CC BY
6
теля, заполненных 5 см3 растворителя (среда 199). По окончании протяжки жидкость из поглотителей объединяли, разливали по стерильным ампулам, запаивали и стерилизовали 30 мин при 100 "С. Полученные растворы летучих фракций изучаемых материалов при необходимости разводили средой 199 и использовали в экспериментах. Исследования проводили на перевиваемой линии клеток (клетки почек эмбриона человека).
Для изучения токсического действия летучих фракций исследуемых материалов во флаконы с покровным стеклом вносили по 1,5 см3 подготовленной суспензии клеток (150 000—70 000) в ростовой срсде (среда 199 с 10% бычьей сыворотки) и добавляли по 0,2 см3 изучаемого раствора. Через 24. 48 и 72 ч после инкубации при 37 °С определяли морфологические особенности монослоя клеток и их мито-тичсскую активность В каждой серии опытов осуществляли контроль культуры клеток, причем в связи с однородностью показателей контрольных проб в разных сериях при окончательной обработке материалов они были объединены.
Оценку цнтотоксического действия изучаемых препаратов на культуру клеток проводили при микроскопическом изучении монослоя и результат выражали в баллах. Дегенерацию 100 % клеток оценивали в 4 балла, 75 % — в 3 балла, 50 % — в 2 балла, 25 % — в 1 балл. Для суммарной оценки цнтотоксического эффекта рассчитывали индекс цитотоксичности (ИЦ) путем деления суммы баллов на число исследованных культур клеток.
Для изучения влияния препаратов, на митотическую активность клеток монослой, выращенный на покровных стеклах, фиксировали раствором Буэна 15 мин, промывали 70° этанолом и окрашивали гематоксилином и эозином по общепринятой методике, после чего препараты заключали в канадский бальзам и подвергали микроскопическому исследованию. Подсчитывали число патологических и нормальных митозов на 1000 клеток с учетом фаз деления.
Исследовали растворы летучих фракций 3 видов лакокрасочных (лак НЦ-222, эмали ПФ-115 и ЭП-525П) и 3 видов резинотехнических (резины 922, ИРП-3012 и ИРП-1130) материалов. По результатам санитарно-химическнх исследований указанные материалы в условиях, моделирующих их эксплуатацию на. судах, выделяют в воздух камер следующие компоненты: бензол, изобутаиол, бутилацетгт, бута-нол (лак НЦ-222), ацетон, формальдегид (резина 922), бу-танол, толуол, (резина ИРП-3012), стирол, этанол, бензол, метанол (резина ИРП-1130), бутанол, изобутаиол, бутил-ацетат, уайт-спирит (эмаль ПФ-115), бензол (эмаль ЭП-525П).
Как видно из таблицы, летучие фракции эмалей ПФ-115 и ЭП-525П оказывали выраженное токсическое действие на культуру клеток. Уже через 24 ч отмечена дегенерация около 50 % клеток монослоя. В последующие сроки наблюдения дегенерация клеток прогрессивно нарастала. При изучении митотнческой активности выявлено уменьшение числа делящихся клеток уже через 24 ч в 2—4 раза по
сравнению с контролем, а также появление атипичных форм^ митозов. Прослеживалось закономерное снижение митоти-^» ческой активности клеток в последующие сроки наблюдения вплоть до полного отсутствия нормальных митозов к 72 ч. Анализ митотической активности по фазам деления выявил задержку митоза в мета- и анафазе. Летучие фракции лака НЦ-222 не вызывали видимых морфологических изменений в культуре клеток и существенных изменений в митотической активности клеток в сравнении с контролем. Наиболее выраженное токсическое действие на культуру клеток оказывали летучие фракции резины 922. Уже через 24 ч ИЦ был равен 2,83, а к 72 ч наступала полная дегенерация клеток. Обращало на себя внимание полное отсутствие митозов во все сроки наблюдения. Несколько менее выраженное токсическое действие оказывали компоненты резины ИРП-3012. Через 24 ч ИЦ составлял 1,25 балла, а к 72 ч возрастал до 3,87. При этом отмечалось резкое уменьшение количества нормальных митозов, особенно выраженное в отношении ана- и телофаз. Через 72 ч делящиеся клетки не обнаруживались. Препараты резины ИРП-1130 практически не оказывали цнтотоксического действия на культуру клеток и не влияли на их митотическую активность.
