ИЗУЧЕНИЕ БИОСОВМЕСТИМОСТИ ПУСТЫХ ЛИПОСОМ В ОРГАНИЗМЕ ЖИВОТНЫХ

Плотникова Эдие Миначетдиновна; Вафин Фаниль Рафаэлевич; Шакуров Муланур Махсутович; Калимуллин Фарит Хабуллович; Кашеваров Глеб Сергеевич; Гайнуллин Руслан Рустамович

CC BY

0

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Журнал

Ветеринарный врач

2024

ВАК

Область наук

Ветеринарные науки

Ключевые слова

фосфолипиды / подсолнечный лецитин / липидная пленка / липосомы / микроскопия / phospholipids / sunflower lecithin / lipid film / liposomes / microscopy

Аннотация научной статьи по ветеринарным наукам, автор научной работы — Плотникова Эдие Миначетдиновна, Вафин Фаниль Рафаэлевич, Шакуров Муланур Махсутович, Калимуллин Фарит Хабуллович, Кашеваров Глеб Сергеевич

Изучены технологии получения липосом методами обращения фаз с использованием ультразвуковой обработки, инжекции, экструзии с использованием фильтрующих мембран, которые в своем составе имеют компоненты растительного (подсолнечный лецитин) и животного (мозг крупного рогатого скота) происхождения. Электронно-микроскопическая идентификация на просвечивающем электронном микроскопе JEM-100 CX (фирма Jeol, Япония) показала, что полученные варианты липосом по морфологическим характеристикам соответствуют таковым стандартных липосом. Электронномикроскопические исследования проводили методом негативного контрастирования на сетках с формваровой подложкой. Пробоподготовку изучаемых образцов проводили в соответствии с инструкцией на электронномикроскопической технике. Для получения электронномикроскопического изображения использовали фототехническую пленку Agfa orthochromatic (Бельгия). Полученные снимки оцифровывали в разрешении 600 dpi. Для токсикологического исследования использовали 15 белых мышей весом 20-25 г. Животным подкожно вводили пустые липосомы. При гистологическом исследовании внутренних органов опытных групп, в печени наблюдалась ткань с сохраненной гистоархитектоникой. Дольчатое и балочное строение органа сохранено. Междольковая соединительная ткань формирует слабо выраженные классические дольки. В легких – гистоархитектоника сохранена. Альвеолы заполнены воздухом, альвеолярные перегородки тонкие, выстланы пневмоцитами, ядра клеток крупные, округлые. Выявляли очаговые утолщения межальвеолярных перегородок за счет инфильтрации их лимфоидно-гистиоцитарными клетками, с формированием дистелектазов. Анализ патологоморфологической картины внутренних органов опытных животных после введения пустых липосом, указывает на их безвредность для организма белых мышей, а также косвенно подтверждает наличие у липидных везикул неспецифического действия, что служит одним из критериев усиления неспецифического иммунного ответа, а также является подтверждением наличия у липосом иммуностимулирующих свойств.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

