CC BY
40
ИЗМЕНЕНИЯ ИОННЫХ ТОКОВ НЕЙРОНОВ МОЛЛЮСКОВ ПОД ВЛИЯНИЕМ Ы-ФЕНИЛАЛКИЛЬНЫХ ПРОИЗВОДНЫХ ТАУРИНА
УДК 615.216.2:577.3:612.822.3 © А. И. Вислобоков1, Л. К. Хныченко 2, Ю. Д. Игнатов1, Н. С. Сапронов2, П. Д. Шабанов 2
1ГБОУ ВПО Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. акад. И. П.Павлова Минздрава России; 2 ФГБУ НИИ экспериментальной медицины СЗО РАМН, Санкт-Петербург
Ключевые слова:_
таурин; n-фенилалкильные производные таурина; натриевый; кальциевый и калиевый ионный ток; нейрон; Lymnaea stagnalis; Planorbarius corneas.
Резюме:_
Изучали изменения трансмембранных натриевых, кальциевых и калиевых ионных токов под влиянием аминокислоты таурина и n-фенилалкильных производных таурина при внеклеточном приложении в концентрациях 1, 10, 100 и 1000 мМ. Использовали метод внутриклеточного диализа и фиксации мембранного потенциала на изолированных нейронах прудовика Lymnaea stagnalis и катушки Planorbarius corneas. Установлено, что растворы, содержащие 1 и 10 мкМ исследуемых веществ, не изменяли активность ионных каналов изолированных нейронов, а при увеличении концентраций до 100 и 1000 мкМ оказывали дозоза-висимое и обратимое подавляющее действие на все токи: таурин < ТАУ-02 < ТАУ-15 < ТАУ-60. Сдвига вольт-амперных характеристик мембраны по оси потенциалов не происходило и не наблюдалось изменения кинетики развития токов.
введение
Влияние лекарственных средств на организм может быть реализовано на системном, органном и клеточном уровнях по различным механизмам, изучение которых является важным для фундаментальной и прикладной фармакологии. Известно, что многие патологические состояния, такие как сердечная аритмия, нестабильность артериального давления, эпилепсия, диабет связаны с нарушением работы ионных каналов и ионного баланса клеток [2, 14, 15]. В основе мембранотропных эффектов лекарственных средств лежит их непосредственное взаимодействие с ма-кромолекулярными структурами клетки [2, 16, 19], поэтому изучение влияния вновь синтезированных соединений на активность ионных каналов расширяет представления о механизме их действия и способствует более эффективной фармакотерапии.
В настоящее время большое внимание уделяется созданию фармакологических препаратов на основе эндогенных метаболитов и их производных. В этом отношении несомненный интерес вызывает амино-
кислота таурин, содержащаяся в большом количестве в нервной ткани и миокарде и выполняющая функцию трансмиттера в нейромедиаторных системах [4, 6, 12, 13, 17, 18, 21-23]. Однако нестойкость и быстрая инактивация в организме являются препятствием для ее использования в клинике. В связи с этим в отделе нейрофармакологии ФГБУ НИИЭМ СЗО РАМН был синтезирован ряд оригинальных соединений, представляющих собой п-фенилалкильные производные таурина, выявлены наиболее активные и перспективные соединения (ТАУ-02, ТАУ-15, ТАУ-60), характеризующиеся центральным и периферическим действием [7, 9].
В экспериментах на животных продемонстрировано, что ТАУ-60 устраняет нарушения ритма, вызванные у крыс окклюзией левой коронарной артерии, введением аконитина или хлористого кальция. Действие препарата сопоставимо с эффектом прокаинамида и лидокаина. В основе антиаритмического эффекта может лежать удлинение реполяризации и рефрактерного периода вследствие влияния на ионные каналы электровозбудимой мембраны кардиомиоцитов, а также влияние на системную гемодинамику [7, 9, 10, 20]. Кардиотропное действие соединения ТАУ-15 обусловлено нормализацией энергетического обмена, активности ферментов антиоксидантной защиты, снижением интенсивности процессов перекисного окисления липидов [8]. По результатам гистологического, гистохимического анализа и изучения метаболического статуса сердца выявлено, что противо-ишемический эффект этого соединения сопоставим с таковым у неотона, действие которого в основном направлено на энергетический метаболизм, сократительную функцию и структурную целостность мембран кардиомиоцитов [11].
