CC BY
14
Курченко А.И. и соавт. ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНОГО.
УДК 615.5-002-056.3
Иммуногистохимические особенности противовоспалительного действия антигистаминных препаратов у больных Е-зависимой формой атопического дерматита
Курченко А.И., Глухенькая А.Б., Глухенький Б.Т.
Национальный медицинский университет имени А.А. Богомольца, Киевский институт медицины труда АМН Украины
1МУНОГ1СТОХ1М1ЧН1 ОСОБЛИВОСТ1 ПРОТИЗАПАЛЬНОТ ДМ АНТИГ1СТАМ1Н-НИХ ПРЕПАРАТ1В У ХВОРИХ НА 1дЕ-ЗА-ЛЕЖНУ ФОРМУ АТОП1ЧНОГО ДЕРМАТИТУ
Курченко А.1., Глухенькая А.Б., Глухенький Б.Т.
Зютавлення одержаних даних iмуноriстохiмN свiдчать про те, що з трьох дослщжуваних препаратiв цетири-зин мае найбтьшу силу дií на експреаю /САМ-1 ке-ратиноцитами хворих на /дЕ-залежну форму атотч-ного дерматиту (АД). Як виявилося, пюля трьох тижшв прийому в терапевтичнш дозi даний препарат, на вщмшу вiд фексофенадину та лоратадин, здатний максимально знижувати ктькють клiтин епщермюу, експресуючих /САМ-1 у хворих на /дЕ-залежну форму АД.
IMMUNOHISTOLOGICAL FEATURES OF ANTI-INFLAMMATORY PROPERTIES OF ANTIHISTAMINES IN PATIENTS WITH THE IgE-DEPENDENT FORM OF ATOPIC DERMATITIS
Kurchenko A.I., Gluchenkaya A.B., Gluchenky B.T.
Atopic dermatitis (AD) is an inflammatory skin disorder, the prominent feature of which is chronic allergic skin disorders. Early evidence suggested that skin disorders under AD were partially due to mast cell release of histamine. Conversely, recent studies do not validate the role of ICAM-1 in the pathogenesis of /gE-dependent form of AD. Conventional management continues to include the wide use of cetirizin to treat the AD patients; however, there is an urgent need for anti-inflammatory therapy, which will reduce the severity of chronic allergic skin disorders.
Кератиноциты, в противоположность эндоте лиальным клеткам и другим клеткам паренхимы, имеют очень низкую конституциональную экспрессию 1САМ-1 на своей поверхности [1]. Индукция экспрессии 1САМ-1 в эпидермисе может рассматриваться, как важный фактор лимфоцит-зависимого повреждения кератиноцитов при развитии процессов иммунологической ци-тотоксичности [2].
Существует предположение, что появление экспрессии 1САМ-1 на эпидермальных керати-ноцитах при различных хронических заболеваниях кожи, таких как: - экзема;
1-2 (9)' 2006
- красный плоский лишай;
- пузырчатка;
- многоформная экссудативная эритема;
- псориаз;
- атопический дерматит (АД), -
может быть «финальным аккордом» в патофизиологии этих известных воспалительных заболеваний кожи [3]. Однако картина экспрессии /САМ-1 кератиноцитами может варьировать при разных заболеваниях кожи, что обусловлено характерным эпидермальным окружением, наведенным экспрессией 1САМ-1 при этих заболеваниях [4].
В недавних исследовательских работах была
ОБМЕН ОПЫТОМ
показана способность некоторых современных антигистаминных препаратов ингибировать экспрессию молекул адгезии эпителиальными клетками, что приводило к уменьшению вербовки лимфоцитов из периферической крови и могло быть использовано в лечении аллергических заболевании [5]. В доказательство этому факту было показано, что антигистаминные препараты in vitro способны уменьшать экспрессию ICAM-1 на эпителиальных клетках [6].
Некоторые исследования продемонстрировали, что лечение хронических атопических заболеваний верхних и нижних дыхательных путей, с использованием продолжительного назначения антигистаминных препаратов второго поколения, способно уменьшать экспрессию ICAM-1 на эпителиальных клетках и приводит к выраженному противовоспалительному эффекту [7]. Однако в доступной литературе отсутствовали данные о возможном использовании современных антиги-стаминных препаратов с аналогичной целью у больных АД.
