CC BY
6
Таблица 2
Влияние летучих фракций фитонцидов хвойных деревьев на коэффициент униполярности (Af ± m)
Объект исследования Аэроиоиы
легкие средние тяжелые
Ель сибирская 1,15±0,005 1,0±0,024 1,63 +0,041
1,23+0,019 0,94+0.034 1,1 ±0,007
Р <0,01 <0,5 <0,001
Пихта 1,01 ±0,008 1,0+0,019 0,97±0,01
1,04+0,015 1,05+0,007 0,72±0,007
>0,5 <0,05 <0,001
где Р — молекула вещества, влияющего на ионизацию; Р~ — отрицательный ион этого вещества; И — молекула вещества-носителя первичной ионизации; — первичный отрицательный ион.
Процесс (1) осуществляется при условии, если энергия сродства электрона к молекуле вещества Р превышает таковую к молекуле И. Интенсивность процесса (/) определяется константой скорости перезарядки:
К ~ I«"] • (2)
где К — константа скорости перезарядки (в см3/молеку-ла-с); 11 — скорость ионизации (в ион/см3-с); — концентрация вещества, влияющего на ионизацию (в молекула/см3); /?- — концентрация первичных отрицательных ионов (в ион/см3).
Ранее высокая константа скорости перезарядки выявлена для озона при кондиционировании воздуха, она равна 1,2-Ю-5 см3/молекула-с. Аналогичные величины установлены и для фитонцидов. Для фитонцидов ели сибирской процесс перезарядки отрицательных ионов наблюдался в отношении легких н средних ионов, для фитонцидов пихты — в отношении легких, средних и тяжелых ионов. Поскольку энергия сродства электрона снижается с увеличением размеров отрицательного иона, благодаря процессу (/) имеется возможность трансформировать средние и тя-^келые отрицательные ионы, находящиеся обычно в избытке над легкими и не имеющие в отличие от них существенной гигиенической значимости, в легкие отрицательные ионы со значительным стимулирующим действием. Аналогич-
но протекают процессы перезарядки и для положительных ионов:
Р + Г** —»- Р++Я. (3)
Процесс (3) осуществляется при условии, если энергия ионизации вещества Р ниже энергии ионизации молекулы Я. Поскольку источником ионизации в воздухе под влиянием химических веществ являются тяжелые ноны, преобладающие по содержанию над легкими, разность энергий ионизации должна компенсировать и энергию, затрачиваемую на предшествующий перезарядке распад тяжелого иона.
Ряд бытовых процессов приводит .к значительному снижению ионизации воздуха помещений жилых и общественных зданий: загрязнение воздуха при сжигании газа и приготовлении пищи, поступление в воздушную среду выдыхаемого человеком воздуха и др. Особенно сильное отрицательное влияние оказывает табачный дым. Так, одна выкуренная сигарета в помещении объемом 35 м3 снижает концентрацию легких ионов на 27 %, две — на 48 %, три — на 68%; шесть выкуренных сигарет полностью устраняют легкие ноны из воздуха [2].
ЛИТЕРАТУРА
1. Губернский Ю. Д., Дмитриев М. Т.. Минх А. А — Вести. АМН СССР, 1982. № 10, с. 27.
2. Дмитриев М. Т. — Здравоохр. Белоруссии, 1980, №12, с. 28.
3. Дмитриев М. Т.. Захарченко М. П., Степанов Э. В. — Здравоохр. Казахстана, 1983, № 10, с. 21.
4. Дмитриев AI. Т.. Мищихин В. А., Степанов Э. В. — Гнг. и сан., 1983, № 7. с. 43.
5. Дмитриев М. Т. и др. — Там же, 1972, № 8, с. 97.
6. Минх А. А. Ионизация воздуха и ее гигиеническое значение. М., 1963.
7. Минх А. А.. Губернский Ю. Д., Дмитриев М. Т.— Вести. АМН СССР, 1973, № 10, с. 3.
