CC BY
128
Bernnux&TyWT/Proceedmgs of VSUET, Т. 80, № 1, 2018-
Оригинальная статья/Original article_
УДК 664
DOI: http://doi.org/10.20914/2310-1202-2018-1-199-205
Исследование аминокислотного состава кормовой добавки _методом ионообменной хроматографии_
Андрей А. Волнин 1 [email protected]
Алексей В. Мишуров 1 [email protected]
Александра А. Михина 2 [email protected]
Алиса А. Коротаева 3 [email protected]
Александр В. Севко 1 [email protected]_
1 Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Федеральный научный центр животноводства - ВИЖ имени академика Л.К. Эрнста», Городской округ Подольск, поселок Дубровицы, д. 60, Московская область, Россия
2 Московский государственный технический университет имени Н.Э. Баумана (национальный исследовательский университет), 2-я Бауманская ул., д. 5, стр. 1, Москва, Россия
3 Воронежский государственный университет инженерных технологий, пр-т Революции, 19, г. Воронеж, 394036, Россия Реферат. Определение содержания аминокислот в кормах для сельскохозяйственных животных имеет большую научно-практическую значимость. Это необходимо для более точной детализации норм кормления и балансирования рационов животных по содержанию аминокислот и белка, а, следовательно, способствует повышению продуктивности животных. В данной работе рассмотрены вопросы применения ионообменной хроматографии с постколоночной дериватизацией проб нингидрином для исследования аминокислотного состава кормов для сельскохозяйственных животных. Определено общее содержание аминокислот (кроме триптофана) в кормовой добавке. Концентрация треонина составила 3,26 г/100г протеина, лейцина - 6,43, изолейцина - 3,24, валина - 4,77, метионина - 2,18, лизина - 2,90, фенилаланина - 3,16, гистидина - 2,03, тирозина - 2,33, суммы аспарагина и аспарагиновой кислоты - 6,76, серина - 3,97, суммы глутамина и глутаминовой кислоты
- 12,04, глицина - 6,00, аланина - 6,71, аргинина - 6,93, пролина - 3,08, суммы цистина и цистеина - 1,38. Выполнена оценка полноценности добавки по содержанию незаменимых аминокислот в сравнении с референтным белком ФАО/ВОЗ и определены лимитирующие аминокислоты. Аминокислотный скор треонина составил 81,5%, лейцина - 91,9%, изолейцина - 81%, валина - 95,4%, лизина - 52,7%, суммы фенилаланина и тирозина - 91,5%, суммы метионина и цистеина
- 101,7%. Определено соотношение незаменимых и заменимых аминокислот: 0,57. Установлена относительно низкая биологическая ценность (относительно референтного белка ФАО/ВОЗ) исследованной кормовой добавки по содержанию незаменимых аминокислот. Данная добавка может быть использована в кормлении сельскохозяйственных животных в комплексе с другими кормовыми компонентами, содержащими свободные аминокислоты и / или белки, в составе рациона,
сбалансированного по содержанию незаменимых аминокислот._
Ключевые слова: аминокислоты, ионообменная хроматография, аминокислотный скор, постколоночная дериватизация,
Determination of feedstuff amino acids composition by ion-exchange _chromatography_
Andrei A. Volnin 1 [email protected]
Aleksei V. Mishurov 1 [email protected]
Aleksandra A. Mikhina 2 [email protected]
Alisa A. Korotaeva 3 [email protected]
Aleksandr V. Sevko 1 [email protected]
1 Federal Science Center for Animal Husbandry n.a. L.K. Ernst, Podolsk Municipal District, Dubrovitsy, 60, Moscow Region, Russia
2 Moscow State Technical University n.a. N.E. Bauman, 2 Baumanskaya str., 5/1, Moscow, Russia
3 Voronezh state university of engineering technologies, Revolution Av., 19 Voronezh, 394036, Russia_
Summary. Determination of animal feeds amino acids composition is the very important part of agricultural sciences and livestock management. This is necessary for normalization and balanced of farm animal's diets parameters. Advances in husbandry techniques are making in response to the needs for rearing high genetic merit livestock. The nutrition of livestock has a critical role in these developments and is an element which needs to be continually updated as new scientific information becomes available. This article is devoted to the use of ion-exchange chromatography with post-colum derivatization by ninhydrin in the study of the amino acid composition and evaluation of the biological value of livestock feedstuff components. The amino acid composition (except tryptophan) of the livestock feed-stuff component is presented for threonine - 3.26 g/100g of protein, leucine - 6.43, isoleucine - 3.24, valine -4.77, methionine - 2.18, lysine - 2.90, phenylalanine - 3.16, histidine - 2.03, tyrosine - 2.33, sum of asparagine and aspartate - 6.76, serine - 3.97, sum of glutamine and glutamic acid - 12.04, glycine - 6.00, alanine - 6.71, arginine - 6.93, proline - 3.08, sum of
fl^a цнтнpoвaннa For citation
Boothh A.A., MumypoB A.B., MnxHHa A.A., KopoTaeBa A.A., Volnin A.A., Mishurov A.V., Mikhina A.A., Korotaeva A.A., Sevko A.V.
