CC BY
60
УДК 635.153
ИТОГИ ИЗУЧЕНИЯ ЖЕЛТОЙ КАРЛИКОВОСТИ ЯЧМЕНЯ
K.A. МОЖАЕВА
(Всероссийский научно-исследовательский институт фитопатологии PACXH)
Приведены результаты многолетнего всестороннего изучения желтой карликовости ячменя и вирусов — возбудителей этого опасного заболевания зерновых культур. Изучены методы идентификации (переносчики, ИФА, ПЦР) и штаммов/й состав ВЖКЯ и ВЖКЗ, проведен их мониторинг на территории России. С использованием гибридомной технологии на основе моноклональных антител получены диагностикумы для проведения ИФА, разработана методика полевого опыта оценки сортообразцов овса и других зерновых на толерантность / устоичивость к ВЖКЯ с использованием вирофорной тли.
Ключевые слова: ВЖКЯ, идентификация, штаммы, мониторинг, эпидемиология , толерантнось овса.
Желтая карликовость ячменя — одно из наиболее распространенных и опасных заболеваний зерновых культур — поражает пшеницу, ячмень, овес, кукурузу, рис и наносит большой урон производству этих культур, приводит к потеря м 10~15% урожая, а в годы эпифитотий — до 60~90% [30]. Болезнь отмечена во всех зерносеющих странах и регионах, причем в большинстве из них периодически наблюдаютс эпифитотии.
Впервые желтая карликовость
была описана в начале 1950-х гг. Возбудителем заболевани первоначально считался один вирус, названный вирусом желтой карликовости ячменя (ВЖКЯ), который был отнесен к группе лютеовирусов. В зависимости от способности переноситьс определенными видами тлей стали различать пять штаммов ВЖКЯ, объединенные в две подгруппы, между кото-
рыми не было серологического родства. В настоящее время считается, что желтая карликовость вызывается двумя вирусами. ВЖКЯ представлен штаммами PAV, MAV, SGV и RMV, штамм RPV получил название вируса желтой карликовости злаков (ВЖКЗ) и был отнесен к полеровирусам [25]. Оба вируса имеют сферические частицы диаметром 20-30 нм, геном представлен одноцепочечной РНК. В растении вирусы локализуетс во флоэме и передаются только тля ми по персистентному типу. Известно более 20 видов тлей-переносчиков, но наиболее эффективными из них являются Sitobion avenae F., Rho-palosiphum padi L., Rhopalosiphum maidis (Fitch), Schizaphis graminum (Rondani) и Metopolophium dirhodum (Walker).
В России это заболевание впервые было зарегистрировано в 1961 г.
в Краснодарском крае в период эпи-фитотии вирусных болезней на зерновых культурах. В 1969 г. оно было отмечено в Московской обл. [22]. В течение последующих почти двадцати лет упоминаний о нем не было. В 1988-1991 гг. сильная эпифитотия желтой карликовости на серых хлебах наблюдалась в Нечерноземной зоне и в меньшей степени в Центральночерноземном регионе России. Посевы зерновых на территории нескольких миллионов гектаров были поражены этим заболеванием, что привело к большим потерям урожая [23].
Изучение желтой карликовости ячменя во ВНИИФ было начато в 1991 г. после эпифитотии желтой карликовости я чменя в 1988-1991 гг. и продолжалось до 2010 г. В 19912009 гг. по тематике РАСХН, а в 2001-2004 гг. также и по проекту Международного научно-технического центра (МНТЦ).
Методика
Для наработки препаратов вируса, которые необходимы для получения моноклональных антител, использовали модифицированный метод Hammond et al. [26]. Для выделения вируса брали естественно инфицированный материал или зараженный вирофорной тлей, инфицированной определенным штаммом ВЖКЯ. Для определения штаммов ВЖКЯ/ВЖКЗ использовали диагностикумы для им-муноферментного анализа (ИФА), полученные на основе моноклональных антител совместно с ИБХ имени М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова [28], или диагностикумы фирм Agdia, Loewe и BioRAD, специфичные к отдельным штаммам ВЖКЯ или ВЖКЗ.
Образцы зерновых культур, в
основном серых хлебов, имеющие симптомы желтой карликовости, собирали во врем обследований и получали из областных СТАЗР при содействии Фитоцентра РФ.
