CC BY
23УДК: 617.586:616.13-005.4: 616.379-008.64-07-08
ИММУННЫЙ СТАТУС У БОЛЬНЫХ СИНДРОМОМ ДИАБЕТИЧЕСКОЙ СТОПЫ ПРИ КРИТИЧЕСКОЙ ИШЕМИИ
НИЖНИХ КОНЕЧНОСТЕЙ
ХАМДАМОВ БАХТИЁР ЗАРИФОВИЧ доктор медицинских наук, доцент кафедры факультетской и госпитальной хирургии, урологии Бухарского медицинского
института. ОНОЮ Ю 0000-0003-3569-6688 ГАЗИЕВ КАРИМ УМАРАМОВИЧ кандидат медицинских наук, доцент кафедры факультетской и госпитальной хирургии, урологии Бухарского медицинского института. ОНОЮ Ю 0000-0003-0387-5892 ХАМДАМОВ АЛИШЕРЖОН БАХТИЁРОВИЧ студент 6 курса лечебного факультета Бухарского медицинского института ОНОЮ Ю 0000-0001-6614-4806
АННОТАЦИЯ
Сравнительная характеристика параметров иммунной системы Т- и В-лимфоцитов показали наличие дисбаланса и напряжённости в иммунной системы больных синдромом диабетической стопы признаками критической ишемии нижних конечностей, что указывает на развитие синдрома системной воспалительной реакции и возникновения грубых иммунологических перестроек отражающийся в значительной активности провоспалительного цитокина ИЛ-17А, которая имеет большую ценность в качестве теста ранней диагностики развития осложнений в виде органных дисфункций.
Ключевые слова: диабетическая стопа, провоспалительные цитокины, сахарный диабет, метаболический синдром
IMMUNE STATUS OF PATIENTS WITH DIABETIC FOOT SYNDROME IN CRITICAL LOWER LIMB ISCHEMIA
KHAMDAMOV BAKHTIYOR ZARIFOVICH
Doctor of Medical Sciences, Associate Professor of Faculty and Hospital Surgery, Urology of the Bukhara Medical Institute.
ORCID ID 0000-0003-3569-6688 GAZIEV KARIM UMARAMOVICH candidate of medical sciences, associate professor of faculty and hospital surgery, urology of the Bukhara Medical Institute.
ORCID ID 0000-0003-0387-5892 KHAMDAMOV ALISHERZHAN BAKHDYROVICH student of 6 courses of the lecture faculty of the Bukhara Medical
Institute ORCID ID 0000-0001-6614-4806 ABSTRACT
Comparative characteristic parameters of the immune system T -and B-lymphocytes showed the presence of imbalance and tension in the immune system of patients with diabetic foot syndrome signs of critical ischemia of the lower extremities, indicating the development of systemic inflammatory response syndrome and the occurrence of gross rearrangements immunological reflected in a significant activity of proinflammatory cytokine IL-17A, which is of great value as a test for early diagnosis of complications in the form of organ dysfunctions.
Keywords: diabetic foot, pro-inflammatory cytokines, diabetes mellitus, metabolic syndrome
ДИАБЕТИК ТОВОН СИНДРОМИ ВА ОЁКЛАРНИНГ КРИТИК ИШЕМИЯСИ БУЛГАН БЕМОРЛАРНИНГ ИММУН ХОЛАТИ
ХАМДАМОВ БАХТИЁР ЗАРИФОВИЧ
т.ф.д., факультет ва госпитал хирургия, урология кафедраси доценти, Бухоро давлат тиббиёт институти.
ОИОЮ Ю 0000-0003-3569-6688 ГАЗИЕВ КАРИМ УМАРАМОВИЧ
Т.ф.н., факультет ва госпитал хирургия, урология кафедраси доценти, Бухоро давлат тиббиёт институти.