CeBKo A.B. HccnegoBaHHe aMHHoKHc^oraoro cocTaBa kopmoboh ao6aBKH Determination of feedstuff amino acids composition by ion-exchange
MeTogoMHoHoo6MeHHoñ xpoMarorpa^HH // BecraHK BrYHT. 2018. T. 80. chromatography. Vestnik VGUIT [Proceedings of VSUET]. 2018. vol. 80.
№ 1. C. 199-205. doi:10.20914/2310-1202-2018-1-199-205 no. 1. pp. 199-205. (in Russian). doi:10.20914/2310-1202-2018-1-199-205
Efl Agris 199
Qernwx&TyMT/Proœedmgs of VSUET, Т. 80, № 1, 2018-
cystine and cysteine - 1.38. Biological value of feedstuff component compared with the "ideal" protein (FAO WHO) is estimated, limiting amino acids were found. The amino acid score was calculated: for threonine - 81.5%, leucine - 91.9%, isoleucine - 81%, valine - 95.4%, lysine - 52.7%, phenylalanine and tyrosine sum - 91.5%, methionine and cysteine sum - 101.7%. Feedstuff component had a low level of essential amino acids in compare with "ideal" protein (FAO WHO). Feedstuff component can be used
for livestock nutrition as a component of essential amino-acid balanced diet._
Keywords: amino acids, ion-exchange chromatography, post-colum derivatization, amino acid score, feed-stuff component
Введение
Повышение потребности населения в продуктах питания является основным стимулом развития отрасли животноводства. При этом одной из тенденций является повышение продуктивности сельскохозяйственных животных за счет использования молекулярно-генетических методов селекции в сочетании с оптимизацией условий содержания, обеспечивающей наиболее полную реализацию высокого генетического потенциала животных. Повышение эффективности кормления является одним из решающих факторов в этой системе. Кормление животных в настоящее время динамично развивается благодаря поступлению новых экспериментальных данных о составе и качестве кормов и их конверсии в организме животных [1-3, 18, 19].
Аминокислоты являются одними из ключевых компонентов питания животных, как в составе белковой диеты, так и в качестве дополняющих продуктов [1, 4]. Считается, что белок не является питательным веществом. Животные нуждаются в аминокислотах, а не в белке как таковом. Качество кормового белка определяется его потенциалом для покрытия физиологических требований в отношении аминокислот на поддержание жизнедеятельности и продуктивность (рост, воспроизводство, моло-кообразование и т. д.). Потребность в кормовом белке зависит от вида животных, возраста, генотипа и пола. Отсюда следует, что существуют два важных фактора, определяющих качество белка, а) профиль аминокислот, который представляет собой соотношение незаменимых аминокислот в белке и Ь) их усвояемость [1]. В рационе животных возможен недостаток одной или нескольких незаменимых аминокислот, необходимых для поддержания оптимального роста и здоровья [1, 4]. Исследование аминокислотного состава кормов имеет крайне важную роль в оптимизации систем кормления, детализации и нормировании рационов сельскохозяйственных животных [5-7].