Полевые мелкоделяночные опыты проводили в ОПИ ВНИИФ Раменская горка в Московской обл. Методика проведения опытов и оценки толерантности образцов овса к ВЖКЯ описаны в результатах соответствующего раздела.
Результаты и их обсуждение
На основании изучения свойств ВЖКЯ и способов его передачи нами было установлено, что основной причиной эпифитотийного поражения серых хлебов на европейской части РФ в 1988-1991 гг. явля ется этот вирус [12].
Основными задачами наших исследований в 1991-2000 гг. были:
1) идентификация ВЖКЯ/ВЖКЗ; 2) изучение особенностей эпидемиологии желтой карликовости ячменя в Центральном регионе европейской части страны; 3) изучение распростра-нени и штаммового состава ВЖКЯ и ВЖКЗ в регионах европейской части России.
В результате 10-летних исследований было сделано следующее:
1 ) освоен и модифицирован метод выделени вируса из естественно инфицированных листьев овса и ч-меня [5, 8]; 2) совместно с ИБХ получены моноклональные антитела и на их основе созданы диагностикумы для выявления РАУ ВЖКЯ и ИРУ ВЖКЗ [6, 27]; 3) разработана методика подготовки образцов из сухих листьев злаков и оптимизирована схема проведения ИФА [1, 9, 13];
4) совместно с РУДН изучена фауна тлей-переносчиков вирусов [4];
5) охарактеризован состав ценоза зла-
ков, которые я вля ются источниками и резерваторами инфекции желтой карликовости ячменя в течение года [14]; 6) дана характеристика ком-
плекса агроклиматических условий, благопри тных дл возникновени
эпифитотийных вспышек этого забо-
левания [14, 32]; 7) впервые во всех семи регионах европейской части РФ (19 края х, областя х и республиках) проведено определение штаммов PAV, MAV, SGV и RMV ВЖКЯ и RPV ВЖКЗ. Вы влены все эти штаммы и показано, что наиболее часто в эти годы встречались PAV ВЖКЯ и RPV ВЖКЗ, а самым малораспространенным был штамм RMV ВЖКЯ [8, 16, 31, 33].
Проведенные в эти годы исследо-вани создали научно-методическую базу дл дальнейшего более глубокого и всестороннего изучени этого заболевания . В 2001-2004 гг работа проводилась при поддержке Международного научно-технического центра (МНТЦ) по проекту «Вирусные болезни серых хлебов в России (вирус желтой карликовости я чменя)». Основными задачами проекта вл -лось дальнейша разработка диагно-стикумов дл штаммов ВЖКЯ, определение штаммового состава ВЖКЯ/ ВЖКЗ в азиатской части РФ, оценка возможности использования для селекции в России толерантных сортов и линий овса.
Получение диагностикумов для ИФА к штаммам ВЖКЯ-ВЖКЗ. Эта работа была продолжена совместно с ИБХ. имени М.М. Шем -кина и Ю.А. Овчинникова. При использовании гибридомной технологии получены моноклональные антитела (МА) и приготовлены их конъюгаты с ферментами (щелочной фосфотазой и пероксидазой хрена), что позволило получить диагностикумы дл определения PAV, МAV и RMV штаммов ВЖКЯ и RPV ВЖКЗ [27].
Из одиннадцати моноклональных антител, специфичных к ВЖКЯ и ВЖКЗ, которые были получены в ходе выполнения проекта, для дальнейшей работы были отобраны пять: 4B5, 4B5m, 4B6, 4C6, 2A5.4. С трем из них приготовлены конъюгаты: 4В5-ПХ, 4В5-ЩФ, 4В6-ПХ, 4B5m-ПХ и 4B6. Указанные моноклональные
антитела и их конъюгаты с ферментами использованы дл приготовления отечественных диагностикумов, с помощью которых можно определя ть все пя ть штаммов ВЖКЯ/ВЖКЗ:
- МА 4В5 с коньюгатом 4В5-ПХ пригодны для выя вления РАУ и SGV ВЖКЯ;
- Ма 4В6 с конъюгатом 4В6-ПХ могут одновременно выя вля ть МАУ и ИМУ ВЖКЯ и ИРУ ВЖКЗ;
- МА 4В5 с конъюгатом 4В6-ПХ выя вля ют МАУ ВЖКЯ;
- МА 2А5.4 с конъюгатом 4В6-ПХ вы вл ют МАУ ВЖКЯ;
- МА 2А5.4 с конъюгатом 4Б5т-ПХ выявля ют ИРУ ВЖКЗ.