ОНОЮ Ю 0000-0003-0387-5892 ХАМДАМОВ АЛИШЕРЖОН БАХТИЁРОВИЧ Даволаш факультети 6 курс талабаси, Бухоро давлат тиббиёт институти. ОНОЮ Ю 0000-0001-6614-4806 АННОТАЦИЯ
Т- ва Б- лимфоцитлар параметрларининг ;иёсий характеристикам диабетик товон синдроми ва оё;ларнинг критик ишемияси булган беморларнинг иммун тизимидаги мувозанатнинг бузилганлиги ва унинг таранг цолатдалигини курсатди, бу уз навбатида уларда тизимли яллигланиш синдроми ва чу;ур иммунологик узгаришлар ривожланганлиги х,а;ида далолат бериб, яллигланишга ;арши цитокин ИЛ-17А нинг кескин фаоллаш-ганлигида аксини топди. Органлар дисфункцияси ривожланишини эрта ташхислаш тести сифатида ИЛ-17А нинг ани;ланиши катта ацамиятга эга.
Калит сузлар: диабетик товон, яллигланиш цитокинлари, ;андли диабет, метаболик синдром
Актуальность: У больных страдающим сахарным диабетом, критическая ишемия нижних конечностей (КИНК) встречается примерно в пять раз чаще. Особой тяжестью при этом, отличаются гнойно-некротические осложнения синдрома диабетической стопы -[1, 9, 13].
Установлено, что развитие синдрома диабетической стопы (СДС) с признаками критической ишемии нижних конечностей (КИНК) у больных приводит к различным осложнениям, в том числе и
развитию синдрома системной воспалительной реакции (ССВР), которые отрицательно сказываются на результатах лечения данной категории больных, зачастую приводя к органным дисфункциям - [10, 11, 12, 14]. Как известно, критическая ишемия нижних конечностей характеризуется наличием иммунодефицита по Т-звену иммунитета, дисбалансом показателей гуморальной защиты, про -и противовоспалительных цитокинов - [2, 6, 15].
При этом в литературе также большое значение придается изучению синдрома системной воспалительной реакции (ССВР), который представляет собой универсальный генерализованный ответ организма на различные повреждающие воздействия, в том числе системную и локальную гипоксию, и обусловлен выбросом в циркуляторное русло медиаторов воспаления - [3, 7, 8]. Проявления ССВР у больных с критической ишемией нижних конечностей (КИНК) при синдроме диабетической стопы, связаны с гипоксией большой массы мышечной ткани, которая, по сути, и определяет тяжесть течения заболевания, способствует возникновению грубых иммунологических перестроек, которая приводить к развитию ССВР, замыкая при этом возникающий порочный круг - [4, 5, 14, 15].
Комплексный подход к оценке иммунного статуса у таких больных были проведены крайне редко, в связи с тем мы сочли целесообразным провести анализ полученных результатов по определению параметров иммунной системы больных и здоровых лиц в сравнительном аспекте.
Цель исследования: Изучение и оценка показателей иммунной системы больных синдромом диабетической стопы признаками критической ишемии нижних конечностей в сравнении с данными здоровых лиц.
Материал и методы: Для проведения исследований были привлечены 412 больных синдромом диабетической стопы
признаками критической ишемии нижних конечностей, из них 283 мужчин (68,7%) и 129 женщин (31,3%). При этом у всех исследованных пациентов были выявлены синдром системной воспалительной реакции. Из всех обследованных больных 99 были городскими жителями (24,0%), а 313 человек были сельчанами (76,0%). Средний возраст обследованных больных составил 62,2±12,5 года. Контрольную группу составили 30 здоровых лиц, половозрастной состав которых был практически одинаковым с больными.
Для проведения иммунологических параметров забор крови осуществляли из локтевой вены в центрифужную пробирку, обработанную гепарином в количестве 5,0 мл. Нами 10 мкл были отобраны для подсчета лейкоцитов и лимфоцитов на камере Горяева с помощью краски Задорожного С.И. и Дозморова И.М. (1987).
Мононуклеарные клетки из периферической крови получали путем выделения на градиенте плотности фиколл-верографинас плотностью 1,077г/л по Воуит (1968). Число клеток подсчитывали в камере Горяева общепринятым методом под микроскопом и доводили концентрацию лимфоцитов до 2х106 в 1 мл, жизнеспособность лимфоцитов определяли в тесте с 0,1%-ной трипановой синью.
Оценку состояния иммунной системы организма больных и здоровых проводили по экспрессии антигенов ОЭ- дифферен-цировочных и активационных. Определяли следующие маркеры иммунокомпетентных клеток: CD3+-, ОЭ4+-, ОЭ8+-, ОЭ16+-, 0Э20+-, ОЭ23+-, 0Э38+-, а также CD25+-, ОЭ95+-лимфоцитов. Экспрессию рецепторов ОЭ проводили в реакции розеткообразования с помощью моноклональных антител серии LT производство ООО «Сорбент» (РФ) по методу Гариба Ф.Ю. и соавт. (1995).
