CC BY
20
«Дни иммунологии в СПб 2017» Immunology Days in St. Petersburg 2017
Медицинская Иммунология Medical Immunology (Russia)/Meditsinskaya Immunologiya
Проведен ряд исследований, отражающих распространенность ИА среди взрослого населения. Так, например, в России аллергия к жалящим насекомым отмечается у 0,1-0,4 % населения, к нежалящим насекомым — у 1,7-17,5%.
Среди детского населения проблема ИА является не менее острой. Однако в современной отечественной литературе практически отсутствуют данные по распространенности ИА среди детского контингента и особенностям клинического течения у детей. Несмотря на то, что в раннем детском возрасте тяжелые аллергические реакции на ужаления встречаются не часто, они отражены в литературе. Однако общепринятая шкала оценки тяжести реакций и единый лечебно-диагностический алгоритм ИА у детей также не разработаны.
Цель. Изучение распространенности ИА и ее удельного весе в общей структуре аллергопатологии среди детского населения московского региона.
Материалы и методы. Обследованы 350 детей московского региона в возрасте от 0 до 18 лет. Среди них сформирована группа из 140 детей (40%, n = 350), имеющих в анамнезе жалобы на выраженные местные и системные гиперергические реакции на ужаления и укусы насекомыми. Анкетирование проводили с применением специализированного опросника по раннему выявлению ИА, разработанного авторами в рамках выполнения работы.
Результаты. По результатам анкетирования у 140 (40%, n = 350) детей имеются в анамнезе жалобы на выраженные местные и системные гиперергические реакции при ужалениях и укусах насекомыми. Из них у 8,8% детей симптомы соответствовали системным реакциям различной степени тяжести (по классификации H. Mueller).
У 3 детей (2,1%, n = 140) в анамнезе отмечена анафилактическая реакция на ужаление осы, которая сопровождалась системными реакциями, такими как головокружение, шум в ушах, рвота, ангионевротический отек области глаз, а также выраженный ангионевротический отек с геморрагическим компонентом в месте ужаления, сохранявшийся более двух недель на фоне терапии местными и системными глюкокортикостероидами. У остальных детей отмечались местные реакции различной степени тяжести в виде болезненности, чувства жжения и рас-пирания, распространенного отека, геморрагической сыпи в месте укуса и ужаления, в ряде случаев с последующим присоединением инфекционного воспаления в месте укуса/ужаления.
Из 140 детей (40%, n = 350) отобрано 48 пациентов (34%, n = 140), имеющих аллергопатологию с преобладанием в группе аллергического ринита у 84% (n = 140) и бронхиальной астмы у 67% (n = 140); 50% (n = 140) детей страдают поллинозом и 24% (n = 140) атопическим дерматитом.
У 12 детей (8,5%, n = 140) из группы с гиперергиче-скими реакциями на насекомых отмечалась также непереносимость рыбы в анамнезе.
Симптомы ГЧ отмечены преимущественно при укусах комарами — 70,5% (n = 140), мошкой — 26,4%, слепнем — 17,6%, при ужалениях осами — 26,4%, пчелами — 8,8%.
Развитие симптомов ГЧ отмечено преимущественно в возрастных группах 5-7 лет — 33% (n = 140), и 8-13 лет — 42%, 14-18 лет — 22%, реже в группе детей 3-5 лет-3%. Однако возникновение выраженных системных анафилактических реакций отмечено у детей подросткового возраста 12-16 лет, имеющих преимущественно сенсибилизацию к бытовым и эпидермальным аллергенам.
Заключение. Результаты исследования подтверждают высокую распространенность ИА среди детского контингента и необходимость дальнейшей разработки и внедрения в клиническую практику единых алгоритмов выявления и обследования больных с ИА. Тяжесть системных реакций в отдельных клинических случаях доказывает актуальность изучения проблемы ИА у детей.
ИССЛЕДОВАНИЕ ОТВЕТНЫХ РЕАКЦИЙ КЛЕТОК КРОВИ ПАЦИЕНТОВ С ДЕБЮТОМ БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМЫ НА ЭНДОТОКСИНЫ
Серов Д.А.1, Радзюкевич Я.В.1, Косякова Н.И.2, Прохоренко И.Р.1
1 Институт фундаментальных проблем биологии РАН, Пущино, Россия
2 Больница Пущинского научного центра РАН, Пущино, Россия
Введение. Бронхиальная астма (БА) — хроническое аллергическое воспаление дыхательных путей, ведущее к повышению концентрации провоспалительных цито-кинов в крови. Для лечения широко используются как антилейкотриеновые препараты, так и ингаляционные глюкокортикостероиды (иГКС). Системное воспаление, сопровождающее БА, может приводить к компенсаторной гиперпродукции противовоспалительных цитокинов (sTNFRII, IL-1ra) и, как следствие, к снижению функциональной активности иммунных клеток, что увеличивает риск бактериемии, в т.ч. грамотрицательной. Эндотоксины являются одними из самых сильных бактериальных агентов и индукторов секреции провоспалительных ци-токинов (TNFa, IL-6, IL-8, IL-1ß).
