CC BY
8УДК 616.211 + 616.315.1:576.8.077.3
ИЗУЧЕНИЕ ЭКСПРЕССИИ ГЕНА БЕТА-ДЕФЕНСИНА-1 ЧЕЛОВЕКА В СЛИЗИСТОЙ ОБОЛОЧКЕ ВЕРХНИХ ДЫХАТЕЛЬНЫХ ПУТЕЙ
Е. В. Тырнова, Г. М. Алёшина, В. Н. Кокряков
INVESTIGATION OF HUMAN BETA-DEFENSIN-1 GENE EXPRESSION IN THE UPPER AIRWAY MUCOSA
E. V. Tyrnova, G. M. Aleshina, V. N. Kokryakov
ФГБУ «Санкт-Петербургский научно-исследовательский институт уха, горла, носа и речи
Минздрава России»
(Директор - засл. врач РФ, член-корр. РАМН, проф. Ю. К. Янов)
ФГБУ «Научно-исследовательский институт экспериментальной медицины СЗО РАМН», Санкт-
Петербург
(Директор - засл. деятель науки РФ, акад. РАМН, проф. Г. А. Софронов)
Бета-дефенсин-1 человека (hBD-1) считают одним из самых значимых антимикробных пептидов в эпителиальных тканях. Цель работы: оценить экспрессию гена hBD-1 в поверхностном эпителии слизистой оболочки верхних дыхательных путей. Исследован операционный материал от больных хроническим декомпенсированным тонзиллитом (n = 4), гипертрофией аденоидов (n = 4), заболеваниями носа и околоносовых пазух (n = 8) (носовые полипы, нижние носовые раковины в качестве контроля). Оценку экспрессии матричной рибонуклеиновой кислоты (мРНК) hBD-1, а также мРНК бета-2-микроглобулина проводили методом обратной транскрипции полимеразной цепной реакции в режиме реального времени. мРНК hBD-1 была экспрессирована во всех анализированных образцах ткани на уровнях, которые достоверно не различались (р > 0,05; тест Манна-Уитни). hBD-1 конститутивно экспрессирован в эпителии верхних дыхательных путей и не индуцируется воспалительными медиаторами и бактериальными стимулами.
Ключевые слова: аденоиды, бета-дефенсин-1 человека, небные миндалины, нижние носовые раковины, носовые полипы, полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.
Библиография: 26 источников.
Human beta-defensin 1 (hBD-1) is probably the most important antimicrobial peptide in epithelial tissues. The aim of this study was to investigate the hBD-1 gene expression in the surface epithelium of the upper airway mucosa. Surgical samples from patients with chronic decompensated tonsillitis (n = 4), hypertrophic adenoids (n = 4) and sinonasal disease (n = 8) (nasal polyps, inferior turbinate mucosa as controls) were investigated. Estimation of hBD-1 messenger ribonucleic acid (mRNA) as well as beta-2-microglobulin mRNA expression was performed by real-time quantitative reverse-transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR). hBD-1 mRNA was expressed in all tissue specimens, at levels that did not differ significantly (р > 0,05; Mann-Whitney). hBD-1 was expressed constitutively in the upper airway epithelia and was not induced by inflammatory mediators or bacterial products.
Key words: adenoids, inferior turbinate, human beta-defensin-1, nasal polyps, real-time quantitative polymerase chain reaction, tonsils.
Bibliography: 26 sources.
Постоянная борьба между макроорганизмом и патогенами на протяжении эволюции привела к возникновению тонко регулируемой системы защиты, включающей у человека и позвоночных животных врожденный (паттерн-специфический) и адаптивный (антиген-специфический или приобретенный) иммунитет [2, 15].