Определение концентрации в сыворотке крови обследованных иммуноглобулинов основных трех классов М, А и О проводили методом радиальной иммунодиффузии по Манчини (1963).
Интерлейкины (цитокины) определяли в сыворотке крови обследованных методом твердофазного иммуноферментного анализа (ИФА). Для реализации этого варианта использованы по два моноклональных антитела с различной этиотропной специфичностью к интерлейкинам-10 и 17А. Один из них иммобилизовано на внутренней поверхности лунок планшета, второе конъюгировано с пероксидазой. На первой стадии анализа, содержащийся в калибровочных и исследуемых пробах, производилось связывание с антителами, иммобилизованном на внутренней поверхности лунок. На второй стадии анализа иммобилизованный интерлейкин взаимодействовал с коньюгатом вторых антител -пероксидазой. Количество связавшегося коньюгата было прямо пропорционально количеству интерлейкина в исследуемом образце. Во время инкубации с субстратной смесью происходило окрашивание раствора в лунках. Степень окраски было прямо пропорциональна количеству связавших меченых антител. После измерения оптической плотности раствора в лунках на основании калибровочной кривой рассчитывали концентрацию интерлейкина в определяемых образцах. При этом был использован тест набор «Цитокин» (Санкт-Петербург, РФ).
Все исследования были проведены в отделении гнойной хирургии Бухарского областного многопрофильного медицинского центра и в Институте иммунологии и геномики человека АН РУз.
Результаты исследований обрабатывали общепринятым методом вариационной статистики. Был использован пакет программ для медико-биологических исследований. При организации и проведении исследований были использованы принципы доказательной медицины.
Результаты и обсуждение: Полученные результаты показали, что если 2,0-кратное увеличение количества лейкоцитов у больных синдромом диабетической стопы с признаками критической ишемии нижних конечностей (12270±70х109/л) по сравнению данными здоровых лиц (6200±73х109 /л) были проявлением воспалительного процесса в организме, то снижение относительного и абсолютного количество лимфоцитов (соответственно 22,14±1,40% и 2717±171мкл) указывало на снижение резистентности организма этих пациентов (таблица 1).
Изучение относительного и абсолютного количества лимфоцитов, несущих на своей поверхности дифференцирующих маркеров ОЭ3+ (Т-лимфоциты) показали, что они изменились разнонаправленно по отношению к данным контроля. Если относительное количество ОЭ3+-клеток в 1,2 раза достоверно снижаются по отношению к данным здоровых (соответственно 57,64±1,20% против 47,45±1,29%, Р<0,05 ), то абсолютное количество этих клеток были достоверно повышенными по отношению к нормативу в 1,1 раза (соответственно 1289±35 мкл против 1130±23 мкл). То есть у больных синдромом диабетической стопы признаками критической ишемии нижних конечностей был установлен Т-иммунодефицит.
Таблица.1
Сравнительные показатели клеточного иммунитета больных синдромом диабетической стопы признаками критической ишемии нижних конечностей и здоровых лиц, М±m
Показатели Контрольная группа (здоровые лица) БольныеСДС признаками КИНК
Лейкоциты, 109 /л 6200±73 12270±70
Лимфоциты, мкл 1953±60 2717±171
Лимфоциты, % 31,51±0,97 22,14±1,40
ОЭ3+-клетки, % 57,64±1,20 47,45±1,29
ОЭ3+-кпетки, мкл 1130±23 1289±35
ОЭ4+-клетки, % 31,66±0,80 26,15±2,18
ОЭ4+-кпетки, мкл 618±16 710±59
ОЭ8+-клетки, % 23,14±0,68 20,0±1, 16
ОЭ8+-кпетки, мкл 452±13 543±32
ОЭ4+/О08+, ед 1,37±0,01 1,31±0,02
ОЭ38+-клетки, % 15,84±0,55 20,44±1,07
ОЭ38+-клетки, мкл 309±11 555±29
Далее нами были изучены основные субпопуляции Т-лимфоцитов - Т-хелперы/индукторы (ОЭ4+-клетки) и Т-супрессоры/цитотоксические лимфоциты (ОЭ8+-кпетки).
