CC BY
25
БИОЛОГИЧЕСКИЕ НАУКИ
УДК 579.62
ИЗУЧЕНИЕ АНТИБИТИОТИКОУСТОЙЧИВОСТИ ВИДОВ B.TREMATUM _И B. PETRII_
Ломакин А.А.,
студент-магистр, кафедра кормления и разведения животных, ФГБОУ ВО Ульяновский государственный аграрный университет имени П.А. Столыпина, Ульяновск, Россия;
Мастиленко А.В.
кандидат биологических наук, доцент кафедры "Микробиология, вирусология, эпизоотология и ветеринарно-санитарная экспертиза", ФГБОУ ВО Ульяновский государственный аграрный университет имени П.А. Столыпина Ульяновск, Россия;
Васильев Д.А.,
доктор биологических наук, заведующий кафедры "Микробиология, вирусология, эпизоотология и
ветеринарно-санитарная экспертиза ".
АННОТАЦИЯ: статья посвящена изучение изучению устойчивости к антибактериальным препаратам. По результату проведенных исследований былы выявлено на культуру микроорганизма B. trematum подавляющие свойства оказывают антибиотики группы аминогликозидов, как и группы fi-лактамных це-фалоспоринов. Микроорганизмы B.petrii проявляют резистентность по отношении fi-лактамных пеницил-линов, за исключением карбпенецилина, полусинтетических макролидов, оптохинов и фурозалину. Наибольшие подавляющие воздействие на культуру микроорганизма B.petrii оказывают антибиотики фторхинолоновой группы, за исключением энрофлоксацина.
Ключевые слова: Bordetella, B. trematum, B.petrii, ДДМ, антибиотики.
STUDY OF ANTIBIOTIC RESISTANCE OF B.TREMATUM AND B. PETRII SPECIES
Lomakin AA,
Master's Degree, Department of Feeding and Breeding Animals, FGBOU VO Ulyanovsk State Agrarian
University named after P.A. Stolypin, Ulyanovsk, Russia;
Mastilenko A. V.
Candidate of Biological Sciences, Associate Professor of the Department of Microbiology, Virology, Epi-
zootology and Veterinary-Sanitary Expertise, FGBOU VO Ulyanovsk State Agrarian University named after
P.A. Stolypin Ulyanovsk, Russia;
Vasiliev D.A.,
Doctor of Biological Sciences, Head of the Department "Microbiology, Virology, Epizootology and Veterinary Sanitary Examination ", Ulyanovsk, Russia.
ABSTRACT: The article is devoted to the study of resistance to antibacterial drugs. Based on the results of the studies, the tremendum has been revealed in the culture of the B. trematum microorganism, antibiotics of the aminoglycoside group, as well as the p-lactam cephalosporin groups, have suppressing properties. B.petrii microorganisms exhibit resistance to p-lactam penicillins, with the exception of carbpenicilin, semisynthetic macrolides, optohins and furozaline. The greatest inhibitory effect on the culture of the B.petrii microorganism is provided by the antibiotics of the fluoroquinolone group, with the exception of enrofloxacin.
Key words: Bordetella, B. trematum, B.petrii, DDM, antibiotics.
Введение
Бактерии вида B. trematum впервые были описаны Vandamme et al,. которые нашли 10 ранее неклассифицированных штаммов Bordetella у пациентов с ранениями или отитом, затем они были отнесены к этому виду. Прежде чем B.trematum был выделен как отдельный вид, Dorittke(1995) описал этот изолят, как B. avium подобный микроорганизм, выделенный от больного с хроническим отитом [3,5]. Только затем изолят (штамма LMG 13506) затем был переклассифицирован как B.trematum. На сегодняшний день, отсутствуют официальные тесты для типизации B. trematum. По данным M. Almagro-Molto, W. Eder и S. Schubert(2015) только
три изолята были выделены из человеческого клинического материала с момента его первого описания в 1996 году[1,2].
Первое упоминание о выделение бактерий вида B.petrii было в 2001 году в соответствие с идентификацией генома данного микроорганизма из биореактора [2,10], где были анаэробные условия, в котором также высокое содержание речных отложений. Так же он был выделен из образцах па-талогического материала от больных людей с хроническим заболеванием легких, больных кистоз-ным фиброзом [4,9,11].
