CC BY
57
Краткое сообщение
Литература
1. Антонов Б.И. и др. Лабораторные исследования в ветеринарии: биологические и микологические: Справочник.- М: Агропромиздат, 1991.- 287 с.
2. Денисова О.Ф., Липатова О.А. // Экологические проблемы патологии, фармакологии и терапии животных: Мат-лы междун. корд. совещ.- Воронеж, 1997.- С. 203.
3. Дорожкин В.И. Фармакологические и токсикологические свойства биокординационных соединений: Автореф. дис... д. биол. наук.- Воронеж, 1998.- 45 с.
4. Сидоров К.К. // Токсикология новых промышленных веществ.- М.: Медицина, 1997.- Вып.13.- С. 47-51.
УДК 616-08945-031.81
ОПТИМАЛЬНЫЙ ВЫБОР ПРЕПАРАТОВ ДЛЯ ОБЩЕГО НАРКОЗА ВО ВРЕМЯ МНОГОКРАТНЫХ ПЕРЕВЯЗОК У ДЕТЕЙ С ТЯЖЕЛОЙ ОЖОГОВОЙ ТРАВМОЙ
Е.Н.МАТЧИН, Ю.В. ТУПИКИН*
Проблема ожогов у детей занимает центральное место среди травм мирного времени, в случаях локальных вооружённых конфликтов и катастроф. Ежегодно погибают от ожогов 5,5 тысяч детей. Интенсивная терапия тяжелообожжённых детей отличается сложностью, трудоёмкостью и не всегда хорошо оканчивается. В комплексном лечении тяжелообожжённых детей оптимальный выбор препаратов для общего наркоза во время многократных перевязок одна из актуальных проблем современной комбустио-логии. Ведутся разработки по внедрению высокоэффективных препаратов для проведения многократных общих наркозов у детей. Однако побочные эффекты этих медикаментов создают серьезные ограничения для их практического применения
Перед анестезиологом стоит задача - выбор метода обезболивания, обеспечивающего не только адекватную анестезию и вегетативную стабилизацию во время хирургической агрессии, но и минимум риска развития ранних посленаркозных осложнений, связанных с остаточным действием препарата, а также их побочными эффектами. Известен случай, когда у ребенка с относительно небольшим по площади ожогом при проведении перевязок без анестезии в результате эмоционального стресса и связанных с этим общих изменений в организме развился вторичный иммунодефицит, потребовавший медикаментозной коррекции. Само общее обезболивание несет опасность осложнений и срыва компенсаторных механизмов, т.к. при многократном применении оно само по себе подавляет иммунную систему.
Табл.ица
Показатели иммунитета у детей с тяжелой ожоговой травмой
Показатели Данные после перевязок в первые дни после ожога Данные после перевязок через 21 сутки после ожога
I группа II группа 1 а группа Па группа
Лимфоциты % 26,1±7,2* 26,2±7,6** 30,3±6,7* 31,9±7,5**
Лимфоциты тыс. 1392±173 1367±251,4 1454±173 1477±284
ЦИК % 84,2±5,8 83,5±4,8* 83,8±5,1** 80,7±6,4* **
Активность комп. вед. 57,4±4,7* 56,8 ±3,9** 54,1±4,7* *** 63±4,0
Т-лимфоциты % 60,6±1,5* 61,2±2,09** 58,45±1,6*** 60±1,6**
Т-лимфоциты тыс. 864,1±106,3 850±170 857±105 882 ±170
Т-активные лимфоциты % 35,2±2,2 34,9±2,4 35,5±2,2 34,8±2,3
Т-активные лимфоциты тыс. 292±51,4 291±58 301±50,4 304,7±59,2
В-лимфоциты % 21,8±2,2* ** 23,5±2 19,93±2,4* 19,3±1,8
В-лимфоциты тыс. 305±59,1 290±39,1 * 289±61,7** 249, ±40* **
О-лимфоциты % 17,4±2,5* ** 15±3,6 21,7±3,4* 20,5±2,7***
О-лимфоциты тыс. 222±52,3* 226±70** 305±62* *** 344±62
Ig А 1858,8* 186,8± 11,9 196±15,8* ** 185±20,8 **
Ig G 1214±99* 1208±106** 1273±99 1364±160***
Ig М 90,2±6,1* 89,0±5,3** 85,5±6,5* 85,9±5,5**
ЛИИ Kalif 0,9±0,6 0,8±0,6 0,85±0,5 0,75±0,4
, , - достоверность отличий в сравниваемых группах по критерию
Стьюдента. Уровень значимости р<0,05; I% -иммуноглобулины
Для оценки эффективности общего наркоза во время многократных перевязок у тяжелообоженных детей нами проведен сравнительный анализ двух групп больных, в 1-й из которых проводилась стандартная общая анестезия с использованием