Эти линии будут храниться в т ече-ние последующих лет в жидком азоте и при необходимости могут быть расконсервированы дл реклониро-
вания, проверки продукции антител и наработки новых порций асцитных жидкостей. Кроме того, создан запас очищенных антител и асцитных жидкостей от перечисленных линий, что позволит удовлетворить потребность в соответствующих диагностикумах в ближайшие годы. Клеточные линии сохраня ются при -70°С и при необходимости могут быть реклонированы. Дл определени ВЖКЯ и его штамма SGV также освоен метод полимеразной цепной реакции [3].
Мониторинг и штаммовый состав ВЖКЯ. Для выполнения этой задачи проведено обследование посевов зерновых культур, собраны и проанализированы с использованием ИФА образцы из 16 краев и областей всех регионов азиатской части РФ (Урал, Западная Сибирь, Восточная Сибирь, Дальний Восток). Впервые доказано наличие в этих регионах желтой карликовости ячменя, воз-будител ми которой вл ютс штаммы РАУ, МАУ, SGV, ИМУ ВЖКЯ и ИРУ штамм вЖкЗ.
Как уже отмечалось выше, на европейской части РФ обследовани посевов зерновых культур началось
после эпифитотии этого заболевания здесь в 1988-1991 гг. К 2006 г. на наличие ВЖКЯ/ВЖЗК были проанализированы образцы зерновых культур из 7 регионов (38 областей, краев и республик) и во всех регионах были обнаружены штаммы РАУ, МАУ, SGV, ИМУ ВЖКЯ и ИРУ штамм ВЖКЗ. Показаны различи в штаммо-вом составе, как по регионам, так и по годам в обоих част х страны. Проведено сравнение штаммового состава ВЖКЯ и ВЖКЗ в европейской и азиатской частях РФ [2, 16, 20, 35].
Уровень поражения серых хлебов тем или иным штаммом зависит от численности и состава попул ции тлей-переносчиков, их вирофорно-сти, что определяется погодными условия ми года, влияющими как на выживание тлей зимой, так и на сохранение очагов инфекции, возможности ее распространения, накопле-ни и т.п. Весной источником инфекции служат многолетние злаковые травы и сорня ки, озимые и их падалица; летом, до всходов озимых, -посевы на зеленый корм овса в смеси с бобовыми и в меньшей степени злаковые травы и сорня ки. В конце вегетационного сезона, кроме озимых, источником инфекции становитс падалица и подрост ровых культур на полях, где не проводится зя блевая вспашка. Нар ду с погодными условия ми на поражение посевов зерновых культур желтой карликовостью и на реализацию имеющегос в природе потенциала заболевани вли ют также агротехнические мероприятия (подготовка почвы, удобрения, использование инсектицидов и гербицидов и т.п.), которые в значительной степени определ ют фитосанитарное состо ние посевов [2].
Мониторинг посевов серых хлебов в разных регионах РФ был продолжен в 2005-2009 гг. В 2005 и 2006 гг. в европейской части России погодные усло-ви были благопри тны дл массового размножения тлей-переносчиков и инфицировани зерновых культур
ВЖКЯ. В эти годы эпифитотийные вспышки этого заболевани на зерновых культурах наблюдались на Северном Кавказе и ЦЧО, что привело к значительным потеря м урожая озимой пшеницы в некоторых хоз йствах. Например, в 2006 г. в ОПХ Гулькеви-ческий Краснодарского кра на некоторых полях снижение продуктивности озимой пшеницы достигало 50%, аналогичное снижение урожая было на фирме «Апротек» Воронежской обл. Поражение зерновых культур желтой карликовостью (от очагового до эпифитотийных вспышек) в этом году отмечалось также в Нечерноземной зоне, Поволжье и на Урале.