Одним из компонентов иммунной системы защиты организма на поверхности слизистых оболочек считают антимикробные пептиды (АМП) эпителиального происхождения [6], которые играют основную роль в формировании врожденных иммунных и воспалительных реакций [2, 15]. Помимо своего прямого антимикробного действия, АМП обладают множественной ролью в качестве медиаторов воспаления, действующих на эпителиальные
и иммунные клетки, оказывают влияние на такие разные процессы, как пролиферация, индукция иммунитета, заживление ран, освобождение цитоки-нов, хемотаксис, протеазо-антипротеазный баланс (равновесие) и окислительно-восстановительный гомеостаз [6, 15]. Антимикробные пептиды - это эффекторные (исполнительные) молекулы врожденного иммунитета с прямой антимикробной и медиаторной функциями, обеспечивающие реализацию инициальных (неотложных) защитных реакций организма [2, 6].
У человека идентифицированы пептидные антибиотики трех семейств: дефенсины (альфа и бета), кателицидины и гистатины. Первый бета-дефенсин человека, получивший название human beta-defensin-1 (hBD-1), впервые выделен в 1995 г.
путем биоскрининга и функционального анализа антимикробной активности из большого объема (несколько тысяч литров) гемофильтрата [12], установлена конститутивная экспрессия гена на уровне транскрипции (образования мРНК) в эпителиальных клетках мочеполового и дыхательного трактов [17].
Первичная структура hBD-1 включает 36 аминокислотных остатков, из которых 36% гидрофобные, заряд молекулы +5 [24]. В микромолярных концентрациях hBD-1 обладает способностью убивать или инактивировать грамположитель-ные и грамотрицательные бактерии, некоторые грибки, оболочечные РНК- и ДНК-вирусы. Это происходит либо путем прямого контакта hBD-1 с микроорганизмами, либо косвенно, путем запуска ряда врожденных и адаптивных иммунных реакций [2, 6]. Механизм антимикробной активности объясняют электростатическими взаимодействиями между отрицательно заряженной бактериальной стенкой и положительно заряженным пептидом и последующим встраиванием пептида в мембрану клетки-мишени за счет гидрофобных взаимодействий, что приводит к формированию в мембране пороподобных структур, нарушающих целостность мембраны. Микробоцидное действие бета-дефенсина-1 человека реализуется вследствие нерегулируемого нарушения проницаемости липидного бислоя мембраны микробной клетки и последующего выхода ее содержимого наружу [2, 6, 11, 15, 25]. Антимикробную активность hBD-1 снижают повышенные концентрации солей, например 100 ммоль №С1 или 2 ммоль Са2+, присутствующие во многих средах организма [2, 14].
В дополнение к антимикробной активности, бета-дефенсин-1 человека обладает способностью связываться с липополисахаридом - маркерным компонентом внешнего слоя наружной мембраны грамотрицательных бактерий, и инак-тивировать функциональную активность этого эндотоксина [6].
Подобно другим бета-дефенсинам, hBD-1 способен стимулировать экспрессию провос-палительных цитокинов, хемокинов (Ш-8) и де-грануляцию тучных клеток, которые являются медиаторами врожденного и адаптивного иммунитета. hBD-1 является мощным лигандом-хемоаттрактантом-«микрохемокином», который привлекает незрелые дендритные клетки и индуцирует миграцию CD45RO/CD4+ Т-клеток памяти путем специфического взаимодействия с рецептором хемокинов CCR6 [18], что также обеспечивает связь между врожденным и адаптивным иммунитетом.
Некоторые исследователи рассматривают бе-та-дефенсин-1 в качестве кандидата на роль су-прессора опухолей, обнаружена специфичная для
рака утрата экспрессии hBD-1 в 90% карциномы почек и 82% рака предстательной железы, которая указывает, что hBD-1 может обладать противоопухолевым действием, а его утрата может способствовать опухолевой прогрессии в онкогенезе предстательной железы [10].
Поскольку пептидные антибиотики животного происхождения считают компонентами иммунной защиты организма, экспрессия их генов тщательно регулируется [6]. hBD-1 широко экспрессируется эпителиальными клетками конститутивным образом [26], но в некоторых эпи-телиях экспрессия hBD-1 в небольшой степени индуцируется под влиянием воспалительных стимулов [18, 21]. В эпителии нижних дыхательных путей ген hBD-1 экспрессирован конститутивно на уровне транскрипции (образования мРНК) и не индуцируется воспалительными медиаторами или бактериальными продуктами [17].
