CC BY
70
УДК 615.37:616.24-002-036.11-053.2
ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ИНГАЛЯЦИЙ ДЕРИНАТА В КОРРЕКЦИИ ИММУННЫХ НАРУШЕНИЙ У ДЕТЕЙ С ОСТРОЙ ПНЕВМОНИЕЙ
© Шальнева Т.В., Лазарев А.И., Быстрова Н.А., Локтионов А.Л.
Кафедра биологической химии Курского государственного медицинского университета, Курск
E-mail: ala-loc@yandex.ru
Острая пневмония у детей характеризуется повышением количества клеток, обеспечивающих неспецифическую резистентность организма, их функциональной активности, готовности к апоптозу, активацией воспалительной реакции. Лечение по традиционной схеме не корригирует полностью выявленные изменения в крови. Включение в традиционное лечение ингаляций с деринатом оказывает выраженные противовоспалительные эффекты и нормализует показатели функциональной активности нейтрофилов периферической крови.
Ключевые слова: острая пневмония, деринат, иммунокоррекция.
THE USE OF DERINAT INHALATIONS IN CORRECTION OF IMMUNE DISTURBANCES
IN CHILDREN WITH ACUTE PNEUMONIA Shalneva T.V., Lazarev A.I., Bystrova N.A., Loktionov A.L.
Biochemistry Department of the Kursk State Medical University, Kursk
Acute pneumonia in children is characterised by increasing the amount of the cells providing nonspecific resistance of an organism, their functional activity, readiness for apoptosis, and activation of inflammatory reaction. The management according to the traditional scheme does not correct completely the revealed changes in blood. The inclusion of inhalations with derinat in traditional management renders the expressed antiinflammatory effects and normalises indicators of functional activity of peripheric blood neutrophils.
Key words: acute pneumonia, derinat, immunocorrection.
Весьма актуальной проблемой детского возраста является острая пневмония, на ее долю приходится 10-15 случаев заболевания на 1000 детей первого года жизни, 15-20 случаев на 1000 детей в возрасте от 1 до 3 лет и 5-6 случаев на 1000 детей старше 5 лет [6, 9, 10]. Острая пневмония является одной из наиболее частых причин детской смертности при респираторных заболеваниях. Возбудителями пневмонии могут быть различные микроорганизмы, однако наиболее часто - до 85-95% - пневмония имеет бактериальную этиологию [11], причем в большинстве случаев возбудителем является пневмококк, тогда как роль остальных возбудителей относительно невелика [2]. Патогенетически в легочной ткани наблюдается появление вязкого слизистого секрета, который вызывает обтурацию мелких бронхов, приводя к развитию ателектаза, отека и воспаления [7]. По данным литературы, при этой патологии по сравнению с бронхитом установлены более выраженные изменения иммунного статуса,
что обосновывает включение в традиционное лечение иммунокорректоров [1, 3, 5]. Большой интерес привлекает препарат деринат, интраназальное использование которого позволяет нормализовать показатели лейкоцитов, клеточных факторов иммунитета, воспалительного процесса, цитокинового баланса, уменьшить гипоксию и ишемию органов [4].
Целью исследования было изучение иммуномодулирующих эффектов ингаляций с деринатом при острой пневмонии у детей.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Под постоянным наблюдением было 22 ребенка, в возрасте от 7 до 15 лет, средний возраст которых составлял 11 лет, находившихся на стационарном лечении в МУЗ "Детская городская больница", педиатрическое отделение № 5, г. Белгорода. В исследуемую группу включались больные с диагнозом острая пневмония на основании осознанного
информированного согласия родителей или опекунов ребенка. Все больные были разделены на 3 рандомизированные по возрасту и проводимому лечению группы: 1 -ю группу составили 11 пациентов, получавших лечение по традиционной схеме, не включавшее иммунокорригирующих препаратов (антибактериальные препараты - цефалоспорины III поколения, синтетические макролиды; бронхо-литики, отхаркивающие средства; антигиста-минные препараты II поколения, мембрано-стабилизаторы, метилксантины, физиолечение); 2-ю группу - 11 пациентов, дополнительно к традиционному лечению получавших ингаляции с деринатом (1,5% - 2,5 мл в разведении с физ. раствором 1:1, через 24 часа, № 10). Контрольная группа пациентов состояла из 10 здоровых доноров-добровольцев того же возраста.