бензодиазепина-мидазолама (дормикум), кетамина и фентанила; во 2-й группе наряду с традиционным наркозом применялся даларгин. Наши исследования показали возможность исключения фентанила при использовании даларгина у лиц 2-й группы, что снижает риск возникновения нарушений дыхания во время перевязок; удалось уменьшить дозу и частоту введения анальгетиков. На фоне даларгина доза вводимого кетамина во 2-й группе больных уменьшалась на 35,69%, что давало быстрый выход из наркоза и возможность более раннего приема пищи ребенком после перевязки. Анализ общеклинических и биохимических исследований не выявил различий в методах обезболивания.
Анализ лейкоцитарной формулы в динамике показал, что в 1-й группе абсолютное количество лейкоцитов снизилось на 23,78%, а во 2-й группе, где применялся даларгин, снижение составило 28,08% по сравнению с исходными данными. Палочкоядерные нейтрофилы во 2-й группе снизились на 31,75%. Эозинофилы также достоверно (Р< 005) снизились во 2-й группе на 38,64%. В 1-й группе произошел рост числа лимфоцитов на 14,62%, а во 2-й группе - 18,99% (Р< 005) по сравнению с исходными данными. Выявлено менее выраженное снижение Т-лимфоцитов и 1% М во 2-й группе, что говорит о меньшем имму-нодепрессивном влиянии препаратов для общего наркоза у лиц этой группы. Роль естественной невосприимчивости макроорганизма играет активность комплемента. Снижение показателя активности комплемента в 1-й группе и рост его во 2-й группе говорит о меньшем риске развития инфекционных осложнений во 2-й группе. Низкое содержание 1% С в 1-й группе при высоком содержании В-лимфоцитов (наличие «ножниц») говорит о пониженной реактивности иммунной системы и дефекте лимфоцитов, отвечающих за синтез 1%. Во 2-й группе тяжелообожжженнных детей эти «ножницы» менее выражены за счет снижения уровня В-лимфоцитов и роста количества 1% С.
Основные показатели иммунитета представлены в табл. В ходе анестезиологических мероприятий по проведению многократного обезболивания во время перевязок у тяжелообожжен-ных детей достижение адекватной антиноцицептивной защиты достигается высокими дозами препаратов для общего обезболивания, в частности кетамина и фентанила. Эти факторы при повторяющихся обезболиваниях плохо сказываются на показателях иммунной системы, что удлиняет сроки лечения и не препятствуют развитию осложнений в течение ожоговой болезни.
Эти обстоятельства обосновывают необходимость включения в комплекс традиционного общего обезболивания дополнительных препаратов, которые могли бы при сохраняющейся адекватности ноцицептивного блока обеспечить снижение доз препаратов для общего обезболивания, а также способствовать мобилизации резервов для оказания противодействия патологическому процессу. Для этого был использован даларгин.
Выводы. Включение даларгина в комплекс препаратов для наркоза позволяет добиться стимуляции показателей клеточного и гуморального звеньев иммунитета, более стойкого иммуномодулирующего эффекта. При использовании даларгина идет снижение дозировок препаратов для общего наркоза при адекватной антиноцицептивной защите во время перевязок. Снижение доз препаратов для общего наркоза означает уменьшение подавления иммунных реакций, побочных эффектов и возможность ранней активации больных. Использование общего обезболивания у тяжелообожженных детей с включением даларгина обеспечивает гладкое течение анестезии с подавлением стрессовых реакций.