В 2007-2009 гг. как в европейской, так и в азиатской част х РФ наблюдалось только очаговое или единичное инфицирование серых хлебов и пшеницы ВЖКЯ, что практически не оказывало влия ние на урожайность этих культур. В эти годы ВЖКЯ был выявлен в образцах, присланных из разных областей и республик Центрального региона, ЦЧО, Северного Кавказа, Поволжья, Урала и Западной Сибири. Низкий уровень инфицирования зерновых культур желтой карликовостью в эти годы был обусловлен тем, что погодные условия были неблагоприятными для жизнедеятельности тлей-переносчиков как весной во врем первичного инфицирования злаков, так и позднее в период накоплени и распространени инфекции.
Таким образом, в природе постоя нно сохраня ется и поддерживается обычно невысокий, но стабильный уровень инфицировани зерновых культур, злаковых трав и сорняков ВЖКЯ. При создании благопри тных условий для размножения вспышка заболевания, вначале очаговая, но способна впоследствии развиватьс до размера эпифитотии в отдельных регионах страны и даже распростра-н тьс на целые страны и континенты, вызывая большие экономические потери, как это было в конце
1980-х гг. В последние годы эпифито-тийные вспышки ВЖКЯ наблюдались в 2005 и 2006 гг. на Северном Кавказе и в Центрально-черноземном регионе.
Для того чтобы иметь возможность прогнозировать по вление и распространение желтой карликовости ячменя , а также приостановить возникновение эпифитотии или ограничить ее, необходимо регуля рно проводить мониторинг численности и видового состава тлей-переносчиков и обследовать посевы зерновых культур на зараженность этими вирусами.
Изучение толерантности сортов и линий овса к ВЖКЯ. Поскольку у овса (в отличие от чмен ) гены устойчивости к ВЖКЯ не идентифицированы, ответ растения на заражение характеризуют как чувствительность или толерантность. Наиболее интенсивные работы по созданию толерантных к ВЖКЯ сортов овса проводились в США, слабопоражае-мые сорта и линии овса получены в Канаде, Финля ндии, Чехии и Швеции [24].
В России подобных селекционных работ не проводили, исследования в этой области ограничивались оценкой имеющегос набора сортов из мирового сортимента на естественном инфекционном фоне, в частности, в ВИР и его московском филиале после эпифитотии ВЖКЯ (1988-1991) только на основании визуальных симптомов. В этих коллекци х овса были выявлены сорта и гибриды, слабо поражаемые вирусом, происходя щие из США, Канады и Мексики. Нами была предприн та попытка изучени поражаемости сортов и линий овса ВЖКЯ как на естественном, так и на искусственном инфекционных фонах, с привлечением иммуноферментного анализа. Цель исследований состо ла в выявлении форм, пригодных для создания в России толерантных сортов овса.
Полевой мелкодел ночный опыт проводился в 2001-2004 гг. на опыт-
ном поле BHИИФ в Московской обл. В 2001 г. были испытаны п тьдес т сортообразцов овса из коллекции ВОТ на естественном фоне инфицирования BЖKЯ/BЖKЗ. По результатам этого опыта было отобрано 34 сортообразца (в т.ч. 15 линий Иллинойского университета CШA), которые в 2002 г. испытывались при искусственном инфицировании. В 2003 г. дл опытов был оставлен 21 сортообразец, в 2004 г. — 23 сор-тообразца (включены новые гибриды, полученные в HИИCX ЦPHЗ на основе продуктивных отечественных сортов и толерантных иллинойских линий).
Полевые опыты 2002-2004 гг. включали три варианта:
1 - контроль: овес выращивался в условиях, ограничивающих заражение растений BЖKЯ тлями-переносчиками за счет периодического опрыскивани инсектицидами;
2 - овес выращивали на естественном фоне заражения BЖKЯ; 3 - овес выращивали на искусственном фоне заражения штаммом PAV BЖKЯ с использованием вирофорной тли Rho-palosiphum padi.
В качестве чувствительного сорта был взя т Clintland 64, в качестве стандартного включенный в Госреестр для данного региона сорт Улов. P=^ пространенность болезни оценивали визуально по симптомам и с помощью иммуноферментного анализа (Mf) с использованием моноклональных антител, специфичных к PAV BЖKЯ. После уборки урожая определя ли высоту растений, продуктивную кустистость, массу зерна с растения и метелки, количество зерен с растения и метелки, массу 1000 зерен. Оценивали продуктивность одного растени и одной метелки по отношению к контролю сорта и контролю стандарта в процентах. Сатирическую обработку данных проводили в программе STA-TISTICA Microsoft [18].
