CC BY
47
способностью лимфоидные клетки, выделенные из селезенок мышей в концентрации 100 тыс. клеток на лунку, и клетки опухолевых линий мышей, обладающие патологической регенерацией в концентрации 10000 клеток на лунку.
Результаты. Показано 100 % подавление пролиферативной активности спленоцитов в ответ на стимуляцию КонА и LPS В55 в присутствии 30 % супернатанта печеночной, почечной и легочной ткани. Обнаруженная супрессорная активность была дозозависимой и практически исчезала при концентрации супернатанта в 7 %. 90-100 % подавление пролиферативной активности клеток опухолевых линий мышей (LLC , L1210) и человека (К562) выявлено в присутствии 30 % супернатанта печеночной, почечной, легочной ткани. Данная супрессорная активность была также дозозависимой и полностью исчезала при концентрации супернатантов ниже 7,5 %. При изучении природы иммуносупрессорных свойств супернатантов с помощью физических методов воздействия на них (кипячение в течение 5 мин) было показано, что кипячение не отменяло супрессию
пролиферации К562, что говорит о небелковой природе исследуемых продуктов.
Выводы. Обнаруженная супрессия опухолевых клеток является видонеспецифичной и опосредуется низкомолекулярными небелковыми продуктами. Наблюдаемые эффекты могут быть связаны с выделением во внешнюю среду из поврежденных клеток биологически-активных веществ, способных подавлять пролиферацию как опухолевых, так и нормальных клеток организма. Определенную роль в этой супрессии, возможно, играет ТРФ-бета. Данный феномен может быть объяснен выходом из поврежденной клетки большого количества активных молекул Ca, Na, K, которые изменяют физико-химические свойства мембран клеток, препятствуя их пролиферации. Еще одним объяснением феномена супрессии может быть выход из клетки низкомолекулярных пептидов, взаимодействующих с Toll-like рецепторами на поверхности клеток, тормозящих их пролиферацию и направляющих клетки в сторону дифференцировки.
ИССЛЕДОВАНИЕ ВЗАИМОСВЯЗИ ПОЛИМОРФИЗМА ГЕНОВ ЦИТОХРОМОВ Р450 С ЭФФЕКТИВНОСТЬЮ
неоадъювантной химиотерапии при раке молочной
ЖЕЛЕЗЫ
Т.А. СЕРЕДИНА1, О.Б. ГОРЕВА1, В.О. ТАЛАБАН1, Н.В. ЛИТВЯКОВ2, Е.Ю. ГАРБУКОВ2, А.Ю. ГРИшАНОВА1
ГУ «НИИ молекулярной биологии и биофизики СО РАМН», г. Новосибирск1 ГУ «НИИ онкологии Томского научного центра СО РАМН»2
Актуальность. Неоадъювантная химиотерапия (НАХТ) показана при местнораспространенном раке молочной железы (РМЖ) и позволяет уменьшить объем первичной опухоли и выполнить радикальное оперативное вмешательство или провести органосохранное лечение. Современный подход дозирования препаратов при НАХТ должен учитывать индивидуальную способность пациента метаболизировать назначаемый химиопрепарат, что позволило бы достичь максимального про-
тивоопухолевого эффекта и свести к минимуму побочные эффекты индукционной терапии. В биотрансформации препаратов, входящих в стандартные протоколы НАХТ (CAF, FAC, CMF), участвуют ферменты суперсемейства цитохромов Р450 (CYP) - CYP2B6, CYP3A4, CYP3A5, CYP2C9, CYP2C8, CYP2C19. Полиморфизм в генах этих ферментов является причиной изменения их активности, и это может быть связано с избыточной или недостаточной
метаболизацией лекарственных препаратов, что
СИБИРСКИЙ ОНКОЛОГИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ. 2008. Приложение № 1
может оказывать влияние на эффективность НАХТ.
