CC BY
20
РЕЗЮМЕ
И. С. Моисеев, Б. В. Афанасьев
Диагностическое значение исследования антитромбина III при вено-окклюзионной болезни печени после аллоген-ной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток
Вено-окклюзионная болезнь печени (ВОБ) — одно из наиболее серьезных осложнений, определяющих прогноз и раннюю летальность после аллогенной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток (аллоТГСК). Проведено проспективное исследование уровня антитромбина III у 69 пациентов, получивших аллоТГСК. В 32 % случаев была выполнена аллоТГСК от родственного HLA-совместимого донора, в 68 % случаев — от неродственного HLA-совмес-тимого донора. 77 % пациентов получили режим кондиционирования со сниженной токсичностью. Уровень ATIII оценивался 2 раза в неделю с начала режима кондиционирования и до +30 дня после трансплантации. ВОБ развилась у 8 пациентов. У 7 пациентов имела место ВОБ средней степени тяжести и тяжелая ВОБ. Исходный уровень ATIII не различался в группах больных с и без ВОБ (92,9±13,2 против 96,2±15,7, p = 0,62), но на момент развития ВОБ был значимо ниже в группе больных с ВОБ по сравнению с больными без ВОБ (67,7±10,7 против 88,9±14,9, p = 0,0006). Снижения ATIII у 1 пациента с легкой формой БОВ не выявлено, но для пациентов со средней степени тяжести и тяжелой ВОБ чувствительность и специфичность метода оказались 100 и 98 % соответственно.
Ключевые слова: антитромбин III, аллоТГСК, вено-окк-люзивная болезнь печени (ВОБ).
SUMMARY
I. S. Moiseev, B. V. Afanasyev
Diagnostic value of antithrombin III evaluation in hepatic veno-occlusive disease following allogenic hematopoietic stem cell transplantation
Hepatic veno-occlusive disease (VOD) is one the most serious complications after allogeneic stem cell transplantation (alloSCT) that adversely effects prognosis and leads to early post-transplant mortality. A prospective evaluation of ATIII levels was conducted in 69 patients undergoing alloSCT. 32 % of the patients received transplants from related and 68 % from unrelated HLA-matched donors. 77 % of the patients received reduced-intensity conditioning. The ATIII level was measured two times a week from the start of the conditiong regimen until day +30 after transplantation. VOD developed in 8 patients. 7 patients had moderate or severe VOD. The basic level of AT III was not significantly different in the patients with and without VOD (92.9±13.2 vs 96.2±15.7, p = 0.62), but at the time of VOD development was significantly lower in the patients with VOD (67.7±10.7 vs 88.9±14.9, p = 0.0006). No decrease in ATIII levels was found in the patient with mild VOD, but in the patients with moderate and severe VOD sensitivity and specificity of this assay were 100 % and 98 % respectively.
Key words: antithrombin III, alloSCT, hepatic veno-occlusive disease.
© Коллектив авторов, 2012 г. УДК 616.37-002:615.357.814]-092.4
Д. Ю. Семёнов, В. Б. Васильев, Е. Е. Зуева, А. Г. Тоноян, Л. Г. Шапкина, М. В. Горчакова, А. В. Соколов
ИССЛЕДОВАНИЕ ЭКСПРЕССИИ РЕЦЕПТОРОВ МЕЛАТОНИНА В ЛИМФОЦИТАХ И КЛЕТКАХ ПОДЖЕЛУДОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ В УСЛОВИЯХ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО ОСТРОГО ПАНКРЕАТИТА
Санкт-Петербургский государственный медицинский университет имени академика И. П. Павлова
ВВЕДЕНИЕ
В настоящее время острый панкреатит является одной из наиболее важных и далеко не решенных проблем неотложной хирургии. Продолжается неуклонный рост заболеваемости данной патологией, которая по различным регионам России колеблется от 38 до 95 человек на 100 тыс. населения [2]. Общая летальность при остром панкреатите составляет
4,0 — 5,3 %, в то время как показатели летальности от деструктивных его форм, по данным некоторых авторов, колеблются от 20 до 30 % [8]. Преобладание в возрастной структуре лиц молодого и среднего возраста придает проблеме медико-социальную значимость. Для решения проблемы прогнозирования развития деструкции пытаются использовать разнообразные биохимические и иммунологические критерии: уровень С-реактивного белка, интерлей-кина-10, прокальцитонина и др. [3, 4]. Однако перечисленные маркеры позволяют диагностировать уже наступившие изменения в поджелудочной железе и не дают возможности прогнозировать развитие деструкции на момент поступления в хирургический стационар [1]. Пути решения проблемы прогнозирования тяжести острого панкреатита, вероятно, тесно связаны с более глубоким изучением патогенеза данного заболевания.
