CC BY
57
MOBILE PASTORAL EMPIRE JUCHIDS ("GOLDEN HORDE") LOST TECHNOLOGY
Nabiev R.V.
Summary
Allegations that the seasonal nomadic herding nomads suppressed grain and has ruined agricultural soil, is belied by the actual data.On the contrary, such a way of management contributed to high grain yield.However, in the present conditions to revive it does not seem possible.
УДК 619:615.3:612.017.11/.12
ИСПОЛЬЗОВАНИЕ АПИЗАНА В КАЧЕСТВЕ ИММУНОМОДУЛЯТОРА ПРИ СТИМУЛЯЦИИ ПОСТВАКЦИНАЛЬНОГО ИММУНИТЕТА
Низамов Р.Н. - д.в.н., профессор; *Кабиров Г.Ф. - д.в.н., профессор; Юсупов Р.Х. -д.в.н., профессор; Сетдеков Р.А. - к.в.н.; Иванов А.А. - к.э.н.; Юсупов Р.Р. - к.в.н.;
Тухфатуллов М.З., *Юсупова Г.Р. - д.б.н., доцент Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности,
г. Казань
*Казанская государственная академия ветеринарной медицины имени Н.Э. Баумана
Ключевые слова: апизан, иммуномодулятор, иммунитет, белые мыши, вакцина.
Key words: apisane, immunomodulator, immunity, white mice, the vaccine.
В современных условиях ведения животноводства на фоне воздействия на животных стресс-факторов различной (физической, химической и биологической) природы наблюдается существенное угнетение иммунного ответа при профилактических обработках. Для получения полноценного иммунитета и повышения эффективности вакцинации широко используют препараты, целенаправленно воздействующие на иммунитет - иммуностимуляторы и иммуномодуляторы. Особенной активностью обладают биологически активные вещества на основе продуктов пчеловодства, которые наряду с лечебно-профилактической активностью одновременно обладают и высокими иммуностимулирующими и иммуностимулирующими свойствами, активизируя поствакцинальный противобактериальный и противовирусный иммунитет [1].
Целью настоящего исследования является разработка способа активизации поствакцинального иммунитета против эшерихиоза,
протекающего на фоне радиогенной иммунодепрессии.
Материалы и методы. В качестве иммунизирующих агентов использовали противоэшерихиозную вакцину, противолучевой полиантиген, композиционные препараты на основе указанных вакцин и потенциального иммуномодулятора - хитозана, полученного из подмора пчел - апизана. Препарат апизан получали из подмора пчел путем дезацилирования (ДА) и депротенирования (ДП) в растворах щелочи (NaOH) и кислот (уксусная кислота) в соответствии с общепринятой методикой [2].
Моделирование эшерихиозной инфекции у белых мышей на фоне иммунодепрессии осуществляли путем облучения животных на гамма-установке «Пума» с источником излучения 60Со при мощности экспозиционной дозы 2,58-10-5 А/кг в дозе 6,0 Гр и заражения их вирулентным штаммом возбудителя эшерихиоза E. coli КВ-1.
Объектом исследования служили белые мыши, которые были разделены на 5 групп по 6 животных в каждой. Животным 1-й группы за 15 сут до облучения и заражения подкожно вводили противоэшерихиозную вакцину в дозе 0,1 мл; животны 2-й группы -противолучевой полиантиген; животным 3-й группы -противоэшерихиозную вакцину с хитозаном (апизаном) в количестве 0,2 мл на голову; животным 4-й группы - противолучевой полиантиген с хитозаном в указанной дозе. Облученных и зараженных возбудителем эшерихиоза животных не иммунизировали, и они служили контролем заражения и облучения. Через 3 и 14 дней после иммунизации у животных брали пробы крови и определяли титр противоэшерихиозных и противорадиационных антител в РНГА-тесте с использованием сенсибилизированных эшерихиозным и лучевым (радиотоксином) антигенами эритроцитов соответственно.