8. Г1 шежецкий С. #., Дмитриев Al. Т. Радиационные Физико-химические процессы в воздушной среде. М., 1978.
9. Токин Б. П. — Науч. докл. высш. школы. Биол. науки, 1980, № 5, с. 5.
10. Hichs W. W.. Bechett J. С.— J. Amer. Inst. Electr. Engl., 1957, N 1. p. 108.
11. Kruegcr Л. Р.— Ргос. Soc. exp. Biol. (N.Y.), 1958, v. 98, p. 412.
12. Smith R. P.— J. gen. Physiol., 1960, v. 43, p. 553.
Поступила 05.03.84
УДК 615.285.7.099 : 818.33
/О. Н. Талакин, И. А. Некрасова, Л. Т. Волошина
ЭМБРИОТОКСИЧЕСКОЕ ДЕЙСТВИЕ ДИУРОНА В ЭКСПЕРИМЕНТЕ
Донецкий медицинский институт им. М. Горького
Перспективность применения пестицидов в сельском хозяйстве и в то же время реальная возможность попадания их в организм человека с загрязненным воздухом, водой и продуктами питания ставят задачу всестороннего изучения ^воздействия их на организм. К числу основных их свойств, "приводящих к стойкому нарушению гомеостаза, вызываю-
щих тяжелые патологические последствия как для данной особи, так и для ближайшего и отдаленного потомства, можно отнести прежде всего эмбрнотоксическне.
В настоящей работе изучено эмбрнотокснческое и тератогенное действие гербицида диурона. Исследования выполнены по схеме, разработанной В. А. Гофмеклером и соавт.
- S3 -
Показатели репродуктивной функции крыс при хроническом пероральном воздействии гербицида диурона (х ± Эх)
Показатель
Доза диурона, мг/кг
720
ЗС
18
Контроль
Число на I самку: желтых тел живых плодов Прирост массы тела самок к концу переменности, г Коэффициент массы яичников
Средняя масса эмбриона, мг
Средний размер эмбриона. мм Средний диаметр плаценты, мм Средняя масса плаценты. мг Смертность:
общая эмбриональная преДимплантационная мостимплантационная Пл а центно- плоди ы й коэффициент
10.8 ± 0,7! 9,08±0.71
37,75 ± 2,4•
0,000354±0,000036
1,090± 0,06*
29,4 ±0,54*
13,7±0,37
483, 2 ± 0,79
16 , 04 ± 3 . 96 13,04 ±3, 25 3,5± 1 .63
0,243±0,010*
10,3 ±0,54 9,58±0,45
88,33 ± 6.6
0,000254 ±0,00001
258 I ,0± 0,04»
32,9 ± 0.44»
14 , 4 ± 3 , 24
548, 5± 0,01
7. 06±I,3 4,7 ± 0,29 2.4 ± I , 12
0,213 ± 0, 006
•Различия достодерны.
{2]. Вещество вводили перорально с помощью желудочного зонда в 2 % растворе крахмала. Животные 4 групп получали изученный гербицид с 6-го по 15-й день беременности в дозах 720 мг/кг ('/5 LDso), 36 мг/кг ('/ioo LDso), 18 мг/кг 0/я» LDso), 9 мг/кг ('Лоо LDso), 5-й (контрольной) —только крахмал. В опыте использовано 75 самок белых крыс, 466 эмбрионов и 49 крысят.
Об эмбриотокснческом действии диурона судили на основании количества желтых тел в яичниках, пред- и пост-имплантационной гибели плодов, общей эмбриональной смертности, внешних и внутренних аномалий развития эмбрионов, числа живых н мертвых плодов, а также патомор-фологических изменений в органах самок и плода.
При определении пред- и постимплантационной гибели эмбрионов подсчитывали число плодовместилнщ, мертвых и резорбированных плодов, разность между наличием желтых тел и живых эмбрионов. Для выявления внешних аномалий развития плоды осматривали под лупой. Производился замер эмбрионов и взвешивание эмбрионального материала (яичников, плацент и эмбрионов).