Как известно, мелатонин, являющийся изначально гормоном эпифиза, в большом количестве продуцируется клетками APUD-системы желудочно-кишечного тракта, обладая самыми разнообразными эффектами в организме млекопитающих. Свое воздействие данный гормон реализует через мембранные рецепторы. У млекопитающих описаны 2 типа рецепторов к мелатонину — МТ1 и МТ2 [5].
В экспериментальных исследованиях на животных было доказано, что мелатонин в условиях мо-
ОРИГИНАЛЬНЫЕ РАБОТЫ
делированного панкреатита уменьшает тяжесть течения заболевания, реализуя свои эффекты на разные звенья патогенеза посредством МТ2-рецеп-торов. При фармакологическом блокировании МТ2-рецепторов происходит значительное повышение тяжести острого панкреатита за счет снижения регионарного кровотока, увеличения концентрации продуктов перекисного окисления липидов непосредственно в ткани поджелудочной железы [7]. Выполнено ретроспективное исследование экспрессии рецепторов мелатонина у пациентов с панкреатитом различной степени тяжести в «холодном» периоде. В ходе выполнения данного исследования изучалась корреляция тяжести перенесенного острого панкреатита с значениями МТ1, МТ2, а также соотношением двух типов рецепторов в виде показателя МТ2/МТ1. Было установлено, что наиболее информативная и достоверная зависимость наблюдалась между тяжестью перенесенного заболевания и показателем МТ2/МТ1 в лимфоцитах крови[1]. В связи с этим в наших дальнейших исследования мы ориентировались на изучение этого показателя. Возможность получения информации об экспрессии МТ-рецепторов как об одной из возможно наиболее важных эндогенных противовоспалительных систем может стать основой прогноза деструкции ткани поджелудочной железы.
Целью исследования является оценка экспрессии рецепторов мелатонина в лимфоцитах и клетках поджелудочной железы в условиях экспериментального острого панкреатита.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
В эксперименте использовались лабораторные животные — самцы половозрелых белых лабораторных крыс линии Вистар. Животных разделили на 2 группы. У 20 крыс основной группы производилось моделирование острого панкреатита (ОП) путем внутрибрюшинного введения 50 мг/кг гидрохлорида Ь-аргинина с последующим забором крови и ткани поджелудочной железы через 24 часа от начала эксперимента [6]. В качестве контрольной группы исследованы кровь и клетки поджелудочной железы 10 лабораторных животных, которым вводили физиологический раствор. У всех крыс выполнялось изъятие не менее 1,0 мл крови в одно и то же время. Для исключения возможного влияния факторов внешней среды на количество МТ-рецепторов условия содержания и режим питания крыс в течение всего срока жизни были абсолютно идентичны. Все животные выводились из эксперимента методом дислокации шейных позвонков с последующей де-капитацией для эксфузии крови. Полученный материал хранился и транспортировался в вакутейне-рах с ЭДТА при температуре не более 4 оС.