В работе исследован иммунный статус больных и здоровых лиц. Фенотип лимфоцитов определялся методом иммуноферментно-го анализа с помощью моноклональных антител (ООО «Сорбент», г. Москва) к структурам CD3 (общие Т-лимфоциты), CD4
(Т-хелперы), CD8 (цитотоксические клетки), CD22 (В-лимфоциты), CD16 (NK-клетки), CD25 (рецептор к ИЛ-2), HLA-DR-клетки (поздние маркеры активации), CD56
(нейтрофильные гранулоциты).
Количественная оценка уровней ФHОa, ИЛ-^, ИЛ-4, ИЛ-8, ИЛ-10, Сз-, С4-компо-нентов комплемента, фактора H, С1-ингиби-тора, IgA, M, G в сыворотке крови проводилась с помощью набора реагентов ОЛО "Век-тор-Бэст".
Определяли функциональную активность нейтрофилов периферической крови. Поли-нуклеары выделяли из цельной крови с помощью фиколл-верографина (d=l,077). Фагоцитарную активность нейтрофилов оценивали по фагоцитарному индексу (ФИ, процент фагоцитирующих из 100 подсчитанных нейтрофилов), фагоцитарному числу (ФЧ, среднее количество поглощенных частиц латекса на один фагоцит) и индексу активности фагоцитоза (ИАФ) [8]. Кислородзависимую активность по спонтанному и стимулированному зимозаном тесту восстановления нитро-синего тетразолия (HCT-сп. и HCT-ст.), индексу стимуляции (ИСЩ и функциональному резерву нейтрофилов (ФРЩ [12].
Статистическую обработку результатов исследования проводили, используя непараметрические методы (критерии Вилкоксона, Манна-Уитни), параметрический критерий Стьюдента, корреляционный анализ проводили при помощи вычисления коэффициентов корреляции Спирмена. Статистически значимыми считали различия с p<0,05.
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
При поступлении в клинику у детей с пневмонией в крови наблюдалось повышение уровня CD56, CD95 и HLA-DR-клеток, концентрации иммуноглобулинов классов M, G и A, провоспалительных цитокинов ФНОа, ИЛ-1ß и ИЛ-8, С3-, С4-компонентов системы комплемента, Ci-ингибитора и фактора Н, ФП, ФЧ, ИАФ, НСТ-сп., НСТ-ст., ФРН, снижение количества CD16-клеток, ИСН, концентрации противовоспалительных цитоки-нов ИЛ-4 и ИЛ-10, при нормальном содержании CD3-, CD4-, CDB-лимфоцитов, CD25-клеток (табл. 1).
Полученные в нашем исследовании результаты объясняются следующим образом. Появление бактериального агента в легком вызывает активацию факторов неспецифической резистентности организма, однако наиболее эффективным механизмом борьбы с инфекцией в этой ситуации является кисло-родзависимый киллинг, в связи с чем возрастает количество клеток с повышенной готовностью к апоптозу, а также повышение функциональной активности нейтрофилов периферической крови.