Цель исследования - изучение влияния антигистаминных препаратов второго поколения на экспрессию кератиноцитами ICAM-1 у больных IgE-зависимой формой АД в условиях хронического воспаления.
Для изучения противовоспалительных свойств антигистаминных препаратов второго поколения нами исследовалась пораженная кожа у 35 больных IgE-зависимой формой АД в хроническом периоде заболевания. Выставленный диагноз IgE-зависимой формы АД у больных, имеющих атопический анамнез и высокие уровни концентрации общего IgE в сыворотке крови, отвечал критериям, предложенным Hanifin & Rajka [8].
Исследуемые больные были разделены на 3 группы в зависимости от применяемого препарата:
- лоратадин получали 10 больных IgE-зави-симой формой АД;
- фексофенадин - 12;
- Цетиризин - 13 больных, -
в обычных терапевтических дозах на протяжении 3 недель. Противовоспалительный эффект препаратов оценивался по способности влиять на возможность эпителиальных клеток экспресси-ровать молекулы адгезии ICAM-1.
Контрольную группу составили больные IgE-зависимой формой АД, получающие индифферентную терапию (не принимающие антигиста-
минных препаратов и не использующие гормональные мази).
После информированного согласия пациентов, эллиптические биопсии диаметром 3 мм были получены из очагов воспаления пораженной кожи до и после проведенной терапии. Иммуногисто-логическое исследование проводилось на серийных криостатных срезах стандартным методом биотин-стрептавидин иммунопероксидазного окрашивания (Strept АВСошр1ех/НКР, производство DAKO). В исследовании были использованы моноклональные антитела с реактогенной направленностью на 1САМ-1 (CD54) (Becton Dickinson).
У больных IgE-зависимой формой АД в хроническом периоде заболевания наблюдалось значительное увеличение количества клеток, экс-прессирующих молекулы межклеточной адге-зии-1 (ICAM-1). В эпидермисе воспаленной кожи больных АД, до лечения, экспрессия молекул ICAM-1 проявлялась на кератиноцитах базаль-ного отдела, в основном, отдельными локусами, состоящими из 20-30 ICAM-1+ кератиноцитов. Обычно проявление клеточной ICAM-1 позитивности локально совпадало с наличием дермаль-ных воспалительных инфильтратов, близко прилежащих к эпидермису. Для кератиноцитов ICAM-1 позитивность была характерна как для цитоплазмы, так и для клеточной мембраны.
Необходимо отметить, что среди ICAM-1+ клеток с морфологическими особенностями ке-ратиноцитов наблюдались клетки с короткими дендритическими отростками, а также клетки с узеньким ободком реактогенной цитоплазмы. Отмеченные клетки могут быть расценены как мигрирующие через данный отдел эпидермиса ICAM-1+ дендритические клетки и клетки лим-фоидного ряда.
После проведенного лечения исследуемыми препаратами, иммуногистохимическая картина очага поражения претерпела изменения, связанные с уменьшением клеточного воспалительного инфильтрата и, в особенности, - количества кератиноцитов, экспрессирующих молекулы ICAM-1.
Сопоставление полученных данных иммуно-гистохимии свидетельствуют о том, что из трёх исследуемых препаратов наибольшей силой воздействия на экспрессию ICAM-1 кератиноцитами больных IgE-зависимой формой АД обладал Цетиризин. Как оказалось, после трёх недель приёма в терапевтической дозе данный препарат, в отличие от фексофенадина и лоратадина,
1-2 (9)' 2006
Курченко А.И. и соавт. ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНОГО..
способен максимально снижать количество клеток эпидермиса, экспрессирующих ICAM-1 у больных IgE-зависимой формой АД.
Как выяснилось в процессе исследования, при АД базальные клетки эпидермиса, прилегающие к лимфоцитарному инфильтрату в сосочковом слое дермы, особенно активно экспрессировали ICAM-1. При этом уровень экспрессии ICAM-1, вероятно, связан с обнаруженным ранее повышением внутриклеточного содержания IFN-y и TNF-a в клетках дермального инфильтрата у таких пациентов [9]. Было показано, что цитоки-ны IFN-y и TNF-a при IgE-зависимом варианте АД расценивались, как основные индукторы повреждения эпидермиса в хроническом периоде заболевания [10]. Как оказалось, выделенные и культивированные базальные кератиноциты были особенно восприимчивы к действию этих цито-кинов и отвечали на воздействие появлением экспрессии ICAM-1 на их поверхности [11].
