CC BY
2
ВЕСТНИК РОССИЙСКОГО НАУЧНОГО ЦЕНТРА РЕНТГЕНОРАДИОЛОГИИ (ВЕСТНИК РНЦРР), 2023, Т. 2023, № 3
ОРИГИНАЛЬНАЯ СТАТЬЯ. МОЛЕКУЛЯРНАЯ МЕДИЦИНА
Исследование острой токсичности нового противоопухолевого препарата «Карплазмин-ova», предназначенного для CAR-T терапии РЭА-позитивных опухолей
О.Б. Князева, Т.М. Кулинич, Я.Ю. Киселева, А.М. Шишкин, В.К. Боженко
ФГБУ «Российский научный центр рентгенорадиологии» Минздрава России, Россия, 117997, г. Москва, ул. Профсоюзная, д. 86
Для цитирования: Князева ОБ., Кулинич Т.М., Киселева Я.Ю., Шишкин А.М., Боженко В.К. Исследование острой токсичности нового противоопухолевого препарата «Карплазмин-ova», предназначенного для CAR-T терапии РЭА-позитивных опухолей. Вестник Российского научного центра рентгенорадиологии. 2023; 2023(4):23-30. EDN: QZBWMB
Адрес для корреспонденции: Татьяна Михайловна Кулинич, [email protected]
Статья поступила в редакцию 01.12.2023; одобрена после рецензирования 08.12.2023; принята к публикации 15.12.2023.
Резюме
Целью исследования являлось определение параметров безопасности в исследованиях острой токсичности нового сомато-клеточного противоопухолевого препарата для CAR-T терапии солидных опухолей, экспрессирующих раково-эмбриональный антиген (РЭА) -Карплазмин-ova. Исследуемый сомато-клеточный лекарственный препарат представляет собой аутологичные Т-лимфоциты, генетически модифицированные рекомбинантной плазмидной ДНК, несущей ген РЭА. Исследование острой токсичности лекарственного препарата проведено на 168 белых беспородных мышах (84 самца и 84 самки), 168 белых беспородных крысах (84 самца и 84 самки) и 30 кроликах породы Шиншилла (15 самцов и 15 самок). Исследование острой токсичности препарата предполагает однократное введение фармакологического вещества и дальнейшее наблюдение за экспериментальными животными в течение 14 суток. На основании проведенных исследований, показано, что препарат не оказывает выраженного токсического действия на экспериментальных животных.
Ключевые слова: раково-эмбриональный антиген, РЭА, CAR-T терапия, иммунотерапия, острая токсичность, Т-клеточный рецептор
Investigation of the acute toxicity of the new anticancer drug "Karplazmin-ova" intended for CAR-T therapy of CEA-positive tumors
O.B. Knyazeva, T.M. Kulinich, Y.Y. Kiseleva, А.М. Shishkin, В.К. Bozhenko
Russian Scientific Center of Roentgenoradiology (RSCRR), 86 Profsoyuznaya St., Moscow, 117997, Russia
For Citation: Knyazeva O.B., Kulinich T.M., Kiseleva Y.Y., Shishkin А.М., Bozhenko В.К. Investigation of the acute toxicity of the new anticancer drug "Karplazmin-ova" intended for CAR-T therapy of CEA-positive tumors. Vestnik of the Russian Scientific Center of Roentgenoradiology. 2023; 2023(4):23-30. (In Russ.). EDN: QZBWMB
Address for correspondence: Tatyana M. Kulinich, e-mail: [email protected]
The article was submitted on December 01, 2023; approved after reviewing on December 08, 2023; accepted for publication on December 15, 2023.
Summary
The aim of the study was to determine the safety parameters in acute toxicity studies of a new somatic cell antitumor agent for CAR-T therapy of solid tumors expressing cancer embryonic antigen (REA) - Karplazmin-ova. The investigated somatic cell drug is an autologous T-lymphocyte genetically modified with recombinant plasmid DNA carrying the REA gene. The study of acute toxicity of the drug was conducted in 168 white mongrel mice (84 males and 84 females), 168 white mongrel rats (84 males and 84 females) and 30 Chinchilla rabbits (15 males and 15 females). The study of acute toxicity of the drug involves a single administration of a pharmacological substance and further observation of the experimental animals for 14 days. Based on the conducted studies, it has been shown that the drug has no pronounced toxic effect on experimental animals.
