Научная статья на тему 'Исследование влияния пробиотических эшерихий и энтерококков на иммунную систему здоровых крыс'

Исследование влияния пробиотических эшерихий и энтерококков на иммунную систему здоровых крыс Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

CC BY
300
44
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Ключевые слова
КОМПЛЕМЕНТ / ЦИТОКИНЫ / ПРОБИОТИКИ / ЭШЕРИХИИ / COMPLEMENT / CYTOKINES / PROBIOTICS / ESCHERICHIA / ENTEROCOCCI / IMMUNOGLOBULINS

Аннотация научной статьи по фундаментальной медицине, автор научной работы — Бельтюков П. П., Абдурасулова И. Н., Тарасова Е. И., Суворов А. Н., Захарова Е. Т.

Сравнительное исследование курсового внутрижелудочного введения молочных заквасок, содержащих E. coli M17 или E. faecium L3 самкам крыс Вистар выявило их способность активировать как врожденный, так и приобретенный иммунитет, а также индивидуальные особенности иммуномодулирующего действия пробиотических бактерий. Через 14 дней у всех крыс, получавших пробиотики в отличие от контрольных групп животных наблюдалось увеличение функциональной активности С3 компонента системы комплемента. Через 7 дней у крыс, которым вводили энтерококки, отмечено усиление экспрессии генов ИЛ-8 и ИЛ-10 в мезентериальных лимфоузлах, у всех крыс отмечена умеренно выраженная экспрессия генов ИЛ 1 ß и ИЛ-18. На фоне введения пробиотиков не обнаружено существенных изменений содержания IgA, IgM, IgG1 в сыворотке крови животных, а также белка острой фазы -церулоплазмина.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по фундаментальной медицине , автор научной работы — Бельтюков П. П., Абдурасулова И. Н., Тарасова Е. И., Суворов А. Н., Захарова Е. Т.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

NFLUENCE OF PROBIOTIC ESCHERICHIA AND ENTEROCOCCI ON THE IMMUNE SYSTEM OF HEALTHY RATS

A comparative study of a course of intragastric injections of fermented milk products with E. coli M17 or Enterococcus faecium L3 to female Wistar rats revealed their ability to activate both innate and acquired immunity, as well as individual characteristics of immunomodulating properties of probiotic bacteria. In 14 days, all rats on probiotics demonstrated an increase in functional activity of the C3 component of complement in contrast to the control groups of animals. In 7 days the rats with injected enterococci showed marked enhancement of gene expression of IL-8 and IL-10 in mezenterial nodes. All rats had moderately expressed genes of IL-1 ß and IL-18. During injection of probiotics there were no significant changes in the content of IgA, IgM, IgG1 in the serum of the animals nor of an acute phase protein ceruloplasmin either.

Текст научной работы на тему «Исследование влияния пробиотических эшерихий и энтерококков на иммунную систему здоровых крыс»

рецидивов героиновой наркомании. Несмотря на использование разнообразных психотропных средств и психотерапевтических программ, патологическое влечение к героину приводит к частым рецидивам заболевания. Употребление инъекционных наркотиков становится не только причиной инфицирования ВИЧ и вирусами гепатитов В и С, но создает трудности в лечении этих хронических вирусных инфекций и вирусных гепатитов у наркопотребителей. В работе проведена оценка эффективности полного антагониста опиоидных рецепторов налт-рексона для стабилизации ремиссий и профилактики рецидивов героиновой наркомании. Продемонстрирована эффективность налтрексона в лечении героиновой наркомании. Налтрексон рекомендован для комплексной терапии ВИЧ-инфекции у наркопотребителей для повышения приверженности к АРВ-терапии.

Ключевые слова: героиновая наркомания, налтрексон, ВИЧ-инфекция, АРВ-терапия.