Тенденция и направленность изменений относительного и абсолютного количества этих субпопуляций были такими же, как и у ОЭ3+-лимфоцитов, но с разной интенсивностью. Дефицит относительного количества ОЭ4+-клеток у больных было 1,2-кратным по отношению к данному параметру здоровых лиц-соответственно 26,15±2,18% против 31,66±0,80% (Р<0,05), но дефицит CD8+-клеток было мало заметным -снижение составило в 1,1 раза (соответственно 20,0±1,16% против 23,14±0,68%, Р<0,05). В обеих случаях абсолютные значения, как и у ОЭ3+-лимфоцитов,были достоверно выше контрольных значений (Р<0,05). На этом фоне иммунорегуляторный индекс (CD4+/CD8+) также был досто- верно снижен у больных по отношению к норме - соответственно 1,31±0,02 ед. против 1,37±0,01ед. (Р<0,05).
Сравнительное изучение относительного и абсолютного количество Т- лимфоцитов (ОЭ3+-кпетки) и их регуляторных субпопуляций- Т-хелперов/индукторов (ОЭ4+-клеток) и Т-
супрессоров/цитотоксических лимфоцитов (CD8+клетки) показали, что у больных СДС признаками КИНК параметры изменились с одинаковой тенденцией и разнонаправленностью. Абсолютные количества всех клеток у больных были достоверно повышенными, но относительные показатели были достоверно сниженными по отношению к данным здоровых лиц.
Учитывая тот факт, что в клинической иммунологии деятельность иммунной системы оцениваются по функциональным состояниям иммунокомпетентных клеток обследованных, то относительное количество клеток указывает на истинное состояние иммунного статуса. Исходя из этого, нами установлено, что у изученных больных СДС признаками КИНК обнаруживается Т-иммунодефицит.
Известно, что маркер CD38+ обнаруживается на поверхности многих иммуннокомпетентных клеток и участвует в процессах гибели клеток, апоптоза и других. ОЭ38+ участвует в регуляции метаболизма и в патогенезе процесса старения и воспаления. Учитывая это, мы сочли целесообразным определение лимфоцитов, несущих на своей поверхности маркер ОЭ38+.
Полученные результаты показали, что относительное количество CD38+-лимфоцитов, в отличие от Т-лимфоцитов и их субпопуляций, повышаются по отношению к нормальным значениям в 1,3 раза - соответственно 20,44±1,07% против 15,84±0,55% (Р<0,05). Идентичные показатели были получены и при анализе абсолютных показателей этих лимфоцитов, где разница между данными больных и здоровых лиц была 1,8-кратной в пользу больных синдромом диабетической стопы с КИНК- соответственно 555±29 мкл против 309±11мкл (Р<0,001).
Таким образом, установлено, что относительное и абсолютное количество ОЭ38+-лимфоцитов у больных СДС при КИНК было
достоверно повышены в 1,3 и 1,8 раза по отношению к нормативным значениям. Данный факт указывает, что в отличие от Т-лимфоцитов и их субпопуляций, функциональная активность CD38+-лимфоцитов усиливается, о чем свидетельствует увеличение их количества. Если учесть, что ОЭ38+-лимфоциты участвуют в процесс старения и воспаления, связанные с изученными нами больными, то для изучения иммунного статуса этих больных рекомендуется включить данный параметр (ОЭ38+-клеток) как дополнительный, высокоинформативный критерий состояния иммунного статуса у больных старших возрастных категорий (лица пожилого и старческого возраста).
На следующем этапе исследований нами были изучены параметры В-системы лимфоциты, результаты которых приведены в таблице 2.
Полученные результаты показывают, что в отличие от Т-системы лимфоцитов относительное и абсолютное количество В-лимфоцитов (ОЭ20+-кпетки) у больных было достоверно больше показателей здоровых лиц, соответственно в среднем в 1,2 и 1,6 раза (Р<0,05) - 22,80±0,96% и 619±26 мкл у больных, против 19,42±1,39% и 379±27 мкл у здоровых лиц.