УДК 615.281
ИЗУЧЕНИЕ БИОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ НОВЫХ БИОКОМПЛЕКСОВ С ПРОИЗВОДНЫМИ НИТРОИМИДАЗОЛА И НИТРОФУРАНА
Е.М. БУКРЕЕВА, А.В. ЗАИКИН, А.А. КРАСНОВ, Л.П. ЛАЗУРИНА, И.В. САМОХВАЛОВА*
Лечение и профилактика инфекционных заболеваний остаются сложной проблемой в связи с резистентностью микроорганизмов к антимикробным средствам. Повысился интерес к лекарственным средствам (ЛС), которые учитывали бы состояние
* Тула, Тульская областная больница
* 305004, г. Курск, ул. К.Маркса, 3, КГМУ
Краткое сообщение
иммунной системы, специфику гнойно-воспалительного процесса и стадии его развития. Направление поиска новых биоактивных соединений - получение солей металлов с известными ЛС, т.к. это расширяет спектр действия и снижает их токсичность.
Цель работы - изучение биоактивности координационных Zn (II) и Со (II), исследование антимикробной активности гелей и мазей на их основе in vitro и на модели инфицированной раны.
Антибактериальную активность производных нитроимида-зола (MN) и нитрофурана (F), а также их соединений с металлами и мазей, приготовленных на их основе, в отношении факультативно анаэробных микроорганизмов определяли in vitro методом диффузии в агар (Государственная Фармакопея XI изд., 1990 -ГФХ!). По рекомендациям ВОЗ и ГФ-Х для оценки активности новых биокомплексов в качестве тест-культур использовали штаммы аэробных бактерий и грибов из коллекции ГИСК им. Л.А.Тарасевича (Москва) (табл.1). Активность биокомплексов in vivo изучали на белых мышах (весом 18-20 г) при моделировании стафилококковой инфекции. Антимикробное действие установлено у биокомплексов Со и Zn в отношении всех исследованных тест-микробов в сравнении с их лигандами.
Для этого мышей внутрибрюшинно заражали суточной агаровой культурой Staphylococcus aureus №554, в дозе, вызывающей гибель 50% мышей в течение 7 суток (1х107 микробных тел/мл) и через сутки после заражения 7 дней ежедневно вводили в/м исследуемые препараты. Терапевтическую эффективность биокомплексов оценивали по выживаемости животных (табл. 2). Т.к. не всегда антимикробное действие препарата in vitro совпадает с его активностью в живом организме, проведены исследования эффективности биокомплексов Со и Zn на мышах при внутрибрюшинном заражении их культурой S.aureus.
Выживаемость мышей при лечении соединениями Со с MN и F составила 80 и 85%. При лечении комплексными соединениями Zn с метронидазолом и фурацилином почти все мыши были живы. Определяли токсичность биокомплексов на мышах при внутрибрюшинном введении [1, 2]. Влияние биокомплексов на показатели иммунологической реактивности организма изучали на крысах-самцах линии Вистар массой 100-120 г. Препараты вводили в/м раз в сутки 11 дней. Крыс усыпляли эфиром, вскрывали грудную полость и забирали кровь из нисходящей части грудной аорты. Изучали факторы неспецифической защиты (табл. 3), в т.ч. бактерицидную активность сыворотки крови (БАС). Фагоцитарная реакция оценивалась в отношении S.aureus 209-Р с определением % активных фагоцитов (фагоцитарный индекс) и числа поглощенных частиц в пересчете на 1 фагоцитирующую клетку (фагоцитарное число). Завершенность фагоцитоза определялась как % микробных клеток, подвергшихся разрушению фагоцитами при 2-часовом инкубировании - индекс завершенности фагоцитоза (ИЗФ). Оценивали кислородзависи-мые бактерицидные системы фагоцитов in vitro с помощью НСТ-теста, отражающего способность супероксиданиона восстанавливать НСТ в диформазан; НСТ-тест - по степени восстановления НСТ в спонтанной и продигиозан-стимулированной реакциях при учете внутриклеточных отложений диформазана. Использовали НСТ фирмы «Lachema» (Чехия). Резерв системы фагоцитоза равен разнице между показателями стимулированного и спонтанного теста.