SUMMARY

V. U. Val'gren, E. M. Krupitsky, E. E. Zvartau,

D. V. Masalov, A. M. Burakov, M. V. Zoy-Podosenin,

E. V. Verbitskaya, D. A. Lioznov

Naltrexone as a medication to improve adherence to ARV-therapy in HIV-infected heroin addicts

The article is devoted to prevention of heroin addiction relapses. Diverse psychotropics and psychotherapeutic programs are not always successful in treatment of heroin addicts. Drug injections not only induce HIV, HCV, and HBV infections but they bad to poor adherence to ARV-therapy in intravenous drug users as well. The authors have studied the efficacy of Naltrexone in prevention of heroin addiction relapses. Naltrexone has been proved to be effective in heroin addiction treatment. Naltrexone might be used to improve adherence to ARV-therapy in HIV-infected heroin addicts.

Key words: heroin addiction, Naltrexone, HIV-infection, ARV-therapy.

© Коллектив авторов, 2009 г.

УДК 616.98:578.835.16:612.017.1]-092.4

П. П. Бельтюков, И. Н. Абдурасулова, Е. И. Тарасова, А. Н. Суворов, Е. Т. Захарова, А. В. Соколов, М. Н. Карпенко, Е. И. Ермоленко

ИССЛЕДОВАНИЕ ВЛИЯНИЯ ПРОБИОТИЧЕСКИХ ЭШЕРИ-ХИЙ И ЭНТЕРОКОККОВ НА ИММУННУЮ СИСТЕМУ ЗДОРОВЫХ КРЫС

Санкт-Петербургский государственный медицинский университет имени академика И. П. Павлова, НИИ Экспериментальной медицины РАМН, Федеральный центр сердца крови и эндокринологии имени В. А. Алмазова

В настоящее время в связи с возрастанием числа заболеваний инфекционной природы и частым развитием иммунодефицитных состояний особую актуальность приобретает проблема использования пробиотических пищевых продуктов и препаратов, содержащих живые непатогенные микроорганизмы, чаще всего лактобацил-лы, бифидобактерии, энтерококки и эшерихии, с целью регуляции деятельности иммунной системы. Доказана относительная иммунологическая толерантность организма к пробиотическим бактериям и их способность оставаться в организме хозяина в большинстве случаев кратковременно, не нарушая в нем естественного биоценоза, лишь помогая функционированию систем и органов [1, 2, 18]. Пробиотические микроорганизмы могут по-разному влиять на организм хозяина в зависимости от особенностей строения их поверхностных структур, а также от продуктов метаболизма. Выявлено избирательное влияние отдельных компонентов клеточных стенок грам-положительных и грамотрицательных бактерий, а также

поверхностных полисахаридов (лактобацилл и энтерококков) на рецепторы, расположенные в мембранах иммуно-компетентнык клеток или секретируемых ими [4, 5, 8, 17, 19]. В то же время иммуномодулирующие эффекты пробиотических культур изучены недостаточно. Накоплено небольшое количество данных, полученный при терапии инфекционнык заболеваний и атопии с использованием пробиотиков [1, 2, 13]. Большинство исследований имму-номодулирующих эффектов проведено in vitro на культурах клеток, обладающих ограниченным набором рецепторов и способных продуцировать узкий спектр ци-токинов. При этом не создается целостной картины влияния пробиотических культур на иммунную систему. Влияние пробиотиков на иммунные показатели рыб [20], грызунов [19, 21], свиней [23], собак [9] и птиц [15] оценивали в большинстве случаев с использованием лактоба-цилл и бифидобактерий, а полученные результаты носят противоречивыш характер.