Исследование состояния внутренних органов выполняли на серии поперечных срезов по методу Вильсона в модификации А. П. Дыбана и соавт. [1], а скелета — на тотальных препаратах плодов, окрашенных ализарином (метод Даусо-на). Достоверность полученных результатов оненивали с использованием критерия Стыодента.
Как следует из данных таблицы, доза диурона 720 мг/кг ('/г, LDso) вызывает уменьшение прироста массы тела самок к 20-му дню беременности, массы эмбриона и его размера (Р^0,05). Кроме того, отмечено снижение общей эмбриональной смертности (в 1,3 раза) и постимплантационной гибели плодов (в 3,4 раза).
При осмотре эмбрионов не удалось выявить уродства, аномалии развития. При макроскопическом же исследовании срезов плодов отмечены кровенаполнение внутренних органов (23%), точечные кровоизлияния головного мозга (7%), печени (9%), расширение почечных лоханок (4%), расширение желудочков (третьего и боковых) головного мозга (5%). У подавляющего большинства эмбрионов отсутствовали нарушения в образовании костного и костно-суставного аппарата. Исключение составили 5 % эмбрионов, у которых выявлено недоокостенение основания черепа. Развитие с момента рождения первого поколения потомства от самок, беременность которых протекала на фоне поступления диурона в дозе 720 мг/кг, оценивали по массе тела и таким стандартным критериям, как открывание глаз, появление резцов, покрытие шерстью. Наряду с этим для выявления возможных скрытых нарушений в организме
10, 08 ±0,54 9,08 ± 0,45
75,25± 3.7
0.000319± 0.000016
2684,7 ± 0,05
31,4 ± 0,2
13,2 ± 0,16
624 ,2± 0, 015*
9,4 ± 3,25 4 ,03± 1,63 5. 7 ± 2, 4 4
0,247 ± 0,01 *
9,75 ± 0 .36 8.42*0.36
78,0 ± 2■58
0.000295 ± 0,000012
2750, 3 ± 0, 08
31 ,0± 0,62
13, 0 ± 0, 24
545,8 ± 0,02
6.2 ±I,48 3,8 ± 0,99 1 ,62± I , 12
0,209± 0,009
11.17 ± 0.62 9.58 ± 0,98
79,9±5.9
0,000380± 0,000010
2781 ,2 ± 0.03
31,9± 0,13
13,4 ± 0, 13
505,4 ±0,014
15.8 ± 7.8 13,85 ± 7,8 2, 1 ± 1 .4
0,202 ± 0,007
потомства первого помета в конце 2-го месяца от момента рождения крысят применяли функциональные нагрузки (плавание, подвнеание на горизонтальном стержне). Следует отметить, чте нам не удалось выявить различий между животными опытной и контрольной групп по всем указанным тестам. Однако у самок 1-й группы родилось крысят на 18 % меньше, чем у животных 3-й, 4-й и контрольной групп (различия недостоверны), что, возможно, связано с дородовой гибелью эмбрионов. Установлено также, что крысята, родившиеся от самок 1-й группы, держались на воде на 28 % времени меньше, чем животные остальных опытных и интактной групп (Я<0,05). В пробе с подви-санием на горизонтальном стержне не зафиксировано различий между сравниваемыми группами.
Данные гистологического исследования свидетельствовали о развитии патологических изменений в организме крыс и плодов. В стенке пищевода, желудка, миокарде и головном мозге крыс имелись признаки нарушения кровообращения, что проявлялось резким полнокровием сосудов и отеком ткани. Были выражены дистрофические изменения в мышечных волокнах сердца и нервных клетках головного мозга. В яичниках и плаценте обнаружены полнокрови^ сосудов и отек. 1Щ
При исследовании плодов отмечены резкое нарушение процесса кровообращения (полнокровие сосудов, отек, множественные обширные кровоизлияния), а также признаки уродства — гидроцефалия и отставание в развитии одного из парных органов (полушарий головного мозга, глаз, почек).