Критериями иммуностимуляции и иммуномодуляции служили увеличение титра антител на фоне иммунизации испытуемыми вакцинами и активации факторов клеточного иммунитета. Критерием антиинфекционной и противолучевой защиты служила 30-суточная выживаемость зараженных возбудителем эшерихиоза на фоне воздействия иммунодепрессанта - радиогенного стресса.
Результаты изучения биосинтеза противоэшерихиозных и противолучевых антител при изолированном и сочетанном с апизаном применении испытанных вакцин представлены в таблице 1.
Из данных таблицы видно, что совместное применение противоэшерихиозной вакцины с испытуемым иммуномодулятором -апизаном оказывало иммуностимулирующее действие, увеличивая титр антител в 1,23 на 3 день и в 1,32 раза (Р<0,05) на 14 день после иммунизации животных.
Таблица 1. Влияние апизана на биосинтез противоэшерихиозных и противолучевых антител у зараженных возбудителем эшерихиоза белых мышей на фоне радиогенного стресса
Срок исследования Титры антител, иммунизированных различными вакцинами животных в РНГА (1о§2)
противоэшерихиозная вакцина ПЭВ + апизан противорадиационный полиантиген ПРПА + апизан
До иммунизации 0 0 0 0
Через 3 сут 3,9±0,43 6,8±0,39* 4,7±0,27 6,5±0,13
Через 14 сут 6,7±0,19 8,9±0,25* 7,9±0,11* 9,1±0,31*
ПЭВ - противоэшерихиозная вакцина, ПРПА - противорадиационный полиантиген; * - Р<0,05.
Результаты параллельных серологических исследований в РНГА сывороток крови белых мышей, иммунизированных противорадиационным полиантигеном, за 3 и 14 сут до облучения и заражения показали, что, как и в предыдущем варианте опыта, наблюдалась аналогичная тенденция - значительное увеличение титра противорадиационных антител на фоне иммунизации животных комплексным полиантигеном в сочетании с потенциальным иммуностимулятором - хитозаном из подмора пчел - апизаном.
Как видно из данных таблицы 1, титр противорадиационных антител сывороток крови животных, иммунизированных комплексным противолучевым полиантигеном и апизаном превышал в 1,38 (3-й день после иммунизации) и 1,17 (Р<0,05) раза по сравнению с изолированным применением противолучевого полиантигена.
Сочетанная иммунизация животных противоэшерихиозной вакциной и противорадиационным полиантигеном в сочетании с апизаном оказывала активизацию не только гуморального, но и клеточного иммунитета.
Результаты определения фагоцитарного числа и фагоцитарного индекса у иммунизированных различными вариантами вакцин показали, что сочетанное применение обоих вариантов вакцин в сочетании с испытуемым иммуностимулятором оказывало активизирующее действие на систему клеточного иммунитета.
Так, фагоцитарное число у иммунизированных противоэшерихиозной вакциной животных с 3-го к 14 дню повышалось с 2,9 до 3,5, а при использовании комплексной вакцины с апизаном - с 3,3 до 6,1 соответственно.
Результаты параллельного изучения плазмоцитарной реакции, как показателя иммунологической перестройки организма, направленной на биосинтез противоэшерихиозных и противолучевых антител, показали, что у животных, иммунизированных комплексными вакцинами, через 2 недели
после иммунизации в селезенке число плазмобластов составило 9,3 против 6,1 в группе животных, иммунизированных изолированной противоэшерихиозной вакциной.
Аналогичная же тенденция активации плазмоцитарной реакции организма просматривалась на фоне применения комплексного противорадиационного полиантигена с потенциальным
иммуномодулятором - апизаном.
Полученные данные свидетельствуют о значительной иммунологической перестройке организма животных, особенно при иммунизации вакцинами с апизаном. Иммуноморфогенез направлен на повышение количества ранних иммунокомпетентных клеток-плазмобластов, что значительно повышает уровень гуморального иммунного ответа на введение испытуемого антигена.
Учитывая, что хитозан наряду с иммуномодулирующей активностью обладает одновременно радиопротекторной, антимикробной и антиоксидантной активностью, параллельно изучали выживаемость зараженных возбудителем эшерихиоза животных на фоне радиогенного стресса.