Таблица 2
Эффективность биокомплексов при стафилококковой инфекции
Название соединения Выживаемость мышей на 7 день после заражения (в %)
Физраствор в твине (контроль) 50,0
МЫ 60,0
Комплекс 2п с МЫ 99,2
Комплекс Со с МЫ 80,0
Е 70,0
Комплекс 2п с Е 99,6
Комплекс Со с Е 85,0
Для определения активности кислороднезависимой бактерицидной системы использовали лизосомально-катионный тест, на базе определения лизосомальных катионных белков в гранулах лейкоцитов периферической крови в мазках, окрашенных бромфеноловым синим [3, 4]. Уровень лизоцима определяли по методу О.В.Бухарина, бактерицидную активность сыворотки - по
F.D.Schoenknercht. Для изучения действия новых биокомплексов на клеточный и гуморальный иммунный ответ крысам-самцам линии Вистар препараты вводили в/м в твине и физрастворе в течение 5 дней с иммунизацией крыс эритроцитами барана (ЭБ) и измерением уровня гуморального иммунного ответа по числу антителообразующих клеток в селезенке. С помощью компьютерной программы PASS спрогнозирована биоактивность новых биокомплексов. При введении металла (Zn и Со) в структуру ЛС прогнозируется рост антибактериальной активности в 2 раза по сравнению с лигандом и увеличение в 2-3 раза противовоспалительной, противоаллергической и противоязвенной активности. Возникают противомико-бактериальная, анальгезирующая, противовирусная и антисептическая активности.
Исследования антибактериальной активности комплексов с MN и F подтверждали, что введение металлов в структуру ЛС ведет к росту активности исходного лиганда и расширению спектра его действия. Микроэлементы участвуют в иммуногенезе, изучено влияние биокомплексов на показатели иммунного ответа. Введение лигандов MN и F не влияло на формирование гуморального иммунного ответа, индуцированного ЭБ. Число антителообразующих клеток в селезенке крыс, получавших физраствор, MN или F, не отличались друг от друга. Введение биокомплексов Zn и Со с MN и F активизировало иммуномодулирующее действие лиганда на гуморальный иммунный ответ на ЭБ (рост числа антителообразующих клеток в 1,5-2 раза). Фактором антиинфекционной защиты, определяющим развитие инфекционного процесса, является ее неспецифическое звено. Влияние биокомплексов на фагоцитарную активность лейкоцитов показало (табл. 3), что более высокие значения фагоцитоза были у животных, которым вводили биокомплексы Zn и Со с MN и с F. У них ИЗФ превышал показатели контроля, где вводили физраствор, и групп, которым вводили MN или F, т.е. лиганды. Изучение активности кислородзависимых бактерицидных систем нейтрофилов в тесте восстановления НСТ говорит о стимулирующем влиянии биокомплексов.
Высокие показатели по НСТ-стимулирующему тесту были у животных, получавших комплексы Zn с MN и Zn и Со с F. Использование комплексов Со с MN и с F стимулировало кисло-роднезависимые бактерицидные системы нейтрофилов, определяемые в тесте на лизосомальные катионные белки. Изменения БАС крови имели статистически более высокие значения у опытных животных по сравнению с контролем. Применение фармпрепаратов возможно только при их безвредности для человека. Поэтому проведено определение токсичности MN и F и их комплексов. MN и его биокомплексы характеризуются низкой токсичностью, относятся к классу малотоксичных веществ. Ком-плексообразование металлов с ЛС способствует росту антимикробной активности и расширению спектра действия.