Зарубежными авторами были проведены исследования чувствительности видов B. trematum и B. petrii к антибиотикам. Так в своей работе Norman
K. Fry, John Duncan (2005) определяли минимальную ингибирующую концентрацию на основе MIC метода для B.petrii. В их статье представлены следующие результаты исследования (мкг/мл): пенициллин> 32, ампициллин >256, пиперациллин 2, це-фтриаксон >32, цефотаксим >32, цефтазимин 32, имипенем> 32, меропенем >32, эртапенем >32, ами-кацин >256, гентамицин 4, тобрамицин 16, ципро-флаксоцин >32, эритромицин 128, азитромицин 4, кларитромицин 64, клиндамицин >256, хлорамфе-никол> 256, котримоксазол 8, рифампин>32, тетра-циклин>256. Так же по данным Alain Le Coustum-ier, Elisabeth Njamkepo et al. (2011) подавляющим действием на B.petrii обладает амоксициллин, дап-томицин, линезолид, фузидовая кислота[7,9].
Эти данные так же были подтверждены данными приведенными в своей работе M. Zelazny (2013). Что любопытно при интедификации прибор определил образец как микроорганизм вида Pseudomonas fluorescens, коэффициент достоверности анализа составлял 97%[11].
Для микроорганизмов B.trematum выявлена чувствительность к ампициллину, пиперациллину, амоксициллин-клавулановой кислоте, пиперацил-лин-тазобактам, цефепиму, имипенему, меропе-нему, гентамицину, тобрамицину, амикацин, три-метоприм-сульфаметоксазолу, левофлоксацину, tigecycline, и миноциклин. был устойчив к цефокси-тину, цефуроксиму, цефотаксиму, цефтазидим, эртапенем, ципрофлоксацину, и фосфомицину [8].
Цель работы. Изучение резистентности микроорганизмов видов B.trematum и B. petrii к антибиотикам препаратам.
Материалы и методы:
В работе использованы штаммов музея кафедры МВЭиВСЭ ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГАУ»: Bordetella trematum Vandamme et al.(ATCC 700309), Bordetella petrii von Wintzingerode(ATCC BAA-461).
Определение чувствительности культур к хи-миотерапевтическим препаратам при подборе селективного компонента к среде проводили согласно МУК 4.2.1890-04 "Определение чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам"[14]. Для исследования резистентности к антимикробным препаратам были использованы ГРМ-агар (ГНЦ ПМБ п. Оболенск, ТУ 9398-02078095326-2006, Рег. № ФСР 2007/00001), ГРМ-бульон (ГНЦ ПМБ п. Оболенск) (ТУ 9398-02178095326-2006, Рег. № ФСР 2007/00002), диски с антибиотиками (НИИ им. Пастера г. Санкт-Петербург). На всех этапах работы был использован 0,9% р-р NaCl.
Результаты исследований
В данной работе была использована 6 часовая бульонная культура B. trematum, B.petrii после инкубации в ГРМ-бульоне при 37°С. Для определения чувствительности к антибактериальным препаратам был использован диско-диффузионный метод (ДДМ), согласно МУК 4.2.1890-04 «Определение чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам» [1].
Таблица 1. Результаты определения чувствительности к антимикробным препаратам для микроорганизмов B. trematum(Btr-309), B.petrii (Bpt-461). Зона лизиса указана в мм.