С уменьшением дозы диурона до 36 мг/кг ('/|оо LDso) ответная реакция организма животных на воздействие токсического агента снизилась. В то же время средняя масса и размер эмбрионов были достоверно ниже контрольных. При макроскопическом изучении внутренних органов эмбрионов выявлены единичные случаи кровоизлияний в головной мозг и печень, расширение почечных лоханок и желудочков головного мозга, у 3 % эмбрионов 2-й группы — недоокостенение основания черепа.
При изучении потомства, родившегося от самок 2-й группы, не установлено различий между животными опытной (36 мг/кг) и контрольной группы по всем изученным показателям. Исключение составила функциональная проба (плавание), при которой крысята держались на воде на 21 % времени меньше, чем ннтактные животные (Р^0,05). При гистологическом исследовании у животных и эмбрионов 2-й группы обнаружены патологические изменения, ана-логичные имевшимся у крыс и плодов 1-й группы, но ин^ тенсивность этих нарушений была несколько ниже. *
^ В результате изучения влияния диурона в дозе 18 мг/кг (Хх> на репродуктивную функцию самок белых крыс
установлено увеличение средней массы плаценты н плацент-но-плодного коэффициента» других изменений по всем проводимым в эксперименте тестам не найдено.
Внутрнжелудочное поступление диурона в дозе 9 мг/кг ('/чоо не сопровождалось статистически достоверным
изменением абсолютного большинства показателей, характеризующих эмбриотоксическое и тератогенное действие химических веществ.
Таким образом, при изучении эмбриотоксического и тератогенного действия диурона установлено, что изучаемый гербицид в дозах 720 и 36 мг/кг обусловливает увеличение внутриутробной гибели плодов, снижение плодовитости, угнетение развития эмбрионов и расстройство кровообращения.
Внутрнжелудочное поступление в организм беременных крыс 3-й группы диурона (18 мг/кг) характеризовалось менее выраженными изменениями, поступление диурона в дозе 9 мг/кг не сопровождалось эмбриотропным действием на организм белых крыс.
Выводы. 1. Воздействующая доза диурона и ответная реакция организма беременной самки и плода находятся в прямой зависимости.
2. Дозы диурона 720 и 36 мг/кг можно характеризовать как действующие на функцию воспроизводства, дозу 18 мг/кг — как минимально действующую, а 9 мг/кг — как недействующую.
ЛИТЕРАТУРА
1. Дыбан А. П., Акимова И. М.. Баранов В. С. — Арх. анат., 1970, № 10, с. 89—100.
2. Методы изучения отдаленных последствий действия химических загрязнений атмосферного воздуха (Экспериментальное и натурное изучение эмбриотропного действия, гонадотропного действия и влияние на женский организм в период беременности). Метод, указания./ Гофмеклер В. А., Красовнцкая М. М., Шепа-рев А. А. и др. Владивосток, 1978.
Поступила 14.03Л4
(ЦЬК 61в-5 + 616-056.431 -02:615.285.7
И. Д. Гадалина, Е. П. Зайцева
ИЗУЧЕНИЕ КОЖНО-РАЗДРАЖАЮЩЕГО И СЕНСИБИЛИЗИРУЮЩЕГО ДЕЙСТВИЯ ПЕСТИЦИДА АЦЕТОХЛОРА
Московский НИИ гигиены им. Ф. Ф. Эрисмана
Использование пестицидов в сельском хозяйстве создает условия для загрязнения ими пищевых продуктов, воды водоемов, почвы и др. В литературе имеется значительное число работ, указывающих на возможность развития раздражающего, сенсибилизирующего эффектов и аллергических заболеваний при воздействии пестицидов [1—3, 6, 7].
Пестициды, попадая на кожу, могут вызывать контактные дерматиты и аллергические поражения кожи. Поэтому в целях гигиенической регламентации пестицидов важна оценка их кожно-раздражающего и сенсибилизирующего действия.