Цель. Оценка влияния терапии бронхиальной астмы в дебюте на ЛПС-индуцированные цитокиновые ответы клеток крови пациентов.
Материалы и методы. Исследование проводили на цельной крови пациентов с дебютом атопической бронхиальной астмы — АБА (n = 10). Забор крови для исследования осуществляли в клинических условиях до начала терапии и через 2 недели после начала терапии ингаляционным глюкокортикостероидом (флутиказон пропио-натом) или монтелукастом per os. В стерильных условиях кровь инкубировали с 100 нг/мл ЛПС E. coli О55:В5 (Sigma-Aldrich, USA) в течение 6 ч для определения секреции TNFa, IL-6, IL-8 и 24 ч для определения концентраций IL-1ß, IFNß. Параллельно контрольные пробы инкубировали в отсутствие ЛПС. Пробы инкубировали при 37 °C, в атмосфере 5% СО2. Концентрации цитокинов измеряли методом ИФА с использованием наборов реагентов (ООО «Цитокин», Санкт-Петербург) по инструкции, рекомендованной производителем. По результатам измерений рассчитывали средние значения с доверительными интервалами. Достоверность различий выборочных средних значений оценивали с помощью t-критерия Стьюдента для парных выборок. Проверку нормальности распределений оценивали с использованием критериев Шапиро—Уилка, Колмогорова—Смирнова.
Результаты. На фоне терапии АБА в контрольных сыворотках пациентов наблюдается достоверное снижение концентрации раннего провоспалительного цитокина IL-6 (с 206±92 до 17±6 пкг/мл), что может указывать на снижение активности воспалительного процесса. Через 2 недели терапии обнаружено достоверное увеличение
2017, Т. 19, Специальный выпуск 2017, Vol. 19, Special Issue
Аллергические заболевания Allergic diseases
секреции TNFa и IL-6 в 2 и в 1,2 раза, соответственно, в ответ на эндотоксин E. coli, демонстрируя эффективность лечения на усиление ответов клеток врождённого иммунитета на потенциальные инфекционные агенты. Лечение иГСК, блокаторами CysLTl не выявило статистически достоверных отличий в наработке цитокинов клетками крови в ответ на ЛПС. Лечение АБА не влияло на концентрации цитокинов IL-8, IL-1ß, IFNy, IL-1ra в контроле и в ответ на ЛПС E. coli.
Заключение. Терапия АБА снижает уровень провоспа-лительных цитокинов в крови пациентов, восстанавливая способность клеток врождённого иммунитета отвечать на антигены бактериальной природы (эндотоксины). Полученные данные показывают, что терапия АБА в первую очередь влияет на врожденный иммунитет. Использование иГКС в качестве основной терапии не изменило ЛПС-индуцированную секрецию про- и противовоспалительных цитокинов, что согласуется с недавними работами (Cohen et al., 2016), подтверждающими неоднозначную роль ГКС в снижении иммунного ответа на эндотоксины. Таким образом, исследованные варианты терапии оказывали сходные модулирующие эффекты на клетки врожденного иммунитета.
ОСОБЕННОСТИ ВРОЖДЕННОГО И АДАПТИВНОГО ИММУНИТЕТА У БОЛЬНЫХ СЕЗОННЫМ АЛЛЕРГИЧЕСКИМ РИНИТОМ В ПЕРИОДЫ ПОЛЛИНАЦИИ И РЕМИССИИ
Сизякина Л.П., Андреева И.И., Семенова Н.И.
ФГБОУ ВО «Ростовский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения РФ, Ростов-на-Дону, Россия
Согласно данным эпидемиологических исследований, распространенность сезонного аллергического ринита (САР) в популяции составляет от трех до двадцати процентов (Яшина Л.А., Игнатьева В.И., 2013). Патогенетической базой клинического проявления САР являются изменения иммунного реагирования, которые опосредованы формированием сенсибилизации. Раскрытие особенностей иммунопатогенеза САР является основой совершенствования терапии и предотвращения прогрессии этой патологии.