Наименование антибиотика Концентрация антибиотика (ед) B. trematum Btr-309 B.petrii Bpt-461
ß-лактамные пенициллины
Амоксициллин 20 20 10
Бензилпенициллин 10 7 0
Карбенициллин 100 12 25
ß-лактамные цефалоспорины
Цефуроксим 75 11 0
Цефалотин 30 13 18
Цефтриаксон 30 13 22
Цефамандол 30 12 24
Цефалоперазон 75 18 25
Природные макролиды
Поликсин — 8 18
Полусинтетические макролиды
Кларитромицин 15 26 30
Доксициклин 40 0
Аминогликозиды
Стрептомицин 30 24 25
Неомицин 30 15 22
Канамицин 30 17 26
Левомицетины (синтет. аналоги хлорамфеникола)
Левомицитин 30 17 30
Гликопептидные антибиотики
Ванкомицин 30 16 0
Фторхинолоны
Ципрофлоксацин 5 18 34
Энрофлоксацин 5 22 30
Ломефлоксацин 17 30
Фурадонин 12 0
Производные нитрофуранов
Фурагин 300 12 0
Прочие
Оптохин — 0 0
Фуразолин 0 0
Линкомизиды
Линкомицин 15 мкг 0 6
Клиндамицин 2 мкг 25 0
Тетрациклины
Доксициклин 2 мкг 24 40
Полупептиды
Бацитрацин 0,04 ед 0 16
Ансамицины
Рифампицин 5 мкг 11 21
Рис. 1. Чувствительность штамма B. trematum Btr-309 к антибактериальным препаратам. Температура культивирования - 370С, время культивирования - 24 часа. Антибиотики: 1 - поликсин, 2-цефуроксим, 3- фурагин, 4-ломефлоксацин, 5-доксициклин.
Согласно МУК 4.2.1890-04 «Определение чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам» величина диаметров зон задержки роста, при которых принято считать, что бактериальная культура чувствительна к антибактериальным препаратам составляет для В-лактам-ных цефалоспоринов > 18,0 мм, для аминоглико-зида канамицина > 18,0 мм, для аминогликозида гентамицина > 15,0 мм
По результату проведенных исследований былы выявлено на культуру микроорганизма B. trematum подавляющие свойства оказывают антибиотики группы аминогликозидов, как и группы В-лактамных цефалоспоринов (рис.1). Так же из проведенного исследования можно сделать вывод, что бактерии этого вида проявляют слабую резистентности к разным группами антимикробных средствам. Микроорганизмы B.petrii проявляют резистентность по отношении В-лактамных пеницилли-нов, за исключением карбпенецилина,
полусинтетических макролидов, оптохинов и фуро-залину. Наибольшие подавляющие воздействие на культуру микроорганизма B.petrii оказывают антибиотики фторхинолоновой группы, за исключением энрофлоксацина. Зона задержки роста бактериальной культуры к энрофлоксацин-30 мм, ципро-флоксацина-34 мм.
Список литературы.
1. Васильев Д. А. и др. Бордетеллёз домашних животных: характеристика заболевания и возбудителя, разработка методов диагностики //Монография.-Ульяновск: УГСХА им. ПА Столыпина.-2014.-190 с. - 2014.
2. Almagro-Molto M., Eder W., Schubert S. Bordetella trematum in chronic ulcers: report on two cases and review of the literature //Infection. - 2015. - Т. 43. - №. 4. - С. 489-494.
3. Barabote R. D., Saier M. H. Comparative genomic analyses of the bacterial phosphotransferase system //Microbiology and Molecular Biology Reviews. -2005. - Т. 69. - №. 4. - С. 608-634.
4. Carleton A. et al. Clustered multidrug-re-sistant Bordetella petrii in adult cystic fibrosis patients in Ireland: case report and review of antimicrobial therapies //JMM Case Reports. - 2014. - T. 1. - №. 1
5. Dorittke C. et al. Isolation of aBordetella avium—Like organism from a human specimen //European Journal of Clinical Microbiology & Infectious Diseases. - 1995. - T. 14. - №. 5. - C. 451-454.
6. Fry N. K. et al. Bordetella petrii clinical isolate //Emerging infectious diseases. - 2005. - T. 11. - №. 7. - C. 1131.
7. Le Coustumier A. et al. Bordetella petrii infection with long-lasting persistence in human //Emerging infectious diseases. - 2011. - T. 17. - №. 4. - C.
8. Saksena R. et al. Bordetella trematum bacteremia in an infant: a cause to look for //Indian journal of
medical microbiology. - 2015. - T. 33. - №. 2. - C. 305.
9. Stark D. et al. Bordetella petrii from a clinical sample in Australia: isolation and molecular identification //Journal of medical microbiology. - 2007. - T. 56. - №. 3. - C. 435-437.
