CC BY
16
liiC. I II ¡Ii' ВДНЗУ «Украгнсъка жедична стожатологЬчна акадежШ»
Summary
POPULATION AND GENETIC PECULIARITIES OF TASTE SENSITIVITY TO PHENYLTHIOCARBAMIDE Miatchina O.V., Skyba O.S., Velytchko L.G.
Key words: phenylthiocarbamide, different ethnic people groups, races.
Population and genetic peculiarities of taste sensitivity to phenylthiocarbamide (PTC) were examined in different ethnic groups and races. The distribution of taste sensitivity to PTC concentration has been studied on 339 healthy persons. Among them 69 are from Iraq and Syria, 71 - from India, 65 - from Kenya, 25 -from Dagestan and 109 - from Central Russia. It has been found out there are differences between the threshold of taste sensitivity peaks and threshold to PTC taste. Hindu is stated to have statistically valid low threshold of PTC taste in comparison with other groups.
УДК 618.19-006-071 Школенко Д. С.
1МУН0Г1СТ0Х1М1ЧН1 0С0БЛИВ0СТ1 НЕ1НВАВИВН01 С0Л1ДН01 ФОРМИ ВНУТР1ШНЬ0ПР0Т0К0В0Г0 РАКУ М0Л0ЧН01 ЗАЛОВИ
ВДНЗУ «Украшська медична стоматолопчна академ1я» м. Полтава, Украша
Наведет 'результаты гмуног{стох{м{чних досл{дженъ сол{дног форми росту внутр^нъопрото-кового раку молочног залози у жток за допомогою группи онкомаркер{в. Знайдено при ствстав-лент з г{стох{м{чною характеристикою атиповог кл{тинног популяци, що онкомаркери рбЗ, Ъс1-2, а-вта та УЕСР маютъ р{зний р{венъ експреси, який залежитъ вг'д ступеня диференщю-вання елемент{в пухлини. Виявлет кл{тинт елементи канцеризованог протоки молочног залози, котр{ стримуютъ тваз{ю раковог пухлини, що в{дкривае перспективи и медичного керування.
Ключов1 слова: молочна залоза, внутришньопротоковий рак, солщна форма росту, ¡мунопстох1м1чний метод. Внутршньопротоковий рак молочноТ залози
(ВПРМЗ), складае до 8% вщ уах раш даноТ ло-кал1заци, характеризуеться р1зномаштнютю морфолопчних вар1ат1в росту та мультщентри-змом [2,3,7]. Прогреем пухлини сприяе пролфе-ративна активнють останньоТ, що дослщжуеться за допомогою деяких маркер1в кл1тинноТ' пролн фераци (Кн67) [4] та ктькютю ф1гур мпч)з1в [3].
Серед пстолопчних вар1ат1в росту нешвази-вноТ форми ВПРМЗ найбтьш мал1гн1зованими е таю, що мають низький ступшь диференцшван-ня, до якого вщноситься пстолопчий солщний вар1ант [8]. В ход1 пухпиноТ' трансформацГ|' кл1ти-ни останнього набувають нових антигенних вла-стивостей. Для ¡дентифкаци таких властивостей пухлин юнуе сучасне ¡мунопстох1м1чне доелн дження [4,6,10] ¡з застосуванням сироваток до пухлиних антигешв - ¡мунопстох1м1чы маркери (Ьс1-2, р63,УЕСР, р53 та ¡нш.) [1,5,9,11,12].
Проте, ¡мунопстох1м1чна характеристика солн дного вар1анту ВПРМЗ як нешвазивного, так \ ¡н-вазивного тишв, потребуе подальшоТ' розробки та анал1зу.
Вивчення ¡мунопстох1м1чых особливостей со-лщного вар1анту ВПРМЗ дозволить, на нашу думку, з'ясувати деяю бюлопчы особливосп морфогенезу ВПРМЗ. В свою чергу, виявлеш ¡мму-нопстох1м1чш особливосп можливо будуть вра-ховаш при вибор1 адекватного лкування \ зор1ен-тують лкаря на прогноз ВПРМЗ.
Мета дослщження: з'ясувати ¡мунопстох1м1чы особливосп найменш вивченого аспекту дм он-когешв \ пухпинних супресор1в, а також особли-восп васкулогенезу при нешвазивному солщно-му ВПРМЗ.