Таблица 2
Сравнительные показателы В-системы лимфоцитов и гуморального иммунитета у больных синдромом диабетической стопы признаками критической ишемии нижних конечностейи здоровых лиц, М±т
Показатели Контрольная группа (здоровые лица) Больных СДС с признаками КИНК
ОЭ20+-клетки, % 19,42±1,39 22,80±0,96
ОЭ20+-клетки, мкл 379±27 619±26
ОЭ23+-клетки, % 12,86±0,50 19,25±1,48
ОЭ23+-клетки, мкл 251±10 523±40
1дМ, г/л 0,92±0,04 2,65±0,05
1дА, г/л 1,89±0,08 4,26±0,12
г/л 9,10±0,27 9,61±0,09
Практически такие же результаты, но с большей интенсивностью наблюдали по содержанию в периферической крови больных ОЭ23+-лимфоцитов, относительное и абсолютное содержание которых были достоверно больше этих же параметров здоровых лиц (Р<0,001) - соответственно в среднем 19,25±1,48% против 12,86±0,50% (разница в 1,5 раза, Р<0,001) и в среднем 523±40 мкл против 251±10 мкл (разница в 2,1 раза, Р<0,001).
Показатели гуморального иммунитета (иммуноглобулины классов М, А и G - 1дМ, 1дА и IgG) имели такую же тенденцию и направленность изменений у обследованных больных, как и CD20+-и ОЭ23+-клетки.
Концентрация всех изученных иммуноглобулинов сыворотки крови у больных были повышенными по отношению к данным контроля, только лишь с разной интенсивностью (рисунок.1).
Если показатели 1дМ у больных были повышенными по отношению к данным здоровых лиц в среднем в 2,9 раза (соответственно 2,65±0,05 г/л против 0,92±0,04 г/л, Р<0,001), то практически такая же тенденция наблюдалась и по содержанию в сыворотке крови больных и здоровых 1дА, отличие составило в 2,3 раза - соответственно 4,26±0,12 г/л против 1,89±0,08г/л (Р<0,001). Интенсивность отличий между содержанием в периферической крови обследованных больных и здоровых лиц 1дО была относительно низкой -в среднем в 1,1 раза увеличена у пациентов в
сравнении с здоровыми - соответственно 9,61±0,09г/л против 9,10±0,27 г/л (Р<0,05).
12 10 8 6 4 2 0
9.61
" 9,1
4.26
2.65
< ----- 0,92 1,89
—Здоровье лица
1§А
■Больные с дибетической стопой
Рис.1 Сравнительные параметры содержания основных классов иммуноглобулинов в сыворотке крови больных СДС признаками КИНК и здоровых лиц, г/л
Таким образом, изучение и оценка параметров В-системы лимфоциты и гуморального иммунитета у больных СДС признаками КИНК в сравнение с данными здоровых лиц показали, что относительное и абсолютное содержание CD20+- и CD23+-клеток были достоверно повышенными у больных в среднем в 1,2-2,1 раза по отношению к контролю. Такую же тенденцию и направленность изменений наблюдали и при сравнительном анализе содержания ^М, ^А и !дО в сыворотке крови у обследованных больных. Наибольшему увеличении были подвержены ^М, где отличие от здоровых составили 2,9 раза (Р<0,001), а наименьшему повышению !дО, где разница от данных контроля было в 1,1 раза (Р<0,05).
Сравнительная характеристика параметров иммунной системы Т- и В- системы лимфоцитов показали, что у обследованных больных СДС признаками КИНК эти показатели изменились в противоположную сторону- снижение содержания Т-лимфоцитов и увеличение концентрации В-лимфоцитов. Это указывает на
следующие выявленные нами закономерности: во-первых, у изученных больных наблюдается наличие дисбаланса показателей Т- и В-лимфоцитов; во-вторых, данный дисбаланс указывает на наличии напряженности в иммунной системе больных; в-третьих, снижение одного компонента иммунной системы организма обуславливает повышение другого компонента иммунитета, которые взаимно дополняют функции друг друга.
На следующем этапе исследований был проведен анализ экспрессии некоторых активационных маркеров на поверхности лимфоцитов периферической крови изученных больных СДС признаками КИНК и здоровых лиц в сравнении. В исследованиях была проведена оценка особенности экспрессии маркера ранней активации лимфоцитов - СЭ25+-клеток, при этом оценивали готовность клеток к апоптозу на основании определения содержания экспрессии СЭ95+-кпеток (таблицаЗ).
