CC BY
39
начала кристаллизации. Выделенные продукты идентифицировали по температурам плавления и УФ-спектрам.
В результате многократных опытов установлено, что без катализаторов глицин не реагирует с АСК, в присутствии фермента панкреатина с выходом 61 % образуется Ы-ацетилглицин. Глутаминовая кислота с АСК образует Л-ацетилглутаминовую кислоту (выход без катализатора составляет 80 %, с катализатором -количественный). Метионин менее активен по отношению к АСК: выход продукта Ы-ацилирования составляет 50 %. Антраниловая кислота в этих условиях с АСК практически не реагирует.
При взаимодействии АСК с анилином получен с 50 % выходом ацетанилид В присутствии панкреатина реакция идет с количественным выходом. Реакция фенола с АСК в отсутствие катализатора вообще не имеет места, при наличии в смеси панкреатина с выходом 10 % образуется о-феноксибензойная кислота.
и-Аминофенол без катализатора не реагирует с АСК, тогда как в присутствии панкреатина единст-
венным результатом взаимодействия является гидролиз ацетилсалициловой кислоты, причем ацетильная группа связывается ферментом, что четко подтверждается данными УФ-спектров. о-Аминофенол без катализатора реагирует с АСК с образованием о-гидроксиацета-нилида, каталитическое действие панкреатина обеспечивает образование о-аминофе-ноксибензойной кислоты.
Таким образом, полученные экспериментальные данные показывают, что АСК является ацилируюгцим агентом по отношению к субстрату с первичной аминогруппой.
Ацетилсалициловую кислоту получали по известной методике из уксусного ангидрида и салициловой кислоты и очшцали перекристаллизацией из этанола (проба с хлорным железом не должна давать фиолетовой окраски). Аминокислоты, амины и фенолы очищали перекристаллизацией или перегонкой до соответствия температур плавления или кипения справочным данным. УФ-спектры снимали на приборе СФ-4А.
ХРОМАТОГРАФИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ ФЛАВАНОИДОВ © А.И. Панасспко, Т.А. Зайцева
Флаваноиды - большая группа структурно родственных соединений, содержащихся в растениях и обладающих физиологической активностью (например, кверцетин входит в состав вига мина Р, регулирующего проницаемость капиллярных сосудов). Гидроксилсодержащие флаваноиды являются природными антиок-сида!ггами, а также органическими люминофорами. В последнее время с целью облегчения подтверждения строения природных и синтетических флаваноидов все шире стали применять хроматографические методы исследования.
В настоящей работе с помощью тонкослойной и жидкостной хроматографии исследованы производные халкона, флаваиона, флавонола и эпоксихалкона. Показано, что флаваноидные соединения можно идентифицировать с помощью метода тонкослойной хроматографии (ТСХ), используя в качестве подвижной фазы смешанный растворитель: толуол - этил ацетат. Все хроматограммы образцов, представляющих собой индивидуальные соединения, содержат хорошо выраженные, четко очерченные пятна на силуфольной пластине, положение которых охарактеризовано величиной Л/. Образцы, содержащие примеси, имеют основное пятно и пятна, соответствующие примесям. Были так-
же проведены опыты с целью выяснения возможности хроматографического разделения смесей ряда флава-ноидных соединений. Показано, что с применением выбранной подвижной фазы на пластинках еилуфола можно разделять смеси флавонолов и флаванонов; 2'-гидрокси-4'-диметиламинохалконов и 2'-гидрокси-халконов. Смеси других сочетаний исследованных флаваноидов удовлетворительно разделить не удалось. При подборе подвижной фазы были изучены также системы бензол - этил ацетат (5:15) и бензол - уксусная кислота (10:25), но их применение не дало положительных результатов.
Тонкослойная хроматография проводилась на пластинах 8у1уГо1. Растворитель - ацетон; подвижная фаза: бензол - этилацетат (5:15), толуол - этил ацетат (5:15), бензол - уксусная кислота (10:25). Все реактивы марки х.ч. Использовали 2 % растворы образцов в ацетоне. Хроматограммы проявляли в УФ-свете.
Чистота образцов, использованных в работе, контролировалась с помощью жидкостной хроматографии. Исследования проводились на хроматографе «Яііііпасіги .8рс1-6А», снабженном колонкой ЫисНовЦ 300-10 С18. Элюент - ацетошприл - вода (80 : 20), скорость потока 1,5 мл/мин.
