Функциональные особенности NK-клеток при беременности Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

клеток имело вытянутую форму и плотно прилегало друг к другу, культура формировала характерные завитки. Эти данные указывают на способность эстроген-гестагенной комбинации индуцировать децидуальную трансформацию культуры эндометрия в условиях in vitro.

Выводы

Проведенное исследование показало, что полученные эндометриальные клеточные линии экспрессируют рецепторы женских половых стероидных гомонов. Кроме того, при

воздействии гестагенных препаратов данные клеточные культуры подвергаются дециду-альной трансформации. Этот факт позволяет рассматривать культуру эндометрия как подходящую клеточную модель для тестирования аналогов прогестерона. Результаты, полученные на клеточных линиях, конечно, нельзя экстраполировать на весь организм. Однако если то или иное вещество не вызывает в клеточной культуре изучаемой ответной реакции, то скорее всего в условиях эксперимента in vivo оно также будет проявлять низкую активность.

функциональные особенности м-клеток при беременности

© В.А. Михайлова, Д.О. Баженов, К.Л. Белякова, Е.В. Хохлова

ФГБНУ «НИИ акушерства, гинекологии и репродуктологии им. Д.О. Отта», Санкт-Петербург

Актуальность проблемы

ЫК-клетки представляют собой лимфоциты, способные к контактному цитолизу ви-рус-инфицированных и опухолевых клеток и являющиеся источником цитокинов, стимулирующих другие клетки иммунной системы и способствующих развитию иммунного ответа. ЫК-клетки являются основной популяцией лейкоцитов, присутствующих в децидуальной оболочке в первом триместре беременности и принимающих участие в процессе образования и ремоделирования плаценты. Одним из вариантов формирования пула децидуальных ЫК-клеток является их миграция из периферической крови и пролиферация в зоне маточно-плацентарного контакта. ЫК-клетки при беременности могут взаимодействовать с клетками трофобласта, что определяет возможное наличие регуляции пролиферативной активности ЫК-клеток в децидуальной оболочке. Ремоделирование клеточных структур плаценты может осуществляться ЫК-клетками за счет реализации ими цитотоксической активности, направленной против клеток трофобласта. Нарушение регуляции цитотоксичности ЫК-клеток в отношении трофобласта может приводить к развитию такой патологии, как невынашивание беременности, в связи с чем актуальной является разработка метода оценки взаимодействия ЫК-клеток и клеток тро-фобласта при беременности.

Цель исследования

Оценка пролиферативной и цитотоксиче-ской функций ЫК-клеток периферической крови в отношении клеток трофобалста при беременности.

Материалы и методы исследования

Для оценки пролиферативной активности ЫК-клеток обследовали 91 женщину во время и вне беременности: здоровые небеременные женщины в пролиферативной фазе цикла, здоровые небеременные женщины в секреторной фазе цикла, женщины с физиологической беременностью на сроке 6-7 недель. Для оценки цитотоксической функции ЫК-клеток обследовали 89 пациентов: здоровые небеременные женщины, здоровые мужчины, женщины с физиологической беременностью на сроке 6-7 недель. В работе использовали мо-нонуклеары периферической крови и выделенную из периферической крови с помощью проточного сортировщика клеток БасзАпаШ (ББ, США) популяцию ЫК-клеток. Также использовали клетки трофобласта линии 1Ев-3. Оценку пролиферативной активности ЫК-клеток проводили по интенсивности экспрессии белка Ю-67 (ББ, США). Оценку цитотоксической функции ЫК-клеток проводили по количеству нежизнеспособных клеток трофобласта после совместной инкубации с ЫК-клетками.

ЖУРНАЛЪ АКУШЕРСТВА и ЖЕНСКИХЪ БОЛЪЗНЕЙ

ТОМ LXVI СПЕЦВЫПУСК 2017

ISSN 1684-0461 ■

Результаты исследования

Установлено, что во всех обследованных группах женщин ЫК-клетки в составе моно-нуклеаров периферической крови обладают повышенной пролиферативной активностью в присутствии 1Ь-2 по сравнению с условиями культивирования без него (р < 0,001). Клетки трофобласта линии |Ев-3 снижают пролиферативную активность ЫК-клеток в составе мононуклеаров периферической крови во всех группах пациенток (р < 0,01). Пролиферация ЫК-клеток в составе монону-клеаров была выше в группе беременных женщин по сравнению с таковой у небеременных женщин при культивировании без 1Ь-2 и клеток трофобласта (р < 0,05), в присутствии 1Ь-2 (р < 0,01), при кокультивировании с клетками трофобласта (р < 0,01) и в присутствии 1Ь-2 и клеток трофобласта (р < 0,01).

Выделенные из состава мононуклеаров изолированные ЫК-клетки обладают повышенной пролиферативной активностью в присутствии 1Ь-2 по сравнению с условиями культивирования без него (р < 0,05). 1Ь-2 в присутствии клеток трофобласта повышал пролиферацию выделенных ЫК-клеток во всех обследованных группах пациенток по сравнению с условиями кокультивирования только с клетками трофобласта (р < 0,05). Выделенные из периферической крови ЫК-клетки беременных женщин по сравнению с ЫК-клетками небеременных женщин в обеих фазах цикла характеризуются сниженной пролиферативной активностью в присутствии клеток трофобласта (р < 0,01). При культивировании ЫК-клеток, выделенных из периферической крови беременных женщин, в присутствии клеток трофобласта и 1Ь-2 отмечена их сниженная пролиферация по сравнению с ЫК-клетками небеременных женщин в секреторной фазе цикла (р < 0,01).

При оценке цитотоксической функции ЫК-клеток в отношении клеток трофобласта

установлено, что данный показатель не различается в группах здоровых небеременных женщин и здоровых мужчин. В то же время ЫК-клетки женщин с физиологической беременностью на сроке 6-7 недель характеризовались сниженной цитотоксической активностью в отношении клеток трофобласта по сравнению с ЫК-клетками здоровых небеременных женщин (р < 0,01).

Выводы

Пролиферативная активность ЫК-клеток периферической крови беременных женщин в присутствии 1Ь-2 повышена по сравнению с таковой у небеременных женщин в обеих фазах цикла. Клетки трофобласта линии |Ев-3 в меньшей степени снижают спонтанную и индуцированную 1Ь-2 пролиферативную активность ЫК-клеток в составе мононуклеаров периферической крови и в большей степени снижают спонтанную и индуцированную 1Ь-2 пролиферацию изолированных из периферической крови ЫК-клеток у беременных женщин, чем в группах небеременных женщин. Вероятно, регуляция пролиферации ЫК-клеток со стороны клеток трофобласта носит опосредованный характер и включает не только прямые контактные взаимодействия, но воздействия со стороны других популяций мононуклеаров (Т-лимфоцитов и моноцитов).

По данным, полученным при анализе ци-тотоксической активности ЫК-клеток в отношении клеток трофобласта, подана заявка в Федеральный институт промышленной собственности (ФИПС) на выдачу патента Российской Федерации на изобретение «Способ определения цитотоксической активности ЫК-клеток» (регистрационный номер № 2016127903 от 11.07.2016).

Работа поддержана грантом РФФИ №17-04-00679 и грантом РНФ №17-15-01230

■ ЖУРНАЛЪ АКУШЕРСТВА и ЖЕНСКИХЪ БОЛЪЗНЕЙ

ТОМ LXVI СПЕЦВЫПУСК 2017

ISSN 1684-0461