Key words: cancer-embryonic antigen, CEA, CAR-T therapy, immunotherapy, acute toxicity, T-cell receptor
Введение
По данным Всемирной организации здравоохранения онкологические заболевания являются одной из основных причин заболеваемости и смертности во всем мире. Сегодня в целом по России на 100 000 человек приходится более 4 000 заболевших. Число летальных исходов от рака в России ежегодно составляет 200 человек на 100 000 населения [ 1].
Одним из способов определить характер течения болезни и степень агрессивности опухолевого роста является диагностика по охарактеризованным маркерам раковых клеток (онкомаркерам). В клинических условиях предпочтение отдается онкомаркерам, находящимся в сыворотке крови, как наиболее легко детектируемым [2].
Одним из таких маркеров является раково-эмбриональный антиген (CEA, carcinoembryonic antigen, CEA) - поверхностный белок суперсемейства иммуноглобулинов, который обычно экспрессируется во время эмбрионального развития и присутствует в следовых количествах у взрослых. CEA - гликопротеин с молекулярной массой 180 кДа, экспрессирующийся во всех аденокарциномах желудочно-кишечного тракта, в 50 % случаев рака молочной железы, в 70 % случаев немелкоклеточного рака легкого и в клетках некоторых других видов рака [3]. РЭА экспрессируется в тканях эмбриона в ходе внутриутробного развития, а после рождения его продукция детектируется в клетках желудочных ямок, эпителия толстой кишки и в других отделах желудочно-кишечного тракта, в основном на поверхности микроворсинок. Однако уровень экспрессии РЭА в опухолевых клетках значительно превышает его уровень экспрессии в нормальной ткани (в 35 раз и выше). При некоторых формах рака его концентрация в сыворотке крови увеличивается в сотни раз [4,5].
В настоящее время известно, что иммунная система играет важную роль не только в процессе образования злокачественной опухоли, но и во влиянии на уже сформировавшуюся опухоль [9]. Многие современные иммунологические исследования демонстрируют высокий потенциал Т-клеточной адаптивной терапии рака, которая представляет собой переливание аутологичных или аллогенных Т-клеток пациентам [7]. Тем не менее, в настоящее время остаются открытыми вопросы, касающиеся адаптивного переноса Т-клеток, такие как выбор вида Т-клеток для терапии, выбор целевого опухолевого антигена, повышение эффективности невирусной генетической модификации, из-за чего применение терапии ограничено [8].
Адаптивная Т-клеточная иммунотерапия может включать как варианты переливания пациентам интерлейкин-2 активированных лимфоцитов (так называемые LAK- клетки), так и более сложные варианты - когда лимфоциты модифицируются генетически для повышения их таргетности и противоопухолевой эффективности [9].
В этом случае антигенсвязывающий участок моноклонального антитела против опухолеспецифического антигена (иммуноглобулина, Ig) обычно объединяется с Z-сигнальной цепью Т-клеточного рецептора (TCR) в качестве распознающей части Т-клеточного рецептора. После того как реципиентные Т-клетки генетически модифицированы, они
приобретают способность связываться с целевыми антигенами, экспрессируемыми на поверхности опухоли, распознавая их с помощью иммуноглобулиновой части химерного рецептора, CAR [11]. Одним из преимуществ этого подхода является теоретическая возможность терапии любого типа опухоли с известными специфическими поверхностными антигенами [2].
Лечение рака клеточными препаратами, состоящими из аутологичных донорских Т-лимфоцитов, трансфицированных (трансдуцированных) препаратами рекомбинантных ДНК и экспрессирующих на своей поверхности химерные рецепторы к антигенам (CAR), является сравнительно новым и перспективным подходом.
На базе ФГБУ «РНЦРР» Минздрава России разработан новый соматоклеточный препарат на основе CAR-T лимфоцитов - «Карплазмин-ova», генетически-модифицирующим агентом которого является рекомбинантная плазмидная ДНК, несущая ген химерного Т-клеточного рецептора к РЭА. Введение в аутологичные донорские Т-лимфоциты в условиях ex vivo, обеспечивает в последних экспрессию химерного мономолекулярного Т-клеточного рецептора, включающего scFv-фрагмент моноклонального антитела, обладающего высокой аффинностью к опухолевому варианту РЭА. Данное лекарственное средство предназначено для лечения РЭА-позитивных опухолей, в частности колоректального рака, рака легкого, рака желудка. Механизм действия связан с образованием в условиях ex vivo пула Т-лимфоцитов, эффективно связывающихся с РЭА на поверхности опухолевых клеток после обратной инфузии клеток пациенту. В результате связывания модифицированных лимфоцитов с РЭА-позитивными опухолевыми клетками запускается каскад активации модифицированных лимфоцитов, следствием которого будет являться формирование цитотоксического иммунного ответа на клетки опухоли и метастазирующие клетки.