Цель настоящего исследования — изучить влияние новых п-фенилалкильных производных таурина (ТАУ-02, ТАУ-15, ТАУ-60) на ионные токи изолированных нейронов, что может способствовать пониманию механизмов их действия в клетке.
материалы и методы
Объект исследования — изолированные нейроны брюхоногих моллюсков прудовика большого (Lymnaea stagnalis) и катушки роговой (Planorbarius
■ Таблица 1. Ионный состав растворов (в ммоль/л) для нейронов прудовика
Регистрируемые токи NaCl CsCl CaCl2 MgCl2 KCl трис-ОН рН
Внеклеточные (перфузирующие) растворы
Суммарный входящий 100 - 2 1,5 5 10 7,5
Кальциевый входящий - 100 10 1,5 - 10 7,5
Натриевый входящий 110 - - 1,5 - 10 7,5
Калиевые выходящие 100 - 2 1,5 5 10 7,5
Внутриклеточные (диализирующие) растворы
Входящие - 120 - - - 10 7,4
Калиевые выходящие - - - - 120 10 7,4
corneus). Известны данные о сходстве мембранных механизмов электрогенеза нейронов моллюска с нейронами млекопитающих [5]. Из тела моллюсков вырезали окологлоточное кольцо нервных ганглиев, которое помещали в физиологический раствор (таблица) с добавлением 0,25 % трипсина на 35-40 минут для освобождения поверхности мембраны нейронов от соединительно-тканных оболочек, глиальных клеток и других диффузионных барьеров, а затем перекладывали в физиологический раствор. Через 10-15 минут, используя вольфрамовые иглы и полиэтиленовую пипетку, механически (под бинокулярным микроскопом) разделяли ганглии на нейроны [1]. Изолированные таким образом нейроны сохраняли свои электрические характеристики в течение 24-72 часов.
Трансмембранные ионные токи измеряли методом внутриклеточного диализа изолированных нейронов и фиксации мембранного потенциала [2, 3]. Для изготовления микропипетки с порой использовали тонкую полиэтиленовую трубку длиной 3 см, сгибая ее V-образно в струе горячего воздуха. На сгибе трубки тонкой стальной проволокой (под бинокулярной лупой) формировали выступ и на его вершине иглой проделывали отверстие. Изготов-
h2n-ch2-ch2-so3h
А. Аминокислота таурин
r-nh-ch-ch-so-nh-ch(ch3)
3'2
Б. Общая формула п-фенилалкильных производных таурина
■ Рисунок 1. Структурные формулы таурина (А) и n-фенилалкильных производных таурина (Б). R — различные радикалы для ТАУ-02, ТАУ-15 и ТАУ-60
ленную микропипетку соединяли с системой трубочек для подачи диализирующего раствора (таблица 1). Диаметр отверстия (3-5 мкм) и пригодность микропипетки для дальнейшей работы оценивали по величине сопротивления (200-300 кОм).
Изолированную живую клетку помещали на полиэтиленовую пипетку, в которой создавали толчки отрицательного гидростатического давления, вследствие чего в области поры мембрана нейрона повреждалась, создавался электрический контакт неполяризующегося электрода, соединенного усилителем фиксации потенциала, с внутриклеточным содержимым. Перфузирующий раствор (табл. 1) подавался в камеру, где находился нейрон на полиэтиленовой микропипетке, а диализирующий — внутрь этой пипетки.
