Активация ионных токов нейронов моллюска окисленным глутатионом, глутоксимом и цистином Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

2146

НЕИРОПСИХОФАРМАКОЛОГИЯ

© В.Г. АНТОНОВ1, В.А. БОРИСОВА2, А.И. ВИСЛОБОКОВ2, К.Н. МЕЛЬНИКОВ2; 2007

1 Военно-медицинская академия им. С.М. Кирова МО РФ; акад. Лебедева ул., 6, Санкт-Петербург, 194044, Россия

2 Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. акад. И.П. Павлова; Льва Толстого ул., 6/8, Санкт-Петербург, 197022, Россия

Резюме

Изучали изменения трансмембранных кальциевого, натриевого, калиевого медленного и быстрого ионных токов под влиянием БИ-содержащих препаратов: окисленного глутатиона, глутоксима и цистина при внеклеточном действии в концентрациях 0,1; 1; 10; 100 и 1000 мкМ. Использовали метод внутриклеточного диализа и фиксации мембранного потенциала изолированных нейронов прудовика 1утпаеа в1адпаГ№. Все препараты обратимо и примерно в равной степени увеличивали ионные токи на 5-30 % и ускоряли кинетику инактивации калиевого медленного тока. Мембранотропная активность препаратов может быть связана с влиянием их БИ-групп на клеточную мембрану и лежать в основе полифункционального действия исследованных соединений на клетки.

Антонов В.Г., Борисова В.А., Вислобоков А.И.,

Мельников К.Н. Активация ионных токов нейронов моллюска окисленным глутатионом, глутоксимом и цистином. // Психофармакол. биол. наркол. 2007. Т. 7, № 3-4. С. 2146-2153

PPBN ID: ppbn.v7i3.28

Ключевые слова

окисленный глутатион; глутоксим; цистин; натриевый, кальциевый, калиевый ионный ток; нейрон; 1утпаеа в1адпаИв

АКТИВАЦИЯ ИОННЫХ ТОКОВ НЕЙРОНОВ МОЛЛЮСКА ОКИСЛЕННЫМ ГЛУТАТИОНОМ, ГЛУТОКСИМОМ И ЦИСТИНОМ

ВВЕДЕНИЕ

Функциональная роль потенциал-управляемых ионных каналов и мембранных рецепторов в деятельности возбудимых нервных и мышечных клеток общеизвестна [3, 6—9]. Например, патологические изменения ритма сердечной деятельности коррегируются противоаритмическими средствами, которые действуют на ионные каналы и рецепторы клеточных мембран, ан-тигипоксические средства и др. также способны модулировать активность ионных каналов [2, 19].

Глутатион в клетках является восстанавливающим фактором и антиоксидантом и его функции чрезвычайно многообразны. Он предотвращает окисление SH-групп, восстанавливая S — S связи, индуцированные окислительным стрессом; инактивирует свободные радикалы, участвует в детоксикации ксенобиотиков (лекарственных веществ, канцерогенов) [14].

В иммуннокомпетентных клетках редокс-система восстановленный/окисленный глутатион участвует в регуляции экспрессии генов и передачи сигналов в норме и при патологии [12]. Восстановленный глутатион, как антиоксидант, также защищает клетки от окислительного стресса, но его катаболиты могут инициировать окислительный стресс, участвуя в реакциях, опосредуемых ионами металлов, и приводящих к образованию активных форм кислорода и свободных радикалов [22]. Анализ данных литературы свидетельствует о том, что регулирующая роль окисленного глутатиона в процессах внутриклеточной сигнализации и, в частности, Са2+-сигнализации весьма многообразна [4, 5, 10, 20, 24]. Прямое влияние на ионные каналы исследовано недостаточно.