Данное исследование направлено на изучение острой токсичности нового лекарственного соматоклеточного препарата «Карплазмин-ova» с целью установления обязательных параметров безопасности нового лекарственного средства.
Методы и исследования
Исследование острой токсичности (безопасности) применения изучаемого лекарственного средства было проведено по условиям стандартных рекомендаций «Руководства по проведению доклинических исследований лекарственных средств» [12].
Эксперименты по исследованию острой токсичности проводились на трех видах лабораторных животных: 168 белых беспородных мышей (84 самца и 84 самки; возраст мышей к началу исследования составил 3-4 месяца, масса тела 18-20 г), 168 белых беспородных крыс (84 самца и 84 самки; возраст крыс к началу эксперимента составил 2-3 месяца, масса тела 180-220 г) и 30 кроликов породы Шиншилла (15 самцов и 15 самок возраст кроликов к началу эксперимента составлял 4-5 месяцев, масса тела 2500-3000 г). Производитель животных: Филиал «Андреевка» НЦБМТ РАМН. Животные разведены специально, и ранее не участвовали в исследованиях.
В ходе эксперимента следили за поведением животных, внешним видом, двигательной активностью, реакцией на внешние раздражители. На 14-й день после введения препарата были проведены исследования на общий и биохимический анализы крови, а также выполнена некропсия с гистологическим исследованием тканей внутренних органов. Дизайн исследования острой токсичности препарата предполагал однократное внутривенное и внутрибрюшинное введение лекарственного средства и дальнейшее наблюдение за животными. Длительность наблюдения за лабораторными животными после введения субстанции составляла 14 дней, в этот период оценивали видимые признаки интоксикации и прирост массы тела (на 5, 10 и 14 день).
Целью исследования являлось изучение острой токсичности лекарственного средства «Карплазмин-ova» при однократном, внутривенном и внутрибрюшинном введении беспородным мышам и крысам и однократном, внутривенном введении кроликам. Одна эффективная доза препарата лимфоцитов, в дальнейшем называемая "ЭД", вводимая
животному (мыши, крысе или кролику), была выбрана на основе анализа экспериментов по оценке эффективности, а также на основе данных литературных источников, и составила 106 лимфоцитов, суспендированных в 0,2 мл стандартного фосфатно-солевого буфера (ФСБ). Препарат был введен мышам и крысам в дозах: ЭД, 2*ЭД, 4*ЭД, 8*ЭД, 14*ЭД и 20*ЭД соответственно; кроликам в дозах: ЭД, 2*ЭД, 4*ЭД, 12*ЭД. Животным контрольных групп были выполнены инъекции фосфатно-солевого буфера в объеме 0,2 мл, способ введения был аналогичен опытным группам. Все исследовательские работы с лабораторными животными выполнялись в соответствии с общепринятыми правовыми и этическими нормами обращения с животными, на основе стандартных операционных процедур, принятых в организации-производстве исследований, которые соответствуют правилам, принятым Европейской Конвенцией по защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и иных научных целей [13]. Эвтаназия животных проводилась ответственным лицом в соответствии с требованиями, принятыми Европейской Конвенцией.
Результаты и обсуждение
Наблюдение за животными всех групп в течение 14 дней не выявило никаких значимых изменений внешнего вида, поведения и двигательной активности. Осмотр животных после однократного введения препарата проводился на 5, 10 и 14 сутки.
Показано, что однократное внутривенное и внутрибрюшинное введение препарата «Карплазмин-ova» белым беспородным мышам, беспородным крысам в дозах до 20*ЭД и внутривенное введение препарата кроликам породы Шиншилла в дозах до 12*ЭД включительно не приводило к летальным исходам. Во всех исследованных группах крыс также не было отмечено признаков интоксикации.