Таурин и n-фенилалкильные производные таурина — ТАУ-02, ТАУ-15, ТАУ-60 (рис. 1) растворяли в наружных растворах и исследовали в концентрациях 1, 10, 100 и 1000 мкМ при внеклеточном действии на нейроны. Таурин использовали в качестве препарата сравнения как структурный аналог исследуемых соединений. Исходные величины токов принимались за 100 %, а установившиеся при введении исследуемых соединений — в % от контроля. Для каждой точки на кривой зависимости концентрация-эффект проведено по 5-6 измерений.
Кривые ионных токов визуально оценивали на экране осциллографа, вводили в компьютер и распечатывали на принтере. Полученные результаты обрабатывали с использованием статистической программы SPSS-17. Для проверки гипотезы о различиях между группами применяли непараметрический дисперсионный анализ Фридмана, а для доказательства различий между контролем и эффектами фармакологических средств в исследуемых концентрациях — апостериорное попарное сравнение по критериям Вилкоксона.
На рисунках зависимостей «концентрация — эффект» значения представлены в виде средних арифметических (n = 6-15), доверительные интервалы при p = 95 %. Для построения графиков использовали пакет программ «Excel».
результаты исследований
Результаты исследования (рис. 2, А) показали, что таурин или п-фенилалкильные производные таурина вызывали обратимые изменения амплитуды натриевого тока, зависимые от концентрации. Растворы препарата сравнения в концентрациях 1, 10 и 100 мкМ и соединений ТАУ-02, ТАУ-15, ТАУ-60 в концентрации 1 мкМ амплитуду тока не изменяли (р > 0,05). С увеличением содержания таурина в пер-фузируемых растворах до 1000 мкМ, а производных таурина до 10, 100 и 1000 мкМ амплитуда тока до-зозависимо подавлялась.
Наибольшая активность наблюдалась у соединения ТАУ-60. Изменения токов на фоне введения этого соединения наступали быстрее и сохранялись при отмывании продолжительнее (3-5 мин), чем при использовании растворов других производных таурина. Полученные данные свидетельствуют о высокой доступности структур ионных натриевых каналов для п-фенилалкильных производных таурина и о прочном связывании их молекул со структурами мембраны. Поскольку кинетика активации и инактивации тока не изменялась (рис. 2, Б), можно предположить, что отсутствуют взаимодействия молекул веществ с воротными структурами каналов. Следует отметить, что при увеличении концентрации исследуемых препаратов в перфузирующих растворах до 1000 мкМ наблюдалось незначительное (на 3-5 мВ) смещение положения максимума вольт-амперной характеристики мембраны ионных каналов на оси потенциа-
□ 1
ою
а 100
■ 1000
120
100
80 —
60 —
40 —
20
1Ш
ТАУРИН ТАУ-02 ТАУ-15
С, мкМ ,5
I
ТАУ-60
□ 1
□ 10
В 100
11000
■ Рисунок 2. Изменения натриевых ионных токов нейронов прудовика под влиянием таурина и его п-фенилалкильных производных в различных концентрациях. А — зависимости «концентрация-эффект»; Б — сравнение производных таурина, 1000 мкМ: 1 — контроль, 2 — таурин, 3 — отмыв, 4 — ТАУ-02, 5 — ТАУ-15, 6 — ТАУ-60; В — изменения вольт-амперньх характеристик натриевых каналов под влиянием ТАУ-02:1 — контроль, 2 — 10 мкМ, 3 — 100,4 — 1000, 5 — отмыв. По оси абсцисс — концентрация (А), время (Б) и В — потенциал (пилообразное смещение от -40 до 10 мВ за 20 мс); по оси ординат — ионный ток (для А: 1 — при действии, 10 — контроль, % при р = 95 %). Поддерживаемый потенциал --90 тУ, тестирующий (для Б)--10 мВ
лов вправо (рис. 2, В, 4 — на примере ТАУ-02, указывающее на изменение потенциала фиксированных зарядов мембраны вблизи натриевых каналов.
