Научная статья на тему 'Иммуногенная активность противоэшерихиозной вакцины СП4ПВ на лабораторных животных'

Иммуногенная активность противоэшерихиозной вакцины СП4ПВ на лабораторных животных Текст научной статьи по специальности «Ветеринарные науки»

CC BY
270
88
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Ключевые слова
ВАКЦИНА / ИММУНИТЕТ / ЭШЕРИХИОЗЫ / VACCINE / IMMUMITY / ESCHIRIOSIS

Аннотация научной статьи по ветеринарным наукам, автор научной работы — Сетдеков Р. А., Низамов Р. Н., Юсупов Р. Х., Иванов А. А., Юсупова Г. Р.

Выживаемость белых мышей при однократной подкожной иммунизации вакциной СП4ПВ № 3 составила 80%. Подобный защитный эффект наблюдался при однократном введении белым мышам 0,10 мл субъединичной вакцины. Расчеты показали, что иммунизирующая доза, обеспечивающая 50%-ную защиту привитых животных, достигается при применении 0,011±0,002 мл исходного препарата (IД 50 = 0,011 мл), а число иммунизирующих доз в 1 мл вакцины составляет 90,9±13 IД 50.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по ветеринарным наукам , автор научной работы — Сетдеков Р. А., Низамов Р. Н., Юсупов Р. Х., Иванов А. А., Юсупова Г. Р.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

ADJUVANCY PROTIVOESHERIHIOZNOY SP

Livability rate of white mice once immunized subcutaneonsly with the SP4PV vaccine N 3 was 80%. Such protection effect was observed in mice introduced 0,10 ml of subsingle vaccine. The calculations showed tnat the immunizing dose proviclong 50% of vaccinoted animals protection is reached esing 0,011±0,002 ml of the primary preparation (ID 50 = 0,011 ml) and the immunizing dose ratios is 90,9±13 ID 50 per 1 ml vaccine.

Текст научной работы на тему «Иммуногенная активность противоэшерихиозной вакцины СП4ПВ на лабораторных животных»

УДК 619.612.017.11/12:636.2

ИММУНОГЕННАЯ АКТИВНОСТЬ ПРОТИВОЭШЕРИХИОЗНОЙ ВАКЦИНЫ СП4ПВ НА ЛАБОРАТОРНЫХ ЖИВОТНЫХ

Сетдеков Р.А. - к.в.н., соискатель; Низамов Р.Н. - д.в.н., профессор; Юсупов Р.Х. -д.в.н., профессор; Иванов А.А. - д.б.н; Юсупова Г.Р. - д.б.н., доцент Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности,

г.Казань

Казанская государственная академия ветеринарной медицины имени Н.Э. Баумана

тел.: (843) 239-53-12

Ключевые слова: вакцина, иммунитет, эшерихиозы.

Keywords: vaccine, immumity, eschiriosis.

Успешному решению животноводства в Российской Федерации препятствуют желудочно-кишечные болезни телят и поросят. Многочисленными исследованиями, проведенными в нашей стране и за рубежом, показано, что их возникновение обусловлено воздействием на молодняк этиологических, предрасполагающих и сопутствующих факторов [6]. Среди этиологических факторов важная роль отводится патогенным эшерихиям. К числу важнейших предрасполагающих и сопутствующих факторов колибактериозов относят нарушения обмена веществ, низкий уровень естественной резистентности и иммунологической реактивности у коров и свиноматок вследствие дисбаланса питательных веществ в рационах, несоблюдения нормативов полноценного сбалансированного кормления, содержания животных при неудовлетворительных параметрах микроклимата; нарушение гигиены проведения отелов и опоросов, послеродовая патология и маститы у маточного поголовья, несвоевременная выпойка молозива новорожденным телятам, гипогалактия у свиноматок [6, 2].

Одним из главных методов борьбы с эшерихиозом является специфическая профилактика. Для этих целей в Российской Федерации выпускают вакцину поливалентную гидроокисьалюминиевую против колибактериоза (эшерихиоза) поросят, телят, ягнят и вакцину против эшерихиоза с.х. животных «Коли-Вак». Однако не всегда вакцинация приводит к желаемому результату, распространение и частота встречаемости колибактериоза на фермах остается высокой [3].

В последние годы в литературных источниках появились сведения об использовании различных препаратов в сочетании с вакциной для коррекции иммунного и биохимического статуса телят при колибактериозе. По мнению В.И. Дорожкина и соавт. (2012), ослабление естественной резистентности и иммунологической реактивности организма является одной из главных причин распространения и

неблагоприятного течения болезней различной этиологии.