Внутривенное введение препарата мышам в дозах ЭД и 2*ЭД также не вызывало никаких видимых признаков интоксикации. При дозе 4*ЭД сразу после введения наблюдалось снижение двигательной активности и одышка. При дозах 8*ЭД, 14*ЭД и 20*ЭД наблюдались также судороги задних конечностей. Эти симптомы проходили в течение 5-15 минут. На протяжении последующего наблюдения в течение 14 суток в состоянии и поведении животных, приросте массы тела не наблюдалось никаких отклонений. Внутривенное введение препарата «Карплазмин-ova» кроликам в дозах ЭД, 2*ЭД и 4*ЭД не вызывало видимых признаков интоксикации. При введении дозы 12*ЭД внутривенно наблюдалось снижение двигательной активности и одышка. Эти симптомы проходили в течение 5-15 минут. На протяжении последующего наблюдения в течение 14 суток в состоянии и поведении животных, приросте массы тела не наблюдалось отклонений. Результаты наблюдения животных во время введения препарата «Карплазмин-ova» приведены в таблицах 1, 2 и 3.
Табл. 1. Признаки интоксикации после однократного введения препарата «Карплазмин-ova» мышам («дефис» - признаков интоксикации не обнаружено)
Эксперимент Контроль Препарат Карплазмин-суа
ЭД 2хЭД 4хЭД 8хЭД 14хЭД 20хЭД
в/в введение - - - Снижение Снижение двигательной
самцы двигательной активности. Одышка.
активности. Судороги задних конечностей.*
Одышка.*
в/б введение - - - - - - -
самцы
в/в введение - - - Снижение Снижение двигательной
самки двигательной активности.
активности. Одышка.
Одышка.* Судороги нижних конечностей.*
в/б введение - - - - - - -
самки
*Симптомы проходили через 5-15 минут после введения.
Табл. 2. Признаки интоксикации после однократного введения препарата «Карплазмин-ova» крысам («дефис» - признаков интоксикации не обнаружено)
Эксперимент Контроль Препарат Карплазмин-ova
ЭД 2хЭД 4хЭД 8хЭД 14хЭД 20хЭД
в/в введение самцы - - - - - - -
в/б введение самцы - ------
в/в введение самки - ------
в/б введение самки - ------
Табл. 3. Признаки интоксикации после однократного введения препарата «Карплазмин-ova» кроликам («дефис» - признаков интоксикации не обнаружено)
Эксперимент Контроль Препарат Карплазмин-ova
ЭД 2хЭД 4хЭД ЭД
в/в введение самцы Снижение двигательной активности. Одышка.*
в/в введение самки Снижение двигательной активности. Одышка.*
*Симптомы проходили через 5-15 минут после введения.
Внешний осмотр экспериментальных животных, проведенный в конце эксперимента (через 14 дней после введения субстанции), показал, что все они нормально упитаны, имеют правильное телосложение. Деформации или отека конечностей нет. Шерсть их опрятная, блестящая, плотно прилежащая к телу, без следов расчесов, изъязвлений, участков облысения и шелушения. Кожа чистая; подкожно-жировой слой развит умеренно. Зубы сохранены. При наружном осмотре выделений из естественных отверстий не обнаружено. По результатам некропсии было установлено, что внутренние органы правильно расположены, полости без выпота и спаек.
Биохимические исследования, проведенные через 14 суток после однократного внутривенного введения препарата «Карплазмин-ova» мышам и крысам в максимальной дозе 20*ЭД, и кроликам в максимальной дозе 12*ЭД показали, что биохимические параметры крови мышей, крыс и кроликов - содержание общего белка, глюкозы, мочевины, креатинина; активность ферментов - аланинаминотрансферазы (далее по тексту АЛТ), аспартатаминотрансферазы (далее по тексту АСТ), щелочной фосфатазы и концентрация гемоглобина - для животных, получивших однократную дозу препарата «Карплазмин-ova» внутривенно или внутрибрюшинно, не отличаются от соответствующих показателей для контрольных животных. Данные гематологических исследований показали, что при внутривенном введении препарата «Карплазмин-ova» мышам в дозе 20*ЭД повышается общее содержание лейкоцитов и изменяется лейкоцитарная формула крови, в то время как содержание эритроцитов, тромбоцитов и ретикулоцитов не отличаются от соответствующих показателей для контрольных животных. При введении препарата «Карплазмин-ova» крысам внутривенно и внутрибрюшинно, мышам внутрибрюшинно и кроликам внутривенно гематологические показатели не отличались от соответствующих показателей для контрольных животных.
