CC BY
3
УДК IM.777-078.73
П. Ю. Кулаге, Э. В. Жукова
ИСПОЛЬЗОВАНИЕ РЕАКЦИИ НЕЙТРАЛИЗАЦИИ АНТИТЕЛ ПРИ ИССЛЕДОВАНИИ ВОДЫ
Ашхабадский институт эпидемиологии и гигиены им. С. М. Дурсуновой
Изучая процессы самоочищения Каракумского канала в районе Ашхабада, мы столкнулись со следующим фактом: несмотря на отсутствие организованного сброса сточных вод, бактериальное загрязнение воды канала, судя по содержанию санитарно-показательных микроорганизмов, в отдельные периоды было довольно значительным (коли-индекс до 90 ООО), однако процент выделения энтеропатогенных бактерий оказался чрезвычайно мал при неблагополучной эпидемиологической ситуации среди населения в отношении кишечных инфекций.
Всего исследовано 180 проб воды, нз 4867 культур, подвергнутых идентификации на принадлежность к патогенным энтеробактериям, выявлена 1 культура S. newport, 2 fкультуры сальмонелл редких групп <0-42) и 1 культура идентифицирована как шигеллы Зонне. При выделении из воды энтеропатогенных бактерий пользовались средами накопления — хлормагниевой в модификации Г. П. Калины и с охмеленным суслом в модификации Ю. Г. Талаевой с дальнейшим пересевом материала на плотные дифференциально-диагностические среды — висмут-сульфитный агар, Плоскирева, Эндо. Микрофлору, выросшую на чашках, после отбора колоний для бактериологического анализа смывали 5 мл нейтрального физиологического раствора, взвесь в пробирках кипятили, центрифугировали и надосадочную жидкость исследовали в реакции нейтрализации антител (РИА).
РИА ставили со стабильными эритроцитными производственными диа-гностикумами из шигелл Зонне, Флекснер 2, сальмонеллезными О-диагно-стикумами 1,4, 12, 9 и ВИ. При постановке РИА пользовались техникой, предложенной Леви и Егоровой (М. Н. Егорова; М. И. Леви и соавт.).
Из 180 проб воды сальмонеллезные и шигеллезные культуры обнаружены в 3, с помощью РИА антигены возбудителей кишечной группы выявлены в 25 пробах. При этом одновременное наличие в воде антигенов 0-9 и ВИ наблюдалось в 7 (3,8%) случаях, что давало возможность косвенно судить о присутствии в воде возбудителей брюшного тифа. В 3 (1,6%) случаях найдены антигены группы В. Антиген Флекснер 2 серологически обнаружен в 7 (3,8%) случаях. Бактериологически возбудителей этих инфекций выделить не удалось, в воде обнаружен лишь один возбудитель дизентерии Зонне, в то время как в_РНА его антигены определены в 5 (2,7%) пробах.
Помимо Каракумского канала, мы проводили исследования арычной и водопроводной воды в одном из колхозов Ашхабадского района. Колхоз находился в зоне влияния канала и характеризовался благополучной эпидемической обстановкой в отношении кишечных инфекций. Исследовано 68 проб арычной и 50 проб водопроводной воды с применением указанных выше методик и диагностикумов. Как из арычной, так и из водопроводной воды энтеропатогенные бактерии не были выделены, в то время как с помощью РИА в арычной воде в 1 (1,5%) случае обнаружены антигены 9 и ВИ, в 2 (2,9%) случаях — антигены дизентерии Флекснер 2 и в 5 (7,3%) случаях — антигены дизентерии Зонне. Единичные находки антигенов 9 и ВИ и дизентерии Флекснер 2 были и в водопроводной воде, в основном отвечавшей требованиям ГОСТа 18963-73 «Вода питьевая». Из водопроводной воды выделен также антиген 0-9, его наличие в воде мы рассматривали как признак, характерный для сальмонелл группы D, вместе с тем не исключено, что он косвенно указывал на наличие в воде
возбудителей брюшного тифа, частично или полностью утративших способность к продукции антигена ВИ.
При исследовании в РНА с теми же диагностикумами 100 непатогенных и условно-патогенных штаммов из семейства Enterobacteriaceae, выделенных из воды, получены отрицательные результаты. На высокую специфичность РНА при исследовании воды и фекалий указывают и проведенные ранее работы. {
Из изложенного видно, что как косвенный показатель наличия в воде возбудителей кишечных инфекций РНА более чувствительна, чем бактериологический метод. Наряду с высокой чувствительностью она менее трудоемка, сокращает сроки исследования, обеспечивает работу с обеззараженным материалом. Преимущественного обнаружения антигенов возбудителей кишечных инфекций с какой-либо определенной среды накопления (хлормагниевой или охмеленного сусла) не отмечено.
Чаще антигены выделялись из воды Каракумского канала в периоды его наибольшего загрязнения, но иногда обнаруживались и в пробах, казалось бы,, благополучных по санитарно-показательным микроорганизмам (коли-индекс 300—500, индекс энтерококков 70—600), подобное явление отмечено и ранее (Ю. Г. Талаева; Seligmann). Ввиду большого разбавления качество веды канала ниже Ашхабада по санитарно-бактериологи-ческим показателям обычно улучшалось, чего нельзя было сказать на основании результатов РНА.
Энтеропатогенные бактерии и их антигены обнаруживались в воде канала и арыков в весенне-осенний период. Выделение антигенов весной а осенью, а не летом, в период максимального использования этих водоемов, объясняется их сильной инсоляцией в условиях жаркого лета Туркмении. Это подтверждается данными наших экспериментальных исследований. Так, при изучении выживаемости бактерий брюшного тифа в воде < в летних условиях (доза 105 микробных тел в 1 мл, температура воды 30°С) антигены брюшного тифа не всегда определялись в зараженной воде уже на следующий день.
Выводы}
1. РНА может быть рекомендована для исследования воды открытых водоемов и водопроводной воды. С помощью этого метода удалось обнаружить в воде антигены таких возбудителей кишечных инфекций, как брюшной тиф, паратиф В, дизентерия Флекснер 2 и Зонне.
2. По сравнению с бактериологическим методом РНА обладает более высокой чувствительностью, менее трудоемка, обеспечивает работу с обеззараженным материалом и помогает сократить сроки исследования.
3. В некоторых случаях антигены возбудителей кишечных инфекций обнаруживались в пробах воды, казалось бы, благополучных по сани-тарно-бактериологическим показателям, но чаще наблюдался параллелизм, т. е. чем грязнее была вода, тем чаще из нее выделялись антигены энтеропатогенных бактерий.
ЛИТЕРАТУРА
Егорова М. Н. Сравнительная оценка серологического и бактериологического методов
обнаружения возбудителя брюшного тифа. Ашхабад. Дис. канд., 1974. Леей М. И., Степанова С. Л., Егорова М. Н. и др. — Ж. микробиол., 1973, № 5, с. 25—28.
Талаева Ю. Г. — В кн.: Бактериальные кишечные инфекции. Кишинев, 1967, с. 168— 171.
Seligmann /?. — J. Am. Water-Works., Ass., 1965, v. 57, p. 1572.
Поступила 24/X 1978 г. Щ
