CC BY
6
Содержание ТХБ (в %) в органах и тканях крыс при многократном внутрижелудочном поступлении (М+т)
Время после введения
Исследуемый объект 1 ч 2 сут 4 сут 7 сут
• •
Желудок 30,40+1,00 74,10+5,50 58,90+5,00 ф 26,60+3,80
Тонкая кишка 5,40+1,00 2,48+0,64 2,95+0,55 3,10 + 1,90
Толстая кишка 0,10+0,03 0,29+0,09 0,21+0,04 0,35+0,21
Жировая ткань 3,083=1,17 7,20+1,00 1,70+1,00 2,90+1,70
к Мышцы 0,90+0,30 3,33+1,05 1,90+0,80 0,85+0,31
Кровь 0,52+0,16 0,41+0,08 0,34+0,11 0,22+0,08
А • ■ Бедро 0,52+0,26 0,46+0,03 0,28+0,05 0,18+0,03
А Печень 0,42+0,20 0,52+0,26 0,60+0,11 0,60+0,17
Головной мозг 0,053+0,024 0,071+0,016 0,078+0,002 0,024+0,006
Селезенка 0,055+0,041 0,025+0,014 0,009+0,001 0,048+0,008
Легкие 0,042+0,009 0,14+0,11 0,045+0,016 0,038+0,016
Почки 0,032+0,003 0,064+0,010 0,079+0,011 0,020+0,004
Яичники 0,018+0,004 0,049+0,019 0,018+0,003 <0,004
Надпочечники 0,015+0,004 0,015+0,019 0,018+0,011 <0,004
Всего
41,57+4,21
89,15+8,82
67,134=7,7
34,93=1=8,23
следующие: колонка стеклянная (2 мХЗ мм), заполненная инертным носителем инертон А\У-НМОБ с 5 % ЭЕ-ЗО, температура колонки 160°С, температура испарителя 200°С, температу )а детектора 230 °С, скорость газа-носителя 40 мл/мин [2] Пробы экстракта в испаритель вводили микрошприцем «Газохром-101» вместимостью 1 мкл. Концентрацию ТХБ определяли по калибровочному графику зависимости величины пика от концентрации ТХБ в стандартных растворах. Для шкалы готовили стандартные растворы с концентрациями ТХБ 0,5, 1 и 2 мкг/мл. Минимально определяемое количество в пробе 1 мкг. Результаты распределения ТХБ в организме крыс при однократном поступлении приведены в табл. 1.
Как видно из табл. 1, при однократном внутрижелудочном поступлении ТХБ обнаруживается во всех органах и тканях в первые 4 мин после введения, причем основное его количество найдено в желудочно-кишечном тракте, из которого ТХБ плохо всасывается и быстро выводится из организма. Во всем организме через 4 мин найдено ^92%, через сутки всего — £¿28%, через 2 сут ТХБ найден лишь в жировой ткани — 0,12 %, через 3 сут ТХБ в организме крыс не обнаружен.
Результаты по распределению ТХБ в организме крыс при многократном поступлении приведены в табл. 2.
Из табл. ■ 2 видно, что при ежедневном поступлении
ТХБ на протяжении 7 сут и определении в организме крыс через 1 ч после введения содержание ТХБ в органах и тканях практически не меняется.
Таким образом, при однократном внутрижелудочном поступлении ТХБ быстро выводится из организма. Через 1 сут он обнаруживается в основном в желудочно-кишечном тракте (20,13=1=7,24 %), жировой ткани (6,00+0,25 %) и мышцах (1,7+0,7%). Через 2 сут ТХБ обнаруживается лишь в жировой ткани (0,12+0,07 %). При многократном внутрижелудочном поступлении ТХБ не обладает кумуляцией.
>. ' ^ ь * А ' ■■ —^ • . * * ' ч* • ( , • ' ■ * • , • I « , " »
Литература
1. Бесядовский Р. А., Иванов К. В., Козюра А. К. Справочное руководство для радиобиологов. — М., 1978. — С. 90—91.