Ткань поджелудочной железы крыс с острым панкреатитом фиксировалась в формалине и отправля-
Средние значения показателя МТ2/МТ1 в клетках лабораторных крыс
Клетки ОП, легкое ОП, тяжелое Контрольная
течение течение группа
Лимфоциты 1,16±0,10 0,86±0,09 1,06±0,04
Панкреатоциты 1,16±0,06 0,80±0,08 1,05±0,03
лась на гистологическое исследование для морфологической оценки тяжести острого панкреатита.
Определение МТ-рецепторов в лимфоцитах и клетках поджелудочной железы проводилось с помощью метода непрямой иммунофлюоресценции. Количественный анализ экспрессии интересующих нас маркеров проводился в проточном цито-флюориметре («Beckman Coulter FC 500»).
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
При гистологическом исследовании ткань поджелудочной железы 12 крыс соответствовала отечной форме острого панкреатита (отек междоль-ковых пространств, смешанноклеточная перидук-тальная и периваскулярная воспалительная инфильтрация), у 8 крыс — острому деструктивному панкреатиту ( резко выраженная крупноочаговая смешанноклеточная воспалительная инфильтрация окружающей железу жировой клетчатки с очажками микроабсцедирования).
Вариабельность тяжести заболевания при абсолютно идентичной методике моделирования острого панкреатита возможно объясняется генетической неоднородностью представленной группы. В предыдущих исследованиях было установлено, что у близкородственных особей крыс содержание МТ-рецепторов в мононуклеарных клетках крови максимально схожее [1].
Результаты средних значений показателя МТ2/ МТ1 в лимфоцитах и панкреатоцитах у животных приведены в таблице.
В результате исследования было выявлено, что у всех животных отмечается схожее соотношение МТ-рецепторов в лимфоцитах и панкреатоцитах. При наличии гистологически верифицированного острого деструктивного панкреатита наблюдается снижение показателя МТ2/МТ1 в лимфоцитах крови и панкреатоцитах по сравнению с контрольной группой и группой животных с отечной формой острого панкреатита (p<0,05).
Полученные результаты подтверждают прогностическую значимость экспрессии МТ-рецепторов в лимфоцитах крови при развитии деструктивных форм острого панкреатита.
ЛИТЕРАТУРА
1. Тоноян, А. Г. Прогнозирование острого панкреатита на основании определения экспрессии рецепторов мелатонина в мононуклеарных клетках крови: автореферат / А. Г. Тоноян. - СПб., 2009. - С. 11-13.
2. Шалимов, С. А. Острый панкреатит и его осложнения / С. А. Шалимов, А. П. Радзиховский. — Киев: Наукова думка, 1990. - 272 с.
3. Ammori, B. J. Calcitonin precursors in the prediction of severity of acute pancreatitis on the day of admission / B. J. Ammori [et al] // Br. J. Surg. - 2003. - Vol. 90. - P. 197-204.
4. Barauskas, G. C-reactive protein in early prediction of pancreatic necrosis / G. Barauskas [et al] // Medicina (Kaunas). -2004. - Vol. 40. - P. 135-140.
5. Dubocovich, M. L. Melatonin receptors: are there multiple subtypes? / M. L. Dubocovich // Trends. Pharmacol. Sci. -1995. - № 16. - P. 50-56.
6. Hegyi, P. L-arginine-induced experimental pancreatitis / P. Hegyi // World J. Gastroenterol. - 2004. - Р. 2003-2009.
7. Jaworek, J. Role of endogenous melatonin and its MT2 receptor in the modulation of caerulin-induced pancreatitis in the rat / J. Jaworek [et al] // J. Physiol. Pharmacol. - 2002. -Vol. 53. - P. 791-804.
8. Mayerle, J. Current management of acute pancreatitis / J. Mayerle, V. Hlouschek, M. M. Lerch // Nat. Clin. Pract. Gastroenterol. Hepatol. - 2005. - Vol. 2. - № 10. - P. 473-483.