Литература
1. Arzamastsev E.V. // Zent. Bl. Pharm., pharmakother., lab. Di-agn.- Berlin, 1988, Bd. 127, № 5.- P. 310-311.
Антимикробная активность биокомплексов с факультативными анаэробами
Тест-культура Диаметр зоны задержки роста бактерий исследованными препаратами в мм (М±т)
MN MNCo MNZn F FCo FZn
Staphylococcus aureus ATCC 25923 9,2+0,2 20,3+0,4 24,6+0,5 11,2+0,2 23,7+0,5 29,7+0,5
Staphylococcus aureus 209-Р 8,2+0,2 23,1+0,5 23,3+0,4 12,1+0,2 24,1+0,5 30,2+0,4
Bacillus subtilis ATCC 6633 9,8+0,2 29,3+0,6 27,0+0,5 10,3+0,3 27,5+0,4 25,9+0,5
Bacillus cereus ATCC 10702 6,8+0,3 27,0+0,5 24,3+0,5 9,8+0,2 25,5+0,4 29,3+0,5
Escherichia coli ATCC 25922 8,2+0,3 23,0+0,4 25,0+0,5 12,2+0,1 25,8+0,3 31,8+0,6
Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 7,0+0,2 32,3+0,6 19,0+0,5 12,3+0,2 24,4+0,2 24,7+0,4
Candida albicans NCTC 2625 8,0+ 0,2 14,0+0,3 16,0+0,3 7,7+0,2 20,3+0,2 20,3+0,2
Примечание: МЫСо - комплекс Со с МЫ; МЫ2п - комплекс Zn с МЫ; различия данных по отношению к МЫ достоверно;; ЕСо - комплекс Co с Е; Е2п - комплекс Zn с Е; различия данных по отношению к Е достоверно
Краткое сообщение
2. Беленький М. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта.- М.: Наука, 1963.- 177 с.
3. Пигаревский В.Е. Лизосомально-катионный тест. Метод. рек.- М.: НИИЭМ АМН СССР, 1979.- 57 с.
4. Шубич М.Г. // Цитология.- 1974.- Т.16, №10.- С. 13-21.
УДК 615.453.6
ТЕХНОЛОГИЯ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ТАБЛЕТОК С МИКРОКАПСУЛАМИ ДИОСМИНА
А.В. КРИКОВА, Э. Ф.СТЕПАНОВА*
Введение. Многие препараты не имеют оптимальных и удобных для применения лекарственных форм. хотя ассортимент этих форм широк. При пероральном применении особого внимания заслуживают микрокапсулы. Они обеспечивают полный терапевтический эффект, им свойственна пролонгированность действия, маскировка органолептических свойств введенного вещества. Микрокапсулы способствует расширению арсенала эффективных лекарственных средств (ЛС), снижению побочных явлений, присущих пероральным лекарствам. Благодаря этому можно вести целенаправленную терапию заболеваний.
Применение средств, сочетающих в себе антигипоксиче-ское и антиоксидантное действие в качестве мягких и малотоксичных кардиопротективных препаратов, актуально для кардиологии. Внимание привлекли ЛС, регулирующие процессы окисления и перооксидации, к которым относится соединение поли-фенольной структуры - индивидуальный флавоноид - диосмин, выделенный из травы вики изменчивой в Пятигорской государственной фармацевтической академии на кафедре органической химии под руководством завкафедрой проф. Э.Т. Оганесяна.
Цель исследования - разработать новую лекарственную форму для перорального введения.
Выделение диосмина из травы вики изменчивой. В профилактике и лечении заболеваний сердечно-сосудистой системы предпочтительным считают применение ЛС растительного происхождения, которые составляют примерно 40% всех ЛС [1]. Биологически активные соединения (БАС) растительного происхождения легко усваиваются организмом, имеют широкий спектр действия, низкую токсичность и достаточную эффективность, положительно влияют на течение сопутствующей патологии. Одним из направлений в поиске БАС является изучение растений, применяемых в народной медицине. К числу таких источников относятся растения рода Vicia семейства Fabaceae (Бобовые).
Род Vicia L. (Вика, горошек) насчитывает 150 видов, из которых 48 растет на Северном Кавказе. Вики распространены и в Европейской части России, в Сибири и на Дальнем Востоке [1]. Основным флавоноидом надземной части вики изменчивой является диосмин, представляющий собой 7-рутинозид диосме-тина. Особенностью этого биозида является высокая прочность гликозидной связи. Диосмин из цветков вики изменчивой был получен с предварительной обработкой сырья этанолом, способствующей избирательной экстракции веществ, которые в отличие от диосмина хорошо растворимы в этом растворителе (рис.1).