Матср1али та методи дослпджсння
Вивченню пщлягали 6 випадюв захворювань на ВПРМЗ ¡з верифкованим солщним типом раку у жшок фертильного BiKy (операцшний та 6io-пешний матер1ал Полтавського обласного пато-логоанатом1чного бюро).
lMyH0riCT0xiMi4Hi реакцП' проводились нами в сертифкованш ¡мунопстох1м1чнш лаборатори (зав.кафедри проф. 1.С.Шпонька, м. Днтропет-ровськ) з використанням моноклональних анти-тт: VEGF ( клон VGI, DacoCytomation), рбЗ (клон JAY, DacoCytomation), онкопротешу bcl-2 (кпон 124, DacoCytomation). Дофарбування ядер клн тин виконували гематоксилшом Майера.
Вивчення ¡MyH0ricT0xiMi4HHx MiKponpenapaTiB
ПРОВОДИЛОСЬ За ДОПОМОГОЮ СВППОВОГО MiKpOCKO-
пу ф1рми "Olimpus". Фотозйомка MiKponpenapaTiB проводилась цифровою фотокамерою, поедна-ною з м1кроскопом ф1рми "Olimpus" "С 3040-А DUP" з використанням спе^альноТ програми "Олимпус ДП Софт».
Результати та "ix обговорення
За результатами попереднього дослщження, з використанням пстолопчного, ricT0xiMi4H0ro та карюметричного анал1зу був виявлений пстоло-пчний пол1морф1зм та з'ясований пстох1м1чний атишзм у вигляд1 гл1коген,- та жировмюних Kni-тин у ooiafli атиповоТ' популяци солщного BapiaH-ту нешвазивного внутршньопротокового раку молочноТ залози. Останнш нагадуе ricTOxiMiHHi ознаки ембрюнального nepiofly розвитку молочноТ залози, та мае низький ступшь диферен^аци [7].
При даному дослщжены верифка^я за анти-
Лктуи.п.н i проблемы сучасно!' медицины
генними властивостями юптинного складу солн дного вар1анту ВПРМЗ була наступною. Експреая маркеру малодиференцшованого стану клн тин рбЗ мае виражений та пом1рний ступшь в ядрах егмтелш, що розташований в парабазаль-них вщдтах канцеризованоТ' протоки (Мал.1).
1нша популяц1я кл1тин, що виповнюе всередиы канцеризоваш протоки \ утворюе солщы струк-тури ВПРМЗ, не мае ознак ядерноТ експресП маркеру рбЗ, що, на нашу думку \ за даними лп"е-ратури, свщчить про вихщ даних юмтин з неди-ференцшованого стану та з-пщ впливу, регулю-ючого апоптоз, протешу рбЗ.
В1зуал1зац1я експресП' маркеру Ьс1-2 в частит парабазальнорозташованих кл1тин з ознаками апоптотозу (зморшкувате ядро, або залишки йо-го у вигляд1 глибок базофтьного кольору), ви-явила дифузне внутр1шньоцитоплазматичне ко-ричньове забарвлення некробютичних змш у внутр1шньопротоковш атиповш популяцП' етте-лш.
Разом з тим вщм1чаеться \ локальна посилена експреая Ьс1-2 атиповими кл1тинами здебтьш перинуклеарноТ' локал1зацП. Вочевидь, останне вщповщае напруженому синтезу антиапоптотич-них протеТ'ыв в дтянках локал1заци мпчэхондрш, тобто блокуванню атиповими кл1тинами альте-ративного впливу апоптозу. Дана характеристика експресування маркеру притаманна атиповим кл1тинам з великими свппими ядрами, що мю-тять одне або два ядерця та оточеш звивистим контуром карюлеми серед добре розвиненоТ ци-топлазми, що багата на глкоген.
На нашу думку, дана р1зноманп"нють експресП' маркеру Ьс1-2 та його локал1заци вщповщае сту-пеню напруженосп синтезу антиапоптотичних протеТшв та стадшносп вщповщ1 атипових кл1тин на сигнали ¡нщ1ацП апоптозу, що, вочевидь, за-лежить вщ ступеню пошкодження хромосомного апарату.
Як наслщок зникнення контролюючого впливу рбЗ та посиленоТ експресП' Ьс1-2 при солщному вар1ант1 внутр1шньопротокового раку молочноТ' залози, утворюеться популяц1я глкоген, - та лн пщовм1сних кттин.