STUDYING THE BIOCOMPATIBILITY OF EMPTY LIPOSOMES IN ANIMAL BODIES

Technologies for producing liposomes using phase reversal methods using ultrasonic treatment, injection, extrusion using filter membranes, which contain components of plant (sunflower lecithin) and animal (cattle brain) origin, have been studied. Electron microscopic identification using a JEM-100 CX transmission electron microscope (Jeol, Japan) showed that the resulting liposome variants correspond in morphological characteristics to those of standard liposomes. Electron microscopy studies were carried out using negative contrast on grids with a Formvar substrate. Sample preparation of the studied samples was carried out in accordance with the instructions using electron microscopy equipment. To obtain an electron microscopic image, photographic film Agfa orthochromatic (Belgium) was used. The resulting images were digitized at a resolution of 600 dpi. For the toxicological study, 15 white mice weighing 20-25 g were used. The animals were given empty liposomes subcutaneously. A histological examination of the internal organs of the experimental group revealed that the liver contained tissue with preserved histoarchitecture. The lobulated and beam structure of the organ is preserved. Interlobular connective tissue forms weakly defined classic lobules. In the lungs, the histoarchitecture is preserved. The alveoli are filled with air, the alveolar septa are thin, lined with pneumocytes, the cell nuclei are large and round. Focal thickenings of the interalveolar septa were detected due to their infiltration by lymphoid-histiocytic cells, with the formation of distelectasis. Analysis of the pathological and morphological picture of the internal organs of experimental animals after the introduction of empty liposomes indicates their harmlessness to the body of white mice, and also indirectly confirmed the presence of nonspecific action in lipid vesicles, which serves as one of the criteria for enhancing the nonspecific immune response, and also confirms the presence of immunostimulating agents in liposomes properties.

Текст научной работы на тему «ИЗУЧЕНИЕ БИОСОВМЕСТИМОСТИ ПУСТЫХ ЛИПОСОМ В ОРГАНИЗМЕ ЖИВОТНЫХ»

�� . 2024. � 4. �. 4 � 9

�he Veterinarian. 2024; (4): 4 � 9

��

�� 619.615.2/661.155.3

DOI: 10.33632/1998-698�_2024_4_4

�� -��

�� , �� , adiya2397031@mail.ru

�� , �� , vafin.fr@mail.ru

�� , �� , vnivi@mail.ru

�� , �� , farit.kalimullin@tatar.ru

�� , �� , kaschewarow@mail.ru

�� , �� , gairuslan10@mail.ru

�� , �� , ��, ��

��, �� : �� .

��. �� -�� , ��, �� , �� (�� ) � �� (�� ) ��. ��-�� -�� JEM-100 CX (�� Jeol, ��) ��-��, �� . �� -�� . �� -�� . �� -�� Agfa orthochromatic (��). �� 600 dpi. �� 15 �� 20-25 �. �� . �� -�� , � �� . �� . �� -�� . � �� . ��-�� , �� , �� , �� , ��. �� -�� , � �� -��. �� , �� , � �� , �� , � �� -�� .

�� : ��, �� , �� , ��, ��

�� : �� .�., �� .�., �� .�., �� .�., �� .�., �� .�. �� // �� . 2024. � 4. �. 4 � 9. DOI: 10.33632/1998-698�_2024_4_4

STUDYING THE BIOCOMPATIBILITY OF EMPTY LIPOSOMES IN ANIMAL BODIES

Edie M. Plotnikova, doctor of veterinary sciences, adiya2397031@mail.ru

Fanil R. Vafin, candidate of biological sciences, vafin.fr@mail.ru

Mulanur M. Shakurov, candidate of biological sciences, vnivi@mail.ru

Farit Kh. Kalimullin, candidate of biological sciences, farit.kalimullin@tatar.ru

Gleb S. Kashevarov, candidate of biological sciences, kaschewarow@mail.ru

Ruslan R. Gainullin, candidate of biological sciences, gairuslan10@mail.ru

Federal Center for Toxicological, Radiation and Biological Safety, Kazan, Russian Federation

Corresponding author: Edie Minachetdinovna Plotnikova.