Целью настоящего исследования явилось изучение влияния пробиотических энтерококков и эшерихий на некоторые иммунологические показатели здоровых млекопитающих.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Эксперименты выгполнены на 42 половозрелых самках крыс породы Вистар (масса 200-250 г). Ежедневно в одно и то же время в течение 14 дней животным из первой группы (n=12) вводили внутрижелудочно 500 мкл молочнокислой закваски, содержащей 5,5х108 КОЕ/мл Enterococcus faecium L3 («Ламинолакт», ООО «Авена», Россия). Вторая группа животных (n= 12) получала по такой же схеме молочную закваску, содержащую 5,5х108 КОЕ/мл Escherichia coli M17 («Бификол», ООО «Фермент», Россия). В третьей контрольной группе (n=12) вместо закваски животные получали молоко. Также в качестве контроля использовали интактных крыс (n=6) (группа 4).

Содержание IgA, IgM, IgG1 и IgG2 в сыторотках крови определяли методом осаждения с ZnSO4 [7]. Функцио-

нальную активность С3-компонента комплемента в сыворотке крови оценивали по результатам кинетической регистрации комплементзависимого гемолиза эритроцитов кролика в присутствии реагента RC3 из сыворотки крови человека после обработки монометиламином [6, 16]. Церулоплазмин (ЦП) определяли фотометрически при 530 нм по окислению пара-фенилендиамина [22]. На заключительном этапе исследования животных декапи-тировали, отбирали пробы крови и выделяли лимфатические узлы брыжейки. Из лимфатических узлов получали РНК. Методом ОТ-ПЦР определяли экспрессию генов цитокинов с использованием сконструированных нами праймеров.

Обработку и статистический анализ результатов проводили с использованием стандартных пакетов программ Microsoft® Office Excel с использованием t-критерия Стью-дента, критерия Фишера и непараметрического критерия Вилкоксона-Манна-Уитни.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

В настоящей работе с использованием в качестве биологической модели крысы было проведено комплексное исследование влияния грамположительных и грамотри-цательных пробиотических культур на содержание церу-лоплазмина, иммуноглобулинов и на характеристики функциональной активности С3-компонента комплемента в плазме и в сыворотке крови, а также на мРНК цитоки-нов в лимфоузлах брыжейки.

Оценка наличия признаков воспалительного ответа на введение пробиотиков проведена путем исследования уровня ЦП в плазме крови животных. Концентрация ЦП повышается при воспалении различной этиологии в результате усиления экспрессии гена этого Си2+-содержа-щего белка, интерфероном-a и цитокинами [14]. Содержание ЦП в плазме на 14-й день наблюдений не отличалось существенно в разных группах животных (рис. 1), что свидетельствует об отсутствии воспалительной реакции. Аналогичные результаты получены при исследовании плазмы крови на 7-й день эксперимента.

Исследование содержания IgA, IgM и IgG1 в сыворотках крови не выявило достоверных различий этих показателей в разных группах. За исключением несколько сниженной концентрации IgG1 (2,075 г/л) у крыс, получавших энтерококки, содержание IgA, IgM, IgG1 на 7-й и 14-й дни наблюдений (рис. 2) было в пределах нормальных значений этих показателей у здоровых взрослых крыс (0,7-0,9; 0,5-0,6; 2,3-2,5 г/л соответственно). Следует отметить, что наши результаты коррелируют с данными, полученными другими исследователями, не выявившими существенных изменений в сыворотке крови животных [18, 23] и людей [1, 8] на фоне использования пробиотических препаратов. Некоторые авторы отмечали повышение уровней IgA и IgM в отделяемом из слизистых кишечника, влагалища животных и, в меньшей степени, в сыворотке крови при приеме пробиоти-ческих препаратов [8]; или указывали на наличие штам-

Рис. 1. Содержание ЦП в плазме крови крыс на 14-й день наблюдений

|aiga pigM sigGi|

Рис. 2. Содержание иммуноглобулинов в сыворотках на 14-й день исследования

мовых особенностей лактобацилл и лактококков в реализации данных эффектов, определяемых, в основном, способностью этих бактерий к транслокациии за пределы lamina propria слизистой [18, 20]. Следует отметить, что в этих случаях удавалось обнаружить как специфические антитела, направленные против этих бактерий, так и нормальные иммуноглобулины. Таким образом, еще одним объяснением штаммовых особенностей действия пробиотиков на уровень продукции иммуногло-