Результаты динамического наблюдения за животными в течение 30 дней после облучения и заражения показали, что иммунизированные животные (контроль) погибали в течение 3-7 дней после физико-биологического воздействия на фоне развития эшерихиозного сепсиса. Хотя доза облучения 6,0 Гр для белых мышей является среднелетальной (ЛД50), однако облучение зараженных возбудителем эшерихиоза животных оказывало иммуносупрессивное действие, усиливая токсическое действие энтеротоксигенного штамма E. coli.
В опытных группах животных, иммунизированных до облучения и заражения использованными вакцинами, наблюдали проявление радиопротекторного и антиинфекционного эффекта, который зависел как от вида использованного профилактического средства, так и сочетания его с потенциальным иммуномодулятором и иммуностимулятором.
Так, выживаемость зараженных возбудителем эшерихиоза и облученных у-лучами 60Со животных после иммунизации их противоэшерихиозной вакциной (1-я группа) составляла 50%, а у привитых этой же вакциной в сочетании с апизаном (2-я группа) - 60%; применение на этом фоне противорадиационного полиантигена обеспечивало выживаемость 70% облученных и зараженных E. coli животных (3-я группа), а сочетанное применение указанной радиовакцины с потенциальным иммуномодулятором (апизаном) усиливало радиозащитную и антиинфекционную активность препарата, обеспечивая выживаемость 80% зараженных вирулентным штаммом возбудителя эшерихиоза животных на фоне радиогенного стресса.
Заключение. Путем депротенирования и ферментативного
гидролиза пчелиного подмора получен хитозан природного происхождения - апизан, который использован в качестве иммуномодулятора нового поколения.
Установлено, что сочетанное применение апизана с противоэшерихиозной вакциной и противорадиационным полиантигеном оказывало как иммуномодулирующий и иммуностимулирующий эффект путем активации гуморального и клеточного звеньев иммунитета. Применение противоэшерихиозной вакцины и противорадиационного полиантигена в сочетании с апизаном за 1-15 дней до заражения и облучения оказывало радиозащитный и антиинфекционный эффект, повышая выживаемость животных на 30-40% по сравнению с изолированным применением указанных вакцин.
ЛИТЕРАТУРА: 1. Красочко П.А., Прудников В.С., Михайлова А.В. Иммуноморфологические изменения у серебристо-черных лисиц при стимуляции поствакцинального иммунитета продуктами пчеловодства // Матер II Междунар. научн.-практ. конф. по апитерапии (5-6 июля 2000 г.). - Уфа, 2004. - С. 158-160. 2. Хитин и хитозан. Получение, свойства и применение / Под ред. академика РАСХН К.Г. Скрябина. - М.: Наука, 2002. - 368с.
ИСПОЛЬЗОВАНИЕ АПИЗАНА В КАЧЕСТВЕ ИММУНОМОДУЛЯТОРА ПРИ СТИМУЛЯЦИИ ПОСТВАКЦИНАЛЬНОГО ИММУНИТЕТА
Низамов Р.Н., Кабиров Г.Ф., Юсупов Р.Х., Сетдеков Р.А., Иванов А.А., Юсупов Р.Р., Тухфатуллов М.З., Юсупова Г.Р.
Резюме
Путем депротенирования и ферментативного гидролиза пчелиного подмора получен хитозан природного происхождения - апизан, который использован в качестве иммуномодулятора нового поколения. Установлено, что сочетанное применение апизана с противоэшерихиозной вакциной и противорадиационным полиантигеном оказывало как иммуномодулирующий и иммуностимулирующий эффект путем активации гуморального и клеточного звеньев иммунитета. Применение противоэшерихиозной вакцины и противорадиационного полиантигена в сочетании с апизаном за 1-15 дней до заражения и облучения оказывало радиозащитный и антиинфекционный эффект, повышая выживаемость животных на 30-40% по сравнению с изолированным применением указанных вакцин.
