CC BY
36
Таким образом, результаты нашего исследовани свидетельствуют о том, что наступление беременности в подростковом возрасте характеризуется повышением уровня активации лимфоцитов периферической крови на фоне нарушения процессов апоптоза, межклеточных взаимодействий и угнетения выработки MIF. Кроме того, происходит стимуляция A-звена иммунитета с одновременным негативным примированием нейтрофилов. Полученные нами результаты свидетельствуют о том, что в подростковом возрасте иммунная система не в состоянии сформировать адекватный ответ на стимуляцию антигенами плода, в результате чего происходит срыв клеточных реакций на фоне угнетения функциональной активности гуморального звена иммунитета. Установленные нами признаки иммунологического неблагополучия у подростков можно рассматривать как один из факторов, свидетельствующих о предпочтительности прерывания беременности в этом возрасте.
Иммунологический метод диагностики аллергии
Борткевич Л.Г., Суковатых Т.Н., Рыбальчеико О.А., Панасевич С.Д., Лысак Н.Н., Полещук Е. А.,
Бутенко С.С., Кузьмина Т.Н.
Международный институт по радиоэкологии им. А.Д. Сахарова, Минск, Беларусь, Фонд Д. Сороса
Известные методы специфической аллергодиагностики основаны на определении наличия в сыворотке периферической крови больного повышенного содержания специфических иммуноглобулинов класса Е (Ig Е), вступающих в реакцию с соответствующим аллергеном.
Задачей настоящего исследования явилось изыскание более универсального и менее дорогостоящего метода диагностики аллергии in vitro.
Поставленная задача достигается тем, что в качестве метода иммуноаллергодиагностики in vitro предложено использовать, в ответ на стимуляцию лимфоцитов больного специфическим аллергеном: а) определение степени синтеза тотального IgE—для диагностики атопических аллергических процессов; б) определение степени пролиферативного ответа на индукцию предполагаемым аллергеном - для диагностики ГЗТ-аллергии и в) определение синтеза фактора некроза опухоли-а — для суждения о степени выраженности воспалительной реакции.
Специфическая иммуноаллергодиагностика осуществляется в системе in vitro при культивировании свежей цельной крови, полученной из вены локтевого сгиба больных, в стандартной полной культуральной среде RPMI 1640 (Sigma). Кровь вносится в среду в соотношении 1:10 и культивируется в течение 120 часов при 37°С в увлажненной атмосфере с 5% СОг Для повышения продукции иммуноглобулина Е используется активатор
Т-хелперов 2 — Р\УМ (митоген локоноса) в концентрации 15 мкг/мл. В зависимости от предполагаемых этиот-ропных аллергенов, подбирается их спектр для данного больного и вносится в лунки в концентрации 50 РЫ11/200 мкл культуральной среды в жидком или в сорбированном виде. По окончании срока культивирования производится отбор супернатантов. Концентрация тотального 1£ Е в каждом супернатанте определяется методом иммуноферментного анализа с набором реагентов различных фирм, ФНО-а - с набором НИИГиПК М3 РБ. К осадку клеток добавляется НЗ-тимидин, и после дополнительного культивирования, харвестрации и Р-счета рассчитывается индекс стимуляции пролиферативного ответа специфическим аллергеном.
В процессе отработки методики диагностики аллергии нами установлено, что указанный метод позволяет поставить этиологический диагноз на 40% чаще, чем метод кожно-аллергических проб, коррелирует на 87% с последним методом, соответствует методу определения специфических иммуноглобулинов Е в сыворотке крови в 89%, требует значительно меньших объемов крови в сравнении с таковыми при определении специфических ^Е- антител. Главным преимуществом является неограниченность его использования при наличии любого количества и спектра аллергенов.
Характеристика иммунокомпетентных клеток при некоторых органоспецифических аутоиммунных заболеваниях
Бубнова Л.Н., Глазанова Т.В., Зубарева Т.С., Лысова Л.В., Розанова О.Е., Павлова И.Е., 'Кузмичев А.С., 'Москаленко В.В.
Российский НИИ гематологии и трансфузиологии, 'Медицинская Академия последипломного образования Санкт-Петербург, Россия
Органоспецифические аутоиммунные заболевания
— такие, как сахарный диабет 1 типа и аутоиммунные поражения щитовидной железы — по-прежнему остаются одной из важных клинических проблем. Их частота не имеет в настоящее время тенденции к снижению, что обусловлено, в том числе, и экологическими факторами. Иммунологические нарушения при них носят не столь выраженный характер, как при генерализованных формах, однако они недостаточно изучены. Поэтому представлялось актуальным изучить характер и степень нарушений в клеточном звене иммунитета при названных патологических состояниях.
Обследовано 20 больных сахарным диабетом 1 типа (СД1), 74 — аутоиммунным тиреоидитом (АИТ) и 65
— диффузным токсическим зобом (ДТЗ). Все диагнозы заболеваний щитовидной железы были верифицированы гистологически. Нами изучено содержание лимфоидных субпопуляций, способность периферических мононуклеарных клеток к спонтанной и ЛПС-
индуцированной продукции ИЛ-1(3 нФНОа (определение цитокинов в супернатантах проводилось стандартным ИФА-методом с помощью тест-систем “Протеиновый контур”), и ответ на ФГА в тесте властной трансформации (учет — радиометрическим способом по включению 3Н-тимндипа). Из данных, представленных в таблице, видно, что при СД1 и АИТ наблюдалась наибольшая пролиферативная активность в ответ на ФГА и способность спонтанно продуцировать ФНОа и ИЛ-1 (3 по сравнению с нормой, тогда как в группе ДТЗ показатели менее выражепно отличались от нормальных.