Цель. Исследование ассоциации генетического полиморфизма генов цитохромов Р450 (CYP3A4*B, CYP3A4*2, CYP3A5*3, CYP2B6*5, CYP2C8*2, CYP2C8*3, CYP2C9*2, CYP2C9*3, CYP2C19*2) с эффективностью НАХТ при раке молочной железы.
Материал и методы. В работе обследовано 300 больных РМЖ Tj 4N0 3M0, находящихся на лечении в НИИ онкологии ТНЦ СО РАМН, с морфологически верифицированным диагнозом, которые в неоадъювантном режиме получали 2-4 курса химиотерапии по схемам CMF или CMXeloda, FAC, cAf или CAXeloda. Работа проводилась с разрешения этического комитета. Эффективность НАХТ оценивали по критериям ВОЗ, и больные с полной или частичной регрессией заболевания составили группу с положительным эффектом (n=97) от лечения, со стабилизацией или прогрессией заболевания - с отрицательным эффектом (n=83).
Генетический полиморфизм цитохромов Р450 был исследован у 300 больных РМЖ методом ПДРФ-анализа. Материалом для исследования послужила геномная ДНК, выделенная из лимфоцитов периферической крови. Об ассоциации полиморфных вариантов исследуемых генов с эффективностью НАХТ судили по величине отношения шансов (ОШ). Статистический анализ проводили с использованием программы Epilnfo 6.
Результаты. Исследование полиморфных вариантов изученных генов у женщин, больных раком молочной железы, показало следующие частоты мутантных аллелей: CYP3A5*3 - 0,89; CYP3A4*1B - 0,02, CYP2C8*2 - 0,01, CYP2C8*3
- 0,09, CYP2C9*2 - 0,10, CYP2C9*3 - 0,10, CYP2C19*2 - 0,26, CYP2B6*5 - 0,11. Следует отметить, что мутантный аллель CYP3A4*2 от -
сутствовал в исследованной выборке пациенток. Сравнение полученных частот аллелей и генотипов с описанными в литературе для здоровых европеоидов не выявило достоверно значимых отличий. Анализ распределения полиморфных вариантов генов в группах больных раком молочной железы с положительным и отрицательным эффектом от НАХТ также не выявил значимых различий в чатотах аллелей и генотипов, однако для больных с отрицательным эффектом от химиотерапии частота мутантного аллеля CYP2C8*3 была выше, а CYP3A5*3 ниже, чем у больных с положительным эффектом (0,11 и 0,06 для CYP2C8*3; 0,79 и 0,89 для CYP3A5*3). Не было выявлено достоверно значимых ассоциаций полиморфных вариантов генов цитохромов Р450 с отрицательным эффектом от НАХТ у больных раком молочной железы: отношение шансов для CYP3A4*1B составило 1,10 (р=0,58); CYP2C8*2 -1,20 (р=0,57), CYP2C8*3 - 1,96 (р=0,14), CYP2C9*2 - 0,80 (р=0,71), CYP2C9*3
- 0,62 (р=0,33), CYP2C19*2 -1,40 (р=0,34), CYP2B6*5 - 1,01 (р=0,86). Показатель ОШ для CYP3A5*3 составлял 0,36 (р=0,17) и был рассчитан для гомозигот мутантного типа по сравнению с гетерозиготами ввиду отсутствия гомозигот дикого типа. Для CYP3A4*2 риск получить отрицательный эффект от химиотерапии не оценивался, поскольку данная выборка была представлена только индивидами с генотипом дикого типа.
Выводы. Предварительные результаты исследования показали, что полиморфизм изученных генов цитохромов Р450 не ассоциирован с эффективностью НАХТ у больных раком молочной железы.
Работа выполнена в рамках интеграционного проекта СО РАМН «Молекулярногенетические механизмы формирования и прогрессии РМЖ».
СИБИРСКИЙ ОНКОЛОГИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ. 2008. Приложение № 1