1мунопстох1м1чне досл1женя гладком'язового актину (а-эта) виявляе наявнють останнього в цитоплазм! кл1тин, розташованих в сполучнотка-нинному комплеш навколо популяцм атипових кл1тин канцеризованоТ протоки МЗ. При цьому спостер1гаеться р1зний ступшь насиченосп гладком'язового актину в цитоплазм!, що, за даними лп"ератури, демонструе скорочувальну функцш останнього (Мал.2).
* » ,-J
'.i ■
Мал. 1 Виражена експреая маркеру рбЗ в пара-базальних eiddmax conidHO'í раковоУ популяцй в канцеризованш проток молочноУ залози. 1ГХ метод, додаткове забарвлення гематоксиль ном Майера. 36. х400
Мал. 2 Експрес/я a-sma сполучнотканинному комплекс '! (1) навколо солЮно'У популяц 'н ВПРМЗ, та судинах оточуючо'У строми молочноУ залози (2). ¡ГХ метод, додаткове забарвлення гема-токсил'том Майера. 36. х400
Разом ¡з тим, в окремих дтянках ctíhkh кан-церизованоТ протоки молочноУ залози cnocTepi-гаеться i слабка експреая маркеру, що, вочевидь, свщчить про зниження насиченосп гладком'язового актину в даних кл1тинах. На вщмшу вщ базальнорозташованих ракових кл1тин, eni-телш, що виповнюе просвп" канцеризованоТ протоки, не експресуе a-sma маркер.
Привертае до себе увагу, виявлений глад-ком'язовий компонент i в ендотелм судин, що mí-стяться в ctpomí, навколо раковоТ пухпини протоку молочноУ залози. Причому маркер a-sma експресуе ендотелий тонкостшних судин, приле-глихдо ctíhkh канцеризованоТ протоки.
Це спонукае до вивчення особливостей трофеи солщного раку протош МЗ за допомогою моноклональноТ' сироватки до VEGF. У даному морфолопчному типов! росту пухлини виявлена слабка експреая маркеру цитоплазмою кттин, розташованих як в центральних, так i перифе-ршних вщдтах пухлини. Вочевидь, дана експреая маркеру a-sma свщчить про секрецш фактору росту ендотелш судин кл1тинами пухлини, що знаходяться в умовах ппокси. При цьому i ви-значаються прим1тивт tohkoctíhhí судини, що утвореш ендотел1ем, i впритул прилягають до ctíhkh канцеризованоТ протоки. Проте живлення кл1тин пухлини, як автономно'!' популяцм все ще вщбуваеться переважно за рахунок дифузного
Том 10, Выпуск 4
113
liiC. l II ¡Ii' ВДНЗУ «Украгнсъка медична стожатолог1чна акадежШ»
захвату поживних речовин.
Таким чином, в1зуал1зац1я кгмтин, пом1чених маркерами рбЗ та а-эта в сполучно-тканиному комплексу що оточуе атипову кл1тинну популя-цш при солщному вар1ант1 ВПРМЗ, дае певну можливють визначення вщсутносп ¡нвазивного росту в данш пухпиш.
Р1зноманп"на за ступенем та локал1зац1ею експреая антиапоптотичного маркеру Ьс1-2 де-монструе р1зы мехаызми ухилення вщ апоптозу популяци атипових юмтин, що мають внутр1ш-ньопротокову локал1зацш. При цьому р1знови-дом кттинних елеметчв, що не зазнають апоп-тотичних перетворень, е гл1когенвм1сш та лтщ-вмюты кттини.
Висновки
1. Кл1тини солщного вар1анту внутр1шньопро-токового раку молочноТ' залози, що не вдаються до апоптозу та мають локальну крапкопод1бну експреаею Ьс1-2 - е глкогенвмюними, можуть вщ1гравати велику роль для подальшого ¡нвазивного росту пухпини; а лтщвмюы раков1 кл1тини позбавлеш експресП' Ьс1-2 через фанероз.
2. Кл1тини з внутр1шньоцитоплазматичною експреаею а-эта та внутршньоядерною - рбЗ, обмежують ракову кл1тинну популяцш солщного вар1анту росту, стримують ¡нвазш останнього.
3. Ппоксичш пошкодження кл1тин солщного вар1анту росту раку молочноТ залози зумовлю-ють експреаю \ZEGF низького р1вня.
Перспективи подальших дослпджснь
Плануеться створити комплексний морфоло-
пчний алгоритм д1агностики внутр1шньопротоко-вого раку молочноТ залози.
