CC BY
35
толстом к прямой кишки в Москве за период 1971- 1987 гг. Заболеваемость раком толстой кишки в Москве возросла с 9,6 (мужчины) и 7,6 (женщины) в 1971 г. до 16,0 (мужчины) и 12,5 (женщины) в 1987 г., раком прямой кишки — с 9,7 (мужчины) и 6,9 (женщины) в 1971 г. до 12,5 (мужчины) и 8,2 (женщины) в 1987 г., при этом тренды заболеваемости раком толстой кишки оказались статистически значимы как для мужчин, так и для женщин, а прямой кишки только для мужчин [1].
Профилактика рака легкого, желудка, молочной железы и шейки матки, основных форм злокачественных опухолей в СССР, имеет большое значение для здравоохранения страны. Для предотвращения дальнейшего роста заболеваемости раком легкого наиболее эффективными являются меры по борьбе с курением. Увеличение потребления свежих фруктов и овощей скорее всего будет способствовать дальнейшему снижению заболеваемости раком желудка и предотвращению развития некоторых других форм злокачественных новообразований, равно как улучшение технологии заготовки и хранения продуктов, а также сокращение потребления соленых, маринованных и копченых продуктов. Сокращение потребления жиров или жиросодержащих ингредиентов питания до уровня, обеспечивающего не более чем 20—25 % вклад в поступление калорий, могло бы предотвратить дальнейший рост заболеваемости раком молочной железы и раком толстой кишки в СССР. Наконец, скрининг может быть важным средством для снижения смертности от рака молочной железы и шейки матки.
ЛИТЕРАТУРА
1. Заридзе Д. Г., Филипченко В. В , Басиева Т. X. // Вопр. онкол. - 1990,- № 5,— С. 523—528.
2. Земляная Г. М., Заридзе Д. Г. // Экспер. онкол.— 1990.— № I - С. 11 — 16.
3. Brinton L. A., Fraumeni J. F. // J. chron. Dis.— 1986.— Vol. 39.— P. 1051 — 1060.
4. Bi>yle P., Leake R. E. // Breast Cancer Research Res. Treat — 1988,—Vol. 11.— P. 91 —112.
5. Correa P. j j Cancer Res.— 1988.— Vol. 48.— P. 3554— 3560.
6. Zaridze D. G., Dvoirin V. V., Kobljakov V. A.,Pisclov V. V. // IARC Scientific Publication N 74, IARC.— Lyon, 1986.— P. 75—86.
7. La Veccia C., Negri E., Decarli A. et al. j I Int. J. Cancer.— 1987,— Vol. 4,— P. 484—489.
8. Muir C., Waterhouse JVack T. et al. // Cancer Incidence in Five Continents. Vol. 5. IARC Scientific Publications N 88, IARC.— Lyon, 1988.
9. Waterhouse J., Muir C., Shanmugaratham K., Powel J. // Cancer Incidence in Five Continents. Vol. 4. IARC Scientific publication N 42, IARC.— Lyon, 1982.
Поступила 13.04.90
INCIDENCE OF SOME SITES OF CANCER IN THE USSR: PATTERNS AND TRENDS
D. G. Zaridze, Т. H. Basieva
The most frequent sites of malignant tumours in the USSR are lung, stomach, breast and cervical cancer. In men incidence of lung cancer is the highest; the second most frequent cancer in men is stomach cancer. In females breast cancer stands as the first among all malignant tumours, followed by stomach and cervical cancer. Incidence of lung and breast cancer is increasing, while incidence of stomach and cervical cancer decreases. There is an important geographical variation in incidence of malignant tumours in Soviet Union, differences for lung and stomach cancer between high and low incidence areas being 4-fold for breast cancer 3-fold and for cervical cancer 2-fold. The paper presents the results of time-trend analysis of the incidence of lung, stomach, breast and uterine cervix cancer in six Soviet republics (Byelorussia, Estonia, Georgia, Latvia, Lithuania, Moldavia) for the period from 1971 to 1987.
