CC BY
26УДК 602.3:579.8
Ахметгареева Э.У.
студент бакалавриата ФГБОУ ВО «БГПУ им.М.Акмуллы» (г.Уфа,Россия)
Кузнецова Т.Н.
доцент биологических наук ООО НВП «БашИнком» (г.Уфа,Россия)
ИССЛЕДОВАНИЕ ПРИРОДНОГО ИЗОЛЯТА ГРИБА РОДА TRICHODERMA НА ЦЕЛЛЮЛОЗОЛИТИЧЕСКУЮ АКТИВНОСТЬ
Краткая аннотация: В лабораторных условиях мы определили целлюлозолитическую активность, выделенного аборигенного штамма микромицета гриба рода Тпекойетша. Выделение культур осуществляли общепринятыми методами из почвы, отобранной на территории Чишминского района.
Ключевые слова: микромицеты, выделение, целлюлазная активность, скорость роста.
Введение: Деградация целлюлозы в почве, совершаемая грибами, занимает одно из важных звеньев в процессе круговорота веществ в природе и создании почвенного плодородия. Целлюлазные свойства установлены у многих сотен видов и тысяч природных изолятов грибов различного происхождения и систематической принадлежности, как при культивировании на целлюлозных субстратах, так и при их развитии в природе. [1]
Обитающие в почве целлюлозоразрушающие грибы имеют большее, чем бактерии, значение в разложении растительных остатков и образовании гумуса. [2] Несмотря на то, что многие микромицеты способны синтезировать
целлюлозолитические ферменты, имеющие разнообразное биотехнологическое применение, на практике используют небольшое количество грибных культур.
При выборе продуцента целлюлаз следует учитывать такие показатели: безвредность, активность биосинтеза, степень использования, доступность, стоимость сырья. чувствительность к условиям культивирования; стабильность. Только по совокупности свойств микроорганизмаи производственных оценивают практическую пригодность и ценность продуцента.[3]
Известно значительное число видов микроскопических грибов, разных систематических групп, поражающих целлюлозосодержащие субстраты. К их числу относятся: Mucor sp., Botrytis sp.. Sclerotinia sclerotiorum, Trichotheciumroseum, Ciadosporium herbarum, Alternaría sp., Fusarium sp., Aspergillus sp.,Pénicillium sp., Chaetkomium sp., Stachybotrys atra, Myrothecium verrucaria,Trichoderma koningii, Agrostalagmus cinnabarinus и некоторые другие. При этом такие грибы, как Cladosporium herbarum, Alternaría sp, Chaetkomíum sp.,Fusarium sp . Trichoderma sp. отмечены, в большинстве случаев, как почвенные целлюлозоразрушающие грибы [2]. В связи с этим целесообразно вести поиск перспективных штаммов для деструкции растительных остатков почвообитающих микромицетов.
Целью данного исследования является оценка целлюлозолитической активности микромицета, выделенного из почвы Чишминского района.
Материалы и методы исследования: Ислледования проводились на базе ОО НВП «БашИнком» В качестве объекта исследования был отобран изолят гриба рода Tichoderma.
Определение целлюлозолитичсекой активности (ЦЛА) проводилось по следующей методике:
1. Из фильтровальной бумаги (источник целлюлозы) нарезают полоски размером 1,5x10 см.
2.Полоски взвешивают и сушат их до постоянного веса.
3. В каждую пробирку с культуральной жидкостью микробного штамма помещают полоски бумаги, выдерживают в термостате при 37°С в течение 24ч.
4. После 24-чаовой инкубации извлекают полоски фильтровальной бумаги,
промывают, высушивают и взвешивают до постоянного веса. По потере в весе полосок фильтровальной бумаги определяют целлюлозолитическую активность в единицах активности (е.а.) по формуле:
ЦЛА=(т-п)х1000,где т - начальный вес бумаги, п - конечный вес.
ЦЛА определялась как в цельной жидкой культуре, так и в разведениях: 1:10, 1:20,
1:40, в 10 повторах.
Результаты и обсуждение:
Благодаря биопрепаратам на основе грибам рода Trichoderma происходит естественный процесс разложения растительных остатков, поэтому было важно изучить целлюлозолитическую активность микромицета.
Каждый пассаж Trichoderma №1 и Trichoderma №2 и Trichoderma №3 на полусинтетической среде и картофельно-глюкозном агаре подвергали проверке на целлюлозолитическуюактивность.(см. методика
Таблица 1
Целлюлозолитическая эффективность
№ Дата пассажа Номер пассажа Питательная Среднее
среда значение ЦЛА
1 25.10.18 Trichoderma №1-1 ПСС 15,0 е.а
Trichoderma №1 -2 КГА 6,3 е.а
2 15.11.18 Trichoderma №2-1 ПСС 45,5 е.а
Trichoderma №2-2 КГА 14,5 е.а
3 28.11.18 Trichoderma №3-1 ПСС 51е.а
Trichoderma №3-2 КГА 15,6 е.а
Заключение
Таким образом, выделение из почвы культуры микроскопических грибов и изучение их целлюлозолитической активности в лабораторных условиях позволило выявить штаммы, сочетающие способность к быстрой колонизации субстрата с активным синтезом ферментов класса целлюлаз. Выявленные штаммы микромицетов-
целлюлозолитиков представляют интерес для разработки технологий утилизации растительных отходов в процессе производства сельскохозяйственной продукции.
ЛИТЕРАТУРА
1.Киреева H. А.,Мифтахова A.M. Микромицеты-целлюлозолитики нефтезагрязненных почв // Вестн. Башк. университета. - 2004 - № 4 - С. 51-56.
2.Билай В. И. Биологически активные вещества микроскопических грибов и их применение. - Киев : Издательство «Наук. думка», 1965 - 267 с.
3.Эколого-биотехнологические аспекты конверсии растительных субстратов : учебное пособие / сост. В. П. Саловарова, Ю. П. Козлов. - М. : Изд-во РУДН, 2001 - 331 с.
4.Методы экспериментальной микологии : сб. / под ред. В. И. Билай. - Киев : Наук.думка, 1973 - 243 с.
5.Teather R. M., Wood P. J. Use of congo-red polysaccharide interaction in enumeration and characterization of cellulozalytic bacteria the bovine rumen // Appl. Environ Microbiol. -198- V. 43 - P. 777-780.