Полагают, что бета-дефенсин-1 человека - один из самых значимых антимикробных пептидов в эпителиальных тканях. Его аллели и (или) измененная экспрессия гена ассоциированы, по крайней мере с 20 заболеваниями человека, включая аллергию, инфекции и рак. Кодирующий hBD-1 ген DEFB1 - единственный ген врожденного иммунитета, который показал долгосрочный уравновешенный (рациональный) отбор и преимущество гетерозиготного состояния. Уникальностью конститутивной экспрессии hBD-1 является способность к повышающей регуляции в ответ на воспалительные или микробные стимулы [20].
Хотя исследователи первоначально концентрировали свое внимание на антибиотическом действии, теперь уже становится ясно, что hBD-1 - это многофункциональная молекула, которая может опосредовать разнообразные иммунные реакции макроорганизма и потому представляет собой неотъемлемый молекулярный компонент системы врожденного иммунитета человека.
Эпителий дыхательных путей рассматривают в качестве органа с иммунными функциями, для которого описана способность распознавания (детекции) микроорганизмов и индукции воспалительных и защитных иммунных реакций, включая секрецию антимикробных пептидов в качестве эффекторных молекул [6]. Антимикробные пептиды дыхательных путей могут быть индуцированы различными стимулами и сигнальными метаболическими путями, и могут иметь различные функции в качестве эффекторных молекул. Для АМП, которые экспрессированы на сильно колонизированной поверхности слизистой оболочки верхних дыхательных путей (ВДП), должны существовать механизмы, которые допускают сосуществование с нормальной микробиотой [5]. Врожденный иммунитет, основанный на анти-
биотических пептидах, может быть определяющим фактором отбора нормальной микробиоты поверхности слизистой. Дополнительным фактором экспрессии (выработки) этого пептида эпителиальными клетками может быть ее индукция сигналами окружающей среды или воспалительными стимулами [5].
Цель исследования. Оценить экспрессию гена бета-дефенсина-1 человека в слизистой оболочке верхних дыхательных путей больных хроническим декомпенсированным тонзиллитом, гипертрофией аденоидов, заболеваниями носа и околоносовых пазух на основе определения мРНК.
Пациенты и методы. Образцы тканей получали во время хирургического вмешательства в условиях общей анестезии и немедленно помещали в консервирующий раствор [RNAlater (Ambion)]. Исследованы три вида тканей: небные миндалины, аденоиды, слизистая оболочка носа (нижние носовые раковины, полипы носа).
Материал получен от 16 больных, в том числе: небные миндалины больных хроническим декомпенсированным тонзиллитом (3 мужчин, 1 женщина, возраст 18-44 лет), подвергнутых тон-зиллэктомии по причине хронического декомпен-сированного тонзиллита (мало или существенно увеличенные миндалины, анамнез хронического тонзиллита); аденоиды больных обструктивной гипертрофией аденоидов (2 мальчика, 2 девочки, возраст 6-8 лет), подвергнутых аденоидэктомии по причине увеличения аденоидов, приводящего к затруднению носового дыхания (назальной обструкции) [1]; носовые полипы больных хроническим полипозным риносинуситом (3 мужчин, 1 женщина, возраст 24-58 лет), подвергнутых по-липэктомии; нижние носовые раковины больных с искривлением носовой перегородки (3 мужчин, 1 женщина, возраст 19-26 лет), подвергнутых септум-операции. Хирургическое лечение было проведено больным в период вне обострения заболевания.
Общую РНК выделяли согласно протоколу Gen Elute Mammalian Total RNA Miniprep Kit и On-
Colum DNase I Digestion Set из поверхностного эпителия исследуемых образцов ткани. Синтез первой цепи кодирующей ДНК (кДНК) из молекул РНК проводили с использованием обратной транскриптазы M-MLV Reverse Transcriptase в присутствии oligo(dT) и dNTPs. Амплификацию с последующим определением уровня экспрессии проводили с использованием набора реактивов iQ SYBR Green Supermix методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с детекцией накопления продуктов реакции в режиме реального времени (45 циклов) с помощью детектирующего амплификатора MiniOpticon и программного обеспечения Opticon Monitor™ версия 3.1 и специфических праймеров. Уровень экспрессии мРНК стандартизировали относительно экспрессии гена бета-2-микроглобулина (табл.). Количество исследуемых кДНК в образцах рассчитывали путем определения дельта CT - разности пороговых циклов гена-мишени и гена внутреннего контроля (housekeeping gene). Относительную экспрессию генов рассчитывали как 2-ДСт и оценивали в условных единицах.
