CC BY
19
HayKOBHH BicHHK .HbBiBCbKoro Ha^OHaibHoro ymBepcurery BeTepHHapHOi MegnuUHH Ta 6i0TexH0iroriH iMeHi C.3. f^H^Koro Scientific Messenger of Lviv National University of Veterinary Medicine and Biotechnologies named after S.Z. Gzhytskyj
doi: 10.15421/nvlvet7506
ISSN 2519-268X print ISSN 2518-1327 online
http://nvlvet.com.ua/
УДК 579.22
Дослвдження впливу складу захисного середовища на збереження життездатност лiофiлiзованих бактерiй L. lactis та L. plantarum, видшених
iЗ традицiйноl карпатсько! бринзи
Львiвський нацюнальнийунгверситет ветеринарног медицини та бютехнологт iMeHi С.З. Гжицького,
вул. Пекарська, 50, м. Львiв, 79010, Украгна
Вивчено вплив складу захисних середовищ на збереження життeздатностi та тeхнологiчнi властивостi лiофiлiзованих бактерш штамiв L. lactis та L. plantarum. Для до^джень обрано быково-вуглеводне та сахарозо-желатозне середовища. Об'ектами до^джень були чистi культури молочнокислих бактерш (МКБ): L. lactis SB 16, L. lactis SB 44, L. plantarum SB 5, L. plantarum SB 7, L. plantarum SB 17, видыеш на попередтх етапах роботи iз традицшно! бринзи, виготовленоi у непро-мислових умовах Карпатського регюну Украгни. Культури бактерш iдeнтифiковано iз використанням класичних м^обю-логiчних i сучасних молекулярно-генетичних мeтодiв (RAPD-PCR, RFLP-PCR, секвенування гену 16S рРНК). Чисельтсть мезо- i термофтьних лактобактерш визначали шляхом поЫву на середовище MRS. МолокозЫдальну актившсть монокультур визначали за змтою кислотностi молока. Процес сублiмацiйного суштня бiомаси, змiшаноi iз вiдnовiдною кыьюстю захисного середовища, здшснювали iз використанням сублiмацiйноi сушарки «Alpha 1,2 LD Plus». За визначеною експериме-нтальним шляхом кшьюстю загиблих тд час суштня клтин встановлювали Рiвeнь Збереження Життeздатностi (РЗЖ) рiзних видiв i штамiв. Встановлено, що за свогми крюпротекторними властивостями кращим для суштня клтин дослi-джених монокультур е сахарозо-желатозне середовище, яке забезпечуе високий РЗЖ, особливо для L. lactis SB 16 (кшьюсть загиблих тд час суштня клтин становила 9,2%) та L. plantarum SB 17 (кыьюсть загиблих тд час суштня клтин станови-ла 9,9%). Проведено порiвняльнe до^дження РЗЖрiзних видiв МКБ за рiзних умов збeрiгання. Встановлено, що уЫ штами молочнокислих бактерш, за винятком штаму L. lactis SB 16, протягом збер^ання у знежиреному молощ за температури (+6) °С через мкяць втрачають вiд 4 до 15% життездатних клтин. Термт збер^ання штамiв L. lactis та L. plantarum у сухт культурi становить 6 мк.
KrnKoei слова: бринза, мезофтью лактококи, термофтью стрептококи, чисельтсть клтин, захисн середовища, сахаро-зо-желатозне середовище, быково-вуглеводне середовище, рiвeнь збереження життездатностi, люфтзоваш культури.
Исследование влияния состава защитной среды на сохранения жизнеспособности лиофилизированных бактерий Ь. 1аой8 и Ь. рШМагиш, выделенных из традиционной карпатской брынзы
Львовский национальный университет ветеринарной медицины и биотехнологий имени С.З. Гжицкого,
ул. Пекарская, 50, г. Львов, 79010, Украина
Изучено влияние состава защитных сред на сохранение жизнеспособности и технологические свойства лиофилизированных бактерий штаммов L. lactis и L. plantarum. Для исследований избраны белково-углеводная и сахарозо-желатозная среды. Объектами исследований были чистые культуры молочнокислых бактерий (МКБ): L. lactis SB 16 L. lactis SB 44, L.
