния диурона в дозе 18 мг/кг (Хх> иОм) на репродуктивную функцию самок белых крыс установлено увеличение средней массы плаценты и плацент-но-плодного коэффициента» других изменений по всем проводимым в эксперименте тестам не найдено.
Внутрнжелудочное поступление диурона в дозе 9 мг/кг ('/чоо не сопровождалось статистически достоверным
изменением абсолютного большинства показателей, характеризующих эмбриотоксическое и тератогенное действие химических веществ.
Таким образом, при изучении эмбриотоксического и тератогенного действия диурона установлено, что изучаемый гербицид в дозах 720 и 36 мг/кг обусловливает увеличение внутриутробной гибели плодов, снижение плодовитости, угнетение развития эмбрионов и расстройство кровообращения.
Внутрнжелудочное поступление в организм беременных крыс 3-й группы диурона (18 мг/кг) характеризовалось менее выраженными изменениями, поступление диурона в дозе 9 мг/кг не сопровождалось эмбриотропным действием на организм белых крыс.
Выводы. I. Воздействующая доза диурона и ответная реакция организма беременной самки и плода находятся в прямой зависимости.
2. Дозы диурона 720 и 36 мг/кг можно характеризовать как действующие на функцию воспроизводства, дозу 18 мг/кг — как минимально действующую, а 9 мг/кг — как недействующую.
ЛИТЕРАТУРА
1. Дыбан А. П., Акимова И. М.. Баранов В. С. — Арх. анат., 1970, № 10, с. 89—100.
2. Методы изучения отдаленных последствий действия химических загрязнений атмосферного воздуха (Экспериментальное и натурное изучение эмбриотропного действия, гонадотропного действия и влияние на женский организм в период беременности). Метод, указания./ Гофмеклер В. А., Красовнцкая М. М., Шепа-рев А. А. и др. Владивосток, 1978.
Поступила 14.03Л4
(ЦЬК 61в-5 + 616-056.431 -02:615.285.7
И. Д. Гадалина, Е. П. Зайцева
ИЗУЧЕНИЕ КОЖНО-РАЗДРАЖАЮЩЕГО И СЕНСИБИЛИЗИРУЮЩЕГО ДЕЙСТВИЯ ПЕСТИЦИДА АЦЕТОХЛОРА
Московский НИИ гигиены им. Ф. Ф. Эрисмана
Использование пестицидов в сельском хозяйстве создает условия для загрязнения ими пищевых продуктов, воды водоемов, почвы и др. В литературе имеется значительное число работ, указывающих на возможность развития раздражающего, сенсибилизирующего эффектов и аллергических заболеваний при воздействии пестицидов [1—3, 6, 7].
Пестициды, попадая на кожу, могут вызывать контактные дерматиты и аллергические поражения кожи. Поэтому в целях гигиенической регламентации пестицидов важна оценка их кожно-раздражающего и сенсибилизирующего действия.
Для оценки данных эффектов проведены исследования с отечественным пестицидом ацетохлором. Это жидкость коричневого цвета. Препаративная форма — 50 % эмльуги-фющий концентрат, не растворяющийся в воде. Ацетохлор заносили 50 морским свинкам на кожу бока в виде 50, 25, 5, 1 и 0,1 % растворов на спирту в количестве 0,2 мл в течение 10 дней. Воспалительную реакцию кожи оценивали по общепринятой пятибалльной системе.
После нанесения 50 % раствора ацетохлора возникла выраженная гиперемия (2—3 балла), в последующем появились отечность, утолщение кожной складки с некротнзациен и изъязвлением. Через 3 сут после прекращения применения раствора корочки подсохли и через неделю отпалн. Рост шерстного покрова был замедленным. При нанесении 25% спиртового раствора отмечалась аналогичная, но менее выраженная картина (реакция кожи 1 —1,5 балла). Менее концентрированный (5%) раствор приводил к гиперемии в 1 балл и слабому шелушению в конце опыта, 1 % раствор вызвал реакцию кожи только у 20 % животных, а 0,1 % раствор не приводил к изменению кожного покрова.
При нанесении этих же растворов 40 белым крысам отмечена реакция в 0,5 балла с последующим шелушением. Таким образом, ацетохлор оказывает раздражающее действие на кожу морских свинок, интенсивность которого снижается прн использовании различных разведений.