Статистическую обработку данных проводили с помощью программы Prism 5 (GraphPad, Inc) методами описательной статистики с использованием непараметрических критериев различия (тест Манна-Уитни). Значения p < 0,05 рассматривали как статистически значимые.
Результаты и обсуждение. Экспрессия мРНК бета-дефенсина-1 человека обнаружена во всех исследованных образцах ткани как респираторного эпителия нижних носовых раковин (псевдомногослойный эпителий, состоящий из мерцательных, бокаловидных, а также коротких и длинных вставочных эпителиоцитов) и полипов носа, аденоидов (однослойный многорядный мерцательный эпителий респираторного типа с мерцательными и бокаловидными клетками), так и многослойного плоского неороговева-ющего эпителия небных миндалин (рис.), что подтверждает представление о конститутивном характере экспрессии hBD-1. Статистически достоверные различия экспрессии мРНК hBD-1 в
Т а б л и ц а
Секвенс праймеров, использованных для ПЦР амплификации
Показатель Последовательность оснований
Human beta-defensin-1: sense antisense 5'TGCTGTTTACTCTCTGCTTACTTTTGT3' 5' CCAAGGCCTGTGAGAAAGTTACC 3'
Human beta-2-microglobulin: sense antisense 5' CCAGCAGAGAATGGAAAGTC 3' 5' GATGCTGCTTACATGTCTCG 3'
Рис. Относительная экспрессия мРНК бета-дефенсина-1 человека в поверхностном эпителии нижних носовых раковин, аденоидов, небных миндалин, полипах носа.
анализированных тканях отсутствовали, т. е. индукция экспрессии мРНК бета-дефенсина-1 человека в слизистой оболочке носоглотки медиаторами воспаления или бактериальными продуктами не обнаружена.
Слизистая оболочка в пределах каждой системы слизистых и даже внутри различных участков в рамках одной системы слизистых оболочек (например, полость носа, полость среднего уха, верхние или нижние дыхательные пути) имеет отличающиеся функции для организма и разные потребности в отношении иммунной защиты. Некоторые участки обычно стерильные, а другие содержат комменсальные (сосуществующие) бактерии нормальной микробиоты [13].
Известно, что экспрессия hBD-1 в норме в стерильном респираторном эпителии нижних дыхательных путей (бронхи, бронхиолы) конститутивная, hBD-1 экспрессирован диффузно по всей поверхности эпителия и клеток серозных желез стенок дыхательных путей [21]. Пептид детектирован в секретах дыхательных путей (жидкость поверхности дыхательных путей); концентрации находятся в диапазоне мкг/мл [21]. Клетки респираторного эпителия (клетки мерцательного эпителия (реснитчатые эпителиальные клетки), бокаловидные (эпителиальные) клетки, базаль-ные клетки, клетки слизистых и серозных желез) не являются пассивными свидетелями воспалительных процессов, а секретируют эффекторные молекулы, включая антимикробные пептиды. Адаптивный иммунный ответ с его Т-клетками и В-клетками (б^А - секреторный иммуноглобулин А) запускается благодаря инициальным реакциям врожденного иммунитета, опосредуемого дендритными клетками [2, 6].
В отличие от нижних дыхательных путей поверхность слизистой носоглотки сильно коло-
низирована. Полученные нами данные об экспрессии гена hBD-1 в слизистой оболочке ВДП согласуются со сведениями других авторов.