Citation:
Tsisaryk, O.I., Slyvka, I.M., Musiy, L.Ia. (2017). The research of the influence of the content of protective environment for the preservation of viability of lyophilized bacteria L. lactis and L. plantarum, from traditional Carpathian bryndza. Scientific Messenger LNUVMBT named after S.Z. Gzhytskyj, 19(75), 29-34.
О.И. Цюарик, IM. Сливка, Л.Я. Мусш tsisaryk_o@yaoo.com, slyvka.88@ukr.net, musiyluba@ukr.net
О.И. Цисарык, И.Н. Сливка, Л.Я. Мусий tsisaryk_o@yaoo.com, slyvka.88@ukr.net, musiyluba@ukr.net
plantarum SB 5, L. plantarum SB 7, L. plantarum SB 17, выделенные на предыдущих этапах работы из традиционной брынзы, изготовленной в кустарных условиях Карпатского региона Украины. Культуры бактерий идентифицированы с использованием классических микробиологических и современных молекулярно-генетических методов (RAPD-PCR, RFLP-PCR, секве-нирование гена 16S рРНК). Численность мезо- и термофильных лактобактерий определяли путем посева на среду MRS. Молокосвертывающую активность монокультур определяли по изменению кислотности молока. Процесс сублимационной сушки биомассы, смешанной с соответствующим количеством защитной среды, осуществляли с использованием сублимационной сушки «Alpha 1,2 LD Plus». По определенной экспериментальным путем количества погибших во время сушки клеток устанавливали Уровень Сохранения Жизнеспособности (УСЖ) различных видов и штаммов. Установлено, что по своим криопротекторными свойствами лучшим для сушки исследованных монокультур является сахарозо-желатозная среда, обеспечивающая высокий РЗЖ, особенно для L. lactis SB 16 (количество погибших за сушки клеток составляло 9,2%) и L. plantarum SB 17 (количество погибших за сушки клеток составляло 9,9%). Проведено сравнительное исследование УСЖ различных видов МКБ при различных условиях хранения. Установлено, что все штаммы молочнокислых бактерий, за исключением штамма L. lactis SB 16 при хранении в обезжиренном молоке при температуре (+6) °С через месяц теряют от 4 до 15% жизнеспособных клеток. Срок хранения штаммов L. lactis и L. plantarum в сухой культуре составляет 6 мес.
Ключевые слова: брынза, мезофильные лактококки, термофильные стрептококки, численность клеток, защитные среды, сахарозо-желатозная среда, белково-углеводная среда, уровень сохранения жизнеспособности, лиофилизированные культуры.
The research of the influence of the content of protective environment for the preservation of viability of lyophilized bacteria L. lactis and L. plantarum, from traditional Carpathian bryndza
O.I. Tsisaryk, I.M. Slyvka, L.Ia. Musiy tsisaryk_o@yaoo.com, slyvka.88@ukr.net, musiyluba@ukr.net
Lviv National University of Veterinary Medicine and Biotechnologies named after S.Z. Gzhytskyi,
Pekarska Str. 50, Lviv, 79010, Ukraine
The influence of the content ofprotective environment for the preservation of viability and technological properties of lyophilized bacteria of stains L. lactis та L. plantarum is studied in the article. Protein and carbohydrate and sucrose-gelatin environment were selected for the research. The objects of the research were pure cultures of lactic acid bacteria: L. lactis SB 16, L. lactis SB 44, L. plantarum SB 5, L. plantarum SB 7, L. plantarum SB 17, extracted on the previous stages of work from traditional bryndza, produced in non-industrial conditions of Carpathian region of Ukraine. Cultures of bacteria were identified using classical microbiological and modern molecular-genetic methods (RAPD-PCR, RFLP-PCR, gene sequencing 16S pPHK). The number of mesophilic and thermophilic lactobacilli were determined using the method of sowing on the environment MRS. Cheese producing activity of monocultures was determined by the change in acidity of milk. The process of freeze-drying of biomass, mixed with the appropriate amount of protective environment, was carried out using freeze-dryer «Alpha 1.2 LD Plus». The Level of Viability Preservation (LVP) of different types and strain was set using experimental method of determination of the amount of dead cells during the process of drying. It is determined that according to its cryoprotective peculiarities sucrose-gelatin environment is better for the process of monocultures drying, which secures high LVP, in particular for L. lactis SB 16 (the number of dead cells during drying was 9.2%) and L. plantarum SB 17 (the number of dead cells during drying was 9.9%). The comparative research of LVP of different types of lactic acid bacteria at different types of storages. It is determined that all these strains of lactic acid bacteria, with the exception of the strain L. lactis SB 16 during the storage in skimmed milk at a temperature (+6) °С after a month lose from 4 to 15% of live cells. The term of storage of strains L. lactis and L. Plantarum in dry culture is 6 months.