Наиболее распространенными методами количественного аминокислотного анализа являются высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ) и ионообменная хроматография с постколоночной дериватизацией
проб нингидрином. Однако в практике рутинного анализа, при значительном количестве исследуемых проб метод ионообменной хроматографии имеет ряд существенных преимуществ по сравнению с ВЭЖХ: более высокая точность определения, воспроизводимость результата и надежность (высокая производительность этого метода является следствием того, что большинство загрязнений быстро перемещаться по колонке и выходят из системы, прежде чем начинается разделение аминокислот), а также более простая подготовка проб (по сравнению с методами предколоночной дериватизации) [8-14].
Метод ионообменной хроматографии с постколоночной дериватизацией проб нин-гидрином стандартизирован Международной организацией по стандартизации (EN ISO 13903), а также Регламентом Европейской Комиссии № 152/2009; рекомендован к использованию для анализа аминокислотного состава сырья и кормов, а также контроля полноценности аминокислотного питания животных Европейской федерацией производителей кормовых добавок и кормов для животных (FEFANA, фр. Fédération Européenne des Fabricants d'Adjuvants pour la Nutrition Animale) [1].
В данной работе рассмотрены вопросы применения ионообменной хроматографии с постколоночной дериватизацией проб нин-гидрином для исследования аминокислотного состава кормов для сельскохозяйственных животных. Определено общее содержание аминокислот (кроме триптофана) в кормовой добавке на основе продуктов переработки отходов мясной промышленности, выполнена оценка полноценности добавки по содержанию незаменимых аминокислот в сравнении с референтным белком ФАО/ВОЗ и определены лимитирующие аминокислоты.
Материалы и методы
Для подготовки проб использовали кислотный гидролиз в растворе 6 М соляной кислоты, с добавлением норлейцина в качестве внутреннего стандарта. Гидролиз выполняли в термостате при 110 °С в течении 24 ч. Для определения цистина и метионина пробы окисляли 50% раствором надмуравьиной кислоты, которую предварительно готовили из муравьиной кислоты и перекиси водорода, с добавлением фенола.
Анализ выполняли на системе высоко эффективной жидкостной хроматографии (HPLC) Shimadzu LC-20 Prominence (Япония), с автоматическим реакционным модулем для пост-колоночной дериватизации нингидрином АРМ-1000 (Sevko&Co, Россия) и колонкой с ионообменной смолой 4,6 x 150 мм (Sevko&Co, Россия). Использовали готовые буферные растворы для разведения образца и элюирования (Sevko&Co, Россия). Расчет концентрации выполняли по стандартному образцу аминокислот (Sykam, Германия).
Определение содержания сырого протеина выполняли методом Кьельдаля [15].
Для расчёта аминокислотного скора белка аминокислотный скор каждой незаменимой аминокислоты в «идеальном» референтном белке ФАО/ВОЗ [16] принимали за 100%, а в исследуемом - определяли процент соответствия. Если значение скора для определенной аминокислоты ниже 100%, данную аминокислоту определяли как лимитирующую.
Результаты и обсуждение Метод ионообменной хроматографии с постколоночной дериватизацией работает на основе того факта, что аминокислоты являются катионами при рН 2,2, удерживаются ионообменной смолой колонки и при элюирова-нии градиентом с повышением рН смываются с нее согласно изоэлектрическим точкам молекул. На выходе с колонки разделившиеся аминокислоты вступают в специфическую реакцию с нингидрином, при высокой температуре, с образованием окрашенного продукта,
нингидрин „ .
Nmhydiin буферные растворы
Г7 BirfVr Sotuliom
автосамплер Autoumpirf ^^
Ш0 и
Ржокипл
Рисунок 1. Общая схема аминокислотного анализатора [1] Figure 1. The General scheme of amino acid analyzer [1]
который количественно определяют используя фотометрическое детектирование при 440 нм -для пролина и 570 нм - для всех других аминокислот [1, 10, 12].