Abstract. Technologies for producing liposomes using phase reversal methods using ultrasonic treatment, injection, extrusion using filter membranes, which contain components of plant (sunflower lecithin) and animal (cattle brain) origin, have been studied. Electron microscopic identification using a JEM-100 CX transmission electron microscope (Jeol, Japan) showed that the resulting liposome vari-ants correspond in morphological characteristics to those of standard liposomes. Electron microscopy studies were carried out using negative contrast on grids with a Formvar substrate. Sample preparation of the studied samples was carried out in accordance with the instructions using electron microscopy equipment. To obtain an electron microscopic image, photographic film Agfa orthochromatic (Bel-gium) was used. The resulting images were digitized at a resolution of 600 dpi. For the toxicological study, 15 white mice weighing 20-25 g were used. The animals were given empty liposomes subcuta-neously. A histological examination of the internal organs of the experimental group revealed that the liver contained tissue with preserved histoarchitecture. The lobulated and beam structure of the organ is preserved. Interlobular connective tissue forms weakly defined classic lobules. In the lungs, the his-toarchitecture is preserved. The alveoli are filled with air, the alveolar septa are thin, lined with pneu-mocytes, the cell nuclei are large and round. Focal thickenings of the interalveolar septa were detected due to their infiltration by lymphoid-histiocytic cells, with the formation of distelectasis. Analysis of the pathological and morphological picture of the internal organs of experimental animals after the in-troduction of empty liposomes indicates their harmlessness to the body of white mice, and also indi-rectly confirmed the presence of nonspecific action in lipid vesicles, which serves as one of the crite-ria for enhancing the nonspecific immune response, and also confirms the presence of immunostimu-lating agents in liposomes properties.

Keywords: phospholipids, sunflower lecithin, lipid film, liposomes, microscopy

��. �� -��, �� [1, 2, 3]. �� -�� , �� -�� (��) � ��-�� [4].

� �� -�� -�� , �� . �� . ��, �� . � �� .

�� , �� , �� - �� , � �� -�� . �� -�� . �� , �� , �� , �� (��) �� -��, �� , �� -�� [5, 6].

�� , �� : �� , �� -�� ; �� -�� , �� -�� .

�� . �� (�� ) �� 9197-002-57531875-2015 �� -�� (��), �� 97 % ��, � �� , �� . �� : �� 5:1 �� -�� 30 �� , ��, �� , �� , ��-�� , �� . � �� (��) ��, �� , �� .

�� 1 �. �� RVO-64 (��) �� (37�1) �� (0,8 ��) �� , �� (0,9 ��) � �� 4 �. �� (�� ) �� -�� + 4 ��. �� , �� -�� JEM-100 CX (�� Jeol, ��) �� . ��-�� -�� 1 % - �� . �� -�� -�� ; �� -�� -�� Agfa orthochromatic (��). �� 600 dpi. �� , �� -�� , �� . �� -�� 15 �� -�� .

�� . �� .

�� 1 � �� : �) �� , �� -��; �) �� , �� ; �) �� , �� ; �) �� , �� -��

�) �) �) �)

� �� , ��

1 � 1044,7?853,6

2 � 252,8?177,3

3 � 670,0? 500,0

4 � 1000,0? 700,0

�� 1 � ��

�� (��-�� ).

�� 12 �� -�� , ��, ��, ��, �� -�� . �� 10% �� , � �� . �� , �� [7, 8].

�� 2 � �� , �� , �� 12 ��

�� -�� . �� -��. �� . �� , �� . �� - ��. � �� -�� , � �� . �� , �� - ��. �� , �� -�� . �� . �� . �� , �� , �� - ��, �� .

� �� . �� , �� , �� , �� , ��. �� -�� -�� , � �� . �� -�� . �� , �� , �� -�� . �� , �� , �� . ��-�� , �� . � ��-�� .

�� . �� -�� , �� , �� -��, �� . �� -��, �� , � �� -�� . �� , �� , �� . �� . �� -�� . �� , ��, ��-�� , �� -�� .

�� : ��, �� . � �� -�� . � �� -�� , � �� -��. �� , �� -�� .

� �� . �� -�� , � �� , � ��-�� . �� , �� , �� , �� -�� (��-��) � �� . �� -�� -�� , �� , �� . �� -��, �� . � �� -�� . �� - �� , �� , � �� .

� �� -�� .

��. � �� -�� , �� -�� . �� -�� . � �� -�� , �� -�� . �� (��) �� -�� .

�� -�� , � �� , �� , � �� .