В связи с этим, задачей настоящей работы являлось сравнительное исследование изменений кальциевого, натриевого, калиевых медленного и быстрого ионных токов соматической мембраны изолированных нейронов моллюска прудовика под влиянием окисленного глутатиона, его синтетического аналога — препарата глутоксима, серосодержащих пептидов С1 (цистин + металл) и С2 (цистин—HCl)

2148

Таблица

Изменения ионных токов нейронов прудовика под влиянием окисленного глутатиона, глутоксима, серосодержащих пептидов С1 и С2 в различных концентрациях ( % от контроля)

Конц. 1 10n , М Глутоксим (n = 6) Окисленный глутатион (n = 7) Пептид С1 (n = 2) Пептид С2 (n = 3)

M, % tm M, % tm M, % tm M, % tm

Кальциевый ток

-7 106,3 1,3 107,6 5,6 116,6 12,5 110,6 7,3

-6 112,6 15,3 109,2 3,2 130,5 21,7 109,2 12,7

-5 113,2 13,7 114,1 10,8 130 18,1 120,5 6,3

-4 115,3 10,3 114,7 15,1 124 14,8 - -

-3 125,2 3,2 110,6 0,5 99 15,4 - -

Отмыв 105,3 12,8 96,5 3,8 111,5 17,1 - -

Натриевый ток

(n = 7) (n = 2) - (n = 3)

-7 107,6 10,3 106 - - - - -

-6 112,1 19,7 121 - - - - -

-5 115,9 13,7 115,5 - - - 118,3 -

-4 126,0 17,7 136,4 - - - 125 -

-3 118,1 22,0 75 - - - - -

Отмыв 118,1 22,2 118,4 - - - 104 -

Калиевый медленный ток

(n = 8) (n = 6) (n = 3) (n = 3)

-7 110,4 7,4 106,0 6,6 108,1 5,2 108,9 5,7

-6 114,4 14,4 112,1 21,0 109,8 5,0 109,2 9,5

-5 115,2 10,7 114,5 18,6 111,6 4,7 110 13,5

-4 112 10,4 114,7 22,2 110,6 10,4 108,8 17,6

-3 110,3 6,0 97,1 27,2 101,2 11,8 97,2 16,7

Отмыв 113,5 14,6 113,8 18,1 103,4 7,4 108,8 15,8

Калиевый быстрый ток

- - (n = 3) (n = 2)

-7 - - - - 111,2 15,3 112,2 10,2

-6 - - - - 117,1 21,2 113,6 18,5

-5 - - - - 112,5 15,3 112,4 13,8

-4 - - - - 112,5 15,3 105,4 13,7

-3 - - - - 107,7 14,8 99,7 16,0

Примечание: М — среднее значение, 1ш — доверительный интервал при р = 95 %, п — число опытов, прочерк — отсутствие данных.

т. е. стабильность мембран не изменялась; сдвига вольт-амперных характеристик мембраны по оси потенциалов не происходило, т. е. потенциал поверхностного заряда мембран также не изменялся.

В целом влияние глутоксима и пептида С1 на кальциевые каналы было сходным с влиянием окисленного глутатиона. Кинетика развития тока не изменялась, а увеличение амплитуды токов и отсутствие сдвига максимума вольт-амперной характеристики показано на рис. 1, А, кривая 2.

В некоторых опытах под влиянием глутоксима происходило незначительное уменьшение неспецифических токов утечки мембраны. Возможно, что при большем числе опытов и можно было бы выявить различия в действии окисленного глутатио-на, который не изменял токов утечки и глутоксима, который мог снижать эти токи, т. е. оказывать некоторое стабилизирующее действие на мембрану. Возможно также, что при большем числе опытов удастся выявить то, что глутоксим несколько сильнее (на 5—10 %), чем окисленный глутатион, активировал кальциевые токи.

Влияние пептида С2 на кальциевые каналы состояло в основном в увеличении амплитуд токов, без изменения их кинетики. Увеличение токов иногда происходило с увеличением их только быс-троинактивирующейся части (рис. 2, А, кривая 2). Неспецифические токи утечки мембраны под влиянием С2 также иногда снижались. Из представленных данных о влиянии 4-х соединений на кальциевые каналы можно видеть, что все они примерно в одинаковой степени и в малой зависимости от ис-

пользуемой концентрации увеличивали амплитуду токов. Существенных различий в действии окисленного глутатиона, глутоксима, пептидов С1 и С2 не обнаружено, хотя некоторые незначительные тенденции в таких различиях намечаются (различия в степени увеличения амплитуд токов, влияние на неспецифические токи утечки).