Полученные результаты показали, что маркеры лимфоцитов СЭ25+-клетки были достоверно снижены у обследованных больных по сравнением с данными здоровых лиц соответственно в среднем 15,33±1,19% против 18,53±0,76% (Р<0,05). Полученная 1,2-кратная разница указывает об увеличении содержания лимфоцитов с маркерами ранней активации (СЭ25+-кпеток), такую же картину наблюдали при оценке СЭ95+-кпеток, отвечающих за готовность клеток к апоптозу- соответственно в среднем 19,58±1,28% против 26,63±0,92% (разница в 1,4 раза, р<0,05).
Известно, что натуральные киллеры (Natural killers cells-NK-клетки) содержат на своей поверхности маркер CD16+ и отвечает за обнаружение и уничтожение опухолевых клеток. Активация данных СЭ16+-клеток указывало на наличие напряженности в иммунной системе.
Таблица 3
Сравнительные параметры лимфоцитов с маркером активации и апоптоза, натуральных киллеров у больных СДС признаками
КИНК и здоровых лиц, М±m
Показатели Контрольная группа БольныеСДС признаками КИНК
ОЭ25+-клетки, % 18,53±0,76 15,33±1,19
ОЭ25+-клетки, мкл 362±15 417±32
ОЭ95+-клетки, % 26,63±0,92 19,58±1,28
ОЭ95+-клетки, мкл 520±18 527±35
ОЭ16+-клетки, % 12,70±0,50 17,82±1,01
ОЭ16+-клетки, мкл 248±10 484±27
Исследованиями установлено что, как и лимфоциты с маркерами активации лимфоцитов с готовностью к апоптозу клеток (CD25+ и CD95+-клетки) так иCD16+лимфоциты характеризовались усилением функциональной активности, то есть их содержание было достоверно повышенным по отношению к нормальным величинам -соответственно в среднем 17,82±1,01% против 12,70±0,50% (разница в 1,4 раза, Р<0,05).
Таким образом, изучение лимфоцитов с маркерами ранней активации (CD25+-клетки) и готовности клеток к апоптозу (CD95+-клетки), а также натуральных киллеров (CD16+-клеток) у больных СДС признаками КИНК в сравнении с здоровыми людьми показали, что содержание всех изученных клеток были достоверно повышенными. Это факт указывает, что все лимфоциты активизированы и иммунная система напряжена.
Нами с целью ранней диагностики, мониторинга течения, а также прогнозирования исхода заболевания были изучены
содержание некоторых про- и противовоспалительных цитокинов для оценки иммунного статуса у больных СДС признаками КИНК. При этом, были определены два цитокина - провоспалительный цитокин ИЛ-17А и противовоспалительный цитокин ИЛ-10, результаты которых приведены в таблице. 4.
Таблица 4
Сравнительное содержание про- и противовоспалительных цитокинов у больных синдромом диабетической стопы признаками критической ишемии нижних конечностейи
здоровых лиц, М±m
Показатели Контрольная группа (здоровые лица) Больные СДС признаками КИНК
ИЛ-17А, пг/л 3,98±0,51 222,93±4,74
ИЛ-10 пг/л 17,60±1,43 65,33±1,08
Исследованиями установлено, что содержание ИЛ-17А в сыворотке крови здоровых лиц составило в среднем 3,98±0,51пг/л, а у больных СДС признаками КИНК этот параметр увеличился в 56,0 раз и составил в среднем 222,93±4,74 пг/л (Р<0,001).
Содержание в сыворотке крови обследованных больных и здоровых противовоспалительного цитокина ИЛ-10 имел тенденцию к увеличению у изученных больных в 3,7 раза - соответственно в среднем 65,33±1,08 пг/л 17,60±1,43 пг/л (Р<0,001).
Видно, что оба цитокина (ИЛ-17А и ИЛ-10) достоверно были увеличены у больных по отношению к нормативным значениям. Этот факт подтверждает, что у обследованных больных воспалительный процесс был развит сильно, связанная с достаточным количеством патогенов в инфицированном очаге и наличием как признаков критической ишемии, так и развитием у больных синдрома системной
воспалительной реакции (ССВР), что на наш взгляд усугубляет течение патологического процесса, а воспалительный процесс в свою очередь приводить к усугублению признаков критической ишемии. Таким образом, возникает порочный круг с взаимо отягощением воспаления и критической ишемии.