Целью настоящей работы явилось изучение иммуногенной активности противоэшерихиозной вакцины СП4ПВ, разработанной в ФГБУ «ФЦТРБ-ВНИВИ» на лабораторных животных.

Материалы и методы. Для изучения иммуногенных свойств испытуемых вариантов вакцин СП4ПВ № 1, № 2, № 3, № 4 и № 5, опыты проводили на 160 белых мышах, разделенных на 16 групп по 10 животных в каждой. Животных 1-й, 2-й и 3-й групп иммунизировали однократно

3 3

подкожно в дозе 0,1 см вакциной СП4ПВ № 1, содержащей 0,04 мг/см субъединичного антигена (0,008 мг/мышь) и через 7 (1-я группа), 14 (2-я) и 30 дней (3-я группа) внутрибрюшинно заражали суточной культурой

3 9

вирулентного штамма E. coli «КВ1» в дозе 0,5 см , содержащей 1-10 м.к./см . Животных 4-й, 5-й и 6-й групп иммунизировали вакциной СП4ПВ № 2 и заражали возбудителем эшерихиоза в аналогичных дозах вакцины и вирулентного штамма E. coli. Животных 7-й, 8-й и 9-й групп иммунизировали вакциной СП4ПВ № 3 и заражали E. coli «КВ1» в аналогичных дозах и условиях, что и 1-й, 2-й и 3-й групп соответственно. Животных 10-й, 11-й и 12-й групп иммунизировали вакциной СП4ПВ № 4, через 7, 14 и 30 суток заражали вирулентным штаммом возбудителя эшерихиоза, используя аналогичные дозы иммунизации и заражения животных 1-й, 2-й и 3-й групп соответственно. Животных 13-й, 14-й и 15-й групп иммунизировали вакциной СП4ПВ № 5 и заражали через 7, 14 и 30 дней в аналогичных дозах и условиях, использованных для 1-й, 2-й и 3-й групп соответственно. Неиммунизированные, но зараженные животные 16-й группы служили контролем заражения.

За иммунизированными и зараженными животными вели динамическое наблюдение, учитывали сроки и количество павших мышей по группам. В качестве критерия оценки эффективности испытанных вариантов вакцин использовали выживаемость в процентах (ПЗ, %) или абсолютный иммунитет (АИ, %).

Результаты исследований. Результаты проверки иммунитета на фоне применения испытуемых вариантов вакцин СП4ПВ на основе пилезных антигенов и различных адъювантов представлены в таблице 1.

Использованные варианты вакцины обладали достаточно высокой иммуногенной активностью, защищая животных от экспериментального эшерихиоза в 70-90% случаев. При этом установлено, что одинаковую степень защиты проявляли варианты вакцины, изготовленные с использованием в качестве адъювантов тимоген (СП4ПВ № 1), Т-активин (СП4ПВ № 2) и гидросиликат алюминия (СП4ПВ № 5), которые обеспечивали 70%-ную выживаемость зараженных возбудителем эшерихиоза животных. Вариант вакцины, изготовленной с использованием гидроокиси алюминия в качестве адъюванта, оказался наименее эффективным - выживаемость зараженных возбудителем эшерихиоза

животных в этих группах (10-я, 11-я и 12-я) составляла 40 (на 7-й день после вакцинации), 50 (14-й день) и 60% (30-й день после вакцинации).

1. Иммуногенность субъединичной вакцины СП4ПВ для белых мышей в зависимости от вида использованных адъювантов

Вариант вакцины СП4ПВ Группа животных Срок после иммунизации, сут Число животных Пало Выжило ПЗ, %

1 7 10 5 5 50

№ 1 2 14 10 4 6 60

3 30 10 3 7 70

4 7 10 5 5 50

№ 2 5 14 10 4 6 60

6 30 10 3 7 70

7 7 10 3 7 70

№ 3 8 14 10 2 8 80

9 30 10 1 9 90

10 7 10 6 4 40

№ 4 11 14 10 5 5 50

12 30 10 4 6 60

13 7 10 5 5 50

№ 5 14 14 10 5 5 50

15 30 10 3 7 70

Контроль заражения 16 - 10 10 0 0

Из использованных вариантов вакцины оказалась наиболее эффективной вакцина СП4ПВ № 3, которая уже на 7-й день после иммунизации обеспечивала выживаемость 70% зараженных животных, на 14-й день - 80% и достигнув максимума к 30-м суткам, обеспечивала 90% выживаемость зараженных возбудителем эшерихиоза животных.

Полученные данные свидетельствуют о значительном преимуществе иммунизации животных вакциной СП4ПВ № 3, сконструированной на основе 4-пили антигенов с добавлением 0,1% апизана в качестве адъюванта.