Анализ аминокислот проводят после кислотного гидролиза белков (кроме триптофана). Для более полного нахождения метионина и цистеина (с димером последнего - цистином), кислотный гидролиз проводят с предварительно окисленными (количественно) серосодержащими радикалами аминокислотных остатков. В результате образуются соответствующие продукты окисления - метионинсульфон и цистеиновая кислота. Данный метод позволяет определить 17 протеиногенных аминокислот (за исключением триптофана, разрушающегося при кислотном гидролизе, аспарагина и глута-мина, которые гидролизуются в аспарагиновую и глутаминовую кислоты, соответственно). Сумма определяемых аминокислот включает свободные аминокислоты и аминокислоты, которые были связанные в составе белка до гидролиза [12]. Схема аминокислотного анализатора представлена на рисунке 1.
В исследуемой кормовой добавке было установлено содержание сырого протеина: 18,29%. Было определено содержание незаменимых и заменимых аминокислот. Аминокислотный состав кормовой добавки представлен в таблице 1.
Был рассчитан аминокислотный скор, соотношение незаменимых и заменимых аминокислот и определены лимитирующие аминокислоты. Результаты исследования представлены в таблице 2.
Ta6n^a 1.
AMHHOKHCHOTHHH cocTaB KOPMOBOH go6aBKH, r/100 r. npoTeuHa
Table 1.
Amino acid composition of feed additive, g/100 g of protein
Незаменимые аминокислоты | Essential amino acids
THR LEU ILE VAL MET LYS PHE HIS
3,26 6,43 3,24 4,77 2,18 2,90 3,16 2,03
Заменимые аминокислоты | Non-essential amino acids
TYR ASP SER GLU GLY ALA ARG PRO CYS
2,33 6,76 3,97 12,04 6,00 6,71 6,93 3,08 1,38
Ta6n^a 2.
AMHHOKHCHOTHHH CKOp H COOTHOmeHHe He3aMeHHMbIX H 3aMeHHMbIX aMHHOKHCHOT
Table 2.
Amino acid score and ratio of essential and non-essential amino acids
«Идеальный белок» ФАО/ВОЗ | «Ideal protein FAO/WHO»[9] Незаменимые/заменимые essential/non-essential
THR LEU ILE VAL MET CYS LYS PHE TYR
4 7 4 5 3,5 5,5 6
Аминокислотный скор | Amino acid score, %
81,5* 91,9* 81,0* 95,4* 101,7 52,7* 91,5* 0,57
* - лимитирующая аминокислота
Исходя из результатов очевидно, что исследуемая кормовая добавка наименее полноценна по содержанию лизина, скор этой аминокислоты составил 52,7%. Среди основных протеиногенных аминокислот, лизин является одной из ключевых незаменимых аминокислот [1]. Лизин необходим для синтеза гемоглобина и нуклеопротеидов [17].
Аминокислотный скор изолейцина, лейцина и валина составил 81; 91,9 и 95,4% соответственно. Изолейцин, лейцин и валин являются аминокислотами, имеющими разветвленные алифатические цепи в радикалах. Их метаболизм интересен тем, что данные аминокислоты имеют общие пути катаболизма и, следовательно, могут создавать помехи друг другу при усвоении. Лейцин является сильным регулятором катаболизма аминокислот с разветвленной цепью, поэтому избыток лейцина в рационе нежелателен для животных [1, 3-4]. Лейцин и изолейцин обладают сильно выраженным кетогенным свойством. Валин связан с обменом холестерола, каротиноидов, метилмасляных кислот, служит источником образования гликогена и кофермента А [17]. Аргинин является незаменимым для молодых животных [1]. Установлено, что кормовая добавка содержит аргинин в количестве 6,93 г./100г протеина. Аргинин, превращаясь в орнитин (орнитиновый цикл, совокупность процессов образования мочевины), участвует в обезвреживании конечных продуктов
азотистого обмена (аммиак), связан с функцией паращитовидных желез, служит источником образования креатина и креатинина, играя важную роль в энергетическом обмене [17]. Аминокислотный скор треонина составил 81,5%. Треонин, превращаясь в глицин, используется для синтеза протопорфирина, холестерола, жирных кислот и углеводов. В обмене веществ он тесно связан с лейцином и является антагонистом метионина и серина [17]. Аминокислотный скор суммы фенилаланина и тирозина составил 91,5%. Фенилаланин и тирозин являются «взаимо-превращаемыми» аминокислотами, имеющиеся данные показывают, что тирозин может частично обеспечить потребность в фенилаланине и наоборот [1]. Фенилаланин и тирозин служат источником образования в организме таких гормонов как тироксин, адреналин и норадрена-лин, а также пигментов меланинов. Нарушение обмена этих аминокислот сопровождается тяжелыми расстройствами общего обмена веществ, приводящими не только к снижению продуктивности, но и к гибели животных [17].