При этом, привлекает внимание высокая кратность разницы между сравниваемыми группами больных и здоровых лиц(рисунок.2).
60 56
50
-1
3,7
Кратность отличий
В ИЛ-10 ИИЛ-17А
Рисунок 2. Кратность отличий ИЛ-17А и ИЛ-10 между больными СДС признаками КИНК и здоровыми лицами
Таким образом, сравнительный анализ цитокинового статуса у больных СДС признаками КИНК и здоровыми лицами показал, что оба изученных цитокина (ИЛ-17А и ИЛ-10) были достоверно увеличенными у больных по отношению к данным контроля, причем тенденция и направленность изменений было одинаковым у изученных показателей. Разница была существенной по интенсивности изменений, где провоспалительный цитокин ИЛ-17А был повышенным в среднем в 56,0 раз (цитокиновый взрыв), а противовоспалительный цитокин ИЛ-10 в среднем в 3,7 раза по отношению к нормальным значениям. Из сказанного следует, что
активность провоспалительного цитокина у больных на порядок больше, чем противовоспалительный цитокин. В связи с яркими изменениями содержания в сыворотке крови больных можно предложить, что определение ИЛ-17А имеет большую диагностическую ценность в качестве дополнительного теста ранней диагностики развития осложнений у больных СДС признаками КИНК.
Выводы:
1. Изучение относительного и абсолютного количестваCD3+-клеток и их регуляторных субпопуляций 0Э4+- и 0Э8+-клеток показали, что у больных синдромом диабетической стопы при критической ишемии нижних конечностей эти параметры изменились с одинаковой тенденцией и разнонаправленностью, при этом абсолютное количество клеток были повышенными, а относительное достоверно сниженными по отношению к контролю.
2. Относительное и абсолютное количество 0Э38+-лимфоцитов у больных синдромом диабетической стопы при критической ишемии нижних конечностей были достоверно повышены в 1,3 и 1,8 раза по отношению к нормальным значениям, что указывает на функциональную активность 0Э38+-лимфоцитов.
3. Установлено, что относительное и абсолютное содержание 0Э20+ и CD23+клеток достоверно повышаются у больных в среднем в 1,2-2,1 раза по отношению к контролю.
4. Тенденция и направленность изменений к повышению наблюдается при анализе содержания 1дМ, 1дА и ^ в сыворотке крови, при этом наибольшему увеличению подвержены 1дМ, где отличие их от здоровых составляют в 2,9 раза.
5. Сравнительная характеристика параметров иммунной системы Т- и В- системы лимфоцитов показали, что у обследованных больных синдромом диабетической стопы при критической ишемии нижних конечностей эти показатели изменились в противоположные
стороны - снижение содержания Т-лимфоцитов и увеличения концентрации В-лимфоцитов.
6. В ходе исследований выявлены следующие закономерности: у больных наблюдается наличие дисбаланса, показателей Т- и В-лимфоцитов; который указывает на наличии напряженности в иммунной системе больных, при этом снижение одного компонента иммунной системы организма обуславливает повышение другого компонента иммунитета, которые взаимно дополняют функции друг друга;
7. Изучение лимфоцитов с маркерами ранней активации (0Э25+-клетки) и готовности клеток к апоптозу (0Э95+-клетки), а также натуральных киллеров (CD16+-клеток) у больных синдромом диабетической стопы при критической ишемии нижних конечностей в сравнении с здоровыми людьми показали, что содержание всех изученных клеток были достоверно повышенными у больных. Этот факт указывает на развитие синдрома системной воспалительной реакции.
8. Сравнительный анализ цитокинового статуса у больных синдромом диабетической стопы при критической ишемии нижних конечностей и здоровыми лицами показал, что ИЛ-17А и ИЛ-10 были достоверно увеличенными по отношению к данным контроля.
9. Тенденция и направленность изменений содержания ИЛ-17А и ИЛ-10 было одинаковым у изученных показателей. Разница была существенной по интенсивности изменений, где провоспа-лительный цитокин ИЛ-17А был повышенным в среднем в 56,0 раз, а противовоспалительный цитокин ИЛ-10 в среднем в 3,7 раза по отношению к нормальным значениям, которое означало что, активность провоспалительного цитокина у больных на порядок больше, чем противовоспалительный цитокин.
