CC BY
15
ФУНДАМЕНТАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
79
р < 0,001 для групп 1 и 2; р < 0,01 для группы 3). Пролиферативная активность NK-клеток, стимулированных ^-2, была ниже в присутствии клеток трофобласта по сравнению со стимуляцией ^-2 в отсутствие клеток трофобласта (интенсивность экспрессии маркерного белка пролиферации Ю-67 NK-клетками в присутствии ^-2 и клеток трофобласта (относительные единицы флуоресценции): группа 1 — 578 {490; 813}, группа 1 — 810 {601; 1412}, группа 1 — 2895 {920; 4205}. Достоверность различий внутри групп от культивирования в присутствии ^-2: р < 0,001). Данное ингибирующее действие клеток трофобласта было выражено слабее в отношении NK- клеток женщин группы 2 по сравнению с группой 1 (р < 0,05). Пролиферативная активность NK- клеток женщин группы 3 в присутствии ^-2 была примерно в 5 раз выше по сравнению с группами 1 (р < 0,001) и 2 (р < 0,01). В присутствии клеток трофобласта наблюдали ингибирование пролиферации стимулированных ^-2 NK-клеток женщин группы 3 (р < 0,001), однако базальный уровень пролифе-
рации в данном случае был выше по сравнению с группами 1 (p < 0,001) и 2 (p < 0,001).
Выводы
Клетки трофобласта ингибируют как спонтанную, так и индуцированную IL-2 пролиферацию NK-клеток in vitro при беременности и вне беременности. Ингибирующее действие клеток трофобласта на пролиферацию NK-клеток выражено в различной степени в зависимости от фазы менструального цикла. В секреторной фазе менструального цикла NK-клетки периферической крови более устойчивы к ингибирующему действию клеток трофобласта по сравнению с пролифера-тивной фазой. NK-клетки периферической крови беременных женщин обладают повышенной пролиферативной активностью по сравнению с NK- клетками небеременных женщин. Этот факт свидетельствует в пользу активированного состояния NK-клеток при беременности. Предактивация NK-клеток при беременности может способствовать их повышенной устойчивости к ингибирую-щему действию со стороны клеток трофобласта.
ИССЛЕДОВАНИЯ ВЛИЯНИЯ НА МОРФОЛОГИЮ КЛЕТОК ЭНДОМЕТРИЯ КВАНТОВЫХ ТОЧЕК НА ОСНОВЕ ЦИНКА © Д.М. Галиева 1, студ., А.О. Дробинцева 2, с. н. с.
1 Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого, г. Санкт-Петербург, Россия;
2 ФГБНУ «НИИ акушерства, гинекологии и репродуктологии им. Д.О. Отта», г Санкт-Петербург, Россия
Актуальность проблемы
В последние два десятилетия в связи с развитием методов визуализации биологических объектов особое внимание стали привлекать полупроводниковые нанокристаллы различного типа, в особенности квантовые точки (КТ). КТ — это полупроводниковые флуоресцентные кристаллы, размер ядра которых составляет от единиц до десятков нанометров, а количество атомов 500-10 000. Этот новый вид флуорофоров обладает уникальными оптическими свойствами, устойчивостью к фотообесцвечиванию, широким спектром поглощения и узким спектром излучения, возможностью регулирования излучения за счет изменения размеров частиц. Перечисленные физико-химические и оптические свойства и особенности КТ напрямую зависят от метода получения. Их можно использовать практически во всех сферах, в которых нашли широкое применение современные полупроводники. В первую очередь КТ широко применяются в диагностических целях. В частности, их можно присоединять к биомолекулам (антитела, пептиды, белки или ДНК). А эти соединения могут быть образованы так, чтобы находить другие молекулы. В настоящее время разрабатываются
методики снабжения КТ антителами, имеющими сродство к поверхностным антигенам опухолевых клеток.
Наибольшей популярностью в качестве материала для синтеза КТ последние 10 лет пользуется кадмий, однако из-за того, что он относится к группе тяжелых металлов с высокой токсичностью, ученые пытаются применять для своих целей более безвредные материалы. В нашей работе исследовались КТ на основе цинка, которые могут стать в будущем идеальными флуорофорами для сверхчувствительной, многоцветной детекции биологических объектов и медицинской диагностики.