Изменения натриевых ионных

токов

Под влиянием всех препаратов в концентрациях от 0,1до 1000 мкМ наблюдалось обратимое увеличение амплитуды натриевых токов, что было сходным с их влиянием на кальциевые каналы.

Под влиянием окисленного глутатиона в различных концентрациях увеличение амплитуды натриевого тока происходило без изменений его кинетики. Необходимо отметить, что под влиянием глутоксима (как и окисленного глутатиона) максимум вольт-амерных характеристик натриевых каналов смещался вправо в сторону деполяризации примерно на 5 мВ (рис. 1, Б, кривая 2), что указывает на изменение потенциала фиксированных зарядов мембраны.

Нужно отметить также, что при регистрации натриевых токов из наружного раствора были исключены ионы кальция (заменены на ионы цезия), а в растворе оставлены только двухвалентные ионы магния, которые почти не проникают по кальциевым каналам, но известно, что двухвалентные ионы необходимы для сохранения нормального функциони-

2149

А

Б

-30 -20 -10

10 20 30 40 50

-50 -40 -30 -20 *-*

1 - контроль

2-глутоксим, ЮмкМ

3-отмывание

10 20 30 40 V, мВ

lNa, нА

Рис. 1

Изменения вольт-амперных характеристик кальциевых (А) и натриевых (Б) каналов под влиянием глутоксима: по оси абсцисс — тестирующий потенциал, по оси ординат — ионный ток; поддерживаемый потенциал -90 мВ

2150

А

4 2 0 -2 -4 -6 -8 -10 -12 -14

Т = 500 мс

1 - контроль 2-С2,10 мкМ

Б

-50 -40

-30 -20

10 20 30 40 V, мВ

1-контроль -14

2-глутоксим, ЮмкМ

3-отмывание 'Na> НА

Рис. 2

Изменения быстро инактивирующейся части кальциевого (А) и натриевого (Б) токов нейронов прудовика под влиянием пептида С2:

по оси абсцисс — время, по оси ординат — ионный ток; поддерживаемый потенциал -90 мВ

рования нейронов. Кстати, в некоторых случаях, вероятно вследствие этого, натриевые токи были нестабильны и были затруднения с проведением экспериментов.

Влияние пептида С2 на натриевые каналы было сходным с влиянием на них окисленного глутатиона и глутоксима, наблюдалось также смещение максимума вольт-амперной характеристики каналов вправо примерно на 5 мВ. Пример обратимого увеличения амплитуды натриевого тока показан на рис. 2, Б, кривая 2.

В целом влияние окисленного глутатиона, глутоксима и пептидов С1 и С2 на натриевые каналы напоминало их активирующее действие на кальциевые каналы. Кроме того обнаружено их влияние на потенциал поверхностного заряда мембраны, поскольку происходило смещение максимума вольт-амперных характеристик. Существенных различий в действии отдельных соединений на натриевые каналы не выявлено.

Изменения калиевых

медленных ионных токов

Под влиянием всех препаратов в концентрациях от 0,1 до 1000 мкМ наблюдалось обратимое увеличение амплитуды калиевых медленных и быстрых ионныхтоков.

Под влиянием окисленного глутатиона в различных концентрациях амплитуда калиевых медленных токов, как кальциевых и натриевых, возрастала

на 6—15 %. Неспецифические токи утечки не изменялись. Увеличение амплитуды токов в большинстве опытов происходило с небольшим ускорением процесса инактивации тока (рис. 3, А, кривая 2), а иногда и без изменения кинетики (рис. 3, Б, кривая 2). Сохранение увеличенной амплитуды тока после отмывания препарата в концентрации 1000 мкМ показано на рис. 3, Б, кривая 3. При последовательном применении препарата в возрастающей концентрации также, как и при регистрации кальциевых токов, наблюдалась суммация эффектов.