Учитывая высокую токсическую активность цельных препаратов летучих фракций исследуемых эмалей и резины ИРП-3012, изучали действие разных доз препаратов (разведения 1:4, 1 : 16, 1 :64). Установлено, что влияние пре-д паратов на культуру клеток снижалось по мере разведен-mí^j в отношении как цнтотоксического эффекта, так и митот;;- " ческой активности. Однако даже при разведении 1 : 64 наблюдались выраженные изменения морфологического строения монослоя и митотической активности, что подтверждает высокую токсичность летучих фракций исследованных материалов.
Таким образом, изучение морфологических характеристик культуры клеток и их митотической активности под воздействием синтетических материалов, применяемых в судостроении и судоремонте, показало, что с помощью метода культур клеток может быть установлена сравнительная токсичность летучих фракций полимерных материалов различных марок, определена связь между концентрациями растворов и их цитотоксическим действием, установлены действующая, пороговая и недействующая концентрации.
Литература
1. Калмыкова Т. П. — Ветеринария, 1980, № 8, с. 60—62.
2. Крат А. В., Шефтель В. О., Кесельман И. М. и др. —
Гиг. и сан., 1983. № 5, с. 70—71.
3. Строчкова Л. С., Жаворонкова А. А., Авцын А. П. — v
Цитология, 1984, № 3, с. 299—305. Щ
4. Шпирт М. Б. — Гиг. и сан., 1977, № 4, с. 50—53.
5. Шумская Н. И., Миронова JI. М., Малыгина И. Г. —
Там же, 1980, № 1, с. 50—52.
Поступила 10.07.85
УДК 614.3/.4(477.86)
Н. А. Недоступ, И. В. Мардарович, Л. Л. Карпинец
ИЗ ОПЫТА РАБОТЫ ПОЛЯРОГРАФИЧЕСКОГО ЦЕНТРА РАЙОННОЙ САНЭПИДСТАНЦИИ
Ивано-Франковская областная санэпидстанция
Решение современных гигиенических проблем невозможно без проведения физико-химических исследований. Они необходимы для получения исчерпывающей информации о состоянии компонентов окружающей среды — воздуха, воды, почвы.
Значительное место среди перспективных физико-химических методов занимает полярографический анализ. К достоинствам полярографии следует отнести возможность
установления качественного и количественного состава пробы, возможность аналитического определения ряда веществ, присутствующих в растворе без предварительного их разделения, возможность осуществления практически неограниченного числа повторных определений при использовании одной и той же пробы.
В связи с тем что проведенная в 1977 г. централизация лабораторной службы значительно укрепила материально^
Vтехническую базу, в 1983 г. на базе Коломыйской межрайонной лаборатории организован единый в области центр по выполнению анализов полярографическим методом.
Полярографы марки ГТПТ-1 и ПУ-1 расположены в приспособленном помещении, оборудованном вытяжным шкафом и мощной вентиляционной системой. Работа планируется на год. В план включаются вопросы, касающиеся внедрения новых методик, повышения квалификации, выполнения анализов. Составляется план-график доставки проб районами, которых з области 14. Часть проб (пищевые продукты, почва) обрабатываются на местах и доставляются в лабораторию подготовленными.
Метод полярографии имеет ряд разновидностей: классический, переменно-токовая полярография, осциллографи-ческая полярография и др.
Мы в своей практической работе использовали переменно-токовую полярографию, так как чувствительность и разрешающая способность полярографического анализа существенно повышаются при наложении переменного поляризующего напряжения. Подготовленную пробу и электроды помещают в полярографическую ячейку — электролизер.
В работе очень удобны электролизеры конической формы с плоским дном со сливом, в который помещают два электрода — катод и анод.
На приборе ППТ-1 для аналитических целей можно использовать ртутно-капельнын электрод, медленно капающий, и стационарный.
«
Мы работае.м.с ртутяо-капельным электродом, он обладает рядом преимущестз. Во-первых, он прост в сборке и разборке, все" электрохимические процессы происходят на постоянно обновляющейся поверхности ртути. Во-вторых, постоянное обновление ртути позволяет избегать накопления продуктов реакции на поверхности капли, что также повышает воспроизводимость результатов анализа.
На полярографе определяются медь, цинк, свинец и кадмий в питьевой воде; медь, цинк и кадмий в промышленных сточных водах; медь, цинк и свинец в пищевых продуктах; свинец в воздухе; медь, цинк, кадмий и свинец при совместном присутствии в воздушной среде.