Экспериментальные исследования
© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 1990 УДК 615.277.3-015
Н. И. Зимакова, Е. А. Серебрякова, А. П. Будько, А. Е. Золотарев, Е. Ф. Симонов
ПРЕДКЛИНИЧЕСКОЕ ИЗУЧЕНИЕ ФАРМАКОКИНЕТИКИ 3Н-ТЕСТИФЕНОНА ПРИ ПЕРОРАЛЬНОМ ПРИМЕНЕНИИ
НИИ экспериментальной диагностики и терапии опухолей, МГУ им. М. В. Ломоносова
Противоопухолевый препарат тестифенон (170-[п-ди (2-хлорэтил) -аминофенилацетат] дигидротестостерона,дистрон) относится к группе противоопухолевых соединений — гормоноцитостати-ков — и его действие на организм обусловлено проявлением свойств, входящих в состав препарата алкилирующих групп хлорфенацила и стероидной части — андрогена дигидротестостерона [3, 4].
В процессе I фазы клинического изучения 5 % масляного раствора тестифенона для подкожных инъекций было выявлено побочное действие препарата в виде местнораздражающей реакции. По этой причине испытания противоопухолевого гормоноцитостатика в клинике были приостанов-
лены и продолжены экспериментальные исследования, направленные на разработку новой лекарственной формы препарата для перорального способа применения.
Целью данной работы было изучение фармакокинетики тестифенона у мышей при пероральном однократном и курсовом (пятикратном) введении препарата.
Материалы и методы. Меченный тритием тестифенон был получен методом термической активации газообразного трития [2]. Очистку радионуклида проводили с помощью хроматографии на колонках, заполненных силикагелем L40/100 («СНетароЬ, ЧССР), элюировали смесью хлороформ—бутилацетат в отношении 9:1. Для контроля за радиохимической чистотой препарата использовали метод тонкослойной хроматографии (ТСХ) на готовых хроматографических пластинках БПиГо1 иУ-254 в системе растворителей бензон —хлороформ—этилацетат в отношении 5:1:1 с последующим сканированием хроматограмм на автоматическом сканере «Вег(о1(1» (ФРГ).
После очистки !Н-тестифенона от побочных радиоактивных соединений получали препарат с молярной радиоактивностью 8—20 ГБк/ммоль. Сравнение 'Н-ПМР спектров 3Н-тес-тифенона и исходной субстанции показало, что замещение протия на тритий происходит в дигидротестостероновом фрагменте молекулы без изменений в хлорфенацильной части.
Эксперименты проводили на мышах-самках линии ВОР[ массой 20—25 г. Препарат вводили перорально однократно в 0,35% масляном растворе в дозе 30 мг (10,4 МБк)/кг или
1пс(0
Рис. I. Фармакокинетика 3Н-тестифенона в крови мышей при однократном пероральном введении в дозе 30 мг (10,4 МБк) /кг.
По оси абсцисс — время, ч; по оси ординат — логарифм концентрации во времени. !п С (О.
пятикратно через 24 ч в 0,2 % масляном растворе в дозе 30 мг (13,2 МБк)/кг. Животных группировали по 3 на каждую временную точку, отбирали кровь и органы через
0,25, 0,5, 1, 1,5, 3, 5, 8, 24, 48, 72, 168, 192, 216, 288 ч после однократного введения 3Н-тестифенона и через 24 ч после каждого введения препарата при курсовом применении. Сбор мочи и фекалий проводили в течение 9—10 дней в интервалах времени 0—24, 24—48, 48—72, 72—96, 96—120, 120—144, 144—168, 168—192, 192—216, 216—240 ч. Расчеты фармакокинетических параметров проводили по программе на ЭВМ «Искра-226» с графопостроителем ЯоЬо1гоп. Степень соответствия экспериментальных данных и функции, аппроксимирующей процесс выведения радиоактивных соединений из крови, оценивали методом наименьших квадратов.