Под влиянием глутоксима, пептида С1 и цисти-на солянокислого также происходило увеличение амплитуды калиевых токов и небольшое ускорение процесса инактивации.

Таким образом, все 4 соединения активировали калиевые медленные токи, не проявляя при этом выраженной дозозависимости и существенных отличий между собой в величине эффектов. Наблюдалось незначительное ускорение процесса инактивации калиевого медленного тока, указывающее на возможность взаимодействия препаратов с инак-тивационными воротными механизмами каналов.

Изменения калиевых быстрых ионных токов под влиянием пептидов С1 и С2. В небольшом числе опытов показано, что под влиянием пептидов С1 и С2 в концентрациях от 0,1 до 1000 мкМ наблюдалось обратимое увеличение амплитуды калиевых быстрых ионных токов.

Пептиды С1 и цистин солянокислый в различных концентрациях таким же образом, как все соединения

А 40 35 30 25 20 15 10 5 0 -5 -10

1 - контроль

2 - окисленный глутатион, 10 мкМ

Ti = 50 мс

_L

Т? = 2 с

'ks> "А

Б 35 30 25 20 15 10 5 0 -5 -10

1 - контроль

2 - окисленный глутатион, 10 мкМ

3 отмывание

Т-| = 50 мс

2151

То = 2 с

<Ks> нА

Рис. 3

Изменения калиевых медленных токов нейронов прудовика под влиянием окисленного глутатиона: А — увеличение амплитуды и ускорение инактивации (кривая 2), Б — увеличение амплитуды без изменения кинетики развития тока; по оси абсцисс — время, по оси ординат — ионный ток; поддерживаемый потенциал -90 мВ

при действии на другие каналы, вызывали небольшое увеличение амплитуды калиевых быстрых токов. Следует отметить, что неспецифические токи утечки мембраны изменялись незначительно: то увеличиваясь, то уменьшаясь при их действии. Кинетика развития тока не изменялась.

ОБСУЖДЕНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ

РЕЗУЛЬТАТОВ

В литературе имеются немногочисленные и неоднозначные данные о прямом влиянии глутатиона на кальциевые, натриевые и калиевые ионные каналы [11, 13, 17, 23]. В некоторых работах делаются общие заключения о возможности влияния окислительно-восстановительных процессов на деятельность ионных каналов возбудимых мембран [21]. Например, истощение глутатиона в кардиомиоцитах крыс и свинок вызывало морфологические, биохимические и электрофизиологические изменения. Изменялись параметры потенциалов действия: амплитуда и длительность, возможны изменения в работе натриевых и калиевых ионных каналов [10, 18]. Подчеркивается большая роль глутатиона в деятельности нервных клеток астроцитов [15]. Восстановленный глутатион при внутриклеточном действии тормозил бета-NAD-активируемые неселективные ионные каналы. Окисленный глутатион в концентрациях от 20 мкМ до 2 мМ при внеклеточном действии на эн-дотелиальных клетках деполяризовал их и активиро-

вал неселективные катионные ионные каналы [16]. Глутатион в концентрации 2—5 мМ при внутриклеточном действии на одиночных натриевых каналах аксонов крысы оказывал влияние на их воротный механизм. Под влиянием глутатиона при внутриклеточном приложении одиночные натриевые каналы демиэлинизированных сенсорных и моторных волокон крысы изменяли режим работы на короткие открывания каналов, т. е. изменялась кинетика их инактивации. Восстановленный глутатион на клонированной альфа-субъединице калиевых каналов при внутриклеточном действии обратимо активировал и сдвигал кривую их инактивации влево без изменения наклона. Константы активации уменьшались, а дезактивации — увеличивались. Сделано предположение, что модуляция глутатио-ном может быть важным механизмом регуляции Са2+-активируемых К+-каналов большой проводимости в нейронах [11]. На культивируемых нейронах гиппокампа новорожденных крыс при действии на внутреннюю сторону мембраны восстановленный глутатион активировал Са2+-зависимые К+-каналы большой проводимости (ЕС50=710 мкМ), а восстановленный — подавлял (ЕС50=510 мкМ), т. е. вследствие модификации окислительно-восстановительного потенциала оказывалось действие в противоположных направлениях [23].