В то же время у детей в ответ на развивающееся воспаление в очаг мигрируют моноциты, активируются резидентные макрофаги, запуская каскад воспаления, чем и обусловлено преобладание в крови провоспалитель-ных цитокинов на фоне снижения концентрации противовоспалительных интерлейкинов. Кроме того, учитывая тот факт, что дети с пневмонией поступают в стационар не в первые сутки от начала заболевания, к этому времени формируется иммунный ответ на возбудителя, в связи с чем у детей наблюдалось повышение концентрации иммуноглобулинов классов M, G и A. Таким образом, при пневмонии наблюдаются выраженные
Таблица 1
Состояние иммунного статуса у детей с острой пневмонией при поступлении в клинику
Показатели Единицы измерения 1 2
Здоровые До лечения
CD3 % 65,7±4,1 45,3±5,1*1
109/л 1,14±0,07 1,26±0,12
CD4 % 46,4±1,8 31,4±1,9*1
109/л 0,81±0,05 0,87±0,26
CD8 % 25,4±1,5 * 1 18,1±1,1 1
109/л 0,44±0,02 0,50±0,13
CD16 % 10,9±1,3 7,41±0,9*1
HLA-DR % 12,9±1,37 V i 16,1±1,1 1
CD56 % 16,6±1,73 23,4±1,2*1
CD25 % 8,9±0,33 9,1±1,0
CD95 % 13,8±0,2 20,3±1,3*1
CD22 % 22,1±2,3 15,3±1,4*1
109/л 0,38±0,03 0,43±0,04
IgM г/л 0,83±0,06 1,69±0,12*1
IgG г/л 7,59±0,40 10,18±0,93*1
IgA г/л 1,26±0,14 2,11±0,15*1
ФНОа пкг/мл 4,3±0,7 7,0±0,81 1
ИЛ-lß пкг/мл 8,2±1,48 14,3±0,41*1
ИЛ-8 пкг/мл 6,3±1,1 20,8±1,34*1
ИЛ-4 пкг/мл 59,1±3,7 29,4±4,1*1
ИЛ-10 пкг/мл 12,7±1,4 9,0±1,24*1
Сз мг/л 63,8±1,9 291,8±20,2М
С4 мг/л 9,3±1,2 78,6±3,14*1
С1-ингибитор мг/л 189,9±9,4 327,9±14,2*1
Фактор H мг/л 26,1±2,3 43,5±1,7*1
ФП % 71,1±0,71 77,2±2,25*1
ФЧ абс. 6,55±0,34 7,38±0,69^
ИАФ - 4,66±0,24 5,76±0,26*1
НСТ-сп. % 9,50±0,34 18,9±1,55*1
НСТ-ст. % 41,5±0,67 69,2±1,82*1
ФРН - 32,0±0,80 50,3±1,84*1
ИСН - 4,37±0,20 3,66±0,2Р
изменения показателей, характеризующих воспаление, на фоне формирующегося вторичного иммунного ответа.
Проведенное традиционное лечение нормализовало число СБ16- и НЬЛ-ОЯ-клеток, концентрацию ИЛ-10, корригировало, но не до уровня нормы количество СБ56, концентрацию 1§0, С3-, С4-компонентов комплемента, не влияло на содержание СБ95-клеток, уровень 1§М, 1^ ИЛ-1Р, ИЛ-8, ИЛ-4, ФП, ФЧ, ИАФ, НСТ-сп., НСТ-ст. и ФРН, повышало содержание ФНОа, СБ22-лимфоцитов
(рис. 1). Таким образом, лечение детей с острой пневмонией по традиционной схеме оказывало недостаточные корригирующие эффекты на показатели неспецифической резистентности организма, функциональную активность нейтрофилов периферической крови и показатели гуморального иммунного ответа, цитокинов и компонентов комплемента, что свидетельствует о необходимости включения в традиционную схему лечения фармакологических иммунокорректоров.
Рис. 1. Изменение показателей иммунограммы у детей с острой пневмонией после традиционного лечения и применения ингаляций с деринатом.
Обозначения: 1 - радиус окружности - показатели здоровых доноров;
2 - ----------- - показатели больных с пневмонией после традиционного лечения;
3 --------------- показатели больных с пневмонией после традиционного лечения + ингаляции с
деринатом;
4 - ф - р<0,05 по отношению к контрольной группе;
5 - Ö] - р<0,05 3-й группы по отношению ко 2-й группе.
В качестве такого фармакологического препарата в настоящей работе был использован деринат. Внимание к нему привлек тот факт, что при интраназальном применении дерината у 90% часто и длительно болеющих детей отмечается положительный клинический результат: уменьшение продолжительности катаральных явлений и снижение повторений ОРЗ. У 83,5% детей с длительно и упорно рецидивирующей инфекцией получен хороший клинический эффект при назначении препарата по 2-4 капли 4-5 раз в день в течение 2 месяцев 2 раза в год в периоды предполагаемых сезонных обострений.