г+п 1—í—1 Г+П rh

E. faecium L3 E.coli M17 Контроль Молоко

Рис. 3. Показатель Ткв при исследовании активности С3 в сыворотках крыс на 14-й день

булинов может быть развитие специфического иммунного ответа на антигены этих микроорганизмов. Возможно, что пробиотики играют роль адьювантов или стимулируют иммунные реакции в отношении антигенов патогенных микроорганизмов. Это подтверждается увеличением синтеза специфических антител против возбудителей различных инфекций на фоне введения молочнокислых бактерий [8, 18]. Выявленное нами отсутствие значимых различий в уровнях иммуноглобулинов в группах исследованных животных, вероятно, указывают на наличие у них некоторой иммунологической толерантности на введение пробиотиков на основе Enterococcusfaecium L3 и E. coli Ml 7.

Общеизвестно, что активация системы комплемента может происходить по альтернативному пути в результате действия активаторов (в том числе, при активации полисахаридами клеточной стенки микробов), при образовании комлексов антиген-антитело по классическому пути или в результате активации по лектиновому пути при контакте с клеточными стенками патогенных, чаще грамотрицательных бактерий, содержащими липополи-сахариды (ЛПС) [4, 5]. В наших исследованиях при оценке функциональной активности системы комплемента по результатам кинетической регистрации комплемент-зависимого гемолиза эритроцитов кролика в присутствии реагента RC3 была обнаружена более высокая активность СЗ-компонента в сыворотке крови крыс, получавших пробиотические закваски (р<0,01), причем только на 14-й день наблюдений. Это проявлялось в уменьшении показателя Tlag времени до начала гемолиза (43 ±13,1 с и 45,8±6,9 с) в группах животных, получающих молочнокислые закваски с эшерихиями и энтерококками, в отличие от крыс, получавших молоко и от интактной группы (56,7±15,5 с и 57,1±17,8 с). Следует отметить, что на 7-й день наблюдений величины Tlag у крыс всех четырех групп не отличались существенно друг от друга и находились в пределах от 55,5 до 57,4 секунды. Полученные результаты отражают не концентрацию исследованного компонента С3, являющегося центральным звеном активации системы комплемента, а его функциональную активность, которая изменялась только при длительном использовании пробиотических препаратов. Возможно, это связано с активацией одного из звеньев врожденного иммунитета в ответ на избыточное накопление на слизистых оболочках вводимых чужеродных живых бактерий. Влияние пробиотических препаратов на актив-

Экспрессия цитокинов клетками брыжеечных лимфоузлов крыс (ОТ-ПЦР)

Группа животных ^—-—"" ^—' Срок исследования (дней) ИЛ-1 ИЛ-8 ИЛ-10 ИЛ-18

7 14 7 14 7 14 7 14

E. faecium L3 + + 2/6 * 4/6 + +

E. coli M17 + + 1/6 + +

Молоко + + 1/6 1/6 + +

Контроль + + + +

* количество животных с указанным признаком к общему числу животных в группе.

ность системы комплемента до настоящего времени исследовано мало. Из литературы известно лишь, что уровень С3 в крови может увеличиваться при перораль-ном введении животным некоторых пробиотических добавок, например, сахаромицетов [12]. Также отмечена активация комплемента по альтернативному пути при добавлении в корм рыбам живых и убитых культур Lactobacillus rhamnosus JCM1136 [19]. В организмах млекопитающих и рыб обнаружены одинаковые рецепторы, принимающие участие в иммунных реакциях, и выявляются общие закономерности [11], подтверждающие, что система комплемента является одним из филогенетически наиболее древних механизмов иммунной защиты.