2. Бурина А. И., Ломонова Г. В.// Гиг. труда.— 1984. — № 2. — С. 57—59.
3. Вредные вещества в промышленности: Справочник для химиков, инженеров и врачей / Под ред. Н. В. Лазарева, Э. Н. Левиной.— Л., 1976.— Т. 1. —С. 309—311.
4. Халтурин Г. В., Андрюшкеева Н. И. // Гиг. и сан. — 1982. —№ 10. —С. 61—62.
Поступила 17.02.87
УДК 614.72:547.532]-07:616.155.32-008.939.624-097-078.73
В. Н\ Федосеева, Н. Н. Литвинов, А. Н. Шарецкий, Л. В. Аристовская,
Т. И. Данилова, А. М. Осипенко, Н. В. Горячева
ИЗУЧЕНИЕ ДЕЙСТВИЯ БЕНЗОЛА
НА РАННИЕ ЭТАПЫ АНТИТЕЛОГЕНЕЗА
НИИ общей и коммунальной гигиены -ям. А. Н. Сысина АМН СССР, Москва
Бензол — один из наиболее распространенных химических агентов, загрязняющих окружающую среду. Считается, что в условиях урбанизации человек ежедневно вдыхает 0,6 мг бензола [10]. Кроме ингаляционного пути, бензол проникает в организм с пищей и водой [14]. По-лигидроокисленные метаболиты бензола аккумулируются в определенных • органах и тканях (печень, костный мозг, лимфоидные органы). При этом их концентрация даже при содержании в окружающей среде сравнительно низких доз бензола способна достигать критических для здоровья величин. Известно, что бензол оказывает геноток-сическое, гематотоксическое и канцерогенное действие
[4, 9, 13]. Чрезвычайно чувствительными к бензолу являются иммунокомпетентные клетки. Экспозиция бензола вызывает лимфоцитопению, гипоплазию центральных й периферических органов иммунитета [11]. Снижение резистентности к инфекционным агентам [12] и развитие злокачественных новообразований у экспериментальных животных [13] и у людей, имеющих длительный контакт с бензолом и его производными [7], может быть следствием нарушения иммунологического надзора.
Введение бензола приводит к подавлению стволовых гемопоэтических клеток [6], снижению титра антител [15] и числа антителообразующих клеток (АОК), угнете-
Динамика первичного иммунного ответа в регионарных лимфоузлах мышей линии СВА после однократного введения бензола в дозе 0,7 г на 1 кг массы тела (М±т)
№ опыта Время введения антигена после инъекции бензола, ч Число кариоцитов в лимфоузле, -10е Количество АОК в расчете
на лимфоузел на 10е кариоцитов
общее % от контроля общее % ОТ контроля
1 0 10,7±0,5 50,0=1= 1,2* 10,44=0,25* 6,04=0,4* 14,454=0,98*
Контроль 12,1=±:0,3 479,04=3,4 41,54=0,8 •
2 24 5,5±0,1* 1986,24=22,3* 218,54=2,45* 214,34=12,5* 232,24=13,5*
Контроль 10,9-Ь0,5 908,7±11,0 92,34=2,2
3 72 10,7±0,1 886,1=1=16,5* 145,84=2,7* 79,8+5,4* 163,54=11,0*
Контроль 13,44=0,15 607,54=67,5 48,8=1=14,9
Примечание. Здесь и в табл. 2: звездочка—различия достоверны при р<0,05.
нию бласттрансформации Т- и В-лимфоцитов, индуцированной соответствующими митогенами [16], увеличению выраженности реакции гиперчувствительности замедленного типа в результате, как предполагают, инактивации клеток-супрессоров [2].
Однако последовательного изучения действия бензола на различные этапы иммуногенеза до настоящего времени не производилось. Между тем детальное исследование, им-мунотоксических свойств бензола является актуальной задачей в связи с необходимостью разработки мер профилактики ранних неблагоприятных изменений в организме, индуцированных этим реагентом.