Интересный результат был получен при изучении действия гипоксии и глутатион/глутатион-дисульфид на различные альфа-субъединицы Т-типа Са2+-ка-налов (Ш, 1Н и 11), встречающихся в центральных и

2152

периферических нейронах и играющих важную роль в организации их ритмической активности. При гипоксии в клетках, содержащих 1Н- или 11-субъеди-ницы, кальциевые токи обратимо снижались и это снижение не было потенциалозависимым. В клетках же, содержащих субъединицу Ю, гипоксия не изменяла кальциевых токов. Во всех каналах гипоксия не изменяла кинетику развития токов (их активацию, инактивацию и дезактивацию), а также и кривые стационарной инактивации. Са2+-ток через альфа-1Н субъединицу был увеличен под влиянием 2 мМ глу-татиона и снижен под влиянием 2 мМ глутатион-дисульфида. Напротив, через альфа-Ю субъединицу глутатион ионный ток не изменил. В альфа-1Н клетках, ни глутатион, ни глутатион-дисульфид не могли восстановить сниженный гипоксией ток. Таким образом, различные подтипы Т-Са2+-каналов по-разному регулируются средствами, изменяющими окислительно-восстановительный потенциал, и гипоксией. Влияние гипоксии на альфа-1Н субъединицу происходит независимо от уровня внутриклеточного окислительно-восстановительного потенциала, создаваемого глутатион-дисульфид/глутатион-системой [13].

Все приведенные примеры свидетельствуют о том, что глутатион довольно в высокой концентрации (порядка единиц мМ) оказывает разнообразное действие на те или иные ионные каналы и этот вопрос требует дальнейших исследований. Следует отметить, что отсутствие дозозависимости эффектов глутоксима или окисленного глутатиона было показано при активации рецептора эпидермального фактора роста [1].

Нами впервые проведено сравнительное исследование прямого влияния окисленного глутатиона, его синтетического аналога — препарата глутоксима, пептидов С1 (цистин + М) м С2 (цистин—НС1) в довольно низких концентрациях на трансмембранные кальциевые, натриевые и калиевые ионные каналы соматической мембраны изолированных нейронов прудовика. Эффекты были слабодозозависимы, при этом увеличение (активация) амплитуд всех токов не подлежит сомнению, но остается неясным механизм, с помощью которого это происходит. Можно предположить, что исследуемые соединения увеличивают внутриклеточную концентрацию ионов кальция и активируют ферментные системы клетки, процессы фосфорилирования белков, в том числе и канальных, влияют на активацию фосфоинозитидного пути передачи сигнала в цепочке «рецептор—G-белок—фос-фолипазы». Все это может приводить к увеличению ионной проводимости мембраны вследствие, например, увеличения времени открытого или сокращения времени закрытого состояния одиночных каналов. Не исключаются и другие возможности — увеличение

количества функционирующих каналов вследствие экспрессии новых каналов, снятие инактивации с части из них или увеличение проводимости одиночных каналов. Этот вопрос требует дальнейших исследований.

ВЫВОДЫ

1. Обнаружено обратимое увеличение амплитуд всех ионных токов при действии окисленного глутатиона, глутоксима, пептидов С1 (цистин + М) и С2 (цистин—НС1).

2. Не обнаружено четкой дозозависимости при активации ионных токов всеми соединениями в диапазоне концентраций 0,1 до 1000 мкМ.