Резул-ьтаты и обсуждение. Фармакокинетическая, кривая, характеризующая изменение суммарной концентрации 3Н-тестифенона и его меченых метаболитов, имеющих в своей структуре фрагменты молекулы дигидротестостерона, в крови мышец (рис. 1), носит трехфазный характер, дифференцируются периоды всасывания, распределения и выведения Н-соединений. Максимальные концентрации радиоактивных веществ, составляющие 6—8 -104 (1рт/мл крови (при дозе 16-106 с1рт), наблюдали в течение 8—24 ч после введения 3Н-тестифенона. Затем уровень радиоактивности медленно снижался и к 96 ч устанавливалась моноэкспоненциальная фаза кинетического процесса.
Необходимо отметить монотонность изменений концентрации 3Н-соединений в крови животных: через 15 мин и через 12 сут после введения 3Н-тестифенона уровни радиоактивности составляют соответственно 42 и 28 % от максимального значения.
Фармакокинетические данные были проанализированы в рамках двухчастевой модели со всасыванием со следующими параметрами: полуперио-дами всасывания, распределения и выведения, равными соответственно 5,08, 12,8 и 223,3 ч, площадью под фармакокинетической кривой (АиС), равной 21,4-10б с1рт-мл_|-ч, общим и ренальным клиренсами (С1Т и С1к), составляющими соответственно 0,66 и 0,2 мл-ч_|. Экспериментальная кривая, описывающая динамику Н-тестифенона и его метаболитов в крови, удовлетворительно описывалась трехэкспоненциальным уравнением:
С(0=4,77е“°'ппз-/ + 3,96 е”,м)53-'—5,24 о " ;
Анализ фармакокинетических параметров показывает, что процессы всасывания, распределения и выведения, характерные для 3Н-тестифенона, замедлены во времени и, по-видимому, определяются кинетическими свойствами гормонального фрагмента молекулы препарата [1].
Величина объема распределения (200 мл) почти на порядок превышает объем тела животного и свидетельствует о высокой степени связывания препарата с элементами крови и тканей. Результаты анализов экстрактов крови животных хлороформом с помощью метода ТСХ с последующим сканированием хроматограмм, а также с применением высокоэффективной жидкостной хроматографии показали отсутствие в образцах 3Н-тес-тифенона в неизмененном виде, что коррелирует с данными по образованию обратимых комплексов дигидротестостерона с белками и форменными элементами крови [5].
В органах и тканях животных максимальные концентрации 3Н-тестифенона и его меченых метаболитов отмечались в течение 24—48 ч после введения препарата. Затем наблюдалось двухфазное снижение содержания радиоактивных веществ во всех объектах исследования, за исключением лимфоузлов, яичников, матки и тимуса, где происходило удерживание 3Н-соединений в течение 12 сут на уровнях, близких к максимальным.
В табл. 1 представлены фармакокинетические параметры: АиС и МИТ для органов и тканей, характеризующие тропность 3Н-тестифенона и его метаболитов к изученным объектам. Органы и ткани расположены в порядке убывания величин представленных показателей.
Как видно, только для лимфоузлов, тимуса и матки получено превышение величины как АиС, так и МИТ над значениями, рассчитанными для крови. В то же время фармакокинетические кривые, характеризующие отделы желудочно-кишечного тракта, печени и кожи, имеют большую АиС, чем у крови, а яичники и жировая ткань — более высокие значения М1?Т. Особенно высокие удельные концентрации 3Н-соединений наблюдали в желчи.