Key words: bryndza, mesophilic Lactococcus, thermophilic streptococci, the number of cells, protecting environment, sucrose-gelatin environment, protein and carbohydrate environment, preserve the viability level, lyophilized culture.
Вступ
В Украш для виробництва кисломолочних проду-ktíb та c^íb здебшьшого використовують iмпортнi бактерiальнi препарата, яш характеризуються рiзним складом мiкробiальних культур, ввдповщно рiзною ефективнютю щодо формування споживних та функ-цюнальних властивостей. Натомють, немае вгтчизня-них бактерiальних препарапв, склад яких би ввдтво-рював природний склад культур молочнокислих бак-терш традицшних ферментованих продукпв (Slyvka and Cisaryk, 2016).
Перспективним нововведенням у промисловш бю-технологи та функцюнальному харчуванш е створен-ня люфшзованих культур лактобактерш, видшених Í3 природних екошш для виробництва молочних продукпв (Basjul et al., 2014). Щ^р захисного середовища
для люфшзаци сприяе пвдвищенню стшкосл бактерь альних клгтин до ушкоджень у процеС люфшьного сушшня, стабшзацп !х житгевих функцш i збережен-ню високо! шлькосл життездатних клгтин протягом тривалого часу шсля сушшня (Belov et al., 1993; Golovach and Groma, 2004).
Будь-яка технолопя сухих бактерiальних концент-рапв передбачае ферментування поживного середовища культурами, отримання бюмаси клгтин та подальше Г! консервування шляхом переведения мжроор-ганiзмiв у анабютичний стан для збереження Гх властивостей упродовж усього терм^ застосування. Для цього використовують рiзнi фiзичнi та фiзико-хiмiчнi засоби впливу на бюмасу, зокрема, проводять ГГ замо-рожування та сушшня (Jeres'ko et al., 2001).
При проведенш технолопчних операцш, мжроор-гашзми уах без винятку видiв, тддаються значним
мехашчним та температурным впливам. Апробащя р1зних вар1ант1в сушшня бюмаси показала, що забез-печення мшмально!' шлькосп загиблих клгган, а отже i збереження високо1 активносп готового бактер1аль-ного препарату найкраще вдаеться за використання сублiмацiйного сушiння. Iндивiдуальна чутливють клiтин кожного виду i навггь штаму мiкроорганiзму до заморожування i дефростаци залежить вiд ïx мож-ливостi збeрiгати фiзiологiчнi функцiï за рiзного вмю-ту вологи (Golovach and Groma, 2004).
Числeннi багаторiчнi дослвдження показали, що пом'якшити негативну дiю екстремальних температур на живу клггану здатнi заxиснi середовища, створеш на основi спeцiально пiдiбраниx крюзахисних сполук. ïxне використання на стадп досягнення мшрооргашз-мом пiд час культивування стацiонарноï фази росту хоча й не дае стовiдсотковоï гарантп виживання усix клiтин, проте сприяе iстотному зменшенню втрат нагромаджeноï бюмаси (Basjul et al., 2014). За ввдсут-ностi крiозаxисниx речовин бактeрiальнi клiтини за-знають значних змш, якi супроводжуються розкладом клiтинниx структур i втратою ïx життездатностi.
Визначальну роль у крiостiйкостi бактeрiй вщг-рають вiк культури, склад живильного середовища, спосiб концентрування, фiзико-xiмiчнi властивосп компонeнтiв клiтинниx мембран, склад та структурна оргашзащя мембран, стадiя розвитку бактeрiй, швид-кiсть заморожування тощо (Romeo et al., 2001).
Основними факторами, що впливають на збереження бактeрiями мeтаболiчноï активностi тсля заморожування i сушiння е температура розтоплення бюмаси, штенсившсть та характер ïï пeрeмiшування, компонентний склад захисного середовища, а також спiввiдношeння мiж к1льк1стю мiкробноï маси i кон-цeнтрацiею захисних речовин. Такi фiзичнi парамет-ри, як швидкiсть заморожування мжробюн суспeнзiï, особливостi надходження тепла до поверхш випаро-вування, швидшсть видалення води i швидк1сть потоку пари обумовлюють eфeктивнiсть сушшня мжроб-них клiтин (Blankov and Klebanov, 1987).