3. Все исследованные соединения практически не изменяют кинетику развития кальциевых, натриевых и быстрых калиевых ионных токов, т.е не взаимодействуют с воротными структурами ионных каналов. Наблюдалось незначительное ускорение процесса инактивации калиевого медленного тока, указывающее на возможность взаимодействия препаратов с инактивационными воротными механизмами каналов. Смещения максимума вольт-амперных характеристик мембраны для кальциевых и калиевых каналов не происходило, т. е. потенциал поверхностного заряда мембраны под влиянием исследованных соединений не изменялся. Вольт-амперные характеристики натриевых каналов смещались вправо по оси потенциалов примерно на 5 мВ.

4. Активация ионных токов сохраняется некоторое время в следовом порядке после действия всех соединений.

5. Последовательное увеличение на одном и том же нейроне действующих концентраций исследованных соединений (без отмывания) приводит к усилению активирующих эффектов — к развитию феномена «тренировки».

6. Отсутствие избирательности действия исследованных соединений в активации кальциевых, натриевых и калиевых ионных токов, отсутствие четкой дозозависимости эффектов позволяет говорить о неспецифическом и сходном механизме активации, связанным, вероятно, с наличием БН-групп в структурах окисленного глутатиона, глу-токсима и цистина.

ЛИТЕРАТУРА

1. Бурова Е.Б., Василенко К.П., Антонов В.Г., Ни-

кольский Н.Н. Трансактивация рецептора эпидер-

мального фактора роста окисленным глутатионом и его фармакологическим аналогом глутоксим в клетках А431. // ДАН. 2005. Т. 404, № 1. С. 1-3.

2. Вислобоков А.И., Игнатов Ю.Д., Мельников К.Н. Фармакологическая модуляция ионных каналов мембраны нейронов. СПб.: Изд-во СПбГМУ, 2006. 288 с.

3. Костюк П.Г., Крышталь О.А. Механизмы электрической возбудимости нервной клетки. М.: Наука, 1981. 204 с.

4. Крутецкая З.И., Лебедев О.Е., Курилова Л.С. Механизмы внутриклеточной сигнализации. СПб.: Изд-во СПбГУ, 2003. 208 с.

5. Крутецкая З.И., Лебедев О.Е., Курилова Л.С., Антонов В.Г., Антушевич А.Е., Ноздрачев А.Д. Возможное участие ионов кальция в регуляторном действии окисленного глутатиона на макрофаги. // Докл. АН. 2007. Т. 412, № 5. С. 700-703.

6. Фалер Д.М., Шилдс Д. Молекулярная биология клетки. Руководство для врачей: Пер. с англ. М.: БИНОМ-Пресс, 2004. 272 с.

7. Bowden S., Yeung S.Y., Robertson B. Pharmacology of voltage-gated K+-channels. // Tocris Reviews. 2003. N 22. P. 1-12.

8. Catterall W.A. From ionic currents to molecular mechanisms: the structure and function of voltage-gated sodium channels. // Neuron. 2000. Vol. 26. P. 13-25.

9. Catterall W.A. Structure and regulation of voltage-gated Ca2+ channels. // Annu. Rev. Cell Dev. Biol. 2000. Vol. 16. P. 521-555.

10. Chiamvimonvat N., O'Rourke B., Kamp T.J., et al. Functional consequences of sulfhydryl modification in the pore-forming subunits of cardiovascular Ca2+- and Na+-channels. // Circ. Res. 1995. Vol. 76. P. 325-334.

11. Chung S., Jung W., Uhm D.Y., Ha T.S., Park C.S. Glutathione potentiates cloned rat brain large conductance Ca2+-activated K+-channels (rSlo). // Neurosci. Lett. 2002. Vol. 318, N 1. P. 9-12.

12. Droge W., Hack V., Breitkreutz R., Holm E., et al. Role of cysteine and glutathione in signal transduction, immunopathology and cachexia. // Bio Factors. 1998. Vol. 8. P. 97-102.

13. Fearon I.M., Randall A.D., Perez-Reyes E., Peers C. Modulation of recombinant T-type Ca2+-channels by hypoxia and glutathione. // Pflugers Arch. 2000. Vol. 441, N 2-3. P. 181-188.