Данные литературы свидетельствуют, что hBD-^ожет играть значимую роль в защитных реакциях носа. Показано, что эпителий носа и подслизистых желез слизистой оболочки носа может секретировать, hBD-1, мРНК hBD-1 в слизистой нижних носовых раковин человека выявляли методом обратной транскрипции и полуколичественной ПЦР. Гибридизация in situ локализовала мРНК hBD-1 преимущественно в поверхностных эпителиальных клетках и подслизистом железистом эпителии слизистой нижних носовых раковин человека без явных объективных признаков воспаления [9]. В слизистой нижней носовой раковины здоровых людей и слизистой нижней носовой раковины и носовых полипов больных хроническим синуситом исследовали экспрессию мРНК hBD-1 методом обратной транскрипции и ПЦР, уровень экспрессии оценивали полуколичественно посредством гибридизации дот блот. мРНК hBD-1 была экспрессирована во всех образцах ткани на уровнях, которые достоверно не различались [4]. При рецидивирующих носовых полипах исследовали экспрессию hBD-1 методом обратной транскрипции и ПЦР в ткани полипов носа, полученных при первичной эндоскопической операции на пазухах, в ткани носовых полипов при рецидивах через 6 месяцев после проведенной операции, в слизистой носа выздоравливающих послеоперационных больных с носовыми полипами и контрольной группы. Отсутствовали достоверные различия уровня мРНК hBD-1 между 4 группами (р > 0,05) [16].
Показана экспрессия бета-дефенсина-1 во всех образцах ткани небных миндалин при хроническом тонзиллите (метод обратной транскрипции и полуколичественной ПЦР) [23]. При исследовании экспрессии и локализации антимикробных пептидов в пределах небных миндалин человека с использованием молекулярно-генетического анализа подтверждено, что все исследованные небные миндалины лиц, подлежавших тонзиллэктомии вследствие нарушения сна (контрольной группы), и больных рецидивирующим острым тонзиллитом являются местом экспрессии бета-дефенсина-1 человека. Иммуногистохимически установлена локализация hBD-1 в эпителии крипт и поверхности миндалин, однако поверхностный эпителий миндалин больных рецидивирующим острым тонзиллитом содержит сниженное количество hBD-1 по сравнению со здоровым контролем [7]. Гибридизация in situ показала, что экспрессия мРНК hBD-1 локализована в поверхностном эпителии небных миндалин без признаков инфекции [8]. Методом иммуногистохимии показано, что hBD-1 секре-
тируется в довольно больших количествах в случаях хронического воспаления (полипоз носа и хронический тонзиллит), а при злокачественной трансформации ткани небных миндалин секреция hBD-1 ограничена [19].
Полагают, hBD-1 действует как молекула базовой защиты в отсутствие инфекции и воспаления [22]. Дыхательные пути обеспечены многочисленными защитными механизмами для предотвращения микробной колонизации большим числом бактерий и вирусов, присутствующих в окружающем воздухе. Угнетение активности или экспрессии генов антимикробных пептидов в дыхательных путях может приводить к повышеннию восприимчивости организма человека к инфекциям. Факторы вирулентности патогенов могут тормозить экспрессию генов де-фенсинов, подобно факторам окружающей среды, как, например, загрязнение атмосферного воздуха. Такая интерференция может иметь результатом заражения специфичными для дыхательных путей патогенами [3].
Высказано предположение, что пептиды иммунной защиты человека, вероятно, обладают прямой антимикробной активностью, когда присутствуют в высоких концентрациях (например, в гранулах нейтрофилов или кишечных криптах), и проявляют заметные иммуномодулирующие свойства, когда находятся в низких концентрациях, в частности после выделения (секреции) и распространения (диссеминации) из этих участков, например на поверхности слизистых. Недостаточная секреция эпителиальными клетками бета-дефенсинов и кателицидина LL-37 приводит к дисбалансу между количеством бактерий просвета органа и концентрациями пептидов иммунной защиты, позволяющему бактериям из состава микробиоты запускать воспаление с ассоциированными прилипанием и инвазией (внедрением) в слизистую [15].