Метою наших дослщжень було вивчити вплив складу захисних середовищ пiд час сублiмацiйного сушшня на збереження життездатносп та технолопч-нi властивостi рiзниx штамiв L. lactis та L. plantarum тсля люфшзацп та пiд час зберпання у знежиреному молоцi за температури (+6) °С, а також у люфшзова-ному станi за температури (-18) °С.
Матерiал i методи дослвджень
У дослвдженнях використано культури молочнокислих бактерш, видшеш iз бринзи, що виготовляеть-ся iз овечого молока у непромислових умовах Карпат-ського рeгiону Украши.
Культури бактерш щентифжовано iз використанням класичних мiкробiологiчниx i сучасних молеку-лярно-генетичних мeтодiв (RAPD-PCR, RFLP-PCR, секвенування гену 16S рРНК) (Cisary et al., 2014; Cisaryk and Slyvka, 2015). Ц штами за комплексом морфолопчних, культуральних, бiоxiмiчниx показни-шв та генотипових ознак вiднeсeнi до виду Lactococ-cus lactis та Lactobacillus plantarum, однак за нуклео-
тидною послiдовнiстю не 3apeecTpoBaHi у Gene Bank. Штамам присвоено назву L. lactis SB 16, L. lactis SB 44, L. plantarum SB 5, L. plantarum SB 7, L. plantarum SB 17 та проведено !х скриншг.
Чисельтсть мезо- i термофшьних лактобактерш визначали шляхом поаву на середовище MRS. Моло-козсвдальну актившсть оцшювали за зниженням рН та наростанням титровано! кислотносп молока, скваше-ного вщповвдним бактерiальним штамом (Sbornik... 1985). Вимiрювання активно! кислотностi проводили за допомогою електронного рН-метра «Muttler Toledo MP220». Титровану кислотнiсть молока визначали за ГОСТ 3624-92 «Молоко i молочш продукти. Титроме-тричнi методи визначення кислотностi».
У дослвдженнях використано захисш середовища iз таким спiввiдношенням основних речовин:
1) бшково-вуглеводне - сухе знежирене молоко (30 %), сахароза (10%) та цитрат натрш (5%);
2) сахарозо-желатозне середовище - 13-16% роз-чин желатину (80-100 г желатину розчинений у 600 см3 дистильовано! води) змшаний iз 250 см3 роз-чину 500 г сахарози (50%) у загальному об'емi розчи-ну 1 дм3, який пiддавали стерилiзацi! упродовж 2 годин за тиску 1,5 атм.
Пiдготовку дослiджуваних бактерш до люфшзаци проводили шляхом вирощування !х у редкому середо-вищi MRS в умовах перiодичного культивування протягом 24 годин з наступним концентруванням на центрифузi Thermo Scientific при 1500 об./хв. протягом 15 хв. Суспензш бактерш змшували iз захисним середовищем у сшвввдношенш 1:2, розливали порц1я-ми по 5 мл у стерильш пенiцилiновi флакони, якi при-кривали стерильними марлевими серветками та лю-фiлiзували за початково! температури (-15) °С i кшце-во! (-55) °С. Флакони з лiофiлiзованою культурою закривали стерильними металевими ковпачками, мар-кували та закладали на збертання за температури (+4-6) °С.
Процес сублiмацiйного сушiння бiомаси, змiшано! iз вiдповiдною к1льк1стю захисного середовища здшснювали iз використанням сублiмацiйно! сушарки фiрми «Alpha 1,2 LD Plus».
Обчислення кiлькостi клiтин (N2), загиблих тд час сублiмацiйного сушiння монокультур, проводили за формулою:
N = lg КУО2 х 100 / lg КУО n2 = 100 - N
де
lg КУО1 - шльшсть клiтин у 1 г сиро! бюмаси тсля центрифугування;
lg КУО2 - кiлькiсть клiтин у тому самому зразку тсля сушшня.
N - кiлькiсть життездатних клгган, що залишили-ся, %;
N2 - кiлькiсть кл1тин, загиблих тд час сублiмацiй-ного сушiння монокультур, %.