Для обеспечения искусственного инфицировани овса был получен ви-
рофорный клон тли R. padi, который нарабатывался в количествах, необходимых дл проведени опыта. Всего на толерантность к PAV штамму ВЖКЯ было оценено 15 иллинойских линий и 19 сортов овса отечественной и зарубежной селекции.
Полученные результаты показали, что отдельные сортообразцы овса зарубежной селекции обладают высокой толерантностью к желтой карликовости. В услови х защищенного контрол толерантные сортообразцы, как правило, имеют более низкую продуктивность, чем отечественный сорт Улов, использованный в качестве стандарта. Однако в услови х эпифитотии, которая создавалась искусственным заражением растений PAV штаммом ВЖКЯ с помощью ви-рофорной тли R. padi, толерантные сортообразцы сохраняли до 80% своей продуктивности, в то время как чувствительные сорта не более 2030%. Например, в 2003 г. продуктивность иллинойских линий IL 85-1538, IL 86-6404, IL 86-5698, IL 86-5262, IL 86-1158, IL 2901 и сорта Blaze на искусственном инфекционном фоне была примерно в 2,5 раза выше, чем в тех же условия х у сорта Улов, который не обладает толерантностью к ВЖКЯ. В 2004 г. на искусственном инфекционном фоне потеря продуктивности у овса сорта Улов достигала почти 70%, тогда как у толерантного сорта FF 64-74 она составила 27,4%, а у иллинойских линий IL86-5262, IL 2901, IL 85-1538 — 40-53% [21, 34].
Итак, если оценивать толерантность по среднему показателю за 3 года (сохранение продуктивности на искусственном инфекционном фоне), то изученные образцы можно расположить в следующем поря дке: FF 64-74, Blaze, IL 85-1538, IL 3303, Maris Elf, IL 85-5262 и IL 86-6404. Если же о перспективности образца судить по его урожаю при высокой инфекци-
онной нагрузке ВЖКЯ, то лучшими на основании 3-летних опытов можно считать FF 64-74, IL 85-5262, Blaze, IL 85-1538, IL 2901 и IL 86-1158. Образец FF 64-74 (Канада) был наиболее стабильным по продуктивности и толерантности на искусственном инфекционном фоне ВЖКЯ во все годы испытаний. Некоторые положительно оцененные по толерантности к ВЖКЯ образцы обладали и другими хо-
з йственно полезными свойствами: растени сорта Maris Elf и линии IL 85-1538 характеризовались низко-рослостью, линий IL 86-1158, IL 86-5698 и IL 2901 — крупнозерностью. Сорта FF 64-74 и Maris Elf, линии IL 85-5262, IL 85-1538, IL 2901 и IL 86-5698 уже включены в селекционный процесс в лаборатории овса НИИСХ ЦРНЗ. Начатая здесь в 2003-2005 гг. работа по созданию сортов овса, толерантных к ВЖКЯ, продолжается до настоя шего времени [10, 11].
Основные результаты трехлетних полевых испытаний сортообразцов овса на толерантность к ВЖКЯ.
1. Разработана адаптированна к услови м России методика оценки толерантности овса к ВЖКЯ в полевых услови х и в услови х селекцентров [17, 18, 34], которая включает:
- размножение и круглогодичное поддержание вирофорной тли Rho-palosiphum padi;
- создание искусственного инфекционного фона PAV ВЖКЯ в полевых услови х;
- методику оценки пораженности сортообразцов овса ВЖКЯ (визуально и с помощью ИФА);
- вы вление перспективных дл селекции на толерантность к ВЖКЯ сортообразцов овса по критери м продуктивности, толерантности и реакции на инфицирование вирусом.
2. Рекомендованы в качестве доноров т олерантности для Нечернозёмной зоны РФ сорта овса FF 64-74, Blaze,
Maris Elf и иллинойские линии IL 861158, IL 86-5262, IL 85-1583 и другие. часть этих образцов были включены в гибридизацию и продолжают изу-чатьс в лаборатории селекции овса НИИСХ ЦРНЗ РФ [10, 11, 21, 34].
Разработанна методика оценки
толерантности овса к ВЖКЯ может быть использована также для оценки устойчивости и толерантности к этому вирусу других зерновых культур (ячменя, пшеницы) и кукурузы.