Целью настоящей работы было изучить действие бензола на покоящиеся предшественники антителопродуцен-тов или активированные антигеном иммунокомпетентные клетки, находящиеся в индуктивной фазе антителогенеза.
На данном этапе исследования мы стремились создать максимальную концентрацию бензола в районе изучаемого лимфоидного органа. Наиболее удобным объектом для изучения этой задачи оказались подколенные лимфоузлы.
В экспериментах использовали мышей-самцов линии СВА массой 20—25 г, полученных в питомнике «Столбовая» АМН СССР. Животные 1-й группы получали бензол (benzene «Ferrak»), дополнительно очищенный методом Физера [1], в виде инъекций под кожу подколенной области обеих конечностей в суммарной дозе 0,7 г на 1 кг массы тела одновременно с антигеном, а также за 24 или 72 ч до антигенного стимула. Соответственно этой схеме опыта мишенью действия бензола оказывались клетки — участники кооперативного взаимодействия в начальном периоде индуктивной фазы антителогенеза или их предшественники, находящиеся в состоянии покоя (Т-, В-лимфо-циты, вспомогательные клетки). В качестве антигена использовали эритроциты барабана, которые вводили под апоневротическую пластинку задней конечности в количестве 5 -107.
Животные 2-й группы получали бензол в дозе 0,7 г/кг в течение 3 дней подряд (суммарная доза 2,1 г/кг). Антиген вводили через 1, 2, 5, 8, 15, 70 сут после последней инъекции бензола. На 4-е сутки после антигенного стимула подопытных мышей забивали дислокацией шейных позвонков, извлекали подколенные лимфоузлы. В клеточной суспензии лимфоузлов подсчитывали количество ядросо-держащих клеток и определяли прямые антителообразую-щие клетки (АОК) методом локального гемолиза в жидкой фазе [3]. Число АОК выражали в абсолютных величинах на один лимфоузел, на 106 кариоцитов и в процентах по отношению к количеству АОК, выявляемых у контрольных животных, которым вместо бензола вводили адекватный объем 0,85 % раствора хлорида натрия. Опытные группы состояли из 8—9 мышей. Опыты повторяли не менее 3 раз. Экспериментальные данные обрабатывали статистически с вычислением средней арифметической и доверительного интервала для р^0,05.
Однократная инъекция бензола (0,7 г/кг) в зависимости от сроков относительно антигенного стимула вызывала существенную иммуномодуляцию антителогенеза, ко-
торая выражалась в снижении или увеличении числа АОК в регионарных лимфоузлах (табл. 1). В том случае, когда бензол вводили одновременно с антигеном, т. е. в индуктивную фазу образования антител, наблюдалось резкое (в 7—9 раз) уменьшение числа АОК. Количество ядро-содержащих клеток при этом практически не изменялось. Иммуносупрессию, следовательно, невозможно объяснить истощением пула лимфоидных клеток. По-видимому, происходило изменение оптимального для кооперативного взаимодействия соотношения Т- и В-лимфоцитов за счет снижения в лимфоузле содержания В-клеток или подавления их способности дифференцироваться в плазмоциты. Такая возможность вполне вероятна, так как В-клетки более чувствительны к бензолу, чем Т-клетки [8]. Не исключено, что бензол повреждает и другие механизмы антителогенеза, реализующиеся в индуктивной период образования антител.
