CC BY
28
«Дни иммунологии в СПб 2017» Immunology Days in St. Petersburg 2017
Медицинская Иммунология Medical Immunology (Russia)/Meditsinskaya Immunologiya
ние 5 последних лет не болели ОРВИ (ОРВИ = 0) 12 человек, болели часто (ОРВИ > 2 раз в год) 7 человек. Обследование проводилось в рамках планового профосмотра. Все обследованные работали в условиях контакта с производственным фактором (ПФ) и на момент осмотра были практически здоровы. Было изучено 20 показателей стандартной иммунограммы и 3 показателя мукозаль-ного иммунитета (IgG-sal, s-IgA-sal). Сравнение
рисков проводили для групп с нормальными и повышенными значениями ПИС (ПИСМ и ПИСТ соответственно) с помощью точного критерия Фишера (ТКФ, рР). При формировании таблиц сопряженности 2x2 для каждого ПИС всех обследованных разделяли на 4 группы. Для лиц с ПИСТ выделяли группу с ОРВИ > 2 (а человек) и группу с ОРВИ = 0 (Ь человек). Для лиц с ПИСМ выделяли группу с ОРВИ > 2 (с человек) и группу с ОРВИ = 0 ^ человек). Вычисляли риски частых случаев ОРВИ в группах лиц с ПИСТ(а+Ь человек) и ПИСN(c+d человек):
AR (ПИСТ, ОРВИ > 2) = а/(а+Ь); АЯ (ПИС№ ОРВИ > 2) = c/(c+d).
Риск АЯ (ПИСТ, ОРВИ > 2) считали повышенным относительно АЯ (ПИС№ ОРВИ > 2) при выполнении следующих неравенств:
а/(а+Ь) > c/(c+d) и рр < 0,20 (1).
Результаты. При анализе данных с помощью таблиц сопряженности 2x2 были определены два ПИС, для которых значения величин а, Ь, с, d и значение рР удовлетворяли условию (1). Так, для показателя CD16% а = 3, Ь = 1, с = 4, d = 11, значение АЯ^16%Т, ОРВИ > 2) = 0,750, значение ОРВИ > 2) = 0,267, их отноше-
ние — ЯЯ = 2,81. Риски различались по критерию ТКФ с уровнем значимости рр = 0, 0,117 (или с достоверностью и в 88%).
Для показателя s-IgA-sal а = 4, Ь = 2, с = 3, d = 10, значение АЯ^-^^Т, ОРВИ > 2) = 0,667, АЯ^-^^а^, ОРВИ > 2) = 0,231 их отношение - ЯЯ = 2,89. Риски различались по критерию ТКФ с уровнем значимости рР = 0,129 (или с достоверностью и в 87%).
Таким образом, установлено, что в условиях действия производственного фактора работницы химического предприятия, имеющие повышенные значения показателей CD16% и s-IgA-sal, одновременно имеют повышенный (и в 3 раза) риск развития частых (2 и более раз в год) заболеваний ОРВИ. Статистическая достоверность одновременности этих событий 87-88%. Повышенные значения показателей CD16% и s-IgA-sal были обнаружены у 71,4% (5 из 7) всех часто болеющих женщин.
Заключение. Предложенная методика позволила (с достоверностью в 87-88%) из 23 показателей иммунитета выделить 2, которые являются маркерами повышенного риска частых ежегодных заболеваний острой респираторной вирусной инфекцией для работниц химического предприятия, находящихся в контакте с производствен-
ным фактором. Рассмотренный подход может быть рекомендован для дополнительного анализа результатов им-муноэпидемиологического скрининга работников промышленного объекта.
ИЗМЕНЕНИЕ ФАГОЦИТАРНОЙ АКТИВНОСТИ НЕЙТРОФИЛОВ ПОД ВЛИЯНИЕМ ДИОКСИДА ТИТАНА
Мацко Е.Ф., Аляхнович Н.С.
Витебский государственный медицинский университет, Витебск, Беларусь
Введение. Диоксид титана (TiO2) — краситель белого цвета, известен как пищевая добавка Е171. Мировое производство TiO2 достигает нескольких миллионов тон в год. В последнее время увеличивается доля использования наноразмерных форм TiO2. Учитывая постоянное пероральное поступление красителя с пищей и лекарственными средствами, вероятно его влияние на систему иммунитета. На клеточных линиях установлено взаимодействие наночастиц TiO2 с Toll-подобными рецепторами 3 и 4 типа, обуславливающее активацию NF-kB и белков теплового шока (HSP70B). В экспериментах на мышах кратковременное (10 дней) внутрижелудочное поступление частиц TiO2 (66 и 260 нм) в количестве 100 мг/кг массы тела стимулировало секрецию цитокинов в стенке кишечника.