В результате проведенной работы по уровню содержания специфических антител и иммуногенности различных вариантов субъединичной вакцины СП4ПЫ был рассчитан индекс защиты (ИЗ) сывороток крови в различные сроки после вакцинации животных (табл. 2).

Титры поствакцинальных специфических антиэшерихиозных антител в РБФ тест-системе с индексом защиты 8,1-8,5 обеспечивают формирование иммунитета с 50%-ной защитой животных от экспериментального заражения возбудителем эшерихиоза. Для 60%-ной защиты животных от экспериментального эшерихиоза индекс защиты составляет 9,3-9,8. При диапазоне индекса защиты 9,3-10,6 абсолютный

иммунитет составляет 70%. Для 80-90%-ной защиты животных от экспериментального эшерихиоза индексы защиты составляют в пределах от 10,7 до 12,6.

2. Индекс защиты сывороток крови белых мышей в различные сроки после вакцинации (в логарифмах с основанием 2 в РБФ тест-системе и

абсолютный иммунитет, %)

Вариант вакцины Индекс защиты (ИЗ) на день взя тия крови и абсолютный иммунитет (АИ) |по группам

до вакцинации 7 (1 1-я) 14 (2-я) 30 (3-я)

ИЗ АИ ИЗ АИ ИЗ АИ

№ 1 0,51 8,1 50 9,3 60 10,6 70

№ 2 0,42 8,3 50 9,5 60 10,9 70

№ 3 0,45 9,3 70 10,7 80 12,6 90

№ 4 0,39 7,7 40 8,9 50 9,8 60

№ 5 0,43 8,5 50 9,2 50 10,1 70

Таким образом, при ИЗ сывороток крови, равном 7,7 и ниже, животные частично устойчивы к заражению возбудителем эшерихиоза (иммунитет 40%), при ИЗ сывороток крови, равном 9,3 и выше (10,6), были устойчивы к заражению и при ИЗ 10,7 и выше - высокоустойчивы к заражению возбудителем эшерихиоза.

На основании сравнительного анализа иммуногенной эффективности различных вариантов вакцины СП4ПВ установили, что использование в качестве адъюванта апизана в вакцине обеспечивает наиболее высокую степень иммунного ответа организма на введение профилактического препарата.

Изучение иммунологической эффективности различных доз вакцины СП4ПВ проводили на белых мышах. В опытах использовали 40 белых мышей, которым однократно подкожно вводили последовательно пятикратно разведенные физиологическим раствором вакцины СП4ПВ № 3 в объеме 0,5 мл и через 15 суток животных заражали вирулентной культурой E. coli «КВ1». За иммунизированными и зараженными животными вели наблюдение в течение 30 дней после заражения, учитывая количество павших и выживших животных.

Результаты проведенных исследований представлены в таблице 3.

Наблюдается прямая зависимость защитного эффекта от дозы вводимого препарата. Выживаемость белых мышей при однократной подкожной иммунизации вакциной СП4ПВ № 3 составила 80%. Подобный защитный эффект наблюдался при однократном введении белым мышам 0,10 мл субъединичной вакцины. Расчеты показали, что иммунизирующая доза, обеспечивающая 50%-ную защиту привитых животных достигается при применении 0,011±0,002 мл исходного препарата (1Д50 = 0,011 мл), а число иммунизирующих доз в 1 мл вакцины составляет 90,9±13 1Д50.

3. Зависимость иммуногенности вакцины СП4ПВ от дозы вводимого _препарата_

Вакцина Иммунизирующие дозы, мл исходного препарата Результаты заражения 1Д50, мл исходного препарата 1Д50 в 1 мл

число зараженных мышей число выживших животных, %

СП4ПВ № 3 0,1000 15 80,0 0,011± 0,002 90,9±1 3

0,0200 15 53,3

0,0040 15 33,3

0,0008 15 20

Поливалентная ГОА формолтиомерсало-вая вакцина (контроль) 0,1000 20 40,0 0,125± 0,03 13,3

0,0200 20 20,0

0,0040 20 13,3

0,0008 20 6,7

1Д50 - иммунизирующая доза.

Применение регламентированной при колибактериозе поливалентной ГОА формолтиомерсаловой вакцины (контроль) в дозах, использованных для испытуемой вакцины СП4ПВ (0,1; 0,02; 0,004 и 0,0008 мл) было менее эффективным - доза 0,1 мл обеспечивало защиту от экспериментального заражения только 40% животных, 0,02 - 20%, 0,004 -13,3% и 0,0008 мл - 6,7% животных, что уступает субъединичной вакцине в 2 раза (Р<0,05).