Заключение
В 2009 г. группа вирусологии ВНИ-ИФ закончила многолетнее изучение желтой карликовости ячменя и его возбудителя , которое проводилось в 19912009 гг. по тематике РАСХН, а в 20012004 гг. также и по проекту МнТЦ 1995. В результате проведенных исследований были изучены основные вопросы, касающиеся как этого опасного вирусного заболевани зерновых культур, так и самого вируса — его возбуди-тел .
Идентификация вируса и его штаммов:
- Предложен метод очистки ВЖКЯ и накоплени антигена в препаративных количествах, необходимых для получени диагностикумов на основе моноклональных антител дл иммуно-ферментного анализа (ИФА).
- Совместно с ИБХ имени М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова с использованием гибридомной технологии на основе моноклональных антител получены диагностикумы (специфические антитела и конъюгаты) дл проведени идентификации ВЖКЯ и его штаммов PAV, MAV, RMV и штамма RPV ВЖКЗ.
- Предложена методика идентификации ВЖКЯ и его штамма SGV с помощью ПЦР.
Распространение и штаммовый состав ВЖКЯ и ВЖКЗ в азиатской и европейской частях России:
- Во всех регионах азиатской и европейской частей РФ (в 57 област х, кра х и республиках) вы влены ви-
русы (ВЖКЯ и ВЖКЗ), вызывающие желтую карликовость ячменя.
- На основании результатов ИФА определен штаммовый состав этих вирусов. Во всех регионах ВЖКЯ был представлен штаммами PAV, MAV, SGV и RMV, а ВЖКЗ - RPV.
Эпидемиология желтой карликовости ячменя в Центральном регионе России:
- Вы влены источники и резерва-торы инфекции желтой карликовости
чмен .
- Дана характеристика агроклиматических условий, благоприятных для возникновения эпифитотийных вспышек этого заболевани на зерновых культурах, особенно на серых хлебах.
Селекция на устойчивость и толер нтность зерновых культур к ВЖКЯ (на примере полевого опыта с овсом):
- Разработана адаптированна к
условиям России методика оценки толерантности/устойчивости зерновых
культур к ВЖКЯ в полевых усло-ви х.
- Созданы методическа и материальна базы (получены вирофорна тл R. padi — переносчик вируса и диагностикумы для проведения ИФА), необходимые дл проведени работ по селекции зерновых культур на толерантность и устойчивость к ВЖКЯ.
- Проведена оценка 19 сортообраз-цов овса из коллекции ВИР и 15 илли-нойских линий (США) на толерантность к ВЖКЯ.
- В качестве доноров толерантности дл Нечерноземной зоны РФ рекомендованы сорта овса FF 64-74 (Канада), Blaze (США), Maris Elf (Великобрита-ни ) и иллинойские линии: IL 86-1156, IL 86-5262 и IL 85-1538, с которыми в настоящее время продолжает прово-дитс селекционна работа в ВНИИСХ НЗ РФ.
Результаты изучения жёлтой карликовости ячменя в России отражены в более 40 публикациях и доложены на 18 совещани х и конференци х в России, странах СНГ и за рубежом.
1. Васильева Т.Я., Ерохина Т.Н., Кастальева Т.Б., Можаева К.А. Определение вируса желтой карликовости ячменя при помощи иммуноферментного анализа на основе моноклональных антител // Сб. метод. реком. по защите растений. СПб., 1998. С. 242-245.
2. Вирус желтой карликовости ячменя и другие вирусы зерновых культур на территории Российской Федерации. М.: ФГНУ «Росинфармагротех», 2007.
3. Гирсова Н.В., Можаева К.А., Кастальева Т.Б. Методика определения вируса желтой карликовости ячменя с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР) // В кн.:Высокопроизводительные и высокоточные технологии и методы диагностики и фитосанитарного мониторинга. М., 2007. С. 4-8.
4. Джама М.И. Роль тлей из семейства Aphididae в распространении вирусов на пшенице и пшенично-пырейных гибридах: Автореф. канд. дисс. М., 2000.
5. Кастальева Т.Б., Васильева Т.Я., Можаева К.А. Выделение вируса желтой карликовости из естественно зараженных растений овса и ячменя // Доклады РАСХН, 1994. №3. С. 23-25.