Таким образом, можно предположить, что иммуномодулирующее влияние антигистамин-ных препаратов у больных АД связано, прежде
ЛИТЕРАТУРА
1. Picker L.J., Kishimoto T.K., Smith C.W., Warnock R.A., Butcher E.C. ELAM-1 is an adhesion molecule for skin homing T-cells // Nature. - 1991. - Vol. 349. - Р. 796-799.
2. Bos J.D., Kapsenberg M.L. The skin immune system: progress in cutaneous biology // Immunol. Today. - 1993. - Vol. 14. - P. 75-79.
3. Muller G., Saloga J., Germann T., Bellinghausen I., Mohamadzadeh M., Knop J., Enk A.H. Identification and induction ofhuman keratinocyte-derived IL-12 // J. Clin. Invest. -1994. - Vol. 94. - P. 1799-1805.
4. Yawalkar N., Hunger R.E., Pichler W.J., Braathen L.R., Brand C.U. Human afferent lymph from normal skin contains an increased number of mainly memory/effector CD4+ T-cells expressing activation, adhesion and co-stimulatory molecules // Eur. J. Immunol. - 2000. - Vol. 30. - P. 491-497.
5. Fasce L., Ciprandi G., Pronzato C. et al. Cetirizine reduces ICAM-1 expression on epithelial cells during nasal minimalpersistent inlammation in asymptomatic children with mite allergic asthma // Int. Arch. Allergy Immunol. -1996. -Vol. 109. - P. 272-276.
6. Paolieri F., Battifora M., Riccio A.M. et al. Terfenadine and fexofenadine reduce in vitro
всего, с IFN-j индуцированным снижением ICAM-1 [12]. Как оказалось, уменьшение экспрессии ICAM-1 клетками эпидермиса под действием антигистаминных препаратов происходило на фоне увеличения спонтанной и митоген-индуцированной продукции IFN-y мононуклеара-ми периферической крови, при достоверном повышении уровня продукции IL-10 и TGF-ft у обследованных нами пациентов с IgE-зависимой формой АД. Причем, наши данные подтверждают вывод о том, что высокие уровни IFN-y и TGF-в у пациентов с IgE-зависимой формой АД после проведенной терапии антигистаминными препаратами обладают антагонизмом действия, что приводит к снижению уровня экспрессии ICAM-1 на кератиноцитах.
Выводы. После трехнедельного приема в терапевтической дозе, препарат цетиризин оказывал выраженное противовоспалительное действие и, в отличие от фексофенадина и лората-дина, максимально снижал количество клеток эпидермиса, экспрессирующих ICAM-1 у больных IgE-зависимой формой АД.
ICAM-1 expression on human continuous cell lines // Ann. Allergy Asthma Immunol. - 1998. -Vol. 81. - P. 601-607.
7. Slater J.W., Zechnich A.D., Haxby D.G. Second-generation antihistamines: A comparative review // Drugs.- 1999.- Vol. 57, No 1.- P. 31-47.
8. Hanifin J., Rajka G. Diagnostic features of atopic dermatitis // Acta Derm. Venerol. - 1980.
- Vol. 92. - P. 44-47.
9. Lippert U., Hoer A., Moeller A. et al. Role of antigen-induced cytokine release in atopic pruritus // Int. Arch. Allergy Immunol. - 1998. - Vol. 116.
- P. 36-39.
10.Klein P.A., Clark R.A.F. An evidence-based review of the efficacy of antihistamines in relieving pruritus in atopic dermatitis // Arch. Dermatol. - 1999. - Vol. 135. - P. 1522-1525.
11.Mincarini M., Cagnoni F., Canonica G.W. et al. Quantitative flow cytometric analysis of the effects of cetirizine on the expression of ICAM-1/CD54 on primary cultured skin cells // Allergy.
- 2000. - Vol.55. - P. 226-231.
12.Hsu D.H., Moore K.W., Spits H. Differential effects of IL-4 and IL-10 on IL-2-induced IFN-gamma synthesis and lymphokine-activated killer activity // Int. Immunol. - 1992. - Vol. 4. -P. 563-569.