Изменения амплитуды кальциевого тока (рис. 3, А) при внеклеточной перфузии растворами с содержанием таурина или п-фенилалкильных производных таурина сопоставимы с таковыми для натриевого тока (рис. 2, А), но менее выражены. Кроме того, в концентрациях 1 и 10 мкМ исследуемые соединения проявляли тенденцию к повышению амплитуды кальциевого тока. Наиболее значительное дозозависимое подавление амплитуды кальциевого тока вызывалось соединением ТАУ-60. Как и для натриевого тока, эффекты наступали быстро и отмывались замедленно. Кинетика развития тока (рис. 3, Б, кривая 4 снизу — на примере ТАУ-15) и положение максимума вольт-амперной характеристики мембраны (рис. 3,
-14 -I
■ Рисунок 3. Изменения кальциевых ионных токов нейронов прудовика под влиянием таурина и его п-фенилалкильных производных в различных концентрациях. А — зависимости «концентрация-эффект»; Б — изменения тока под влиянием ТАУ-60:1 — контроль, 2 — отмыв, 3 — 100 и 4 — 1000 мкМ; В — изменения вольт-амперных характеристик кальциевых каналов под влиянием ТАУ-15:1 — контроль, 2 — отмыв, 3 — 1000 мкМ. По оси абсцисс — концентрация (А), время (Б) и В — потенциал (пилообразное смещение от -40 до 10 мВ за 100 мс); по оси ординат — ионный ток (для А: 1 — при действии, 10 — контроль, % при р = 95 %). Поддерживаемый потенциал--90 тУ, тестирующий (для Б) — 0 мВ
■ Рисунок 4. Изменения калиевых ионных токов нейронов прудовика под влиянием таурина и его производных в различных концентрациях. А — зависимости «концентрация-эффект»; Б — изменения тока на введение ТАУ-15: 1 — контроль, 2 — отмыв, 3 — 100 и 4 — 1000 мкМ; В — изменения вольт-амперных характеристик под влиянием ТАУ-15: 1 — контроль, 2 — отмыв, 3 — 100 и 4 — 1000 мкМ; по оси абсцисс: А — концентрация, Б — время (Т1 — до стрелки), Г - потенциал (пилообразное смещение от -40 до 30 мВ за 50 мс; по оси ординат — ионные токи (А: 1 — при действии, 10 — контроль, % при р = 95 %). Поддерживаемый потенциал — -90 тУ, тестирующий — 30 т¥ (Б)
В, кривая 3) не изменялись. Необходимо отметить, что перфузия мембраны нейрона растворами п-фенилалкильных производных таурина в концентрациях 100 и 1000 мкМ ускоряла кинетику закрывания кальциевых каналов после снятия деполяризующих сдвигов мембранного потенциала («хвост» тока на рис. 2, Б верхние кривые в самой их правой части). Это позволяет предположить, что тестируемые препараты оказывают влияние на инактиваци-онные ворота ионных каналов.
Изменения калиевых медленных токов при перфузии растворами таурина и его п-фенилалкильных производных напоминали таковые при исследовании кальциевых токов, но в целом были несколько слабее (рис. 4, А). Амплитуда тока при перфузии изолированного нейрона таурином не изменялась, а в ответ на введение растворов ТАУ-02, ТАУ-15, ТАУ-60 в концентрациях 100 и 1000 мкМ — снижалась равнозначно и дозозависимо. При подавлении калиевого тока заметных изменений процесса его активации или инактивации не обнаружено (рис. 4, Б). Вольт-амперные характеристики калиевых каналов в этих условиях изменяли свой наклон (рис. 4, В), демонстрируя лишь подавление тока без их смещения по оси потенциалов (рис. 4, В — подавление тока, сверху кривые 3 и 4 и частичное восстановление тока после действия — кривая 2).
Влияние производных таурина на быстрые калиевые токи напоминало их влияние на медленные калиевые токи. Для сравнения общий характер подавления выходящих быстрых и медленных калиевых ионных токов показан на рисунке 5 (амплитуда начальной части тока снижалась при введении препаратов в концентрации 1000 мкМ). Процесс активации-инактивации медленного тока в этих условиях не изменялся (нижняя кривая).