Рис. 1. Схема выделения диосмина
Предложенная схема выделения целевого продукта позволяет сократить число операций и длительность процесса [4]. В качестве сырья использовали траву вики изменчивой, собранную в фазу цветения и плодоношения на юго-западном склоне горы Машук (г. Пятигорск). Для снижения экономических затрат разработан метод получения диосмина путем обработки сырья оксидом кальция. Выделение диосмина идет по схеме на рис. 2.
Раствор диосмина |
30 % этанол
Нерастворимый с
=с
I Диосмин ~|
Надосадочная жидкость
Влияние биокомплексов на показатели антиинфекционной защиты
Физ. р-р MN MNZn MNCo F FZn FCo
1 2 3 4 5 6 7
Фагоцитарный индекс, % 39,4±2,8 43,2±2,5 49,4±1,91,2 51,3±2,21,2 45,1±1,9 52,4±2,01,5 55,6±1,91,5
Фагоцитарное число 1,8±0,3 1,7±0,2 2,0±0,3 2,1 ±0,4 1,9±0,4 2,5±0,5 2,7±0,5
Завершенность фагоцитоза, % 61,2±2,3 65,1 ±1,9 67,3±2,2 68,1 ±1,8 66,2±1,8 68,4±2,0 69,1 ±1,9
НСТ-спонтанный 27,2±3,8 28,4±3,5 30,3±2,9 29,2±3,2 29,1±2,0 31,5±2,2 30,8±2,1
НСТ- стимулированный 55,2±3,2 57,4±2,9 61,1±3,5 64,3±2,81,2 58,9±2,3 62,2±2,91,5 64,5±2,51,5
Функциональный резерв фагоцитов, % 28,0±2,4 29,0±2,1 30,8±1,9 35,1±2,01,2 30,1±1,9 31,5±1,91,5 36,0±2,01,5
Уровень ЛКБ 0,10±0,01 0,11±0,03 0,13±0,02 0,18±0,03м 0,12±0,01 0,14±0,02 0,19±0,021,5
БАС 68,8±5,3 71,5±4,9 81,7±4,3М 79,8±3,5М 73,4±3,0 84,4±3,21,5 82,5±3,01,5
Лизоцим сыворотки крови 14,2±4,8 15,3±4,5 17,1±3,9 16,4±4,5 16,4±3,1 18,1 ±3,0 17,5±3,3
Примечание: цифрами обозначены группы, по отношению к которым различия достоверны
* Пятигорск, Пятигорская государственная фармацевтическая академия
Рис. 2. Схема выделения диосмина с помощью оксида кальция
Технология таблеток с микрокапсулами для перорального применения. Технология микрокапсулирования была разработана Уэрстером (D. Wurster) в 1953 г. (Пат. США № 2648609), применившем псевдоожижение для нанесения пленочных оболочек на твердые частицы ЛС. Через два года Грин (B. Green) предложил способ получения микрокапсул, содержащих твердые вещества и жидкости, путем коацервации (Пат. США № 2712507, 1955 г.) Затем разработан ряд способов микрокапсулирования. Целью микрокапсулирования является: разделение реагирующих между собой ЛС, достигаемое объединением в одной лекарственной форме (таблетке, капсуле, спансуле, суспензии и др.) несовместимых при прямом контакте веществ, непроницаемая оболочка на частицах которых предотвращает их химическое взаимодействие; уменьшает летучесть испаряющихся лекарственных веществ. Свойством микрокапсулированных ЛС является их высокая стабильность. Когда вещество оболочки микрокапсулы химически индиффе-Таблица 3 рентно по отношению к ее содержимому, она является защитой от воздействия факторов окружающей среды, отрицательно сказывающихся на стабильности ЛС, - действие света, влаги, О2 и СО2, присутствие иных лекарственных или вспомогательных веществ.
Получение микрокапсул путем диспергирования в системе «жидкость — жидкость». В качестве дисперсионной среды использовали масло подсолнечное. Процесс проводили в реакторе, снабженном пропеллерной мешалкой. Время процесса - 10 мин при перемешивании. Образование оболочки шло в процессе охлаждения дисперсионной среды до +5°С и промывания полу-микрокапсул растворителем - изопропанолом. Затем