�� . �� : 02.06.2022.03/02.2-2 �� .

��

1. �� .�., �� .�. �� .�. �� // �� . � 2021. - � 12. � �. 149-151.

2. �� .�., �� .�., �� .�. � ��. �� -�� (��) � �� // ��-�� 2015. - �9. � �. 74-78.

3. �� .�., �� .�., �� .�. � ��. �� -�� (��) // �� . ��-��: �� . �� . - 2023. - �.9. - � 2 (34). - �. 168-177.

4. �� . �. ��: �� // �� . - 2021. - � 26 (368). - �. 32�40.

5. �� .�., �� .�., �� .�. � ��. �� // �� . - 2023. - � 5 (103). - �. 251-257.

6. �� .�., �� .�., �� . �. � ��. �� -�� // �� . � 2022. - �1. � �. 46-50.

7. ��, �.�. �� . � 5 ��., ��. � ��. / �.�. ��-�� , 1969 �. � 423 �.

8. ��, �.�. �� (�� ). � 2-� ��. ��. � ��. / �.�. �� , �� , ��-��, 2007. � 87 �.

References

1. Spirina V.O., Yudina A.N. Krasnoshtanova A.A. Study of the process of obtaining liposomes from soy and egg lecithin // Advances in chemistry and chemical technology. � 2021. - No. 12. � P. 149-151.

2. Arkhipov S.A., Shkurupiy V.A., Neshchadim D.V. and others. Study of the biocompatibility of liposomes with an anti-tuberculosis drug (dextrazide) in the culture of macrophages // Internation-al Journal of Applied and Fundamental Research - 2015. - No. 9. � pp. 74-78.

3. Plotnikova E.M., Nizamov R.N., Vafin F.R. and others. Modern problems of technology for ob-taining phospholipids (review) // Bulletin of the Mari State University. Series: Agricultural Scienc-es. Economic Sciences. - 2023. - T.9. - No. 2 (34). - pp. 168-177.

4. Guryeva A.V. Lecithin: properties and methods of production // Young scientist. - 2021. - No. 26 (368). - P. 32�40.

5. Mishina N.N., Semenov E.I., Yusupova K.V. and others. Histostructure of the internal organs of white rats with mycotoxicosis against the background of the use of specific treatment agents // News of the Orenburg State Agrarian University. - 2023. - No. 5 (103). - pp. 251-257.

6. Frolov A.V., Vasilevsky N.M., Nizamov Ram. N. et al. Assessment of toxicity and biological ac-tion of an experimental drug // Veterinary doctor. � 2022. - No. 1. � P. 46-50.

7. Merkulov, G.A. Pathological technique course. � 5th ed., rev. and additional / G.A. Merkulov - Publishing house "Medicine" Leningrad branch, 1969 - 423 p.

8. Suleymanov, S.M. Methods of morphological research (methodological manual). � 2nd ed. re-worked and additional / CM. Suleymanov � VNIVI pathology, pharmacology and therapy, Voro-nezh, 2007. � 87 p.

�� .

�� /�� , �� .

All authors have made an equivalent contribution to the preparation of the publication.

The authors declare that there is no conflict of interest.

�� / accepted for publication 24.01.2024;

�� .�., �� .�., �� .�., �� .�., �� .�., �� .�. 2024

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

ИЗУЧЕНИЕ БИОСОВМЕСТИМОСТИ ПУСТЫХ ЛИПОСОМ В ОРГАНИЗМЕ ЖИВОТНЫХ Текст научной статьи по специальности «Ветеринарные науки»

STUDYING THE BIOCOMPATIBILITY OF EMPTY LIPOSOMES IN ANIMAL BODIES

Текст научной работы на тему «ИЗУЧЕНИЕ БИОСОВМЕСТИМОСТИ ПУСТЫХ ЛИПОСОМ В ОРГАНИЗМЕ ЖИВОТНЫХ»