Заключение. Повсеместная детекция экспрессии мРНК бета-дефенсина-1 человека в поверхностном эпителии слизистой оболочки ВДП больных хроническим декомпенсированным тонзиллитом, гипертрофией аденоидов, заболеваниями носа и околоносовых пазух подтверждает конститутивный характер синтеза пептида. Отсутствие различий экспрессии hBD-1 в разных типах эпителия, разных отделах носоглотки, при разных патофизиологических состояниях свидетельствует о том, что в эпителии ЛОРорганов экспрессия мРНК hBD-1, скорее всего, не индуцируется инфекционными и воспалительными стимулами или усиливается в незначительной степени. Возможно, имеет место ингибирование экспрессии hBD-1 в условиях высокого бактериального обсеменения небных миндалин и аденоидов. Отсутствие индуцибельной экспрессии hBD-1 в слизистых оболочках носа, аденоидов, небных миндалин может быть фактором риска повышенной предрасположенности этих групп больных к инфекционно-воспалительным заболеваниям. Сниженное количество АМП может повышать восприимчивость больных к инфекции. Экспрессия бета-дефенсина-1 человека в слизистой оболочке ВДП при гипертрофических и гиперпластических процессах может служить составной частью врожденной иммунной системы, участвующей в распознавании и уничтожении раковых клеток. Дальнейшие исследования позволят уточнить звенья патогенетических механизмов развития хронических воспалительных заболеваний слизистых оболочек верхних дыхательных путей и роль антимикробных пептидов барьерного эпителия в поддержании антимикробной резистентности слизистых оболочек ЛОРорганов, что является необходимым этапом как для понимания гомеостаза слизистой оболочки ВДП, так и для обоснования рациональной антимикробной и противовоспалительной терапии.
ЛИТЕРАТУРА
1. Дроздова М. В., Преображенская Ю. С., Тырнова Е. В. Экссудативный средний отит у детей с хроническим лимфопролиферативным синдромом // Рос. оторинолар. - 2011. - № 4. - С. 62-68.
2. Кокряков В. Н. Очерки о врожденном иммунитете. - СПб.: Наука, 2006. - 261 с.
3. Antimicrobial peptides in the airway / D. M. Laube // Curr. Top. Microbiol. Immunol. - 2006. - Vol. 306. - P. 153-182.
4. Antimicrobial defensin peptides of the human nasal mucosa / S. H. Lee [et al.] // Ann. Otol. Rhinol. Laryngol. -2002. - Vol. 111, N 2. - P. 135-41.
5. Bacterial phosphorylcholine decreases susceptibility to the antimicrobial peptide LL-37/hCAP18 expressed in the upper respiratory tract / E. S. Lysenko [et al.] // Infect. Immun. - 2000. - Vol. 68, N 3. - P. 1664-1671.
6. Bals R. Epithelial antimicrobial peptides in host defense against infection // Respir. Res. - 2000. - Vol. 1, N 3. -P. 141-150.
7. Expression and immunolocalisation of antimicrobial peptides within human palatine tonsils / S. L. Ball [et al.] // J. Laryngol. Otol. - 2007. - Vol. 121, N 10. - P. 973-978.
8. Expression of human beta-defensin 1 mRNA in human palatine tonsil / S. W. Chae [et al.] // Acta Otolaryngol. -2001. - Vol. 121, N 3. - P. 414-418.
9. Expression of human beta-defensin 1 mRNA in human nasal mucosa / S. H. Lee [et al.] // Acta Otolaryngol. - 2000. -Vol. 120, N 1. - P. 58-61.
10. Functional analysis of the host defense peptide human beta defensin-1: new insight into its potential role in cancer / R. S. Bullard [et al.] // Mol. Immunol. - 2008. - Vol.45. - P. 839-848.
Научные статьи
11. Grage S. L., Afonin S., Ulrich A. S. Dynamic transitions of membrane-active peptides Chapter 13 P. 183-207 // Antimicrobial Peptides Methods and Protocols / Ed. A. Giuliani, A. C. Rinaldi. - New York: Springer Science+Business Media, LLC, 2010. - 424 p.
12. hBD-1: a novel p-defensin from human plasma / K. Bensch [et al.] // FEBS Lett. - 1995. - Vol. 368. - P. 331-335.