Очевидно, что временные параметры фармакокинетики 3Н-тестифенона в органах и тканях также определяются гормональным фрагментом молекулы препарата — дигидротестостероном, для которого характерны процесс накопления в крови и
Таблица I
Фармакокинетические параметры 3Н-тестифенона и его метаболитов для органов и тканей после однократного перорального введения в дозе 30 мг (10,4 МБк)/кг
Орган, ткань АиС- 10~3, (ірт • г~1 - ч Орган, ткань . мт, 'і
Желчь 225 Яичники 159,7
Слепая кишка 63 Лимфоузлы 157,6
Желудок 53 Жировая ткань 148,8
Лимфоузлы 38,7 Тимус 148,7
Тонкий кишечник 14,5 Матка 147,5
Матка 14,0 Кровь 120
Кожа 13,0 Брыжейка 114,6
Тимус 12,0 Селезенка 106,2
Печень 11,0 Печень 106,7
Кровь 10,5 Мозг 105,6
Яичники 10,3 Кожа 104,3
Толстый кишечник 10,2 Почки 91,6
Мозг 9 Толстый кишечник 85,4
Брыжейка 8,7 Тонкий кишечник 76,6
Почки 8,7 Желчь 65,7
Селезенка 8,5 Желудок 44,8
Жировая ткань 8,3 Слепая кишка 43,8
Примечание. М{?Т — среднее иремя удерживания.
арт^Ю4
Рис. 2. Скорость изменения количества 3Н-тестифенона и 3Н-метаболитов в содержимом различных отделов желудочно-кишечного тракта.
По оси абсцисс — время, ч; по оси ординат — число 3Н'Соедииений, <1рт.
I — желудок, 2 — тонкий кишечник, 3 — толстый кишечник.
органах-мишенях, продолжающийся соответствен-но в течение 24 и 48 ч после введения, а также медленная экскреция с мочой в течение 7 дней и окончательная элиминация из организма через 3 нед [1].
Параллельно с изучением кинетики 3Н-тестифе-нона и его метаболитов в крови, органах и тканях было проведено количественное определение радиоактивных соединений в содержимом различных отделов желудочно-кишечного тракта, кале и моче. Как видно из рис. 2, процесс эвакуации препарата из желудка характеризуется бифункциональной зависимостью количества 3Н-тестифено-на, определяемого в его содержимом в разные интервалы времени после введения радиоактивного соединения. Так, через 24, 48, 72 ч уровни радиоактивности составляли соответственно 30, 13 и 4 % от введенной дозы. В тонком кишечнике, где, по-видимому, происходит всасывание гормо-ноцитостатика, максимальный уровень радиоактивности, составляющий около 17 % от введенной дозы, определяли через 3 ч после начала эксперимента. К 24 ч количество радиоактивных соединений снижалось до 2 %. В толстом кишечнике максимальные значения, составляющие около
II % от введенной дозы, определяли через 24 ч. В дальнейшем наблюдали снижение радиоактивности содержимого кишечника: более быстрое — до 96 ч и медленное — до конца периода наблюдения (288 ч). Эти данные коррелировали с содержанием радиоактивных соединений в кале животных.
На рис. 3 представлены диаграммы выведения 3Н-тестифенона и его метаболитов с мочой и калом после перорального введения 3Н-тестифенона.
За 12 сут было выведено 64 % радиоактивности (36 % с калом и 28 % с мочой), основное количество Н-тестифенона и его метаболитов выводилось из организма животных за 72 ч. Хроматографический анализ 3Н-соединений, экстрагированных хлороформом из фекалий, полученных в течение 24 ч после введения препарата, показал наличие шести радиоактивных соединений, в том числе неизмененного 3Н-тестифенона, количество которого составляло около 10 % от выведенной радиоактивности. В моче 3Н-соединения находились в основном в виде полярных соединений, являющихся, по-видимому, конъюгатами препарата с. глюкуроновой кислотой, которые обычно образуются при биотрансформации ряда эндоген-
Рис. 3. Выведение 3Н-соединений с мочой и калом после.однократного перорального введения 3Н-тестифенона мышам в дозе 30 мг (10,4 МБк) /кг.
I — моча 28 % (за 10 сут): 2 — кал 36 % (за 10 сут).
ных субстратов, в том числе и стероидных гормонов.
При изучении распределения и накопления 3Н-тестифенона в организме животных при 5-дневном лечении определяли концентрации препарата в различных органах через сутки после введения каждой следующей дозы тестифенона (табл. 2). Во всех исследуемых объектах наблюдалось постепенное повышение концентрации радиоактивных соединений, однако после пятого введения значения концентрации 3Н-тестифенона для большинства органов не менялись по сравнению с таковыми, полученными после четвертого введения, что указывало на достижение насыщения организма препаратом. Исключение составляли лимфоузлы, где концентрация гормоноцитостатика продолжала повышаться. По-видимому, это связано с наличием свободных рецепторов, позволяющих накапливать препарат в лимфоидной ткани, и свидетельствует об эндолимфатическом пути всасывания гормоноцитостатика.