В нашем исследовании ингаляции с дери-натом нормализовали количество CD16-, HLA-DR-, CD56-, CD22-клеток, концентрацию IgG, ФГОа, ИЛ-Щ ИЛ-8, ИЛ-10, фактора H, ФП, ФЧ, ИАФ, корригировали, но не до уровня здоровых детей содержание CD3 и CD95, уровень IgM и IgA, ИЛ-4, С3-, С4-ком-понентов комплемента и С1-ингибитора, HCT-ст., ФР^ не влияли на содержание CD25, HCT-сп. Включение в традиционное лечение ингаляций с деринатом вызывало выраженные противовоспалительные эффекты, кроме того, нормализовало показатели функциональной активности нейтрофилов
периферической крови (рис. 1). Такие имму-нофармакологические эффекты обусловлены химической структурой препарата и его свойствами. Деринат является натриевой солью ДНК, обладает иммуномодулирующим действием, так как является антигеном для организма, кроме того, стимулирует репаратив-ные и регенераторные процессы, нормализует сниженный гемопоэз (гранулоцитарный и лимфоцитарный ростки), в связи с тем что сам является "строительным" генетическим материалом для клеток миелоидного ряда, помимо этого, он оказывает выраженное противовоспалительное действие, снижает токсичность антибиотиков. При помощи метода радиоактивных меток доказано, что органами-мишенями дерината являются красный костный мозг, лимфоузлы, селезенка и кровь. Он способен накапливаться и кумулировать в клетках, на его фоне резко усиливается синтез ДНК и РНК. Иммуномодулирующий эффект дерината, возможно, обусловлен способностью препарата восстанавливать и активизировать перестройку иммунных сил, ген-связывающую активность иммунной системы, В-звено лимфоцитов, Т-хелперов и др. иммуноцитов, чем обусловлены выраженные эффекты дерината на показатели иммунофе-нотипированных лимфоцитов [4].
Благодаря таким свойствам, деринат в настоящей работе оказывал выраженные иммуномодулирующие эффекты в отношении неспецифической резистентности организма, корригировал цитокиновый дисбаланс и оказывал выраженные противовоспалительные эффекты.
Таким образом, полученные результаты свидетельствуют о целесообразности проведения иммуномодулирующей терапии у детей с пневмонией.
ЛИТЕРАТУРА
1. Алешкин В.А., Афанасьев С.С., Калмыков А.А. и др. Эффективность иммуномодулирующего препарата "Кипферон®" в комплексной терапии острых пневмоний у детей // Педиатрия. -2007. - Т. 86, № 3. - С. 94-98.
2. Зубков М.Н. Внебольничная пневмония: этиология, диагностика и антибактериальная пневмония // Русский мед. журн. - 2004. -Т. 12, № 5. - С. 290-296.
3. Иванова В.В., Шилова И.В., Симованьян Э.Н. и др. Новые данные об инфекционном мононуклеозе // Рос. вестн. перинатологии и педиатрии. - 2006. - № 6. - С. 44-51.
4. Каплина Э.Н. Отчет о применении препарата деринат в педиатрии. - 2004. - 24 с.
5. Колтуков В.К., Бычков В.А., Кузьменко Л.Г. и др. Упорно рецидивирующая обструкция бронхов у часто болеющих детей раннего возраста без атопии // Педиатрия. - 2006. -№ 5. - С. 42-47.
6. Коровина Н.А., Заплатников А.В. Пневмонии у детей // Consillium medicum. - 2003. - № 5 (29). - С. 29-31.
7. Левина Е.Г. Оптимизация лечения внеболь-ничной пневмонии с изучением иммунологических параметров // Вопр. теорет. и практ. мед. - Уфа, 2005. - С. 225-227.
8. Медведев А.Н., Чаленко В.В. Способ исследования поглотительной фазы фагоцитоза // Лаб. дело. - 1991. - № 2. - С. 19-20.
9. Пикуза О.И., Андрушко И.А., Закирова А.М. Клиническое значение фермента 5’-нуклеоти-дазы и процессов пероксидации при острой пневмонии у детей школьного овзраста // Педиатрия. - 2003.- № 5.- С. 11-14.
10. Тарануха Л.И. Иммунологическая недостаточность как причина и следствие рецидивирующего бронхита // Российский иммунологический журн. - 2008. - Т. 2 (11), № 2-3. -С. 280.
11. Таточенко В.К. Практическая пульмонология детского возраста. - М., 2001. - 241 с.
12. Щербаков В.И. Применение НСТ-теста для оценки чувствительности нейтрофилов к стимуляторам // Лаб. дело. - 1989. - № 1. - С. 3033.