13. Human defensins and LL-37 in mucosal immunity / M. Doss [et al.] // J. Leuk. Biol. - 2010. - Vol. 87. - P. 79-92.
14. Jenssen H., Hamill P., Hancock R. E. Peptide antimicrobial agents // Clin. Microbiol. Rev. - 2006. - Vol. 19. - P. 491511.
15. Jenssen H., Hancock R.E.W. Therapeutic potential of HDPs as immunomodulatory agents Chapter 20 P. 329-347 // Antimicrobial Peptides, Methods and Protocols / Ed. A. Giuliani, A. C. Rinaldi. - New York, Springer Science+Business Media, LLC, 2010. - 424 p.
16. Liu H. W., He G. X., Sun H. [Expression and significance of human beta-defensin in recurrent nasal polyps] // Zhong Nan Da Xue Xue Bao Yi Xue Ban. - 2008. - Vol. 33, N 12 - P. 1119-1122.
17. McCray P. J., Bentley L. Human airway epithelia express a p-defensin // Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. - 1997. -Vol. 16. - P. 343-349.
18. Multiple roles of antimicrobial defensins, cathelicidins, and eosinophil-derived neurotoxin in host defense / D. Yang [et al.] // Annu. Rev. Immunol. - 2004. - Vol. 22. - P. 181-215.
19. Pacova H., Astl J., Martinek J. The pathogenesis of chronic inflammation and malignant transformation in the human upper airways: the role of beta-defensins, eNOS, cell proliferation and apoptosis // Histol. Histopathol. - 2009. -Vol. 24, N 7. - P. 815-820.
20. Prado-Montes de Oca E. Human beta-defensin 1: a restless warrior against allergies, infections and cancer // Int. J. Biochem. Cell Biol. - 2010. - Vol. 42, N 6. - P. 800-804.
21. Production of p-defensins by human airway epithelia / P. Singh [et al.] // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. - 1998. -Vol. 95. - P. 14961-14966.
22. Underwood M. A., Bevins C. L. Defensin-Barbed Innate Immunity: Clinical Associations in the Pediatric Population // Pediatrics. - 2010. - Vol. 125, N 6. - P. 1237-1247.
23. Wang C., Dong Z., Yang Z. [Expression of human beta-defensin in palatine tonsil] // Lin Chuang Er Bi Yan Hou Ke Za Zhi. - 2004. - Vol. 18, N 3. - P. 129-131.
24. Wang G. Structural studies of antimicrobial peptides provide insight into their mechanisms of action Chapter 9 P.141-168 // Antimicrobial peptides: discovery, design and novel therapeutic strategies (Series: Advances in molecular and cellular microbiology; 18.) / Ed. G. Wang. Chippenham UK, CPI Antony Rowe. - CAB International, 2010. - 230 p.
25. Wiesner J., Vilcinskas A. Antimicrobial peptides // Virulence. - 2010. - Vol. 1, I. 5. - P. 440-464.
26. Zhao C., Wang I., Lehrer R. I. Widespread expression of beta-defensin hBD-1 in human secre-tory glands and epithelial cells // FEBS Lett. - 1996. - Vol. 396. - P. 319-322.
Тырнова Елена Валентиновна - канд. мед. наук, ст. н. с. лабораторно-диагностического отдела Санкт-Петербургского НИИ ЛОР. 190013, Санкт-Петербург, ул. Бронницкая, д. 9. тел.: 8-812-317-84-43, e-mail: tyrno-vaev@mail.ru
Алешина Галина Матвеевна - канд. биол. наук, ст. н. с. отдела общей патологии и патологической физиологии НИИ экспериментальной медицины СЗО РАМН. 197376, Санкт-Петербург, ул. Академика Павлова, д.12. тел.: 8-812-234-07-64, e-mail: galina_aleshina@mail.ru
Кокряков Владимир Николаевич - профессор, докт. биол. наук, руководитель лаборатории общей патологии отдела общей патологии и патологической физиологии НИИ экспериментальной медицины СЗО РАМН. 197376, Санкт-Петербург, ул. Академика И. П. Павлова, д. 12, тел.: 8-812-234-07-64, e-mail: kokryak@yandex.ru