С целью оценки опасности ацетохлора как возможного аллергена проведены опыты на 50 морских свинках с внут-оикожным и эпикутантным введением ацетохлора. Степень выраженности сенсибилизации животных оценивали с помощью методов специфической аллергоднагностики — реак-
ций специфической агломерации лейкоцитов и специфического лизиса лейкоцитов (РСАЛ и РСЛЛ соответственно). Определяли содержание эозинофилов в периферической крови, лейкоцитарную формулу, состояние тучных клеток. Последние играют важную роль в патогенезе воспаления, в частности аллергического. При взаимодействии с различными факторами, выступающими в качестве воспалительного агента, они являются одним из существенных внесосудистых факторов в генезе микроциркуляторных расстройств прн остром воспалении. В работе применен комплексный подход к морфометрическому анализу тучноклеточной популяции, предложенный Д. Г1. Лннднср и соавт. [5]. С помощью селективной окраски кислых гликозамингликанов 0,1 % водным раствором толундинового синего судили о степени насыщенности тучных клеток гепарином. Морфометрнческие критерии получены на основании подсчета 400 тучных клеток у каждого животного прн увеличении 7X20. Проведен морфофункциональный анализ состояния кожи на свежезамороженных срезах (окраска гематоксилином и эозином). Анализ клеточности околососуднстых пространств соединительной ткани осуществлен на пленочных препаратах подкожной клетчатки, окрашенных по Паппенгейму — Крюкову.
В предварительных опытах на морских свинках установлены тестирующая (1%) и сенсибилизирующая (0,5%) концентрации исследуемого вещества. Для специфических тестов в качестве рабочих использовали 0,02 и 0,002 % растворы ацетохлора. Поскольку последний — водонерастворн-мое соединение, предварительно его растворяли в I % спирте, а затем в соответствии с применяемыми методами — в цитрате натрия.
Внутрнкожное введение ацетохлора в дозах 50, 100, 200 мкг в 0,02 мл с последующим кожным тестированием не вызвало положительной кожной реакции в ответ на провокационную пробу. Реакции клеток крови на гаптен были отрицательными. При использовании комплексной схемы сенсибилизации, рекомендуемой для слабых аллергенов (внутрнкожное введение 250 мкг ацетохлора с последующим 7-кратным нанесением ацетохлора на кожу) через 24 ч после провокационной капельной кожной пробы выявлена гиперемия в 1—1,5 балла. Отмечено статистически досто-
"i ° Цитограмма тучноклеточной популЛ
Г ции (а) после 20 аппликаций спир-
I том (/), нанесения на этом фоне раз-
"'г яш решающей дозы ацетохлора (II),
4п\- HI ^ аппликаций ацетохлором (III) и
Г в 2 нанесения на этом фоне разрешаю-
го\- Щ щей дозы ацетохлора (IV), индекс
ГП И Н насыщения гепарином (б), индекс
I—I—LC3J— П дегрануляции и относительная часто-
I Я Ш Ш та ее форм
а: столбики с косой штриховкой — о'.ень темные клетки, с горизонтальной — темные, с вертикальной—светлые. без штриховки — очень светлые; б. в: темные столбики — сильная форма, заштрихованные — умеренная, светлые — слабая.
верное увеличение показателя РСАЛ, что может указывать на слабые сенсибилизирующие свойства ацетохлора.
При эпикутанной сенсибилизации ацетохлор наносили на кожу бока 20 морским свинкам в виде 0,5 % раствора в течение 20 дней. Разрешающие аппликации производили через 10 и 20 нанесений на противоположный бок туловища. После аппликаций только у 20 % животных возникли небольшая гиперемия и шелушение. Тестирование животных после 10 аппликаций привело к появлению гиперемии в 0,5— 1 балл. Со стороны изучаемых показателей статистически значимых различий по сравнению с контролем не обнаружено. Нанесение ацетохлора было продолжено. Тестирование после 20 аппликаций вызвало через 24 ч выраженную гиперемию (1—2 балла) у 20 % животных, а у остальных средний балл кожной реакции составил 0,5. Через 48 ч эти явления стихали. Не выявлено статистически значимых различий в РСЛЛ и РСАЛ. Количество эозинофилов в кровн у подопытных животных было выше, чем у контрольных, но не достигало статистически значимой величины. Содержание же гистамнна в сыворотке крови не отличалось от контроля.