Цель исследования: исследовать влияние на морфологию клеток эндометрия нового вида квантовых точек ZnSe, легированных марганцем (Mn) и стабилизированных молекулами меркаптопро-пионовой кислоты (МПК) in vitro.
Материалы и методы исследования
Для достижения поставленной цели на кафедре микро- и наноэлектроники СПбГЭТУ ЛЭТИ были созданы растворы наночастиц ZnSe: Mn, покрытых молекулами МПК, методом коллоидного синтеза в жидкой фазе.
ЖУРНАЛ! АКУШЕРСТВА - ЖЕНСКИХЪ БОЛМНЕЙ
ТОМ LXVСПЕЦВЫПУСК 2016
ISSN 1684-0461 ■
Международная конференция «Репродуктивная медицина: взгляд молодых — 2016» International conference "Reproductive medicine: young scientists' overlook — 2016"
' - I r
I ■ ' , С ft /
, -it / 'ш m *
1 'V
- V/v-*- : ■
> i v4 ' V
А
Б
Рис. 1. Культура клеток эндометрия человека, окраска гематоксилином и эозином, х400 (А — контрольная группа, Б — группа с введенными КТ в концентрации 1,15 нМ/мкл через 24 ч)
Материалом для исследования были выбраны клетки эндометрия. Их культивирование происходило в среде DMEM/F12, содержащей 10 % сыворотки плодов коровы, 1 % раствор Хепеса, 1 % раствор L-глютамина и антибиотик (пенициллин G, биолот, РФ). Культура поддерживалась при 37 °C в атмосфере 5 % СО2. Культуральная среда менялась каждые 1-2 дня.
Чтобы оценить влияние квантовых точек ZnSe: Мп/МПК на морфологию клеток эндометрия исследование проводилось через 18, 24 и 48 ч после инкубации с КТ, которая имела концентрацию 1,15 нМ/мкл. Окрашивание препаратов проводилось гематоксилином и эозином по стандартной методике. Оценка результатов морфологического исследования осуществлялась с помощью микроскопа BX-46 (Olympus, Япония), цифровой камеры UC 30 и программного обеспечения CellSence Entry.
Результаты исследования
За время длительной инкубации КТ ZnSe: Mn/ МПК с клетками эндометрия не наблюда-
лись морфологические признаки изменения культивируемых клеток, говорящие об изменении их состояния, таких как наличие базальных вакуолей и др. (рис. 1). Также не наблюдалось открепления клеток от субстрата и их гибели. Во всех контрольных группах (контроль и экспериментальные группы) эндометриальные клетки имеют хорошо различимую цитоплазму, занимающую примерно 70 % клетки, небольшое овальной формы ядро.
Выводы
Отработана методика инкубации КТ с клеточной культурой. Наличие МПК-оболочки у исследуемых КТ не вызывает изменений в строении клеток, что говорит о том, одним из важных факторов использования КТ в биологических исследованиях является наличие гидрофильных групп на поверхности частиц.
Исследование выполнено за счет гранта Российского научного фонда (проект № 14-1500324).
ОСОБЕННОСТИ популяционного СОСТАВА ЛИМФОЦИТОВ И УРОВЕНЬ ЭКСПРЕССИИ РЕЦЕПТОРА TLR2 МОНОЦИТАМИ ПУПОВИННОй КРОВИ © В.А. Ляпунов, м. н. с., Л.С. Устьянцева, асп.
ФГБУ «Научно-исследовательский институт охраны материнства и младенчества» Министерства здравоохранения Российской Федерации, научное отделение иммунологии и клинической микробиологии, г. Екатеринбург, Россия
Актуальность проблемы
Поверхностный мембранный рецептор врожденного иммунитета TLR2 (Toll-like receptor 2, CD282) экспрессируется на поверхности моноцитов, макрофагов, дендритных клеток, полиморфно-
ядерных лейкоцитов, в некоторых В- и Т-клетках, в том числе Tregs (CD4+CD25+ регуляторные Т-лимфоциты). Его основная функция — распознавание бактериальных, грибковых, вирусных и некоторые других эндогенных веществ, что об-
ЖУРИАЛЪ АКУШЕРСТВА " ЖЕНСКЖЪ БОЛЬЗНЕЙ
ТОМ LXVСПЕЦВЫПУСК 2016
ISSN 1684-0461