Для оценки данных эффектов проведены исследования с отечественным пестицидом ацетохлором. Это жидкость коричневого цвета. Препаративная форма — 50 % эмльуги-фющий концентрат, не растворяющийся в воде. Ацетохлор заносили 50 морским свинкам на кожу бока в виде 50, 25, 5, 1 и 0,1 % растворов на спирту в количестве 0,2 мл в течение 10 дней. Воспалительную реакцию кожи оценивали по общепринятой пятибалльной системе.
После нанесения 50 % раствора ацетохлора возникла выраженная гиперемия (2—3 балла), в последующем появились отечность, утолщение кожной складки с некротнзацией и изъязвлением. Через 3 сут после прекращения применения раствора корочки подсохли и через неделю отпалн. Рост шерстного покрова был замедленным. При нанесении 25% спиртового раствора отмечалась аналогичная, но менее выраженная картина (реакция кожи 1 —1,5 балла). Менее концентрированный (5%) раствор приводил к гиперемии в 1 балл и слабому шелушению в конце опыта, 1 % раствор вызвал реакцию кожи только у 20 % животных, а 0,1 % раствор не приводил к изменению кожного покрова.
При нанесении этих же растворов 40 белым крысам отмечена реакция в 0,5 балла с последующим шелушением. Таким образом, ацетохлор оказывает раздражающее действие на кожу морских свинок, интенсивность которого снижается при использовании различных разведений.
С целью оценки опасности ацетохлора как возможного аллергена проведены опыты на 50 морских свинках с внут-онкожным и эпикутантным введением ацетохлора. Степень выраженности сенсибилизации животных оценивали с помощью методов специфической аллергоднагностикн — реак-
ций специфической агломерации лейкоцитов и специфического лизиса лейкоцитов (РСАЛ и РСЛЛ соответственно). Определяли содержание эозинофилов в периферической крови, лейкоцитарную формулу, состояние тучных клеток. Последние играют важную роль в патогенезе воспаления, в частности аллергического. При взаимодействии с различными факторами, выступающими в качестве воспалительного агента, они являются одним из существенных внесосудистых факторов в генезе микроциркуляторных расстройств при остром воспалении. В работе применен комплексный подход к морфометрическому анализу тучноклеточной популяции, предложенный Д. Г1. Лннднер и соавт. [5]. С помощью селективной окраски кислых гликозамингликанов 0,1 % водным раствором толундинового синего судили о степени насыщенности тучных клеток гепарином. Морфометрнческие критерии получены на основании подсчета 400 тучных клеток у каждого животного при увеличении 7X20. Проведен морфофункциональный анализ состояния кожи на свежезамороженных срезах (окраска гематоксилином и эозином). Анализ клеточности околососуднстых пространств соединительной тканн осуществлен на пленочных препаратах подкожной клетчатки, окрашенных по Паппенгейму — Крюкову.
В предварительных опытах на морских свинках установлены тестирующая (1%) и сенсибилизирующая (0,5%) концентрации исследуемого вещества. Для специфических тестов в качестве рабочих использовали 0,02 и 0,002 % растворы ацетохлора. Поскольку последний — водонерастворн-мое соединение, предварительно его растворяли в I % спирте, а затем в соответствии с применяемыми методами — в цитрате натрия.
Внутрнкожное введение ацетохлора в дозах 50, 100, 200 мкг в 0,02 мл с последующим кожным тестированием не вызвало положительной кожной реакции в ответ на провокационную пробу. Реакции клеток крови на гаптен были отрицательными. При использовании комплексной схемы сенсибилизации, рекомендуемой для слабых аллергенов (внутрнкожное введение 250 мкг ацетохлора с последующим 7-кратным нанесением ацетохлора на кожу) через 24 ч после провокационной капельной кожной пробы выявлена гиперемия в 1—1,5 балла. Отмечено статистически досто-