■ Рисунок 5. Изменения калиевых медленных и быстрых ионных токов (К и 1К/) при введении ТАУ-15. Подавление быстрого калиевого тока (начальная часть кривых): 1 — контроль, 2 — отмыв, 3 — 1000 мкМ; по оси ординат — ионный ток: по оси абсцисс — время (Т1 — до стрелки). Поддерживаемый потенциал--90тУ, тестирующий — 30 тУ
обсуждение полученных результатов
Полученные результаты свидетельствуют, что исследованные таурин и п-фенилалкильные производные таурина являются мембранотропными соединениями, способными изменять проводимость натриевых, кальциевых и калиевых ионных каналов нервных клеток. Доказательством их мем-бранотропной активности служит обратимое до-зозависимое подавление ионных токов при перфузии изолированной живой клетки растворами соединений ТАУ-02, ТАУ-15, ТАУ-60 в концентрациях от 10 мкМ и выше, и особенно выраженно — при 100 и 1000 мкМ. Производные таурина в большей степени подавляют натриевые токи, чем кальциевые и калиевые, что указывает на определенную избирательность в их влиянии на натриевые ионные каналы.
В наших экспериментах таурин во всем диапазоне концентраций по мембранной активности казался существенно слабее, чем п-фенилалкильные
производные таурина. В ряду исследованных нами веществ мембранотропная активность возрастала следующим образом: таурин < ТАУ-02 < ТАУ-15 < ТАУ-60, что, вероятно, обусловлено различиями в структуре их молекул.
Механизм подавления ионных токов п-фенилалкильными производными таурина, напоминает таковой у анестетиков и противоаритмиче-ских средств — обратимое блокирование ионных каналов [1-3]. Небольшое ускорение инактивации входящих «хвостовых» токов после снятия деполяризующих сдвигов потенциала может объясняеться взаимодействием молекул с соответствующими воротными механизмами ионных каналов. Заслуживает внимания и тот факт, что при перфузии мембраны изолированной живой клетки нейрона растворами исследуемых производных подавлялись преимущественно натриевые токи.
Таким образом, можно заключить, что таурин и п-фениалалкильные производные таурина в низких концентрациях 1-10 мкМ оказывают модулирующее действие на электровозбудимые клетки, что обусловливает их кардиотропные свойства. В высоких концентрациях (100 и 1000 мкМ) п-фениалалкильные производные таурина оказывают каналоблокирую-щее действие, которое может существенно снижать возбудимость клеток, генерацию потенциала покоя, действия, подавлять синаптические потенциалы и ионные градиенты клеток, действуя подобно местным анестетикам [2].
литература
1. Вислобоков А. И., Игнатов Ю. Д. Цитофармакологи-ческое исследование механизмов действия мем-бранотропных средств // Обзоры по клин. фармакол. и лек. терапии. — 2003. — Т. 2, № 1. — С. 14-22.
2. Вислобоков А. И., Игнатов Ю. Д., Галенко-Ярошевс-кий П. А., Шабанов П. Д. Мембранотропное действие фармакологических средств. — СПб — Краснодар: Просвещение-Юг, 2010. — 528 с.
3. Вислобоков А. И., Игнатов Ю. Д., Мельников К. Н. Фармакологическая модуляция ионных каналов мембраны нейронов. — СПб.: Издательство СПбГМУ, 2006. — 288 с.
4. Гуревич В. С. Таурин и функции возбудимых клеток. — Л.: Наука, 1986. — 109 с.
5. КостюкП. Г., Крышталь О. А. Механизмы электрической возбудимости нервной клетки. — М.: Наука, 1981. — 207 с.
6. Нефедов Л. И. Проявления биологической активности таурина // Изв. АН Беларуси. Сер. биол. наук. — 1992. — № 3-4. — С. 99-106.
7. Сапронов Н. С., Торкунов П. А., Елисеев В. В. и др. Влияние нового фенилалкильного производного таурина на размер зоны некроза при экспериментальном инфаркте миокарда у крыс // Патол. физиол. и эксперим. терапия. — 1999. — № 4. — С. 19-20.