В представленной добавке аминокислотный скор более 100% был установлен лишь у суммы метионина и цистеина. Метионин участвует в ряде важных биосинтетических процессов, участвуя в обмене холина, креатина и адреналина через высвобождение метильной группы [1, 17]. Метионин является первой аминокислотой, встраивающейся в рибосомы при биосинтезе
полипептидных цепей белков в клетках [10]. В настоящее время гистидин рассматривается как незаменимая аминокислота [1]. Установленное содержание гистидина в исследованной кормовой добавке составило 2,03 г./100г протеина. Гистидин необходим для синтеза гемоглобина, входит в состав карнозина и ансерина, содержащихся в мышцах. При декарбоксилировании гистидина образуется гистамин, являющийся физиологически активным соединением [17].
Полученные результаты свидетельствуют об относительно низкой биологической ценности (относительно референтного белка ФАО/ВОЗ) исследованной кормовой добавки по содержанию незаменимых аминокислот. Данная добавка может быть использована в кормлении сельскохозяйственных животных в комплексе с другими кормовыми компонентами, содержащими свободные аминокислоты и/или белки, в составе рациона, сбалансированного по содержанию незаменимых аминокислот.
Заключение
Исследование аминокислотного состава кормовых компонентов имеет важное значение в рационализации норм кормления сельскохозяйственных животных и балансировании рационов. В данной работе выполнен анализ
ЛИТЕРАТУРА
1 Dalibard P., Hess V., Tutour L., Peisker M. et al. Amino Acids in Animal Nutrition // FEFANA Publication, FEFANA. Brussels, 2014.
2 Эрнст Л.К., Зиновьева Н.А. Биологические проблемы животноводства в XXI веке. М., 2008.
3 D'Mello J.P. Felix Amino acids in animal nutrition, Second Edition // CABI Publishing. 2003
4 Karau A, Grayson I. Amino acids in human and animal nutrition//AdvBiochemEngBiotechnol. 2014. № 143. P. 189-228. doi: 10.1007/10 2014 269.
5 de Sousa Prado J.P., Oliveira Cavalheiro J.M., da Silva J.A., Cavalheiro T.B. et al. Amino acid profile and percent composition of meals and feeds used in shrimp fanning// Gaia Scientia. 2016. № 10,4. P. 347-360.
6 Purwin C., Fijalkowska M., Lipinski K„ Wierzbowska J. et al. Changes in amino acid composition during ensiling lucerne and red clover in round bales// J. Elem. 2015. № 20.4. P. 965-973. doi: 10.5601/ jelem.2015.20.1.863.
7 Adejumo I. O., Adetunji С. O., Ogundipe K., Osademe S. N. Chemical composition and amino acid profile of differently processed feather meal// Journal of Agricultural Sciences, 2016. № 61,3. P. 237-246. doi: 10.2298/JAS1603237A.
8 Ween0., Stangeland J.K., FyllingT.S., Aas G.H. Nutritional and functional properties of fishmeal produced from fresh by-products of cod (Gadus morhua L.) and saithe (Pollachius virens)// Heliyon. 2017. № 3, 7. doi:10.1016/j.heliyon.2017.e00343.
аминокислотного состава белковой добавки методом ионообменной хроматографии с постколоночной дериватизацией проб. Определено общее содержание аминокислот (кроме триптофана) в кормовой добавке, выполнена оценка полноценности добавки по содержанию незаменимых аминокислот в сравнении с референтным белком ФАО/ВОЗ и определены лимитирующие аминокислоты. Аминокислотный скор треонина составил 81,5%, лейцина - 91,9%, изолейцина -81%, валина - 95,4%, лизина - 52,7%, суммы фенилаланина и тирозина - 91,5%.