При введении бензола за 24 ч до иммунизации, т. е. в период, когда иммунокомпетентные и вспомогательные клетки находились в состоянии покоя, в лимфоузлах после антигенного стимула выявлялось увеличение числа АОК более чем в 2 раза, которое сопровождалось 2-кратным снижением количества кариоцитов. В этом случае в течение 24 ч после инъекции бензола не только происходило восстановление способности иммунокомпетентных клеток отвечать на антиген, но даже имело место повышение восприимчивости к антигенному стимулу. Объяснить этот феномен на данном этапе исследования ввиду сложности системы кооперативных клеточных взаимодействий в анти-телогенезе не представляется возможным. Можно предполагать, например, что возрастание числа АОК обусловлено накоплением в лимфоузлах макрофагов. Показано, что в первые 24 ч после введения бензола в лимфоидных органах увеличивалось количество макрофагов, в которых наблюдалось возрастание активности некоторых гидролитических ферментов [15]. Инъекция бензола за 72 ч до антигена также приводила к увеличению числа АОК, но в меньшей степени по сравнению с вышеописанным (в 1,6 раза). Количество кариоцитов при этом достоверно не отличалось от контроля. По-видимому, к этому сроку после однократного введения бензола появилась тенденция к нормализации антителогенеза. Таким образом, после однократного введения бензола (0,7 г/кг) вслед за кратковременным периодом резкого снижения иммунореактив-ности наступила фаза увеличения иммунного ответа на антиген, которая затем сменилась антителообразованием, близким к уровню контроля.
Трехкратное введение бензола в течение 3 дней подряд (суммарная доза 2,1 г/кг) обеспечивало стойкую иммуносупрессию, которая наблюдалась 70 сут (табл. 2). Число АОК за этот период волнообразно изменялось, не поднимаясь до контрольных величин. Подавление анти-телообразования сопровождалось снижением количества лимфоидных клеток. При этом выраженность лимфоцито-пении не коррелировала с числом АОК. Значительная продолжительность иммуносупрессии, вероятно, объясняется не столько прямым действием бензола или его метаболи-
Динамика первичного иммунного ответа в регионарных лимфоузлах мышей линии СВА после трехкратного введения бензола в дозе 2,1 г на 1 кг массы тела (М±/я)
№ опыта # Время введения Число кариоци-тов в лимфоузле, ■ 10е Количество АО К в расчете
антигена после инъекции бен- на лимфоузел на 10е кариоцитов
зола, сут общее % от контроля общее % от контроля
1 1 7,5±0,7* 100,8±4,1* 12,5±2,2* 12,4±0,75* 15, 4±1 ,04*
Контроль л 12,3±0,63 1025±6,3 80,3±2,3
2 2 5,9±0,8 173,3±10,25* 27,5±1,63* 33,5±2,4* 37,1 ±2,65*
Контроль 8,8±1,2 629,2 ±18,1 90,2±3,2
3 5 5,2 + 0,5* 227,2±71,8* 43,7±13,8 40,5±3.4 82,8 ±6,95*
• Контроль 11,3+0,4 519,44-10,4 48,9±5,3
4 8 7,4±1,6* 144,6±7,7* 8,8±0,48 19,4 ±2,1 * 18,9±2,05*
Контроль 11,32 ±0,3 1645,0±25,2 102,34±12,5
5 15 3,58 ±0,9* 376,7± 16,3* 59,8±2,6 Ю3,4±8,6 113,5±9,5
Контроль 8,8±1,2 629,24-18,1 90,2±3,2
6 70 12,3±2,4 40,6±5,2* 17,1 ±2,2 3,6±1,2* 15,7±5,3*
Контроль 11 >9±1,0 236,8-1-10,4 22,8± 1,5
тов на иммуноциты, сколько повреждением медленно обменивающегося пула клеток стромального микроокружения [5], которое может привести к нарушению дифферен-цировки иммунокомпетентных клеток, а также их нормального рекрутирования в регионарных лимфоузлах после антигенного стимула.
Таким образом, наши наблюдения показывают, что бензол оказывает неоднозначное действие на иммунную систему. В зависимости от сроков введения бензола относительно антигенного стимула он вызывает стимуляцию или подавление антителообразования. Однократное введение бензола в дозе 0,7 г/кг в фазу покоя клеточного цикла стимулирует индуцированный антигеном гуморальный иммунный ответ. Увеличение дозы бензола до 2,1 г/кг приводит к длительному угнетению первичного ответа. При однократном введении бензола (0,7 г/кг) в индуктивный период антителогенеза наблюдается резкое снижение числа АО К.