.Штература
1. Герштейн Е.С. Фактор роста эндотелия сосудов в опухолях и сыворотке крови больных раком молочной желези VEGF / Е.С.Герштейн, А.М.Щербаков, С.К.Алиева [и др.] // Бюлл. экс-перементальной биологии и медицины. -2003 -№1 -С.99-102.
2. Захарцева М.М. Современные аспекты диагностики рака молочной железы. Прогностическое значение гистологических вариантов /Л.М. Захарцева, М.В. Дятел, К.А Пекур // Патологоа-натоммна д1агностика хвороб людини: здобутки, проблеми, перспективи: Всеукрашська науково-практична конференц1я, приев. 100-pi44io з дня народження професора Н.М. Шшкаренка (засновника кафедри та патологоанатом1чно1' служби на Буко-bhhí : мат. конф. - Чернивц1, 2007. - С.96-101.
3. Казанцева И.А. Болезни молочных желез // Патология : руководство / под ред. М.А. Пальцева, B.C. Паукова, Э.Т. Улумбе-кова. - М. : ГЭОТАР - Мед., 2002. - С.520-528.
4. Киясов А.П. Методы иммуногистохимии,- В кн.: Руководство по иммуногистохимической диагностике опухолей человека / под ред. C.B. Петрова, Н.Т. Райхлина. - Казань: Титул, 2004. - С. 18-38.
5. Копнин Б.П.Структурная организация и биохимическая активность белка р53 // Канцерогенез / под ред. Д.Г. Заридзе. - М. : Медицина, 2004.-C.132-142.
6. Мушкамбаров H.H. Молекулярная биология: Учебное пособие для студентов медицинских вузов / H.H.Мушкамбаров, С.Л.Кузнецов. - М. : 000 «Медицинское информационное агенс-тво».-2007.- С.443-520.
7. Нколенко Д.6. ricToxÍMÍ4H¡ та карюметричш особливост1 солщ-hoï форми bhytpiujhbonpotokoboro раку молочноТ залози / Híko-ленко Д.6. // Здобутки kníhí4hoí i експериментальноТ медицини. -2010. -№1(12).- С.107-110.
8. Пальцев М.А. Атлас патологии опухолей человека / М.А. Пальцев, Н.М.Аничков. - М. : Медицина, 2005. - C.266-284.
9. Фтьченко О.О. Апоптоз i рак: вщ Teopiï до практики / О.О.Фтьченко,- Тернопть : ТДМУ, 2006. - С.10-110, 306-373.
10. Dabbs D.J. Diagnostic immunohistochemistry / D.J.Dabbs // Churhill Livinstone, 2006. - 828 p.
11. Ferrara N. The biology of VEGF an its receptors / N.Ferrara, H.P. Gerber, J.LeCouter// Nat Med. - 2003. - V.9. - P. 669-676.
12. Folkman J. Angiogenesis / Folkman J. // Annu. Rev. Med. - 2006. -V. 57. - P. 1-18.
Реферат
ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ СОЛИДНОЙ ФОРМИ ВНУТРИПРОТОКОВОГО РАКА МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ Николенко Д.Е.
Ключевые слова: молочная железа, внутрипротоковий рак, солидный вариант, иммуногистохимический метод.
Приведены результаты иммуногистохимических исследований исследований солидной формы внутрипротокового рака молочной железы женщины при помощи группы онкомаркеров. Определено при сопоставлении с гистохимической характеристикой атипической клеточной популяции, что онко-маркеры рбЗ, bcl-2, a-sma и VEGF имеют разный уровень експрессии, который зависит от степени дифференцировки элементов опухоли. Выявлены клеточные элементы канцеризованого протока молочной железы, которые сдерживают инвазию опухоли, что открывает перспективы медицинской коррекции.
Summary
IMMUNOHISTOCHEMICAL CHARACTERISTICS OF SOLID FORM OF INTRADUCTAL BREAST CANCER Nikolenko D.Ye.
Keywords: mammary gland, intraductal breast cancer, solid form of new growth, immunohistochemical method.
This paper presents immunohistochemical findings on a solid form of intraductal cancer obtained by using the group of oncomarkers. It has been found out by comparison with the histochemical characteristics of atypical cell population that oncomarkers p63, bcl-2, a-sma and VEGF have different expression level which depends on the degree of tumor elements differentiation. There have been detected cellular elements of cancerous ducts of mammary glands which restrict tumor invasion and in that in way offer the challenge for the therapeutic correction.