6. Кастальева Т.Б., Ерохина Т.Н., Васильева Т.Я, Можаева К.А. Диагностика вируса желтой карликовости ячменя с помощью иммуноферментной тест-системы на основе моноклональных антител // Доклады Р'СХН, 1996. №5. С. 19-21.
7. Кастальева Т.Б, Васильева Т.Я, Можаева К.А. Распространение и штам-мовый состав вируса желтой карликовости ячменя // Вестник РАСХН, 1997. №2. С. 48-50.
8. Кастальева Т.Б, Можаева К.А., Васильева Т.Я. Изучение штаммового состава вируса желтой карликовости ячменя // Вестник защиты растений, 2001. №3. Р. 63-65.
9. Кастальева Т.Б., Можаева К.А. Оптимизация методики определения вируса желтой карликовости ячменя с помощью иммуноферментного анализа // Вестник защиты растений, 2002. №2. Р. 49-52.
10. Магуров П.Ф., Можаева К.А., Кастальева Т.Б., Пугачева Г.Т. Перспективы селекции овса на устойчивость к вирусу желтой карликовости ячменя // Сб. науч. тр. НИИСХ ЦР НЗ. М., 2006. С. 66-77.
11. Магуров П.Ф., Можаева К.А., Борисонова Т.М., Кабашов А.Д., Мамедов Р.З. Использование в селекции овса форм, толерантных к вирусу жёлтой карликовости ячменя // Сб. тр. НИИСХ ЦР НЗ «Проблемы селекции и технологии возделывани зерновых культур», 2008. С. 42-46.
12. Можаева К.А., Васильева Т.Я. Вирус желтой карликовости ячменя - возможная причина массового поражения зерновых // Защита растений, 1992. № 6. С. 52-53.
13. Можаева К.А., Кастальева Т.Б., Васильева Т.Я., Ерохина Т.Н. Иммуно-ферментная тест-система для выя вления вируса желтой карликовости ячменя // Агро-ХХ1, 1998. №1. С. 14-15.
14. Можаева К.А., Кастальева Т.Б. Желтая карликовость я чменя: эпидемиологическая ситуация в Европейской части России в 1991-1999 гг. // Агро -ХХІ, 1999. № 9. С. 8-9.
15. Можаева К.А., Кастальева Т.Б., Васильева Т.Я. Распространение вируса желтой карликовости ячменя на злаках // Вестник защиты растений, 2002. №3. С. 65-68.
16. Можаева К.А. , Кастальева Т.Б. Вирус желтой карликовости ячменя и его штаммы в России // Агроекологічньїй журнал, 2002. Спец. Вып. С. 28-33.
17. Можаева К.А., Яковлева И.Н., Мотовилин А.А., Кастальева Т.Б., Щербакова Л.А, Гирсова Н.В., Назарова Т.А. Изучение толерантности сортооб-
разцов овса к вирусу желтой карликовости ячменя (методика полевого опыта) // "Современные аспекты селекции, семеноводства, технологии и переработки ячменя и овса”. Межд. науч.-практ. конф. 6-8 июля 2004 г. Россия, Киров. C. 132-133.
18. Можаева К.А., Кастальееа Т.Б., Лоскутов И.Г. О толерантности овса к вирусу желтой карликовости ячменя // Сельскохозя йственная биология,
2007. №3. C. 68-78.
19. Можаева К.А., Кастальева Т.В., Гирсова Н.В. Испытание сортов и линий овса на толерантность к вирусу желтой карликовости ячменя в полевых условиях // Тези V Мiжнародноi конференцп, «Боiресурси та вiруси». 10-13 вересня 2007, Кшв.
20. Можаева К.А., Кастальева Т.Б., Гирсова Н.В. Мониторинг вируса желтой карликовости ячменя и других вирусов зерновых культур в России // 1-я Межд. Закавказская конф. по фитопатологии. Тбилиси, сентябрь 25-27,
2008.
21. Можаева К.А., Кастальева Т.Б., Гирсова Н.В, Яковлева И.Н., Магу-ров П.Ф. Оценка сортообразцов овса на толерантность к ВЖКЯ // Тр. по прикладной ботанике, генетике и селекции, 2009. Т. 165. C. 213-216.