Литература
IS: Фризер JI. // Современные методы эксперимента в органической химии. — М., 1960. — С. 542. 2: Aojama К.// Toxicol. appl. Pharmacol. — 1986. — Vol. 85. —P. 92—101.
3. Cunningham I. G., Szenberg A. // Immunology. — 1959. — Vol. 14. —P. 599—601.
4, Dean B. J. // Mutât. Res. — 1985. — Vol. 154. — P. 153— 183.
5: Gaido K. W.f Wierda D. // Toxicol, appl. Pharmacol. — 1985. — Vol. 81. — P. 469—473.
6. Green /. D., Snyder C. A., Lo Bue G. et al. // Ibid. — 1981. — Vol 58. — P. 492—503.
1. Infante P.//Tex. Rep. Biol. Med. — 1978. — Vol. 37.— P. 153—161.
8. Irons R. D., Moore B. J. // Res. Commun. chem. Path. Pharmacol. — 1980. —Vol. 27. — P. 147—155.
9. Laskin S., Goldstein B. Z).//J. Toxicol. — 1977.— Vol. 2. —P. 1—48.
10. Merian E., Lander M. // Handbook of Environmental Chemistry. — Berlin, 1982. —Vol. 3, Pt B. — P. 117—161.
11. Pfeifer R. W.f Irons R. D. // J. Rethiculoendoth. Soc. — 1982. —Vol. 3. —P. 155—170.
12. Rosental G. J., Snyder C. A. // Toxicol, appl. Pharmacol. — 1985. — Vol. 80. — P. 502—510.
13. Snyder C., Golstein В., Sellakumar A. et al. // Ibid.— 1980. — Vol. 54. — P. 323—331.
14. US Environmental Protection Agency (1981) National Emission Standard for Hazardous Air Pollutants; Benzene Fugitive Emission [US Code Fed. Regul., Tile 40, part 61, Fed. Regist. 46 (N02)]. — P. 1165—1193.
15. Wirtchaftern Т., Bischel M. G.// Arch, environm. Hlth.— I960. —Vol. 1. —P. 10—16.
16. Weir da D., Irons R. D., Greenly W. F. // Toxicol, appl. Pharmacol. — 1981. —Vol. 60. — P. 410—417.
Поступила 20.03.87
УДК. 615.285.7.099 +[614.31 + 614.777:574.64]:615.285.7
Т. А. Джайлоев
КОМПЛЕКСНОЕ ГИГИЕНИЧЕСКОЕ НОРМИРОВАНИЕ ФУРАДАНА
В ВОДЕ ВОДОЕМОВ И В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ
9
Крымский медицинский институт, Симферополь
Фу рада н (производства фирмы ФМС, США) — новый системный инсектицид-нематоцид широкого спектра действия, используется для борьбы с вредителями сахарной свеклы в виде 5 и 10 % гранул. 35 % суспензия пестицида рекомендована для протравливания семян сахарной свеклы и кукурузы.
В процессе применения не исключена возможность по-п а да ни я пестицида в объекты окружающей среды, что послужило основанием для обоснования допустимой суточной дозы (ДСД) фурадана для человека и гигиенического нормирования его в воде водоемов и продуктах питали я.
Действующее вещество пестицида — карбофуран (2,3-дигидро - 2,2 - диметил - 7-бензофуранил-Ы-метилкарбамат) представляет собой белое кристаллическое вещество, не имеет запаха. Гранулы фурадана фиолетового цвета, без запаха. 35 % суспензия — жидкость розового цвета со слабым ароматным запахом. Молекулярная масса карбо-фурана составила 221,15, упругость паров при 25 °С — 3,4-10-6 мм рт. ст. Растворимость в воде при 25 °С — 700 мг/л, в органических растворителях растворяется хорошо.
Стабильность фурадана в объектах окружающей среды зависит от значения рН среды. С увеличением рН ско-