10. Определение ИЛ-17А имеет большую диагностическую ценность и рекомендуется в качестве дополнительного теста ранней диагностики развития осложнений в виде синдрома системной воспалительной реакции и органных дисфункций у больных синдромом диабетической стопы при критической ишемии конечности.
Список литературы:
1. Абдурахманов М.М., Ураков Ш.Т., Сафаров С.С., Кулдашев Г.Н. Иммуноориентированная терапия в комплексном лечении острого панкреатита. // Цитокины и воспаление. Петербург. - 2019. -Том 18. - № 104 - С. 103-109.
2. Аскаров Т.А., Хамдамов Б.З., Хамдамов И.Б. Усовершенствование методов комплексного лечения гнойно-некротических поражений стопы при сахарном диабете// Журнал теоретической и клинической медицины. - 2015. - №1. - С. 73-76.
3. Ахмедов Р.М., Хамдамов Б.З., Хамдамов И.Б. Оценка способов ампутации на уровне голени при тяжёлых формах синдрома диабетической стопы //Проблемы биологии и медицины. -Самарканд, 2019. №4 (113). -С.29-32.
4. Вдович О.В., Потрохова Е.А. Перспективы диагностического исследования интерлейкина 17 при ревматоидном артрите //Вопросы диагностики в педиатрии -2013. №4.-С.24-27.
5. Гариб Ф.Ю. Механизмы взаимодействий патогенных бактерий с врожденными иммунными реакциями хозяина //Учебно-методическое пособие. -Москва, 2012.-44с.
6. Косаев Д.В., Ахмедова Л.М., Гаджиева Г.К. Мониторинг иммунологических показателей у больных с критической ишемией нижних конечностей при комплексном лечении с применением лазеротерапии // лазерная медицина. 2010.-т.14, №1.-С. 4-7
7. Куликова А.Н. Роль воспаления в атерогенезе при сахарном диабете//Цитокины и воспаление. 2007.-Т.6,№3.-С.14-19.
8. Лазаренко В.А., Николаев С.Б., Быстрова Н.А., Конопля А.И. Коррекция иммунометаболических нарушений у больных с критической ишемией нижних конечностей атеросклеротического генеза // Курский научно-практический вестник «Человек и его здоровье», 2010, №2.-С.78-83.
9. Нуралиев Н.А., Рахмонова Р.С., Исмаилов Б.А. Иммунология. Маъруза матнлари туплами. -Тошкент 2010.-58 б.
10. Хамдамов Б.З., Хамдамов А.Б., Джунаидова А.Х. Совершенствование методов лечения синдрома диабетической стопы с
критической ишемией нижних конечностей // Вестник Дагестанской государственной медицинской академии. - 2020. - №2(35). - С. 11-17.
11. Шилова Л.Н., Паньшина Н.Н., Чернов А.С., Трубенко Ю.А., Хортиева С.С., Морозова Т.А., Паньшин Н.Г. Иммунопатологическое значение интерлейкина -17 при псориатическом артрите //Современные проблемы науки и образования. 2015.-№6.;
12. Alhaik Sari, Huda A. Anshasi Ja'far Alkhawaldeh, Kim Lam Soh, and Aseel Mazen Naji. 2019. "An Assessment of Self-Care Knowledge among Patients with Diabetes Mellitus." Diabetes and Metabolic Syndrome: Clinical Research and Reviews. https://doi.org/10.1016/ j.dsx.2018.10.010.
13. Choe Sung Sik, Jin Young Huh, In Jae Hwang, Jong In Kim, and Jae Bum Kim. 2016. "Adipose Tissue Remodeling: Its Role in Energy Metabolism and Metabolic Disorders." Frontiers in Endocrinology. https://doi.org/10.3389/fendo.2016.00030.
14. Khamdamov B.Z., Nuraliev N.A. Pathogenetic approach in complex treatment of diabetic foot syndrome with critical lower limb ischemia. //American Journal of Medicine and Medical Sciences, 2020 10 (1) 17-24 DOI: 10.5923/j.20201001.05
15. Toliver-Kinsky, Tracy, Makiko Kobayashi, Fujio Suzuki, and Edward R. Sherwood. 2018. "The Systemic Inflammatory Response Syndrome." In Total Burn Care: Fifth Edition. https://doi.org/10.1016/ B978-0-323-47661 -4.00019.