На основании «Руководства по проведению доклинических исследований» [12] были проведены патоморфологические исследования только для животных, получивших препарат «Карплазмин-ova» в максимальной дозе.
Результаты патологоанатомического вскрытия, проведенного через 14 суток после однократного внутривенного и внутрибрюшинного введения исследуемого препарата, показали, что однократное введение препарата «Карплазмин-ova» в максимальной дозе (20*ЭД для мышей и крыс, 12*ЭД для кроликов) не приводит к морфометрическим и морфологическим изменениям внутренних органов: печени, почек, селезенки, тимуса, желудка, поджелудочной железы, сердца, легких и головного мозга. Проведенный гистологический анализ показал отсутствие цитоморфологических изменений в тканях внутренних органов исследованных животных.
Выводы
Полученные результаты наблюдений, проведенных анализов крови животных и результаты патологоанатомических исследований позволили сделать вывод, что однократное внутривенное и внутрибрюшинное введение препарата «Карплазмин-ova» в лекарственной форме суспензии клеток генно-модифицированных Т-лимфоцитов в дозе 20*ЭД не оказывает никакого токсического действия на белых беспородных крыс и белых беспородных мышей, а в дозе 12*ЭД на кроликов породы Шиншилла, за исключением незначительных внешних признаков интоксикации (снижение двигательной активности, одышка), которые проходят в течение 5-15 минут после введения, а также повышения общего содержания лейкоцитов и изменения лейкоцитарной формулы у мышей, получивших препарат в дозе 20*ЭД внутривенно.
Вклад авторов. О.Б. Князева: анализ результатов, написание текста статьи; Т.М. Кулинич: концепция и планирование исследования, проведение экспериментальной части; Я.Ю. Киселёва: проведение экспериментальной части исследования, анализ результатов, правка текста статьи; А.М. Шишкин: планирование хода исследования, проведение экспериментальной части исследования; В.К. Боженко: концепция и планирование исследования, анализ результатов, корректировка рукописи. Все авторы прочитали и согласились с версией рукописи, представленной для публикации.
Финансирование. Публикация подготовлена в рамках Государственного задания № 1022040800109-5-3.2.21
Соблюдение прав пациентов и правил биоэтики. Все исследования проведены с соблюдением требований, регламентирующих проведение экспериментальных работ с использованием лабораторных животных
Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Список литературы
1. ВОЗ. Всемирный доклад о раковых заболеваниях. Информационный бюллетень №297 Февраль 2015 г. Доступно по: http://www.iarc.fr/en/publications/books/wcr/wcr-order.php. Дата обращения: 15.11/2023.
2. Боженко В.К., Киселева Я.Ю., Шишкин А.М., Кулинич Т.М., Джикия Е.Л., Солодкий В.А. Разработка метода иммунотерапии (CAR-T терапии) СА125-позитивнных опухолей. Исследования и практика в медицине. 2019;6(S):73.
3. Duffy MJ, Lamerz R, Haglund C, Nicolini A, Kalousova M, Holubec L, Sturgeon C. Tumor markers in colorectal cancer, gastric cancer and gastrointestinal stromal cancers: European group on tumor markers 2014 guidelines update. Int J Cancer. 2014 Jun 1;134(11):2513-2522. doi: 10.1002/ijc.28384.
4. Khan K, Athauda A, Aitken K, Cunningham D, Watkins D, Starling N, et al. Survival Outcomes in Asymptomatic Patients With Normal Conventional Imaging but Raised Carcinoembryonic Antigen Levels in Colorectal Cancer Following Positron Emission Tomography-Computed Tomography Imaging. Oncologist. 2016 Dec;21(12):1502-1508. doi: 10.1634/theoncologist.2016-0222.
5. Lu YY, Chen JH, Chien CR, Chen WT, Tsai SC, Lin WY, Kao CH. Use of FDG-PET or PET/CT to detect recurrent colorectal cancer in patients with elevated CEA: a systematic review and meta-analysis. Int J Colorectal Dis. 2013 Aug;28(8):1039-1047. doi: 10.1007/s00384-013-1659-z.