Внедрение в практику полярографа и создание полярографического центра дает большой экономический эффект.
Из сказанного следует, что метод обладает большими аналитическими возможностями, очень высокой чувствительностью, точностью анализа, доступностью аппаратуры. С помощью этого метода можно качественно и количественно определять любые соединения, способные электро-окисляться или электровосстанавлнваться.
Универсальность, высокая чувствительность, избирательность и точность метода обеспечивают широкое применение его при определении содержания элементов и ряда соединений, находящихся в малых и ультрамалых количествах.
Поступила 20.08.85
УДК 628.3:579]:876.12
Краткие сообщения
Е. М. Юровская, Т. Б. Мельник-Саевш
ОСОБЕННОСТИ МИКРОБНОГО ЗАГРЯЗНЕНИЯ СТОЧНЫХ ВОД ПРЕДПРИЯТИЙ ПО ПЕРЕРАБОТКЕ МАКУЛАТУРЫ
Киевский НИИ общей и коммунальной гигиены им. А. Н. Марзеева
Производство картона и бумаги на основе переработки макулатуры — широко развивающаяся отрасль промышленности, характеризующаяся высоким водопотрсблением.
Для ограничения потребления природных вод и уменьшения сброса промышленных стоков Украинским научно-производственным объединением целлюлозно-бумажной про-мышленности для ряда предприятий отрасли разработана, р а на отдельных из них внедрена система оборотного водоснабжения. Опыт действующих предприятий по переработке макулатуры показал, что такая рациональная система водоснабжения не исключает непосредственного контакта работающих со сточными водами, что требует обеспечения безопасности последних.
Целью данной работы являлось санитарно-микробиоло-гическое изучение сточных вод ряда предприятий УССР по производству картона из макулатуры с действующей системой оборотного водоснабжения. Объектами изучения были картонная фабрика города Л. и картонное производство целлюлозного завода города Н.
В сточных водах указанных предприятий исследовали общую микробную обсемененность, наличие лактозоположи тельной кишечной палочки (ЛКП), энтерококков и энтеро фагов. Использовали стандартные санитарно-бактериологи ческие и санитарно-вирусологичсские методы исследования Общую микробную Обсемененность определяли глубинным посевом в 1,5% мясопептонный агар при 37 °С в- течение 24 ч; ЛКП выявляли трехэтапным бродильным методом на средах Кода и Эндо, пелужидкой лактозе при 37 °С. Энтерококки определяли двухэтапным методом на щелочной эн-терококковой среде, сахарно-дрожжевом агаре с хлоридом трнфенилтетразолия и ингибиторами (полимиксином, кристаллическим фиолетовым). Энтерофагн к эшерихиям К12.
патогенным эшерихиям серотипов 0151 и 0124, шигеллам Флекснера и Зонне, сальмонеллам мышиного тифа определяли методом агаровых слоев по Грациа [3].
На картонной фабрике сточные воды, используемые в оборотном водоснабжении, предварительно очищаются на фракционаторах, поступают на вторую ступень очистки — в вертикальные отстойники, проходят физико-химическую очистку с применением коагулянта и флокулянта (сульфата алюминия и полиакриламида). Очищенная вода применяется для мойки сукон, технологического оборудования и полов в цехах, а также для разбавления макулатурной массы. Потребление оборотной воды на технические нужды достигает 97—98 %. На этом предприятии изучали производственные сточные воды основных технологических циклов — после гидроразбивателеи, подсеточную воду, перед фракционаторами и сточную воду после физико-химической очистки, используемую в оборотном водоснабжении. Исследования проводили в весенне-летний период в течение 1981—1983 гг. на базе городской санэпидстанции города Л.
В табл. I представлены результаты выполненных исследований.
Как видно из табл. 1, сточные воды всех технологических циклов характеризовались необычно высоким микробным загрязнением. Общая микробная обсемененность составляла 54,8—74,18 млн/мл, индекс ЛКП—125,3 — 130,7 млн. и лишь в стоках перед фракционаторами был на порядок ниже—11,6 млн., а индекс энтерококков достигал 4,78—6,44 млн. В сточных водах постоянно обнаруживалось значительное количество энтерофагов, индекс которых к эшерихиям К12 колебался от 10 000 до 100 000 БОЕ/л, к энтеропатогенным эшерихиям серотипа