Результата та Тх обговорення
Для використання молочнокислих бактерш, як за-квашувальних культур для традицшних кисломолоч-них продуктiв та рiзноманiтних напо!в, необхвдно
мати гаранти збереження ними високо! фшолопчно! активносп упродовж тривалого часу.
За визначеною експериментальним шляхом кшьш-стю загиблих шд час сушшня клгган встановлюють р1вень збереження життездатносп (РЗЖ) р1зних вид1в i штам1в лактобактерш. Цей показник можна викори-стовувати не тiльки, як критерш ввдбору культур до складу заквашувальних композицiй, але й виявити особливосп поведiнки бактерiй пiд час сублгмацшно-го сушiння за використання рiзних захисних середо-вищ. Запропоновано таку умовну класифiкацiю шта-мiв за цим показником:
- культури, яш втрачають за сушiння менше 10% клгган, нагромаджених за час ферментування, мають високий РЗЖ i вщповвдно е стiйкими;
- культури, кшьшсть загиблих клiтин у яких не перевищуе 20%, мають середнiй рiвень РЗЖ i харак-теризуються як середньо стшш;
- культури, у яких тсля сушiння чисельнiсть юл-тин зменшуеться бiльше нiж на 20%, мають низький РЗЖ i е не стiйкими.
Здатнiсть до виживання за сублiмацiйного сушiння мезофшьних лактобактерiй представлено у таблицi 1. Вихщна концентрацiя мезофiльних молочнокислих лактокошв до люфшзацп становила lg 9,4 та lg 9,7 КУО/см3 для L. lactis SB 44 та L. lactis SB 16 ввд-
поввдно. Результата засвщчують, що бшьшу захисну дiю проявляло сахарозо-желатозне середовище, до складу якого входили желатин та сахароза. Кращою життездатною властивiстю за цих умов характеризу-вався штам L. lactis SB 16, юльюсть загиблих за сушшня клгган якого становила 9,2%. При використанш бшково-вуглеводневого захисного середовища юль-к1сть загиблих за сушшня клгган для цього штаму становила 16,1%.
Ще одним критерiем ввдбору монокультур до складу заквашувальних композицш е висока молокоз-сiдальна активнiсть (МЗА), яку оцшювали за триваль стю утворення згустку. Вищою МЗА характеризував-ся штам SB 16 при використанш сахарозо-желатозного захисного середовище, тривалють сква-шування складала 8 год. Рiвень гранично! кислотносп у молощ становив 120 °Т (4,67 од. рН). Це дае тдста-ви очисувати, що залучення його до складу бактерга-льних препаратiв розширить спектр функцюнально! активностi продукту та забезпечить стабшьшсть пе-ребiгу технологiчних процеав. Штам SB 44 характе-ризувався низькою МЗА при використанш двох захисних середовищ. При використанш цього штаму активна кислотшсть молока коливалася в межах 4,754,82 од. рН.
Pincin. збереження життездатност мезофшьних МКБ
Таблиця 1
№ п/п Показники L. lactis SB 16 | L. lactis SB 44
Захисне середовище
1 1 2 1 1 2
1. Юльюсть клгшн до сушгння, lg КУО/см3 9,7 9,4
2. Юльюсть клгшн тсля сушшня, lg КУО/см3 8,3 8,9 7,6 8,1
3. Юльюсть загиблих за сушшня клгшн, % 16,1 9,2 21,4 15,5
4. РЗЖ Середнш Високий Низький Середнш
5. Титрована кислотшсть молока, °Т 115 120 116 118
6. Активна кислотшсть молока, од рН 4,84 4,67 4,82 4,75
7. МЗА, год. 12 8 16 10
Здатшсть до виживання при сублiмацiйному су-шшш термофiльних лактобактерiй представлено у таблиц 2. За нашими результатами, штами L. plantarum показали тсля сушшня нижчий рiвень збереження життездатностi, шж мезофiльнi лактоко-ки. Слщ зазначити, що серед дослщжуваних штамiв L. plantarum найкращою життездатною властвую характеризувався штам SB 17 при використанш саха-розо-желатозного середовища, кшьшсть загиблих за сушшня клгган становила 9,9%, а ввдповвдно характе-
ризувався як стшкий. 1ншГ штами, на жаль, е менш перспективними для конструювання бактерiальних композицш при виробнищга кисломолочних продукта.