При курсовом введении 3Н-тестифенона происходило замедление абсорбции препарата в желудке. Так, если через 24 ч после первого введения 3Н-тестифенона в желудке определяли около 8 мкг препарата, то после пятого введения —
Таблица 2
Концентрация [С] 3Н-тестифенона в органах (при 5-кратном ежедневном введении) в дозе 30 мг (13,2 МБк)/кг через 24 ч после каждого введения
Орган [С] ■ 10~3, ёрт-г~!
день введения
1-й 2-й 3-й 4-й 5-й
Кровь 19,9 74,6 154,9 214,2 238,1
Печень 28,6 102,4 158,8 263,6 234,6
Почки 37,6 63,2 190,4 393,5 309,0
Яичники 63,4 65,9 211,9 304,8 280,0
Селезенка 23,1 64,9 204,6 346,1 320,2
Матка 68,7 111,8 258,4 297,4 334,2
Тимус 92,5 104,4 249,1 654,6 373,8
Лимфоузлы 70,9 50,3 208,0 300,6 733,6
Желудок 357,3 612,4 461,5 825,7 937,8
Тонкий кишечник 106,9 132,5 156,0 375,1 360,3
Толстый кишечник 115,3 124,8 239,2 516,4 330,4
Таблица 3
Выведение 'Н-тестифенона и 3Н-метаболитов с мочой и калом при курсовом (5-дневном) пероральном введении в дозе 30 мг (13,2 МБк)/кг
Время, ч Выведение препарата, % от введенной дозы
с мочой с калом всего
24 6,8 5,8 12,6
48 15,3 11,4 26,7
72 15.1 14,8 29,9
96 17,9 16,2 34,1
120 15,5 17,2 32,7
430 мкг, что составляло соответственно 1 и 60 % от однократно введенной дозы. При этом наблюдалось увеличение объема желудка и истончение его стенки. Кроме того, в течение 5 сут происходили увеличение массы печени и почек соответственно на 40 и 30 % и дистрофические изменения тимуса, селезенки и яичников на 80, 65 и 50 % соответственно. Токсическое действие препарата и его метаболитов на тимус, селезенку и яичники связано с тропностью препарата к гормонозависимым органам и согласуется с ранее описанными данными о его лимфоцитолитическом действии и ингибирующем влиянии на функцию яичников. Увеличение массы почек является, по-видимому, следствием ренотропного действия андрогенов у грызунов. Токсическое действие препарата на печень и увеличение ее массы следует связать с затруднением эвакуации препарата из желудка и недостаточностью пищеварения.
В табл. 3 представлены данные по выведению 3Н-тестифенона и 3Н-метаболитов с мочой и калом при курсовом 5-дневном введении 3Н-препарата. 3Н-соединения выводятся в равной степени с мочой и калом. Через 24 ч после первого введения было выведено 12,6 %, затем через 24 ч после каждого последующего введения величина суммарной радиоактивности экскрементов составляла около 30 % от общей введенной дозы 3Н-тестифенона. Таким образом, для тестифенона характерна медленная эвакуация из желудочно-кишечного тракта и медленная элиминация из органов и тканей животных. После однократного введения препарата удельные концентрации 3Н-сбединений в лимфоузлах, тимусе, яичниках и матке в течение 12 сут изменяются незначительно. При курсовом 5-днев-ном применении 3Н-тестифенона происходит накопление 3Н-соединений в органах и тканях с достижением в ряде случаев насыщения к пятому введению препарата. Поступление 3Н-тестифенона в организм осуществляется, по-видимому, за счет эндолимфатическоГо пути, о чем свидетельствуют низкие концентрации Н-соединений в крови, незначительный процент выведения препарата в неизмененном виде с экскрементами и высокие уровни 3Н-радиоактивности в лимфоузлах.