Полученные результаты свидетельствуют об относительно низкой биологической ценности (относительно референтного белка ФАО/ВОЗ) исследованной кормовой добавки по содержанию незаменимых аминокислот. Данная добавка может быть использована в кормлении сельскохозяйственных животных в комплексе с другими кормовыми компонентами, содержащими свободные аминокислоты и/или белки, в составе рациона, сбалансированного по содержанию незаменимых аминокислот.
Благодарности
Работа выполнена при финансовой поддержке фундаментальных научных исследований ФАНО РФ, номер государственного учета НИОКТР АААА-А18-118021590136-7
9 Silvao C.F., Nunes A.J.P. Effect of dietary amino acid composition from proteins alternative to fishmeal on the growth of juveniles of the common snook, Centropomus undecimalis// R. Bras. Zootec. 2017.
№1.46. P. 7
10Шапошников M.H., Севко A.B., Севко ДА., Волнин А.А. и др. Анализ аминокислотного состава молока коров симментальской породы// Ветеринария, зоотехния и биотехнология. 2015. № 11. С. 70-75
11 Volnin A.A., Sheraliev F.D., Sliaposhnikov M.N., Zaitsev S.Y. et al. Amino acid score of milk proteins of the interspecific hybrids of argali and domestic sheeps // RJOAS. 2017. № 4,64." P. 240-247. doi: 10.18551/rjoas.2017-04.31.
12 Волнин А. А., Шералиев Ф.Д., Шапошников М.Н., Зайцев С.Ю. и др. Применение ионообменной хроматографии при оценке биологической ценности белков молока овец/ /Актуальные вопросы биологической физики и химии. 2017. № 1,2. С. 494-498.
13 Jajic I., Krstovic S., Glamocic D., Jaksic S. et al. Validation of an HPLC method for the determination of amino acids in feed // J. Serb. Chem. Soc. 2013. № 78, 6. P. 839-850.
Dai Z, Wu Z, Jia S, Wu G Analysis of amino acid composition in proteins of animal tissues and foods as pre-column o-phthaldialdehyde derivatives by HPLC with fluorescence detection// J Chromatogr B Analyt-Technol Biomed Life Sci. 2014. № 27. Р. 964, 116.. doi: 10.1016/j.jchromb.2014.03.025.
15 ISO 5983-1:2005 Feeds, mixed feeds and raw material. Determination of mass fraction of nitrogen and calculation of mass fraction of crude protein. Part 1. Kjeldahl method
16 FAO. Energy and protein requirements. Report of a Joint FAO/WHO/UNU Expert Consultation. Geneva: World Health Organization, 1985. 112 p.
17 Алиев А. А. Обмен веществ у жвачных животных. М.: НИЦ «Инженер», 1997
18 Дерканосова А. А., Коротаева А. А. Особенности российского рынка комбикормов и перспективы его развития // Экономика. Инновации. Управление качеством. 2013. № 3. С. 107.
1') Дерканосова А.А. Анализ перспективы производства отечественных кормовых препаратов // Вестник Воронежского государственного университета инженерных технологий. 2012. № 2. С. 194-196.
REFERENCES
1 Dalibard P., Hess V., Tutour L., Peisker M. et al. Amino Acids in Animal Nutrition // FEFANA Publication, FEFANA. Brussels, 2014.
2 Ernst L.K., Zinovieva N.A.Biologicheskie problem zhivotnovodstva [Biological aspects of livestock husbandry in XXI] Moscow, 2008 (in Russian)
3 D'Mello J.P. Felix Amino acids in animal nutrition, Second Edition. CABI Publishing. 2003
4 Karau A, Grayson I. Amino acids in human and animal nutrition. AdvBiochemEngBiotechnol. 2014.no. 143. pp. 189-228. doi: 10.1007/10 2014 269.