Цель и задачи. Оценка фагоцитарной активности нейтрофилов периферической крови под влиянием TiO2. Количественное определение фагоцитоза стафилококка и метаболической активности лейкоцитов в присутствии TiO2 и без него.
Материалы и методы. В ходе эксперимента обследовано 17 человек. Все обследуемые разделены на две группы: первая группа — 10 человек с верифицированной по международным критериям атопической бронхиальной астмой (ж/м — 5/5, средний возраст — 38 [28;48] лет), вторая группа (контрольная) 7 человек — здоровые добровольцы (ж/м — 3/4, средний возраст — 23 [21; 26] лет).
У всех обследованных подсчитывался фагоцитарный индекс (ФИ) (процент клеток, вступивших в фагоцитоз, от общего их числа) и метаболическая активность нейтрофилов в присутствии нитросинего тетразолия (НСТ-тест). Для индуцирования реакций использовался Staphylococcus aureus (Stf) штамма 209. В исследуемые пробы добавляли 0,008% раствор TiO2 (из расчета на 1 мг/кг массы тела), контрольные пробы ставились с добавлением 0,9% раствора NaCl (физ. р-р). Пробы инкубировались в течение 30 минут при 37 °С. При микроскопии мазков подсчитывалось количество формазан-положительных гранулоцитов в НСТ-тесте и клеток, поглотивших 1 и более частиц Stf, с подсчетом не менее 100 гранулоцитов.
ТАБЛИЦА. СРЕДНЕЕ ЗНАЧЕНИЕ ФИ И НСТ-ТЕСТА ПОСЛЕ ИНКУБАЦИИ С ТЮ2 И В КОНТРОЛЬНЫХ ПРОБАХ (К ТЕЗИСАМ МАЦКО Е.Ф. И ДР.)
Группа Лица с атопической бронхиальной астмой Контрольная (здоровые)
Показатель ФИ (%) НСТ (%) ФИ (%) НСТ (%)
Вид пробы Stf Stf+ TiO2 физ. р-р TiO2 Stf Stf+ TiO2 Stf Stf+ TiO2 физ. р-р TiO2 Stf Stf+ TiO2
Ср. знач.,% 65,2 75,7* 12,2 31,2** 34,3 41,8 62,7 66,0 13,4 24 0*** 39,7 40,3
Примечание. В парном Т-тесте Стъюдента: * - tj = -2,86, р1 = 0,02; ** - t2 = -4,48, р2 = 0,002; *** - t3 = -3,3, р3 = 0,02.
2017, Т. 19, Специальный выпуск 2017, Vol. 19, Special Issue
Экология, стресс и иммунитет Ecology, stress and immunity
Результаты. По результатам анкетирования все участники первой группы имели жалобы на гиперчувствительность к бытовым и/или пыльцевым аллергенам, 30% отмечали непереносимость некоторых пищевых продуктов, 10% подозревали пищевые красители в качестве виновника аллергических реакций, 50% указывали на наследственную отягощенность по аллергии. Лица контрольной группы были несколько моложе (р = 0,01) и имели наследственность по аллергии в 29%.
В таблице представлены результаты оценки фагоцитарной активности нейтрофилов крови.
У всех обследуемых с аллергией фагоцитоз стафилококка и генерация активных форм кислорода достоверно увеличивались после инкубации проб с р-ром TiO2 (табл.), у 70% под влиянием TiO2 увеличивались показатели индуцированного НСТ-теста, по сравнению с парными контрольными пробами.
Среди здоровых добровольцев имелась корреляция между женским полом и величиной ФИ в пробах со Stf и физ. р-ром (0,84), а также между отягощенной наследственностью по аллергии и величиной метаболической активности нейтрофилов в НСТ-тесте с TiO2 (0,78). В среднем и у 86% обследуемых значение НСТ-теста с TiO2 было достоверно выше, чем в пробе с физ. р-ром (табл.). В группе здоровых лиц под влиянием TiO2 в 43% случаев повышалась метаболическая активность фагоцитов, индуцированная Stf; в 86% — усиливался фагоцитоз Stf, но различия с контрольными пробами не достигли статистической достоверности. Не обнаружено различий по показателями фагоцитоза в группе ато-пиков и здоровых лиц.
Заключение. Установлено, что под влиянием 0,008 % раствора пищевого красителя TiO2 увеличивается фагоцитарная активность нейтрофилов крови как больных атопической бронхиальной астмой, так и здоровых добровольцев. Обнаружена связь между отягощенной наследственностью по аллергии и усилением метаболической активности фагоцитов крови в НСТ-тесте с TiO2 у здоровых лиц.