Особый интерес представляют данные, полученные при исследовании мРНК из брыжеечных лимфоузлов крыс на 7-й и 14-й день исследования. Удалось зарегистрировать различия в уровнях экспрессии генов интер-лейкинов только после семидневного воздействия молочнокислой закваской, содержащей энтерококки. У этой группы животных был более высокий уровень экспрессии генов ИЛ-8 и ИЛ-10 по сравнению с другими животными. Через 14 дней исследования не удалось обнаружить достоверных различий в продукции анализируемых цитокинов (таблица). Исключение составила одна крыса, получавшая молочный продукт с эше-рихиями.

Сравнительные исследования влияния на иммунитет грамотрицательных и грамположительных бактерий ранее проводились на других штаммах бактерий в системах in vitro и in vivo. При помощи ОТ-ПЦР и с использованием моноклональных антител показано, что лактобациллы, лактококки, энтерококки, бактероиды и эшерихии могут как ингибировать, так и стимулировать выработку ряда цитокинов: ТНФ-a, ИЛ-8 и МСР-1 [10, 24], ТГФ-р, ИЛ-1р, ТНФ- a, ИЛ-6, ИЛ-18, р-дефен-син 3 и других [17], а также ИЛ-4 и ИЛ-10, что может привести к более вероятному развитию иммунных реакций по пути ТХ2 [8]. Для каждого исследованного штамма выявлены специфические особенности влияния на продукцию цитокинов, экспрессию рецепторов и адгезивных молекул на поверхности различных клеточных культур эпителиоидного и лимфоидного происхождения. Уникальными являются способность некоторых штаммов энтерококков и лактобацилл вызывать ингибирование патернассоциированных рецепторов TLR2, TLT4, TLT9 [19], участвующих в распознавании пептидогликана, ЛПС и флагеллинов, а также недавно выявленный эффект полисахаридов энтерококков вызывать стимуляцию ИЛ-8 [24]. Особенностью действия эшерихий как типичного представителя гра-мотрицательных бактерий является более эффективная стимуляция фагоцитоза, запуск лектинового пути активации системы комплемента и стимуляция фагоцитов за счет маннозосодержащих лигандов, а также воздействие на иммунокомпетентные клетки при помощи белков, связывающих ЛПС [4].

ОРИГИНАЛЬНЫЕ РАБОТЫ

ч СПбГМУ ..

Полученные результаты фактически являются описанием индивидуальных характеристик действия E. faecium L3 и E. coli M17, которые нередко используются с профилактической и лечебной целью при широком круге заболеваний инфекционной природы, аллергических реакция и при метаболических нарушениях [2]. На биологической модели показана способность этих бактерий, не вызывая воспалительной реакции, влиять на механизмы врожденного иммунитета, проявляя себя на этапе цитокинового ответа, стимуляцией как противовоспалительных, так и провоспалительных цитокинов и системы комплемента. Показаны индивидуальные особенности рассматриваемого штамма энтерококков -вызывать стимуляцию ИЛ-10 и ИЛ-8, первый из которых может стимулировать иммунный ответ по ТХ2 типу и ингибировать клеточный иммунитет, а второй является хемоаттрактантом, привлекающим лейкоциты и макрофаги [6] в зону введения пробиотического препарата. В целом показано, что иммуномодулирующее воздействие пробиотических бактерий - динамический процесс, который сложно контролировать даже при наличии комплексного подхода исследований. Однако зная особенности действия пробиотических культур, можно разработать рациональные подходы к использованию различных пробиотиков.

ЛИТЕРАТУРА

1. Бондаренко, В. М. Иммуностимулирующее действие лакто-бактерий, используемых в качестве основы препаратов пробиоти-ков / В. М. Бондаренко, Э. И. Рубакова, В. А. Лаврова // Журн. микробиол. - 1998. - № 5. - С. 107-112.

2. Доронин, А. Ф. Функциональное питание / А. Ф. Доронин, Б. А. Шендеров. - М., 2002. - 296 с.

3. Грибова, И. А. Гематологическая норма / И. А. Грибова // Руководство по гематологии. - М., 1979. - С. 54.