22. Развязкина Г.М. Вирусные заболевания злаков. Новосибирск: «Наука», 1975.
23. Юдкин Л.Ю. и др. О вспышках вирусных заболеваний серых хлебов в Нечерноземной зоне России // Тез. докл. совещ. «Проблемы вирусных болезней зерновых культур и пути их решени ». Всерос. НИИ с./х. использ. мелиор. земель. 4.1. С. 2-4. Тверь, 1993.
24. Burnett P.A., Comeau A., Qualset C.O. Host tolerance or resistance for control of barley yellow dwarf. // In: Barley yellow dwarf: 40years of progress. C. J. D’Arcy and P.A. Burnett, eds. APS Press, St. Paul, MN, 1995. P. 321-343.
25. D’ Arcy C.J.,Mayo M. Propousals for changes in luteovirus taxonomy and nomenclature // Arch. Virology, 1997. 142. P. 1285-1287.
26. Hammond J., Lister R.M., Foster J.E. Purification, identity and some properties of an isolate of barley dwarf virus from Indiana // J. Gen. Virology, 1983. Vol. 64. P. 667-676.
27. Erokhina T.N., Kastalieva T.B. Production of monoclonal antibodies against barley yellow dwarf virus, detection of BYDV in the field samples from central region of Russia // Zuchtungsforschung, 1995. Bd. 1. № 2. P. 71-74
28. Erokhina T.N., Kastalyeva T.B., Mozhaeva K.A. Preparing monoclonal antybodies against BYDV u sing viruses purified from naturally infected plants // Barley Yellow Dwarf Disease recent advances and future strategies. CIMMYT, Mexico, September 1-3, 2002. P. 101-103.
29. Kastalieva T.B., Mozhaeva K.A., Vasilieva T.Ya. Barley yellow dwarf virus in European Russia // Journal of Russian Phytopathological Society, 2000. Vol. 1. P. 17-20.
30. Lister R.M., Ranieri R. Distribution and economic importance of barley yellow dwarf // In: Barley yellow dwarf: 40year of progress. C.J. D’Arcy and P.A. Burnett, eds. APS Press, St. Paul, MN, 1995. P. 29-53.
31. Mozhaeva K.A., Kastalieva T.B., Vasilieva T.Ya. Strains of barley yellow dwarf virus in European Russia // CIMMYT, Mexico, 1998. BYD Newsletters. 7. Р. 9-10.
32. Mozhaeva K.A. , Kastalieva T.B. Same aspects of epidemiology of barley yellow dwarf in the European Russia // Abstracts of the V111th International Plant Virus Epidemiology Symposium. Aschersleben, Germany, 12-17 May. 2002. P. 105.
33. Mozhaeva K.A., Kastalyeva T.B. Barley yellow dwarf virus in Russia // Barley Yellow Dwarf Disease recent advances and future strategies. CIMMYT, Mexico, September 1-3. 2002. P. 120-122.
34. Mozhaeva K.A., Domier L.L., Kastalyeva T.B., Magurov P.F., Yakovleva I.N. Evaluation of oat cultivars and lines under infection with barley yellow dwarf virus // Communication in agricultural and applied biological sciences, 2004. Vol. 69(4). Part 2. P. 581-588.
35. Mozhaeva K.A., Kastalyeva T.B., Girsova N.V. Incedence of barley yellow dwarf disease in Asiatic Russia // «Bioresourses and Viruses». Abstracts of IV International Conference, 27-30 September, 2004. Kiev.
Рєцєнзєн2 — д. с.-х. н. О.О. Белошапкина
SUMMARY
Results, obtained during long-term research into b oth yellow dwarfism disease and its causative agents - BYDV and CYDV are presented in the article. To identify strain specificity of the viruses such methods as transfer with specific aphid vectors - ELISA and PCR have been used. Monitoring of both viruses and their strains incidence all over grain-producing regions of Russia is carried out. Specific monoclonal antibodies were obtained and viral diagnosticum was worked out, hybridome technology being used. Method of field evaluation of oat varieties on their resistance to BYDV, using artificial infestation by BYDV-infected aphids has been worked out.
Key words: BYDV, identification, strains, monitoring, epidemiology, tolerance of oats.
Можаева Карина Алексеевна — к. с.-х. н. E-mail: mozhaeva@vniif.ru