5 de Sousa Prado J.P., Oliveira Cavalheiro J.M., da Silva J.A., Cavalheiro T.B. et al. Amino acid profile and percent composition of meals and feeds used in shrimp fanning. Gaia Scientia. 2016. no. 10,4. pp. 347-360.
6 Purwin C., Fijalkowska M., Lipinski K., Wierzbowska J. et al. Changes in amino acid composition during ensiling lucerne and red clover in round bales. J. Elem. 2015. no. 20.4. pp. 965-973. doi: 10.5601/jelem.2015.20.1.863.
7 Adejumo I. O., Adetunji С. O., Ogundipe K„ Osademe S. N. Chemical composition and amino acid profile of differently processed feather meal. Journal of Agricultural Sciences, 2016. no. 61,3. pp. 237-246. doi: 10.2298/JAS1603237A.
8 Ween0., Stangeland J.K., FyllingT.S., Aas G.H. Nutritional and functional properties of fishmeal produced from fresh by-products of cod (Gadus morhua L.) and saithe (Pollachius virens). Heliyon. 2017. no. 3, 7. doi:10.1016/j.heliyon.2017.e00343.
СВЕДЕНИЯ ОБ АВТОРАХ
9 Silvao C.F., Nunes A.J.P. Effect of dietary amino acid composition from proteins alternative to fishmeal on the growth of juveniles of the common snook, Centropo-mus undecimalis. R. Bras. Zootec. 2017. no. 1.46. pp. 7
10 Shaposhnikov M.N., Sevko A.V., Sevko D.A., Volnin A. A. et al. The analysis amino acid composition of milk of simmental breed cows. Veterinariya, zootech-niya i biotechnologiya [Veterinary, zootechny and biotechnology] 2015. no. 11. pp. 70-75 (in Russian)
11 Volnin A.A., Sheraliev F.D., Shaposhnikov M.N., Zaitsev S.Y. et al. Amino acid score of milk proteins of the interspecific hybrids of argali and domestic sheeps. RJOAS. 2017. no. 4,64'pp. 240-247. doi: 10.18551/rjoas.2017-04.31.
12 Volnin A.A., Sheraliev F.D., Shaposhnikov M.N., Zaitsev S.Y. et al. pplication of ion-exchange chromatography in assessing the biological value of sheep milk proteins. Aktual'nye voprosy biologicheskoi fiziki i khimii [Modern Trends in Biological Physics and Chemistry] 2017, no. 1, 2, pp. 494-498 (in Russian)
13 Jajic I., Krstovic S., Glamocic D„ Jaksic S. et al. Validation of an HPLC method for the determination of amino acids in feed. J. Serb. Chem. Soc. 2013. no. 78, 6. pp. 839-850.
14Dai Z, Wu Z, Jia S, Wu G Analysis of amino acid composition in proteins of animal tissues and foods as pre-column o-phthaldialdehyde derivatives by HPLC with fluorescence detection. J Chromatogr B Analyt-Technol Biomed Life Sci. 2014. no. 27. pp. 964, 116.. doi: 10.1016/j.jchromb.2014.03.025.
15ISO 5983-1:2005 Feeds, mixed feeds and raw material. Determination of mass fraction of nitrogen and calculation of mass fraction of crude protein. Part 1. Kjeldahl method
16FAO. Energy and protein requirements. Report of a Joint FAO/WHO/UNU Expert Consultation. Geneva, World Health Organization, 1985. 112 p.