10. von Wintzingerode F. et al. Bordetella petrii sp. nov., isolated from an anaerobic bioreactor, and emended description of the genus Bordetella //International journal of systematic and evolutionary microbiology. - 2001. - T. 51. - №. 4. - C. 1257-1265.
11. Zelazny A. M. et al. Adaptability and persistence of the emerging pathogen Bordetella petrii //PLoS One. - 2013. - T. 8. - №. 6. - C. e65102.
АКТУАЛЬНОСТЬ ИЗМЕНЕНИЯ ПЛОЩАДИ ЗЕЛЕНОЙ ЗОНЫ И СОСТАВА ДРЕВОСТОЯ ПРИГОРОДНЫХЛЕСОВ ГОРОДОВ ЮЖНОГО ПРИМОРЬЯ (РЕАЛИЗАЦИЯ ПРОГРАММЫ «БОЛЬШОЙ ВЛАДИВОСТОК»)
Розломий Наталья Геннадьевна
Доцент, кандидат биологических наук Приморская государственная сельскохозяйственная академия, г. Уссурийск
АННОТАЦИЯ: цель статьи - дать краткую характеристику земель, входящих в состав территории Владивостокской агломерации, дано обоснование дефицита лесов зеленых зон, определен коэффициент лесистости п-ва Муравьева (г. Владивосток), приведены данные по загрязнению атмосферного воздуха в городах «Большого Владивостока», рассчитана площадь зеленой зоны г. Владивостока.
Ключевые слова: Приморский край, Владивостокская агломерация, состояние пригородных лесных экосистем, динамика и площади городских пригородных лесов, пути оптимизации состояния лесопарковых насаждений.
ABSTRACT: the purpose of the article is to give a brief description of the lands that make up the territory of the Vladivostok agglomeration, the justification for the deficit of forests of «green zones», the coefficient of forest cover of Murav'ev Peninsula (Vladivostok), the data on atmospheric air pollution in the cities of "Greater Vladivostok" green zone of Vladivostok.
Keywords: Primorsky Region, Vladivostok agglomeration, the state of near towns forest ecosystems, dynamics and areas of urban suburban forests, ways to optimizations the state of forest parkings
Введение. Важной экологической проблемой современного урбанизированного мира является изучение особенностей функционирования, оценка состояния и поиск путей оптимизации лесопарковых насаждений и зеленых зон городов. Она носит комплексный характер и включает в себя целый ряд как научных, так и практических задач, главными из которых, на наш взгляд, являются круг вопросов, связанных с рекреационным лесопользованием, и мониторинг состояния пригородных лесных экосистем совместно с урбоэко-системами. К сожалению, в настоящее время не существует единой методической базы комплексного изучения экологических проблем пригородных лесов и насаждений [2 а46].
Большая часть площади Владивостокской агломерации - это Владивостокский городской округ. Владивостокский городской округ занимает территорию полуострова Муравьева-Амурского до посёлка Трудовое включительно, полуостров Песчаный, около 20 островов залива Петра Великого острова. Он протянулся на расстояние около 30 км с юга на север и почти 10 км с запада
на восток (без полуострова Песчаный), омывается водами Амурского и Уссурийского заливов, входящих в акваторию залива Петра Великого Японского моря. В состав городского округа входит непосредственно город Владивосток, посёлки Трудовое, остров Русский, остров Попова, остров Рейнеке и село Береговое.
Обобщение полученных результатов и их разъяснение. По данным из государственного земельного кадастра, на 1 января 2005 г. общая площадь земель в границах Владивостокского городского округа составляет 56154 га. Часть города, расположенная на полуострове Муравьева-Амурского, включая п. Трудовое, имеет площадь 35044 га, а расположенная на полуострове Песчаный (с прилегающей территорией), имеет площадь 7525 га. Остров Русский, самый крупный из островов, входящий в городской округ, имеет площадь 9764 га. Площадь остальных тридцати трёх островов в общей сложности составляет 2915 га.
Леса окрестностей г. Владивостока относятся к зоне смешанных хвойно-широколиственных ле-