Максимальний показник кислотоутворення тсля шкубаци за температури 37 оС протягом 24 год. (160 °Т) встанговлений для бактерiй штаму SB 17, для люфшзацп якого використано сахарозо-желатозне захисне середовище.
PiBeHi збереження життcздатностi термофiльних МКБ
Таблиця 2
№ п/п Показники L. plantarum SB 5 | L. plantarum SB 7 | L. plantarum SB 17
Захисне середовище
1 1 2 1 1 2 1 1 2
1. Юльюсть клгшн до сушшня, lg КУО/см3 8,7 8,5 8,9
2. Юльюсть клгшн тсля сушшня, lg КУО/см3 6,5 7,7 6,3 6,5 7,2 8,1
3. Юльюсть загиблих за сушшня клпин, % 25,3 11,5 25,6 23,5 19,1 9,9
4. РЗЖ Низький Середнш Низький Низький Середнш Високий
5. Титрована кислотшсть молока, °Т 161 159 157 161 158 160
6. Активна кислотшсть молока, од рН 4,2 4,25 4,32 4,18 4,3 4,22
7. МЗА, год. 28 27 25 27 26 24
Результати дослщжень впливу складу захисного середовища на виживання тeрмофiльниx лактобактерш у процеа лiофiлiзaцiï дозволили шдтвердити данi про те, що у сахарозо-желатозному сeрeдовищi моно-цукри i полiсaxaриди, а також бiлки i продукти 1'хньо-го гiдролiзу е основними компонентами, оскiльки вони виконують функцш стaбiлiзaторa зв'язано1' води у клгганах (Belov et al., 1993).
Оскшьки за отриманими даними кращим для су-шiння монокультур е сахарозо-желатозне захисне середовище, проведено порiвняльнe дослщження рiвня збереження життездатносп рiзниx видiв МКБ за рiзниx умов збeрiгaння. Динaмiку виживання монокультур МКБ дослщжували у двох режимах: 1) витри-мування упродовж 30 дiб у знежиреному молощ за
температури (+6) °С; 2) у люфшзованому стaнi про-тягом 6 мю. за температури (-18) °С. Динaмiку вщми-рання клгган за цих умов представлено на рисунках 1 i 2.
Даш, наведеш на рисунку 1, свщчать, що витри-мування монокультур за режиму 1 впливае на ïx жит-тездатшсть. Дослiджeнi культури, особливо термофь льнi МКБ, поступово починають втрачати нагрома-джену кiлькiсть клгган вже через 5 дiб збертання.
Усi штами молочнокислих бaктeрiй, за винятком штаму L. lactis SB 16 за температури збериання (+6) °С через мюяць втрачають вщ 4 до 15% житте-здатних клгган. Серед тeрмофiльниx молочнокислих бактерш стшким до вiдмирaння виявився штам SB 17, який за 30 дГ6 збeрiгaння втратив 3,8% клгган.
чО 16
o^
К 14
S
Ь 12
"g
X 10
s
Й о
Ю о
S
£_. a 6
CO
ь 4
о
"Й д 2
R
2 0
Рис. 1. Динамiка втрачання життездатносл МКБ пiд час зберiгання у знежиреному молощ за температури (+6) °С
Даш, наведеш на рисинку 2, свщчать, що у люфь лiзовaному стaнi культури, особливо штами L. plantarum SB 5 та L. plantarum SB 7 поступово починають втрачати нагромаджену кшьшсть клгган через 1 мь сяць. На шнець дослгду, кшьшсть загиблих клгган в них становить 25-26%. Кращою життездатною влас-тивютю за цих умов характеризувався штам L. lactis SB 16, кшьшсть загиблих клгган протягом збериання
за температури (-18) °С становила 21%. Серед термофшьних молочнокислих стрептокошв найстшшшим виявився штам L. plantarum SB 17 (кшьшсть загиблих клгган протягом збертання 22,7%).
Одержат у цих дослдах результати дозволяють зробити висновок, що термш збериання штамгв L. lactis та L. plantarum у сухш культург становить 6 мю.