Таким образом, экспериментальная субъединичная вакцина, созданная в ФГБУ «ФЦТРБ-ВНИВИ», обладает высокой иммуногенностью и обеспечивает защиту более 80% животных от смертельных доз возбудителя.

ЛИТЕРАТУРА: 1. Гафаров, Х.З. Эшерихиозная диарея новорожденных телят. Моно- и смешанные инфекционные диареи новорожденных телят и поросят / Х.З. Гафаров, А.В. Иванов, Е.А. Непоклонов, А.З. Равилов // Монография. - Изд-во ФЭН. - Казань, 2002. -С. 127-165. 2. Джупина, С.И. Этиология и профилактика массовых желудочно-кишечных болезней телят / Ветеринарный врач. - Казань, 2003. - № 2. - С.28-30. 3. Иванов, А.И. Эпизоотология и этиология колибактериоза телят в Зауралье (Данные за 1996-2006 гг.) / А.И. Иванов, И.Б. Баймурзин, // Вестник РАСХН. - 2007. - № 6. - С.69-70. 4. Зароза, В.Г. Эшерихиоз телят / В.Г. Зароза // Всесоюзная акад. с.-х. наук им. В.И.Ленина. - М.: Агропромиздат. - 1991. - 238 с. 5. Шахов, А.Г. Актуальные проблемы болезней молодняка в современных условиях / А.Г. Шахов // Ветеринарная патология. - 2003. - № 2(6). - С.6-7. 6. Шахов, А.Г., Бригадиров Ю.Н., Сашина Л.Ю., Субботина С.Г. Антогонистическая активность, профилактическая и лечебная эффективность пробиотика на основе Bacillus subtilis и Bacillus licheniformis при колибактериозе (отечной

болезни) поросят / А.Г. Шахов, Ю.Н. Бригадиров, Л.Ю. Сашина, С.Г. Субботина // Ветеринарный врач. - Казань, 2012. - № 2. - С.7.9; 7. Шахов, А.Г. Этиология и профилактика желудочно-кишечных и респираторных болезней телят и поросят / А.Г. Шахов // Ветеринарный врач. - Казань, 2003. - № 2. - С.25.28; 8. Acres, S.D. Enterotoxigenic Escherichia coli infections in newborn calves: A revies / S.dary Sc., 1985, 68, 1, p.229-256.

ИММУНОГЕННАЯ АКТИВНОСТЬ ПРОТИВОЭШЕРИХИОЗНОЙ ВАКЦИНЫ СП4ПВ НА ЛАБОРАТОРНЫХ ЖИВОТНЫХ

Сетдеков Р.А., Низамов Р.Н., Юсупов Р.Х., Иванов А.А, Юсупова Г.Р.

Резюме

Выживаемость белых мышей при однократной подкожной иммунизации вакциной СП4ПВ № 3 составила 80%. Подобный защитный эффект наблюдался при однократном введении белым мышам 0,10 мл субъединичной вакцины. Расчеты показали, что иммунизирующая доза, обеспечивающая 50%-ную защиту привитых животных, достигается при применении 0,011±0,002 мл исходного препарата (1Д50 = 0,011 мл), а число иммунизирующих доз в 1 мл вакцины составляет 90,9±13 1Д50.

ADJUVANCY PROTIVOESHERIHIOZNOY SP4PV VACCINE IN LABORATORY

ANIMALS

Setdekov R.A., Nisamov R.N., Yusupov R.Kh., Ivanov A.A., Yusupova G.R.

Summary

Livability rate of white mice once immunized subcutaneonsly with the SP4PV vaccine N 3 was 80%. Such protection effect was observed in mice introduced 0,10 ml of subsingle vaccine. The calculations showed tnat the immunizing dose proviclong 50% of vaccinoted animals protection is reached esing 0,011±0,002 ml of the primary preparation (ID50 = 0,011 ml) and the immunizing dose ratios is 90,9±13 ID50 per 1 ml vaccine.

УДК 615.45

ВЛИЯНИЕ СУЛЬФАТА И НАНОЧАСТИЦ ЖЕЛЕЗА НА

ОСОБЕННОСТИ ОБМЕНА ХИМИЧЕСКИХ ЭЛЕМЕНТОВ

В МЫШЕЧНОЙ ТКАНИ

Сизова Е.А. - к.б.н., Лебедев С.В. - д.б.н., Сипайлова О.Ю. - к.б.н.,

Нестеров Д.В - к.б.н.

Оренбургский государственный университет, тел.: 8 (3532) 37-24-82

Ключевые слова: железо, наночастицы, межэлементный обмен, пероральное введение.

Keywords: iron, nanoparticles, interelement exchange, oral introduction.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.