Во всех изученных группах больных отмечалось достоверное снижение процентного содержания CD3', CD4* и CD8* лимфоцитов. Это свидетельствует о преобладании в клеточном звене иммунитета проявлений вторичного иммунодефицита у больных с органоспсцифичсс-кими аутоиммунными заболеваниями. Следует, однако, отметить, что в группе АИТ наблюдалось наиболее выраженное снижение содержания CD8+ лимфоцитов, по сравнению как с нормальными показателями, так и с прочими изученными группами. Кроме того, у этих больных выявлено достоверное снижение уровней HLA-DR' и CD25’ клеток по сравнению с нормой. В то же время в группе СД1 был повышен уровень DR\ CD 16' и CD25’ клеток, что свидетельствует об активации имму-нокомпетентпых клеток. Содержание клеток, несущих CD95, было повышено в группах ДТЗ, АИТ и СД1, составляя 36,9 ± 3,7 %, 25,2 ± 3,9 % и 20,6 ±3,9 %, соответственно при норме 11,2 ± 1,1 %, т. е. наибольшее повышение уровня CD95, почти в 3 раза, отмечено у больных ДТЗ. Изучение содержания CD28' и CD152’ клеток показало их снижение в группах больных ДТЗ, АИТ и СД1, причем для CD 152’ оно было наиболее выражено, опять же, при ДТЗ (CD28*: 16,4 ±3,6%, 15,6 ±2,9%, 12,1 ± 1,6%, соответственно при норме 25,5 + 3,4%; CD152*: 6,2 ± 1,7 %, 14,9 ± 3,6 %, 13,3 ± 2,5 %, соответственно при норме 25,2 ±3,0%).
Таким образом, при органоспецпфических аутоиммунных заболеваниях отмечаются проявления Т-клеточ-ного иммунодефицита (снижение содержания CD3*, CD4' и CD8* лимфоцитов), повышение числа клеток, несущих Fas-aimireii (CD95+), и одновременное снижение содержания CD28* и CD152*, наиболее выраженное при ДТЗ. Функциональная активность иммунокомпе-тентных клеток при СД1 и АИТ повышена, о чем свидетельствует значительное увеличение спонтанной продукции ФНОа и ИЛ 1 р и ответа на митоген в РБТЛ.
Таблица
Выявление противомозговых антител у детей 1 -го года жизни с гипоксически-ишемической энцефалопатией
Веримеевич Л.И.,Бочаицсв С.В.,Соботкж Н.В.,
Белан К).Б.
Омская Государственная медицинская акаОемии Омск, Россия
Гипоксически-ишемическая энцефалопатия (ГИЭ) является широко распространенной патологией среди детей 1-го года жизни. В патогенезе этого заболевания имеют место гемодинамические, биохимические и иммунопатологические механизмы.
Целыо работы являлось выявление и оценка уровня противомозговых антител (ПМ-Ат) у детей 1 -го года жизни с ГИЭ.
В задачи исследования входило:
1. Определение ПМ-Ат у новорожденных с ГИЭ.
2. Выявление причин, приводящих к появлению ПМ-Лт у детей с ГИЭ.
3. Изучение иммунопатологических показателей у детей с энцефалопатией в динамике.
Обследованы 40 детей с ГИЭ в течение 1 -го года жизни и их матери. Контролем служили 28 детей без проявлений ГИЭ. Всем детям проводилась клиническая оценка неврологического статуса, нейросонография, определялись иммунологические показатели: уровень иммуноглобулинов в сыворотке крови, количество лимфоцитов и их функциональная активность в реакции бласт-ной трансформации (РБТЛ) с фитогемагглютипином (ФГА), титр противомозговых антител (ПМ-Ат) с помощью нммуноферментного анализа и реакция торможения миграции лейкоцитов с мозгоспецифическим антигеном (РТМЛ-Ма). Статистическая обработка проводилась методами дисперсионного, корреляционного анализа и последовательного анализа Вальда.
В результате исследования выявлено, что у 63% де тей с ГИЭ в остром периоде заболевания в сыворотке крови выявляются ПМ-Ат, а у 55% имеют место положительные результаты РТМЛ-Ма. В контрольной группе ПМ-Ат отмечались у 11% детей, иихтитрбылнижеднагностическизначи-мого. Эти данные свидегельствуют о наличии иммунопатологического процесса у детей с ГИЭ. Между уровнем ПМ-Ат у новорожденных с ГИЭ и их матерей в течение 1-го месяца после родов выявлена высокая, прямая корреляционная связь (г=0,8, р<0,01), что может говорить о материнской природе ПМ-Ати транспла1 янтарном механизме передачи. Эгот факт подтверждается также принадлежностью ПМ-Ат к п уменьшением их титра к 3 месяцам у боль-
шинства детей за счет естественной элиминации.
В зависимости от уровня ПМ-Ат в остром периоде ГИЭ, было выделено две группы новорожденных. ВI группу вошли 25 новорожденных, имевших диагностически значимый уровень ПМ-Ат (титр >1:4), который, в среднем, был 1:12. Вторую группу составили 15 детей с уров-
Группа ФНОа ИЛ 1 р РБТЛ
Спонт. (л г/мл) Инд. стим. Спонт. (пг/мл) Инд. стим. Спонт. (имп/ мин) ИС
ДТЗ АИТ СД1 доноры 93±25 324±63 186±35 44±21 13,1±3,5 4,2±1,3 5,4±2,7 53,7±11,5 285±118 678±143 507±92 33±12 19,9+4,9 4,8±1,20 3,1 ±0,7 35,5±5,9 826±156 754±136 989+194 №169 29,7±11,7 74,9±22,1 70,4±15,93 1,4±6,4