РЕЗЮМЕ
Д. Ю. Семёнов, В. Б. Васильев, Е. Е. Зуева, А. Г. Тоноян, Л. Г. Шапкина, М. В. Горчакова, А. В. Соколов
Исследование экспрессии рецепторов мелатонина в лимфоцитах и клетках поджелудочной железы в условиях экспериментального острого панкреатита
Исследована экспрессия рецепторов мелатонина в лимфоцитах и панкреатоцитах в условиях экспериментального острого панкреатита легкого и тяжелого течения. Выявлено, что наиболее низкие соотношения рецепторов мелатонина характерны для острого панкреатита тяжелого течения. Полученные результаты позволяют предположить корреляцию индекса МТ2/МТ1 с течением острого панкреатита, что в дальнейшем поможет разработать количественную шкалу прогноза деструкции ткани поджелудочной железы.
Ключевые слова: поджелудочная железа, мелатонин, экспериментальный панкреатит, лимфоциты.
SUMMARY
D. U. Semenov, V. B. Vasilyev, E. E. Zueva, A. G. Tonoyan, L. G. Shapkina, M. V. Gorchakova, A. V. Sokolov
Expression of melatonin receptors on lymphocytes and pancreas cells during experimental (model) acute pancreatitis
The authors have studied expression of melatonin receptors in the lymphocytes and pancreas cells during experimental acute pancreatitis of mild and severe forms. The lowest ratio bertween melatonin receptors (MTR2/MTR1) has been found to be typical of severe pancreatitis. These results inply a correlation of the MTR2/MTR1 ratio with the course of acute pancreatitis — the fact that may be of help in development of a quantitative prediction scale of the pancreatic tissue destruction.
Key words: pancreas, melatonin, experimental pancreatitis, lymphocytes.
© А. В. Стабредов, Э. С. Кафаров, 2012 г. УДК 616.61-053.9-073.756.8
А. В. Стабредов, Э. С. Кафаров
ИЗМЕНЕНИЕ ПАРАМЕТРОВ ЧАШЕЧНО-ЛОХАНОЧНОЙ СИСТЕМЫ ПОЧЕК ЧЕЛОВЕКА В ПРОЦЕССЕ ИНВОЛЮЦИИ ПО ДАННЫМ КОМПЬЮТЕРНО-ТОМОГРАФИЧЕСКОГО, УЛЬТРАЗВУКОВОГО И МОРФОЛОГИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ
Астраханская государственная медицинская академия
Функция почек зависит от нормального оттока мочи из органа. В связи с этим вопросы морфологии чашечно-лоханочной системы весьма актуальны [4, 5]. Инволютивные изменения почечных чашечек и лоханки освещены лишь в единичных источниках. Изучение данного вопроса имеет не только теоретическое, но и практическое значение.
Цель работы — изучить морфологические изменения почечных чашечек и лоханки при старении.
Провести сравнительный анализ инволютивных изменений параметров почек и чашечно-лоханоч-ного комплекса при старении.
Проводилось измерение почек и их чашечно-ло-ханочной системы у 103 людей от 30 до 89 лет. Изготовлено 100 коррозионных слепков чашечно-лоха-ночной системы почек. Слепки погружали в градуированные цилиндры с водой и по объему вытесненной воды определяли объем чашечно-ло-ханочной системы почки. Гистологические срезы почечных чашечек и лоханки 32 почек человека в возрастном диапазоне от 30 до 83 лет окрашивались гематоксилином-эозином, по ван Гизон и Мал-лори. Проводилось измерение слоев стенки почечной лоханки с помощью окуляр-микрометра и мор-фометрической линейки МОВ-15М. Изучены данные ультразвукового исследования почек 66 людей (132 почки) в возрасте от 20 до 80 лет. Использовался сканер «Siemens ЕС 9-4 Ultrasound Transducer Sonoline G 60 S» (Германия) конвексным датчиком с частотой 3,5 МГц в реальном режиме на базе диагностического отделения Красноярской центральной районной больницы (УЗИ проводилось по показаниям, не связанным с патологией почек). Изучены компьютерные томограммы 125 человек (250 почек) в возрастном диапазоне от 22 до 85 лет, выполненные на базе медицинского центра