14. Hayes J.D., McLellan L.I. Glutathione and gluta-thione-dependent enzymes represent a co-ordinately regulated defence against oxidative stress. // Free Radical Res. 1999. Vol. 31. P. 273-300.

15. Hirrlinger J., Dringen R. Multidrug resistance protein 1-mediated export of glutathione and glutathione disulfide from brain astrocytes. // Methods Enzymol. 2005. Vol. 400. P. 395-409.

16. Koliwad S.K., Elliott S.J., Kunze D.L. Oxidized

glutathione mediates cation channel activation in calf vascular endothelial cells during oxidant stress. // J. Physiol. 1996. Vol. 495, N 1. P. 37-49.

17. Lacampagne A., Duittoz A., Bolanos P., et al. Effect 2153 of sulfhydryl oxidation on ionic and gating currents associated with L-type calcium channels in isolated guinea-pig ventricular myocytes. // Cardiovascular. Res.

1995. Vol. 30. P. 799-806.

18. Pacher P., Kecskemeti V., Ronai A.Z., Balogh I., Szalai G., Matkovics B. Changes in cardiac electro-physiology, morphology, tissue biochemistry and vascular reactions in glutathione depleted animals. // Mol. Cell Biochem. 1998. Vol. 185, N 1-2. P. 183-190.

19. Ragsdale D.S., McPhee J.C., Scheuer T., Catterall W.A. Common molecular determinants of local anesthetic, antiarrhythmic, and anticonvulsant block of voltage-gated Na+-channels. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1996. Vol. 93. P. 9270-9275.

20. Renard D.C., Seitz M.B., Thomas A.P. Oxidized glutathione causes sensitization of calcium release to inositol 1,4,5-trisphosphate in permeabilized hepa-tocytes. // Biochem. J. 1992. Vol. 284. P. 507-512.

21. Sen C.K. Redox signaling and the emerging therapeutic potential of thiol antioxidants. // Bio-chem. Pharmacol. 1998. Vol. 55. P. 1747-1758.

22. Sies H. Glutathione and its role in cellular functions. // Free Radical Biol. Med. 1999. Vol. 27. P. 916-921.

23. Soh H., Jung W., Uhm D.Y., Chung S. Modulation of large conductance calcium-activated potassium channels from rat hippocampal neurons by glutathione. // Neurosci. Lett. 2001. Vol. 298, N 2. P. 115-118.

24. Zable A.C., Favero T.G., Abramson J.J. Glutathione modulates ryanodine receptor from skeletal muscle sarcoplasmic reticulum. Evidence for redox regulation of the Ca2+-release mechanism. // J. Biol. Chem. 1997. Vol. 272. P. 7069-7077.

Antonov VG, Borisova VA, Vislobokov AI, Melnikov KN. Activation of ionic currents of neurones of a mollusk by oxidated glutation, glutoxim and cistin. Psychopharmacol Biol Narcol 2007; 7(3-40): 2146-2153

Military Medical Academy; I.P. Pavlov State Medical University; Saint-Petersburg; 6/8, Lev Tolstoy street, Saint-Petersburg, 197022, Russia

Summary: Studied changes of transmembrane calcium, sodium, potassium slow and fast ionic currents under influence of SH-keeping preparations: oxidized glutatione, glutoxime and cistine at extracellular action in concentrations 0.1; 1; 10; 100 and 1000 mkM. Used a method of an endocellular dialysis and bracing of membrane potential of isolated neurones Lymnaea stagnalis. All preparations it is reversible and approximately equally enlarged ionic currents by 530 % and accelerated kinetics of an inactivation of a potassium slow current. Membranic activity of preparations can be connected to influence of their SH-bunches on a cellular membrane and underlie multifunctional action of the investigated bonds on cells. Key words: oxidized glutatione; glutoxime and cistine; a sodium; calcium; potassium ionic current; neurones; Lymnaea stagnalis

электронная копия статьи (full text): http://www.elibrary.ru

http://www.psychopharmacology.ru/index.php/PPBN/article/view/28