Цель. Изучение факторов врожденного и адаптивного иммунного ответа у больных сезонным аллергическим ринитом легкой степени тяжести.
Были обследованы одни и те же пациенты (34 человека, средний возраст 30,0±5,6 лет) в активную фазу САР легкой степени и в условиях стойкой клинической ремиссии вне сезона пыления. Диагноз выставлялся в соответствии с Федеральными клиническими рекомендациями, с учетом Классификации международных согласительных документов по АР (EAACI//WAO, ARIA 2008). В качестве контроля обследованы 20 практически здоровых доноров крови. При оценке показателей иммунного статуса использовали проточную цитофлюориметрию с соответствующим набором моноклональных антител (anti-CD3, CD4, CD8, CD16, CD19, CD25, FoxP3, GransimB). Метаболическую активность нейтрофилов оценивали в НСТ-тесте, содержание сывороточных иммуноглобулинов — в реакции радиальной иммунодиффузии в геле по Манчини, уровень IgE, IFNy, TNFa, IL-6, IL-4 — методом ИФА. Статистическая обработка полученных дан-
ных проводилась с применением пакета прикладных программ Statistica 6.1.
Установлено, что в активную фазу заболевания активировано созревание Т-лимфоцитов (75,50±6,40%, в контроле 66,20±2,35%) с преимущественной диффе-ренцировкой в сторону цитотоксической субпопуляции (CD8+,% 30,74±5,49, в контроле 21,40±0,70) и усилением литических потенций этих клеток (CD8+Gr+,% 24,12±7,13, в контроле 9,80±1,23) при снижении процессов Т-клеточной негативной иммуносупресии (CD4+CD25+FoxP3+, % 1,09±0,45, в контроле 1,34±0,13). Также регистрируется увеличение количества В-клеток (CD19+, % 10,38±2,82, в контроле 6,09±0,23) и активация их эффекторных свойств, документированное гипе-риммуноглобулинемией IgA (2,08±0,49 г/л, в контроле 1,42±0,15г/л), IgE (308,20±232,31 МЕ/мл, в контроле 78,20±11,47 МЕ/мл). В системе врожденного иммунитета выявлено усиление активности нейтрофилов по данным спонтанного НСТ-теста (97,38±10,81 у.е., в контроле 90,20±1,03 у.е.). Однако при дополнительной стимуляции нейтрофилов продукция активных форм кислорода ниже, чем в группе сравнения, что находит свое отражение в сниженном значении коэффициента стимуляции НСТ (1,54±0,24, в контроле 2,10±0,01). Анализ показателей CD16+ клеток демонстрирует количественную сохранность (10,26±4,36%, в контроле 11,6±0,52%) при угнетении цитолитических свойств (CD16+Gr+,% 6,25±4,33, в контроле 10,20±0,79). Содержание в сыворотке крови провоспалительных медиаторов IL-6 (2,3±0,8 пг/мл) и TNFa (1,6±0,5 пг/мл), а также оппозитных цитокинов IL-4 (2,7±1,9 пг/мл) и IFNy (6,2±2,4 пг/мл) статистически достоверно не изменено (в контроле 2,2±0,6; 1,6±0,5; 1,9±0,1; 5,4±1,0 пг/мл соответственно), однако параметры стандартных отклонений уровней IL-4 и IFNy значительно превышают соответствующие контрольные критерии.
Исследование параметров иммунного статуса в период ремиссии выявило увеличение, в сравнении с нормативными данными, числа циркулирующих зрелых Т-лимфоцитов (74,56±4,97%), за счет Т-эффекторов (CD8+,% 29,04±6,23) при активации их литических потенций (CD8+Gr+,% 23,79±6,20). В гуморальном звене определяется увеличение количества зрелых В-лимфоцитов (10,44±3,13%), гипериммуноглобули-немия IgA (1,99±0,44г/л), IgE (292,88±294,74 МЕ/мл). Нейтрофилы характеризуются снижением метаболизма в условиях дополнительной стимуляции in vitro (Кст. НСТ1,55±0,15 у.е.), а CD16+ клетки отличает угнетение функциональных потенций (CD16+Gr+,% 6,56±4,56). Остальные исследованные показатели находятся в пределах контрольных значений.
Таким образом, выявленные, в сравнении с нормативными критериями, особенности функционирования иммунной системы у больных САР легкой степени в период активации соответствуют активации аллергического воспаления. Отличные от контрольных данных количественные и функциональные показатели врожденного и адаптивного иммунитета в стадии клинической ремиссии являются объективным доказательством нарушения системного иммунного реагирования даже в условиях отсутствия причинно-значимого аллергена.