я к н
s
30
25
а 20
15
10
.я
ш
0 1 ■SB 16 —«—SB 44
4 б
SB7 -»-SB 17
Рис. 2. Динамша втрачання життездатносл МКБ пщ час збер^ання у лiофiлiзованому сташ за температури (-18) °С
Висновки
1. Встановлено, що за сво1'ми крюпротекторними властивостями кращим для сушшня дослщжених монокультур е сахарозо-желатозне середовище, яке забезпечуе високий РЗЖ, особливо для L. lactis SB 16 (к1льк1сть загиблих тд час сушшня клгган становила 9,2%) та L. plantarum SB 17 (кшьшсть загиблих пвд час сушшня клгшн становила 9,9%).
2. Встановлено, що ус штами молочнокислих бак-терш, за винятком штаму L. lactis SB 16 протягом збертання у знежиреному молощ за температури (+6) °С через мюяць втрачають вщ 4 до 15% житте-здатних клгган. Термш зберп-ання штамгв L. lactis та L. plantarum у сухш культург становить 6 мю.
Перспективи подальших дослгджень. В подаль-шому люфшзоваш молочнокислг культури L. lactis та L. plantarum будуть використанш для створення бак-тергального препарату для виробництва бринзи.
Робота виконана в рамках наукового проекту «Бю-технолопя створення вичизняних бактергальних препарата для молочно! промисловосп» (номер держре-естрацп № 0116U208537).
Бiблiографiчнi посилання
Slyvka, I.M., Cisaryk, O.J. (2016). Biotehnologija stvorennja vitchyznjanyh bakterial'nyh preparativ dlja molochnoi' promyslovosti Ukrai'ny. Naukovyj visnyk LNUVM ta BT imeni S.Z. Gzhyc'kogo. 12, 2(68), 103-110 (in Ukrainian). Basjul, O.V., Jamborko, G.V., Ivanycja, V.O. (2014). Vplyv skladu zahysnyh seredovyshh na zberezhennja zhyttjezdatnosti ta biotehnologichnyh vlastyvostej liofilizovanyh bakterij LACTOBACILLUS
PLANTARUM ONU315. Visnyk ONU. 19, 1(34), 915 (in Ukrainian).
Golovach, T.M., Groma, L.I. (2004). Laktobacyly: zamorozhuvannja pry nyz'kyh ta ul'tranyz'kyh temperaturah. Metody oderzhannja chystyh kul'tur mikroorganizmiv ta i'h dovgostrokovogo zberigannja v kolekcijah. Kyi'v: Tov. «Znannja Ukrai'ny», 39-44 (in Ukrainian).
Belov, A.N., Belova, L.P., Krivorotova, T.L., Guseva, N.M. (1993). Vlijanie sostava zashhitnyh sred pri sublimacii i hranenii koncentratov termofil'nyh molochnokislyh bakterij. Molochnaja
promyshlennost'. 1, 25-26 (in Ukrainian).
Jeres'ko, G.O., Nasyrova, G.F., Romanchuk, I.O., Kigel', N.F. (2001). Sposib oderzhannja suhogo bakterial'nogo preparatu dlja fermentovanyh molochnyh produktiv. Pat. №33321, Ukrai'na. Opubl. 15.02.2001, Bjul. №1 (in Ukrainian).
Romeo, Y., Bouvier, J., Gutierres, C. (2001). Osmotic stress responce of lactic acid bacteria Lactococcus lactis and Lactobacillus plantarum. Lait. 81(1), 49-55.
Blankov, B.I., Klebanov, D.L. (1987). Primenenie liofilizacii v mikrobiologii. M.: Medgiz (in Russian).
Cisaryk, O.J., Slyvka, I.M., Bocer, T. (2014). Zastosuvannja metodu RAPD-PCR dlja identyfikacii' molochnokyslyh bakterij. Zhurnal «Biologija tvaryn». 16(4), 143-149 (in Ukrainian).
Cisaryk, O.J., Slyvka, I.M. (2015). Identyfikacija molochnokyslyh bakterij iz zastosuvannjam kompleksu molekuljarno-genetychnyh metodiv. Naukovyj visnyk LNUVMBT imeni S.Z. Gzhyc'kogo. 17, 1(61), 213-222 (in Ukrainian).
Sbornik instrukcij po selekcii molochnokislyh bakterij i bifidobakterij i podboru zakvasok dlja kislomolochnih produktov (1985). M., 101 (in Russian).
Cmammn nadiümna do peda^iï 15.03.2017