6. Krüger C, Greten TF, Korangy F. Immune based therapies in cancer. Histol Histopathol. 2007 Jun;22(6):687-696. doi: 10.14670/HH-22.687.
7. Tiwari M. From tumor immunology to cancer immunotherapy: miles to go. J Cancer Res Ther. 2010 Oct-Dec;6(4):427-431. doi: 10.4103/0973-1482.77071.
8. June CH. Adoptive T cell therapy for cancer in the clinic. J Clin Invest. 2007 Jun;117(6):1466-1476. doi: 10.1172/JCI32446.
9. Gauthier J, Yakoub-Agha I. Chimeric antigen-receptor T-cell therapy for hematological malignancies and solid tumors: Clinical data to date, current limitations and perspectives. Curr Res Transl Med. 2017 Sep;65(3):93-102. doi: 10.1016/j.retram.2017.08.003.
10. Li J, Li W, Huang K, Zhang Y, Kupfer G, Zhao Q. Chimeric antigen receptor T cell (CAR-T) immunotherapy for solid tumors: lessons learned and strategies for moving forward. J Hematol Oncol. 2018 Feb 13;11(1):22. doi: 10.1186/s13045-018-0568-6.
11. Murphy A, Westwood JA, Teng MW, Moeller M, Darcy PK, Kershaw MH. Gene modification strategies to induce tumor immunity. Immunity. 2005 Apr;22(4):403-414. doi: 10.1016/j.immuni.2005.03.007.
12. «Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств» под ред. А Н. Миронова. М.: Гриф и К., 2012.
13. European Convention for the Protection of Vertebrate Animals Used for Experimental and other Scientific Purposes (ETS 123), Strasbourg, 1986.
Информация об авторах
Оксана Борисовна Князева - младший научный сотрудник лаборатории клеточной и генной терапии, ФГБУ «Российский научный центр рентгенорадиологии» Минздрава России. ORCID: https://orcid.org/0000-0001-8382-3579
Татьяна Михайловна Кулинич - к.м.н., заведующая лабораторией иммунологии и онкоцитологии, ФГБУ «Российский научный центр рентгенорадиологии» Минздрава России. ORCID: https://orcid.org/0000-0003-2331-5753
Яна Юрьевна Киселёва - к.м.н., научный сотрудник лаборатории иммунологии, онкоцитологии и клеточных технологий, ФГБУ «Российский научный центр рентгенорадиологии» Минздрава России. ORCID: https://orcid.org/0000-0002-5530-0591 Александр Михайлович Шишкин - к.м.н., старший научный сотрудник лаборатории иммунологии и онкоцитологии, ФГБУ «Российский научный центр рентгенорадиологии» Минздрава России. ORCID: https://orcid.org/0000-0003-4492-9543
Владимир Константинович Боженко - д.м.н., профессор, заслуженный врач РФ, заведующий отделом молекулярной биологии и экспериментальной терапии опухолей ФГБУ «Российский научный центр рентгенорадиологии» Минздрава России. ORCID: https://orcid.org/0000-0001-8351-8152
Information about the authors
Oksana B. Knyazeva - Junior Researcher, Laboratory of Cell and Gene Therapy, Russian Scientific Center of Roentgenoradiology. ORCID: https://orcid.org/0000-0001-8382-3579
Tatyana M. Kulinich - Candidate of Medical Sciences, Head of the Laboratory of Immunology and Oncocytology, Russian Scientific Center of Roentgenoradiology. ORCID: https://orcid.org/ 00000003-2331-5753
Yana Y. Kiseleva - Candidate of Medical Sciences, Senior Researcher, Laboratory of Immunology and Oncocytology, Russian Scientific Center of Roentgenoradiology. ORCID: https://orcid.org/0000-0002-5530-0591
Alexander M. Shishkin - Candidate of Medical Sciences, Senior Researcher, Laboratory of Immunology and Oncocytology, Russian Scientific Center of Roentgenoradiology. ORCID: https://orcid.org/0000-0003-4492-9543
Vladimir K. Bozhenko - Doctor of Medical Sciences, Professor, Honored Doctor of the Russian Federation, Head of the Department of Molecular Biology and Experimental Tumor Therapy, Russian Scientific Center of Roentgenoradiology. ORCID: https://orcid.org/0000-0001-8351-8152