8. Сапронов Н. С., Хныченко Л. К., Шелемеха С. Е. Стрессорные нарушения метаболизма и их фарма-кокоррекция. — СПб.: Формиздат, 2009. — 240 с.
9. Торкунов П. А., Сапронов Н. С. Действие нового производного таурина при различных вариантах гипок-
сических состояний // Эксперим. и клин. фармакол. - 2000. - Т. 63, № 1. - С. 37-40.
10. Торкунов П. А., Сапронов Н. С. Кардиотропное действие таурина // Эксп. и клин. фарм. — 1997. — Т. 60, № 5. — С. 72-77.
11. Хныченко Л. К., Бульон В. В., Сапронов Н. С. Изучение влияния нового производного таурина на некоторые показатели метаболизма при экспериментальном инфаркте миокарда // Эксперим. и клин. фармакол. — 2001. — Т. 64, № 2. — С. 38-40.
12. Хныченко Л. К., Сапронов Н. С. Фармакологическая активность аминокислоты таурина // Обзоры по клин. фарм. и лек. терапии. — 2004. — Т. 3, № 4. — С. 15-19.
13. Huxtable R.J. Physiological actions of taurine // Physiol. Rev. — 1992. — Vol. 72. — P. 101-163.
14. Jeyaraj D., Haldar S. M., Wan X. et al., Circadian rhythms govern cardiac repolarization and arrhyth-mogenesis // Nature. — 2012. — Vol. 483, N 7387. — P. 96-99.
15. Martin C. A., Matthews G. D., Huang C. L. Sudden cardiac death and inherited channelopathy: the basic elec-trophysiology of the myocyte and myocardium in ion channel disease // Heart. — 2012. — Vol. 98, N 7. — P. 536-543.
16. Narahashi T. Neuroreceptors and ion channels as the basis for drug action: past, present, and future // J. Pharmacol. Exp. Ther. — 2000. — Vol. 294, N 1. — P. 1-26.
17. Oja S. S., Saransaari P. Modulation of taurine release by glutamate receptors and nitric oxide // Prog. Neuro-biol. — 2000. — Vol. 62. — P. 659-665.
18. Oja S. S., Saransaari P. Pharmacology of taurine // Proc. West. Pharmacol. Soc. — 2007. — Vol. 50. — P. 8-15.
19. Ragsdale D. S., McPhee J. C., Scheuer T., Catterall W. A. Common molecular determinants of local anesthetic, antiarrhythmic and anticonvulsant block of voltage-gated Na channels // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. — 1996. — Vol. 93. — P. 9270-9275.
20. SapronovN. S., Gavrovskaya L. K. Taurinamide derivatives — drugs with the metabolic type of action // Adv. Exp. Med. Biol. — 2006. — Vol. 583. — P. 509-514. (Book: Taurine 6; Ed. S. S. Oja, P. Saransaari; Spriger).
21. Saransaari P., Oja S. S. Taurine and neural cell damage // Amino Acids. — 2000. — Vol. 19, № 3-4. — P. 509-526.
22. Schaffer S. W., Jong ^ C. J., Ramila K. C., Azuma J. Physiological roles of taurine in heart and muscle // J. Biomed. Sci. — 2010. — Vol. 17. — Suppl. 1: S2.
23. Wu J. Y., Prentice H. Role of taurine in the central nervous system // J. Biomed. Sci. — 2010. — Vol. 17. — Suppl. 1: S1.
THE MOLLUSC iONiC CURRENTS CHANGES AFTER ADMiNiSTRATiON OF N-PHENYLALKYL DERiVATiVES OF TAURiNE
VislobokovA. I., Khnychenko L. K., Ignatov Yu. D., Sapronov N. S., Shabanov P. D.