4. Кетлинский, С. А. Цитокины / С. А. Кетлинский, А. С. Сим-бирцев. - СПб: «Издательство фолиант», 2008.-552 с.

5. Кокряков, В. Н. Очерки о врожденном иммунитете / В. Н. Кокряков. - СПб., 2006. - 261 с.

6. Халяпин, Б. Д. Кинетический метод количественного определения комплемента / Б. Д. Халяпин, А. А. Прокопьев // Иммунология. - 1986. - № 3. - С. 66-69.

7. Холод, В. М. Справочник по ветеринарной биохимии / В. М. Холод, Г. Ф. Ермолаев. - Минск, 1988. - С. 86-87.

8. Хорошилова, Н. В. Имуномодулирующее и лечебное действие пробиотиков / Н. В. Хорошилова // Иммунология. - 2006. -№ 6. - С. 252-256.

9. Benyacub, J. Supplementation of food with Enterococcus faecium (SF68) stimulates immune functions in young dogs / J. Benyacub [et al] // J. Nutr. - 2003. - Vol. 133. - P. 1158-1162.

10. Blum, S. Intestinal microflora and the interaction with immunocompetent cells / S. Blum, S. Alvares, D. Haller // Antonie van Leewenhoek. - 1999. - Vol. 76. - P. 199-205.

11. Boshra, T. Characterization of a C3a Receptor in Rainbow Trout and Xenopus : The First Identification of C3a Receptors in Nonmammalian Species / T. Boshra [et al] // J. Immunol. - 2005. -Vol. 175. - P. 2427-2437.

12. Caetano, J. A. Immunopharmacological effects of Saccharo-myces boulardii in healthy human volunteers / J. A. Caetano [et al] // Int. J. Immunopharmacol. - 1986. - Vol. 8. - P. 245-259.

13. Elmer, G. W. Probiotics : «living drugs» / G. W. Elmer // American

Journal of Health-System Pharmacy. - 2001. - Vol. 58. - № 12. -P. 1101-1109.

14. Gutteridge, J. M. C. Caeruloplasmin: physiological and pathological perspectives / J. M. C. Gutteridge, J. Stocks // Cri. Rev. Clin. Lab. Sci. - 1981. - P. 257-329.

15. Haghighi, H. R. Modulation of antibody-mediated immune response by probiotics in chickens / H. R. Haghighi // Clin. Diagn. Lab. Immunol. - 2005. - Vol. 2 - P. 1387-1392.

16. Jessen, T. E. A simple alternative pathway for hemolytic assay of human complement component C3 using methylamine-treated plasma / T. E. Jessen, V. Barkholt, K. G. Welinder // J. Immunol. Methods. - 1983. - Vol. 60. - № 1-2. - P. 89-100.

17. Lan, J.-G. Different cytokine response of primary colonic epithelial cells to commensal bacteria / J.-G. Lan [et al] // World Gastroenterol. - 2005. - Vol. 11. - № 22. - P. 3375-3384.

18. Lebenthal, E. Пробиотики : концепция лечебного применения, ожидающая своего признания / E. Lebenthal, Y. Lebenthal // Журн. микробиол. - 2003. - T. 4. - C. 8-9.

19. Maldonado Galdeano, C. Proposed model: mechanisms of immunomodulation induced by probiotic bacteria / C. Maldonado Galdeano [et al] // Clinical and Vaccine Immunology. - 2007. - Vol. 14. - № 5. - P. 484-492.

20. Panigrahi, A. The viability of probiotic bacteria as a factor influencing the immune response in rainbow trout Oncorhynchus mykiss / A. Panigrahi // Aquaculture. - 2005. - Vol. 243. -№ 1-4. -P. 241-254.

21. Perdigon, G. Lactic acid bacteria and their effect on the immune system / G. Perdigon, R. Fuller, R. Raya // Curr. Issues Intest. Microbiol. -2001. - Vol. 2. - № 1. - P. 27-42.