На 3-й сутки после нанесения тестирующей дозы ацетохлора наблюдалось резкое снижение индекса насыщения гепарином тучных клеток и индекса дегрануляции. Полученные данные свидетельствуют о значительной опустошенности тучных клеток гепарином и гистамином в изученные сроки воздействия (см. рисунок). Обращает на себя внимание при этом резкое увеличение плотности тучноклеточной популяции, т. е. значительный рост числа тучных клеток на единицу площади. Если при аппликации спиртом 400 тучных клеток содержалось в 15—20 полях зрения, то при нанесении тестирующей дозы — лишь в 10—12 полях. Увеличение количества тучных клеток многие авторы связывают не с размножением, а с трансформацией их из клеток предшественников, значительно возрастающей в условиях патологии [4, 8, 9J. Повторные аппликации пестицидом также вызывают активную дегрануляцию, но при этом стимулируется и выработка тучными клетками кислых глюко-замингликанов и биогенных аминов, о чем свидетельствует некоторое преобладание темных тучных клеток в популяции. Значительно выражены крайние варианты клеток (очень темные — насыщенные гепарином и очень светлые—активно функционирующие). Нанесение ацетохлора на этом фоне вызывает еще большее повышение функциональной активности тучных клеток.
Морфологический анализ состояния кожи при описанном воздействии позволяет отметить развитие воспалительного процесса в эпидермисе и дерме, особенно в ее сосочко-вом слое. При этом отмечаются резкое утолщение эпидермиса и повышение мнтотнческой активности эпителия маль-
пигиева слоя. Клетки базального слоя и слоя шиповатых клеток становятся сочными, ядра, как и сами клетки, увеличиваются в размере, контакты их несколько ослабевают. Возрастает толщина зернистого слоя, состоящего из 3—4 рядов клеток, содержащих зерна кератогиалина. Резко утолщается роговой слой эпидермиса. На пленочных препаратах видно расширение всех сосудов микроциркулятор-ного русла рыхлой соединительной ткани сосочкового слоя дермы. Воздействие ацетохлора повышает проницаемость сосудов, о чем свидетельствует увеличение клеточности полу кожной клетчатки за счет фибробластов макрофагов и ту* ных клеток. Появляется небольшое количество клеток лим-фоидного ряда, при этом отсутствует реакция со стороны полиморфноядерных лейкоцитов. При действии разрешающей дозы ацетохлора несколько усиливается воспалительный процесс.
Таким образом, ацетохлор при эпикутанном нанесении морским свинкам не вызывает изменения показателей, характеризующих сенсибилизирующий эффект. Выявлено раздражающее действие этого вещества. Проникая через кожу, оно вызывает массовую дегрануляцию тучных клеток. Освобожденный гистамин повышает проницаемость сосудистой стенки и нарушает обменные процессы в соединительной ткани, обусловливая развитие воспаления, сопровождающегося макрофагалыюй реакцией. Опустошенная тучноклеточная популяция поддерживает себя за очет усиления гетеропластического генеза. Ацетохлор вызывает усиление пролифератнвных процессов, проявляя свое раздражающее действие.
ЛИТЕРАТУРА
1. Ado В. А. — Вестн. дерматол., 1973, Ni 4, с. 3—9.
2. Алексеева О. Г., Дуева Л. А. Аллергия к промышленным химическим соединениям. М., 1978.
3. Брусиловский Е. С.. Виевский Н. А., Байда Н. А.
и др. — В кн.: Гигиена применения, токсикология пе|^ стнцидов и клиника отравлений. М., 1973, вып. 10, с. 329-339.
4. Виноградов В. В.. Воробьева Н. Ф. Тучные клетки (Ге-нез, структура, функция). Новосибирск, 1973.
5. Линдлер Д. П.. Поберий И. А., Розкин М. Я. и др. — Арх. пат., 1980, № 6, с. 60—64.
6. Рабен А. С.. Антоньев А. А. Профессиональная дерматология. М„ 1975.
7. Сасинович Л. М. — В кн.: Гигиена применения, токсикология пестицидов и клиника отравлении. М., 1981, вып. 12, с. 94—97.
8. Струков А. И. Патологическая анатомия. М., 1971.
9. Хрущов Н. Г. Функциональная цитохимия рыхлой соединительной ткани. М., 1969.
Поступила 13.12.83