♦ Summary: The transmembrane sodium, potassium and calcium ionic currents were studied after extracellular administration of N-phenylalkyl derivatives of taurine in concentrations 1, 10, 100 and 1000 mM. The method of intra-cellular dialysis with fixed membrane potential was used in model of isolated neurons of the mollusks Lymnaea stag-nalis and Planorbarius corneus. The solutions containing 1 and 10 mM of the compounds studied did not change ionic channels activity in isolated neurons. Concentrations 100 and mM depressed reversibly all currents in the dose-
dependent manner: taurine < TAU-02 < TAY-15 < TAU-60. The voltage-amplitude membrane characteristics as well as kinetics of the currents did not change.
♦ Key words: taurine; N-phenylalkyl derivatives of taurine; sodium; potassium and calcium ionic currents; neuron; Lymnaea stagnalis; Planorbarius corneus.
♦ Информация об авторах
Вислобоков Анатолий Иванович — д. б. н., заведующий отделом цитофармакологии Института фармакологии им. А. В. Валь-дмана, ГБОУ ВПО Санкт-Петербургский государственный медицинский университет имени акад. И. П. Павлова Минздрава России. 197022, Санкт-Петербург, ул. Льва Толстого, д. 6/8. E-mail: vislobokov@yandex.ru.
Хныченко Людмила Константиновна — д. б. н., старший научный сотрудник отдела нейрофармакологии им. С. В. Аничкова ФГБУ НИИ экспериментальной медицины СЗО РАМН. 197376, Санкт-Петербург, ул. Академика Павлова, д. 12. E-mail: ludmila.konst83@mail.ru.
Игнатов Юрий Дмитриевич — д. м. н., профессор, академик РАМН, директор Института фармакологии им. А. В. Вальдма-на, ГБОУ ВПО Санкт-Петербургский государственный медицинский университет имени акад. И. П. Павлова Минздрава России. 197022, Санкт-Петербург, ул. Льва Толстого, д. 6/8.
Vislobokov Anatoliy Ivanovich — Doctor of Biol. Sci. (Pharmacology), Head of the Dept. of Cytopharmacology. AV Waldman Institute of Pharmacology, IP Pavlov State Medical University, 6/8, Tolstoy street, St. Petersburg 197022. E-mail: vislobokov@yandex.ru.
Khnychenko Lyudmila Konstantinovna — Doctor of Biol. Sci. (Pharmacology), leading researcher, SV Anichkov Dept. of Neuropharmacology, Institute of Experimental Medicine NWB RAMS, 12, Acad. Pavlov street, St.Petersburg, 197376, Russia E-mail: ludmila.konst83@mail.ru.
Ignatov Yuriy Dmitriyevich — academician of RAMS, Doctor of Med. Sci. (Pharmacology), Professor, Head of the AV Waldman Institute of Pharmacology, IP Pavlov State Medical University, 6/8, Tolstoy street, St.Petersburg 197022
Сапронов Николай Сергеевич — д. м. н., профессор, член-корреспондент РАМН, главный научный сотрудник отдела нейрофармакологии им. С. В. Аничкова ФГБУ НИИ экспериментальной медицины СЗО РАМН. 197376, Санкт-Петербург, ул. Академика Павлова, д. 12. E-mail: sns@iemspb.ru.
Шабанов Петр Дмитриевич — д. м. н., профессор, заведующий отделом нейрофармакологии им. С. В. Аничкова Института Экспериментальной медицины СЗО РАМН. 197376, Санкт-Петербург, ул. Академика Павлова, д. 12. E-mail: pdshabanov@mail.ru.
Sapronov Nikolay Sergeyevich — Corresponding Member of RAMS, Doctorof Med.Sci. (Pharmacology), Professor, principal researcher, SV Anichkov Dept. of NeuroPharmacology, Institute of Experimental MedicineNWBRAMS,12,Acad.Pavlovstreet,St.Petersburg,197376 E-mail: sns@iemspb.ru.
Shabanov Petr Dmitriyevich — Dr. Med. Sci. (Pharmacology), Professor, Head, Dept. of Neuropharmacology, Research Institute of Experimental Medicine, North-West Branch of RAMS. 197376, St.- Petersburg, Acad. Pavlov St., 12. E-mail: pdshabanov@mail.ru.