Aliev A.A. Obmen veshchestv u zhvachnykh [Metabolism in ruminants] Moscow, «Injener», 1997 (in Russian)
18Derkanosova A. A., Korotaeva A. A. Features of the Russian market of animal feed and its development prospects. Ekonomika. Innovatsii. Upravlenie kachestvom [Economy. Innovation. The management of quality]. 2013. no. 3. pp. 107. (inRussian)
19 Derkanosova A. A. Analysis of the prospects for the production of domestic fodder preparations. Vestnik VGUlT [Proceedings of Voronezh state university of engineering technologies] 2012. no. 2. pp. 194-196. (in Russian)
INFORMATION ABOUT AUTHORS
Андрей А. Волнин научный сотрудник, отдел физио- Andrei A. Volnin researcher, department of physiology
логии и биохимии сельскохозяйственных животных, and biochemistry of farm animals, L.K. Ernst Federal Sci-
Федеральный научный центр животноводства - ВИЖ ence Center for Animal Husbandry, Podolsk Municipal
имени академика Л.К. Эрнста, Городской округ По- District, Dubrovitsy, 60, Moscow Region, 142132, Russia,
дольск, поселок Дубровицы, д. 60, Московская область, [email protected] 142132, Россия, [email protected]
Алексей В. Мишуров кс-хн., старший научный сотрудник, Aleksei V. Mishurov Cand. Sci. (Agr.), senior researcher,
отдел физиологии и биохимии сельскохозяйственных жи- department of physiology and biochemistry of farm animals,
вотных, Федеральный научный центр животноводства - L.K. Ernst Federal Science Center for Animal Husbandry,
ВИЖ имени академика Л.К. Эрнста, Городской округ По- Podolsk Municipal District, Dubrovitsy, 60, Moscow Region,
дольск, поселок Дубровицы, 60, Московская область, 142132, Russia, [email protected] 142132, Россия, [email protected]
Александра А. Михина магистрант, кафедра информационных систем и технологий, Московский государственный технический университет имени Н.Э. Баумана (национальный исследовательский университет), 2-я Бауманская ул., д. 5, стр. 1, Москва, 105005, Россия, [email protected]
Алиса А. Коротаева к.т.н., инженер-исследователь, Центр коллективного пользования «Контроль и управление энергоэффективных проектов», Воронежский государственный университет инженерных технологий, пр-т Революции, 19, г. Воронеж, 394036, Россия, [email protected] Александр В. Севко младший научный сотрудник, отдел физиологии и биохимии сельскохозяйственных животных, Федеральный научный центр животноводства - ВИЖ имени академика Л.К. Эрнста, Городской округ Подольск, поселок Дубровицы, д. 60, Московская область, 142132, Россия, [email protected]
КРИТЕРИЙ АВТОРСТВА Андрей А. Волнин проведение исследований, выполнение расчётов, оценка результатов, обзор литературных источников по исследуемой проблеме, написание статьи, корректировал рукопись до подачи в редакцию несет ответственность за плагиат Алексей В. Мишуров обзор литературных источников по исследуемой проблеме, планирование исследований, оценка результатов
Александра А. Михина проведение исследований, подготовка реактивов и растворов
Алиса А. Коротаева консультация в ходе исследования Александр В. Севко планирование исследований, консультация в ходе исследования
Aleksandra A. Mikhina master student, department of information systems and technologies, Bauman Moscow State Technical University, 2 Baumanskaya str., 5/1, Moscow, 105005, Russia, [email protected]
Alisa A. Korotaeva Cand. Sci. (Engin.), engineer-researcher, Center for Collective Use "Monitoring and Management of Energy Efficient Projects", Voronezh state university of engineering technologies, Revolution Av., 19 Voronezh, 394036, Russia, [email protected] Aleksandr V. Sevko jr. researcher, department of physiology and biochemistry of farm animals, L.K. Ernst Federal Science Center for Animal Husbandry, Podolsk Municipal District, Dubrovitsy, 60, Moscow Region, 142132, Russia, [email protected]
CONTRIBUTION Andrei A. Volnin conducted an experiment, performed computations, processing of results, review of the literature on an investigated problem, wrote the manuscript, correct it before filing in editing and is responsible for plagiarism Aleksei V. Mishurov review of the literature on an investigated problem, experiment design, processing of results
Aleksandra A. Mikhina conducted an experiment, reagents and solutions managment
Alisa A. Korotaeva consultation during the study Aleksandr V. Sevko experiment design, consultation during the study
CONFLICT OF INTEREST
The authors declare no conflict of interest.
КОНФЛИКТ ИНТЕРЕСОВ
Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
ПОСТУПИЛА 24.01.2018 ПРИНЯТА В ПЕЧАТЬ 13.02.2018
RECEIVED 1.24.2018 ACCEPTED 2.13.2018