РОЛЬ НАРУШЕНИЯ ПИЩЕВОЙ ТОЛЕРАНТНОСТИ В РАЗВИТИИ МЕТАБОЛИЧЕСКОГО СИНДРОМА
Новиков П.С.1, Черевко Н.А.1, Скирневская А.В.1, Стоянов А.С.1, Муравейник О.А.3, Кондаков С.Э.2, Розенштейин М.Ю.4, Розенштейн А.З.4, Резапов Б.Р.4
1 Сибирский государственный медицинский университет Министерства здравоохранения РФ, Томск, Россия
2 Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова, Москва, Россия
3 МО Центр семейной медицины, Томск, Россия
4 ImmunoHealth- РУС, Москва, Россия
Введение. В работе исследован вклад пищевых антигенов (пАГ) в патогенез начальных проявлений метаболического синдрома (МС), являющегося одной из актуальных проблем современной медицины. Пищевые продукты и их компоненты обладают всеми свойствами присущими любому антигену: антигенностью (чужеродностью), имму-ногенностью и критической массой. Иммунологическая толерантность к пАГ формируется в ранний постнаталь-ный период, и поддерживается в активном состоянии всю жизнь. Нарушение пищевого поведения современного человека, употребление новых по составу и качеству пАГ,
красителей, вкусовых добавок, возрастные ферментопа-тии, сопутствующие воспалительные процессы кишечника — способны индуцировать адаптивный иммунный ответ (ИО) к пищевым детерминантам и привести к временному или манифестному нарушению толерантности. В результате ИО формируются эффекторные механизмы, направленные на элиминации пАГ и сохранение «постоянства своего» с участием цитокинов воспаления, клеточ-но- опосредованных цитотоксических и иммунокомплес-ных реакций, которые с большей вероятностью могут запускать системные метаболические нарушения.
Цель. Исследовать роль отмены иммунологической толерантности к пищевым антигенам в развитие метаболического синдрома.
Материалы и методы. Клиническим материалом служила венозная кровь и сыворотка обследованных волонтеров с разным индексом массы тела (ИМТ). Волонтеры с повышенным ИМТ > 27: женщины 20-55 лет, n = 31; мужчины 20-60 лет, n = 25. Окружность талии составляла > 94 см у мужчин, и > 80 см у женщин. Группа сравнения: волонтеры с нормальным ИМТ: 18,5 < ИМТ < 25, аналогичного возраста: женщины, n = 17 и мужчины, n = 12. Основными критериями в группе сравнения являлись соматическое здоровье, отсутствие заболеваний желудочно-кишечного тракта, отягощенность аллергического и аутоиммунного анамнеза. При представлении результатов пищевой ин-толерантности деление обследованных на группы происходило только по ИМТ. Определение холестерина, тригли-церидов, ЛПВП, глюкозы, АлАТ, АсАТ осуществляли с помощью биохимического анализатора Ассей 200. Методом ИФА определяли концентрации IL-4, IL-6, IL-10, IL-17, ТТГ, свободный Т3, инсулин, рассчитывали индексы ин-сулинорезистентности (ИР) и атерогенности (ИА). Диагностику нарушений иммунологической толерантности к 111 тестируемым пАГ проводили на основе многокомпонентного ИФА. Маркером являлась концентрация специфических иммуноглобулинов G (sIgG) к конкретному пАГ. Для определения индивидуальных кластеров пАГ с признаками сформированной гиперчувствительности в адаптивном иммунном ответе у обследованного использовали методологию, разработанную компанией «Иммунохелс». Статистическую обработку данных проводили в программах SPSS 19.0 с использованием U критерия Манна-Уит-ни, коэффициента ранговой корреляции Спирмена, критерия Фишера и отношения шансов (OR).
Результаты. При сравнении показателей волонтеров с разным ИМТ было выявлено, что в исследуемой группе (ИМТ > 27) концентрация холестерина, триглицеридов, ЛПНП, IL-6, IL-17, глюкозы, АлАТ, инсулина, общее количество лейкоцитов (ОКЛ), индексы ИР и ИА были статистически значимо повышены по сравнению с группой сравнения (p < 0,05). Были выявлены статистически значимые связи между ИА (индексом атерогенности, Rs = 0,45, p < 0,05), ИР (индексом инсулинорезистент-ности, Rs = 0,39, p < 0,05) и IL-6 в сыворотке крови. При оценке частоты встречаемости нарушенной пищевой толерантности к 111 пищевым продуктам, наибольшие отличия были выявлены для продуктов, содержащих белки коровьего молока — 43 и 0%, белки зерновых продуктов — 13 и 6% и антигены продуктов семейства пасленовых 23 и 14%. Максимальная частота встречаемости нарушенной пищевой толерантности у волонтеров с ИМТ > 27 по сравнению с группой сравнения была связана с пАГ: казеина — 49 и 0%, сои — 51 и 29%, глютена — 16 и 0% соответственно. При этом взаимосвязь между установленной