22. Ravin, H. A. An improved colorimetric enzymatic assay for caeruloplasmin / H. A. Ravin // J. Lab. Clin. Med. - 1961. - Vol. 58. -P. 161.

23. Scharek, L. Impact of the probiotic bacteria Enterococcus faecium NCIMB 10415 (SF68) and Bacillus cereus var toyoi NCIMB 40112 on the development of serum IgG and faecal IgA of sows and their piglets / L. Scharek [et al] // Arch. Anim. Nutr. - 2007. - Vol. 61. -P. 223-234.

24. Wang, S. Infant intestinal Enterococcus faecalis down-regulates inflammatory responses in human intestine al cell lines / S. Wang [et al] // World J. Gastroenterology. - 2008. - Vol. 14. - № 7. -P. 1067-1076.

РЕЗЮМЕ

П. П. Бельтюков, И. Н. Абдурасулова, Е. И. Тарасова, А. Н. Суворов, Е. Т. Захарова, А. В. Соколов, М. Н. Карпенко, Е. И. Ермоленко

Исследование влияния пробиотических эшерихий и энтерококков на иммунную систему здоровых крыс

Сравнительное исследование курсового внутрижелудочного введения молочных заквасок, содержащих E. coli M17 или E. faecium L3 самкам крыс Вистар выявило их способность активировать как врожденный, так и приобретенный иммунитет, а также индивидуальные особенности иммуномодулирующего действия пробиотических бактерий. Через 14 дней у всех крыс, получавших пробиотики в отличие от контрольных групп животных наблюдалось увеличение функциональной активности С3 компонента системы комплемента. Через 7 дней у крыс, которым вводили энтерококки, отмечено усиление экспрессии генов ИЛ-8 и ИЛ-10 в мезентери-альных лимфоузлах, у всех крыс отмечена умеренно выраженная экспрессия генов ИЛ 1b и ИЛ-18. На фоне введения пробиотиков не обнаружено существенных изменений содержания IgA, IgM, IgG1 в сыворотке крови животных, а также белка острой фазы -церулоплазмина.

Ключевые слова: комплемент, цитокины, пробиотики, эше-рихии, энтерококки, иммуноглобулины.

SUMMARY

P. P. Bel'tiukoo, I. N. Abdurasulooa, E. A. Tarasooa,

A. N. Suooroo, E. T. Zakharooa, A. V. Sokoloo,

M. N. Karpenko, E. I. Ermolenko

Influence of probiotic Escherichia and Enterococci on the immune system of healthy rats

A comparative study of a course of intragastric injections of fermented milk products with E. coli M17 or Enterococcus faecium L3 to female Wistar rats revealed their ability to activate both innate and acquired immunity, as well as individual characteristics of

immunomodulating properties of probiotic bacteria. In 14 days, all rats on probiotics demonstrated an increase in functional activity of the C3 component of complement in contrast to the control groups of animals. In 7 days the rats with injected enterococci showed marked enhancement of gene expression of IL-8 and IL-10 in mezenterial nodes. All rats had moderately expressed genes of IL-1 b and IL-18. During injection of probiotics there were no significant changes in the content of IgA, IgM, IgG1 in the serum of the animals nor of an acute phase protein - ceruloplasmin either.

Key words: complement, cytokines, probiotics, Escherichia, enterococci, immunoglobulins.

© И. Б. Савин, 2009 г.