ЛИТЕРАТУРА
1. Алексина М. /О., Тимофеева Л. А. // Всесоюзное совещание «Актуальные проблемы экспериментальной химиотерапии опухолей», 3-е: Материалы.— Черноголовка, 1987.— С. ! 63-166.
2. Зимакова Н. И., Будько А. П., Серебрякова Е. А. и др. // Всесоюзное совещание «Физиологически активные соединения, меченные радиоактивными и стабильными изотопами», 2-е: Материалы.— Звенигород, 1988.
3. Лагова Н. Д. // Вопр. онкол.— 1982.— № 5.— С. 38—42.
4. Лагова Н. Д., Софьина 3. П., Шкодинская Е. Н. и др. //
Там же,—№ 11,— С. 1363—1369.
5. Розен В. Б. Основы эндокринологии.— М., 1984.
Поступила 25,12.89
PRECLINICAL STUDY OF 3H-TESTIFENON PHARMACOKINETICS WHEN IT IS ADMINISTRATED FOR ORAL
N. I. Zimakova, E. A. Serebryakova, A. P. Bydjko, A. E. Zolotarev, E. F. Simonov
The kinetics of radioactive 3H-testifenon compounds in blood is described by three—exponential equation. The maximum concentration of radioactivity in the blood is registered 24 hr after the drug administration. The maximum concentration of radioactive 3H-testifenon compounds in organs and tissues is observed after 24—48 hr, then a two-phase decrease of radioactivity takes place in all objects, except lymph nodes, ovaries, uterus and thymus. Radioactive compounds are retained for a long time in organs and tissues (observation — 12 days). Radioactive compounds of 3H-testifenon are excreted with urea and excrements. The basic amount of the compounds after a single-dose administration is eliminated from the organism in 72 hr, although the process of elimination is rather prolonged (observation— 10 days). A course of 5-days administration of the drug leads to the accumulation of radioactivity in organs up to the 4th administration. Further introduction of 3H-testifenon does not cause an increase in the concentration of radioactivity in organs — except lymph nodes.
© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 1990 УДК 616.15+615.381(048)
К■ Л. Чимишкян, И. А. Карпов, В. Н. Кострыкина,
Г. Ш. Овумян, Д. М. Мхеидзе, А. Ю. Барышников
ЭЛИМИНАЦИЯ ОПУХОЛЕВЫХ КЛЕТОК ИЗ КОСТНОЮ МОЗГА МЫШЕЙ EX VIVO
НИИ клинической онкологии
В последние годы в онкологическом практике отмечается повышение интереса к проблеме трансплантаций костного мозга (КМ). При ряде нозологических форм злокачественных новообразований увеличение доз противоопухолевых препаратов и/или облучение позволяют получать длительные ремиссии и излечение части больных даже на поздних стадиях заболевания [5, 6, 10, 14]. Однако максимально переносимая доза для многих химиопрепаратов лимитирована гематологической токсичностью, приводящей к гипо- и апла-стическому состоянию КМ. Трансплантация кроветворной ткани в этих случаях сокращает сроки цитопении и уменьшает риск проявления осложнений, угрожающих жизни больного.
При гемобластозах, в частности при острых лейкозах, трансплантация КМ применяется как способ радикальной терапии заболевания [8, 11].
Источником получения кроветворной ткани могут быть сингенный (от идентичного близнеца) КМ, аллогенный — полученный от HLA-совмести-мого донора, аутологичный — полученный от больного и хранящийся в замороженном состоянии, а также циркулирующие стволовые кроветворные клетки (СКК).
Настоящая работа посвящена изучению возможности использования для вышеуказанных целей аутологичного или сингенного КМ, который получают у больного до проведения высокодоз-ной химиолучевой терапии и затем трансплантируют пациентам для восстановления необратимо поврежденного гемопоэза. Проблема, однако, заключается в том, что аутологичным КМ может