УДК 616.72-002.5-089:616.71-008.9]-07

И. Б. Савин

ПРИМЕНЕНИЕ ОСТЕОСЦИН-ТИГРАФИИ ДЛЯ ОЦЕНКИ МЕТАБОЛИЗМА В КОСТНОЙ ТКАНИ ПРИ ТУБЕРКУЛЕЗНОМ И НЕСПЕЦИФИЧЕСКОМ ПОРАЖЕНИИ КРУПНЫХ СУСТАВОВ ДО И ПОСЛЕ ХИРУРГИЧЕСКОГО ЛЕЧЕНИЯ

Санкт-Петербургский государственный НИИ фтизиопульмонологии

В настоящее время область применения остеосцинти-графии (ОСГ) в неонкологической практике значительно расширилась. Выявлена большая чувствительность метода при первичных поражениях суставов и субклиническом течении артрита [1, 2]. Радионуклидные методы не являются специфичными вообще, и для туберкулеза в частности. Однако благодаря максимальной физиологичности метода достигается объективная оценка состояния костной ткани при туберкулезе и патологических изменений в ней. Остеосцин-тиграфия имеет важное значение в наблюдении за реваску-ляризированными аутотрансплантатами как в ближайшем, так и в отдаленном послеоперационном периодах [3-5].

Целью данной работы является количественная оценка метаболизма в костной ткани на различных фазах туберкулезного и неспецифического воспаления крупных суставов и их последствий и изучение результативности различных пластических операций (течения репаратив-ных процессов) с применением несвободной костной пластики и без нее в ближайшем и отдаленном послеоперационном периодах методом остеосцинтиграфии.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

В клинике СПбНИИФ с 1992 по 2006 гг. проведено 513 радионуклидных исследования 385 пациентам в воз-

расте от 16 до 74 лет с поражением крупных суставов (туберкулезное - 228: остит - 4, артрит - 152, посттуберкулезный артроз - 72; нетуберкулезное - 165: неспецифические артриты - 69, дистрофические заболевания - 88, в том числе деформирующий артроз - 46 и асептический некроз головки бедренной кости - 42). Наиболее часто встречались поражения тазобедренного и коленного суставов - 82,5 %: 238 и 80 пациентов соответственно, реже -остальные суставы: голеностопный - 16, плечевой - 28, локтевой - 14, лучезапястный - 11. В стадии туберкулезного поражения обследовали пациентов: разгара - 115, затихания - 21; при синовитах - 16. Последствия туберкулезных артритов (ПТА) - артрозы - разделены на 2 группы: основную (ПТА-осн.) - 46 человек, перенесших коксит в зрелом возрасте, и группу с выраженной атрофией костной ткани - метатуберкулезные артрозы (МТА-атр.) -26 человек, перенесших остит или коксит в раннем детстве. Неспецифические поражения суставов распределены следующим образом: синовиты - 8, активные артриты - 46, затихания - 15. В том числе 46, находящихся с деформирующим артрозом (ДА): 1-11 стадии - 21, ТИТУ - 25. Соответственно 42 пациента асептическим некрозом головки бедренной кости (АНГБ) распределились как Т-ТТ стадии - 13, ТТТ-ТУ - 29.

ОСГ проведена 106 пациентам до и через 2-3 месяца после операции (туберкулезное поражение - 76 человек, нетуберкулезное - 30). В отдаленные сроки (от 9 месяцев и более) обследованы 22 пациента. В зависимости от вида оперативного вмешательства пациенты распределены на 4 группы: Т - мобилизирующие операции с реваскуляри-зацией тканей сустава - 32, ТТ - мобилизирующие без ре-васкуляризации - 32, ТТТ - стабилизирующии с реваскуля-ризацией - 11, ТУ - стабилизирующие без реваскуляриза-ции (резекции) - 31. Отдаленные результаты после операций были прослежены у следующих пациентов: Т группы - 5, ТТ - 9, ТУ - 8.

Радионуклидные исследования проводили на гамма-камере «МВ 9100» фирмы «ГАММА» (ВНР) с системой обработки изображения ИВК «ГАММА» на базе мини-ЭВМ СМ-4 и современной компьютерной системы «СЦИНТИПРО». В качестве радиофармпрепарата (РФП) использовали 99м-Тс-технефор активностью 400 МБк. Количественная обработка сцинтиграфических данных

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.