Научная статья на тему 'Характеристика биохимических показателей крови свиноматок, имеющих разную стрессовую чувствительность, в холостом, супоросном и лактирующем состоянии в связи с тонусом гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковой системы'

Характеристика биохимических показателей крови свиноматок, имеющих разную стрессовую чувствительность, в холостом, супоросном и лактирующем состоянии в связи с тонусом гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковой системы Текст научной статьи по специальности «Ветеринарные науки»

CC BY
165
50
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Ключевые слова
ГИПОТАЛАМО-ГИПОФИЗАРНО-НАДПОЧЕЧНИКОВАЯ-СИСТЕМА / СТРЕССОВАЯ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ / ПРОДУКТИВНОСТЬ СВИНЕЙ / STRESSFUL SENSITIVITY / PRODUCTIVITY PIG

Аннотация научной статьи по ветеринарным наукам, автор научной работы — Габдракипов Р. Р.

В статье дается характеристика биохимических показателей крови свиноматок в различных состояниях.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по ветеринарным наукам , автор научной работы — Габдракипов Р. Р.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

THE FEATURE OF THE BIOCHEMICAL FACTORS SHELTERS SOWS, HAVING DIFFER STRESSFUL SENSITIVITY, IN BEEN SINGLED, SKPOROSNOM AND LAKTIRUYUSCHEM CONDITION IN CONNECTION WITH TONE GIPOTALAMO-GIPOFIZARNONACFOC-ECHN KOVOY SYSTEMS

I n article the characteristic of biochemical indicators of blood of sows in various conditions is given.

Текст научной работы на тему «Характеристика биохимических показателей крови свиноматок, имеющих разную стрессовую чувствительность, в холостом, супоросном и лактирующем состоянии в связи с тонусом гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковой системы»

5. Богданов В. Д. Изучение динамики численности и распределения личинок сиговых рыб реки Северной Сосьвы. Свердловск: УНЦ АН СССР, 1987. 60 с.

6. Павлов Д. С., Нездолий В. К., Ходоревская Р П. и др. Покатная миграция молоди рыб в реках Волга и Или. М.: Наука, 1981. 320 с.

7. Богданов В. Д. Морфологические особенности развития и опреде-литель личинок сиговых рыб р. Оби. Екатеринбург: УрО РАН, 1998. 55 с.

8. Богданов В. Д., Агафонов Л. И. Влияние гидрологических условий поймы Нижней Оби на воспроизводство сиговых рыб // № 1. Экология. 2001. С. 50-56.

9. Экология рыб Обь-Иртышского бассейна. Под ред. Д. С. Павлов, А. Д. Мочек. М.: КМК, 2006. 596 с.

10. Мельниченко С. М. Содержание жира у пеляди при миграции на нерест в р. Северной Сосьве / Экологическая энергетика животных. Свердловск: УрО АН СССР, 1988. С. 118-124.

ХАРАКТЕРИСТИКА БИОХИМИЧЕСКИХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ КРОВИ СВИНОМАТОК, ИМЕЮЩИХ РАЗНУЮ СТРЕССОВУЮ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ, В ХОЛОСТОМ, СУПОРОСНОМ И ЛАКТИРУЮЩЕМ СОСТОЯНИИ В СВЯЗИ С ТОНУСОМ ГИПОТАЛАМО-ГИПОФИЗАРНО-НАДПОЧЕЧНИКОВОЙ СИСТЕМЫ

Р. Р. ГАБДРАКИПОВ, аспирант, Уральская ГАВМ

457100, Челябинская обл. г. Троицк, ул.Гагарина, 13

Ключевые слова: гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковая-система, стрессовая чувствительность, продуктивность свиней.

На организм сельскохозяйственных животных постоянно воздействуют разнообразные факторы внешней среды. К их числу относится технология производства, способ содержания, плотность размещения, величина групп, микроклимат помещений, тип и уровень кормления, биологическая полноценность рациона, способы подготовки и раздачи кормов, качество питьевой воды, ветеринарно-профилактические и зоотехнические мероприятия. При изменении указанных факторов в организме животных происходят определенные реакции.

Одна из наиболее характерных, приобретенных в процессе эволюции особенностей всех животных организмов - это способность адаптироваться к различным внешним воздействиям, поддерживать постоянство внутренней среды организма, несмотря на изменения, происходящие в окружающей среде. С этой точки зрения вся жизнь - постоянное приспособление, адаптация, а все изменения в организме - приспособительные [1, 2].

Реагируя на воздействия окружающей среды, организм всегда стремится к состоянию равновесия, обеспечивающему относительное динамическое постоянство внутренней среды

Биохимические и гематологические показатели крови степенью стрессовой чувствительности в

Таблица 1 у свинок с разной холостом периоде

Показатель Группы животных % к стресс-устойчивым

Стресс-устойчивые Стресс -чувствительные

Эритроциты 1012/л 6,39±0,06 6,17±0,01 96,5

Лейкоциты, 109/л 8,96±0,06 5,06±0,43 56,4

Гемоглобин, г/л 116,50± 1,66 106,50± 1,54 91,4

Глюкоза, ммоль/л 5,55±0,06 3,93±0,07 70,8

Общий белок, г/л 78,23±0,50 60,30±1,54 77,1

Альбумины 49,33± 1,55 30,32±0,97 61,4

Глобулины,%

а 17,89±0,6 25,96±0,77 145,1

В 18,45±0,77 22,77± 1,4 123,4

У 24,23± 1,32 28,95±0,78 119,0

Кальций, ммоль/л 3,59±0,03 2,67±0,07 74,3

Креатинин, ммоль/л 158,0± 1,35 267,17±0,98 170,0

Мочевина, ммоль/л 5,06±0,04 5,41±0,10 107,0

Фосфор неорганический, м мо ль/л 1,36±0,04 1,50±0,04 110,3

Холестерин, ммоль/л 2,86±0,06 1,49±0,10 52,1

АлАТ, мкмоль/л 0,48±0,01 0,46±0,01 95,8

Ас АТ, мкмоль/л 0,57±0,02 0,49±0,02 86,0

(гомеостаз). В ответной реакции организма участвуют в той или иной мере все ткани, органы и функциональные системы. При этом происходит целый ряд физико-химических процессов в обмене веществ, характер и величина которых зависит от силы и продолжительности воздействия [3]. В связи с этим одной из важнейших задач для обеспечения максимальной реализации генетического потенциала является формирование производственных групп животных, строго унифицированных по набору физиологических признаков. Одним из объективных признаков является стрессовая чувствительность свиней, степень которой обусловливает скорость роста животных, их развитие и продуктивность.

Однако для более глубокого понимания механизмов стрессовой реакции необходимы знания изменений биохимических показателей крови у свиноматок, имеющих разную стрессовую чувствительность, в холостом, супоросном и лактирующем состоянии в связи с тонусом гипоталамо-гипофи-зарно-надпочечниковой системы.

Цель наших исследований состояла в изучении биохимических показателей крови свиноматок, имеющих разную стрессовую чувствительность, в холостом, супоросном, и лак-тирующем состоянии в связи с тонусом гипоталамо-гипофизарно-надпо-чечниковой системы.

Научно-хозяйственный опыт проводился в свинокомплексе на 4000 голов свиней на базе ООО «Шаранагро-газ» Шаранского района Республики Башкортостан. Опыта состоял из нескольких этапов. На первом этапе было проведено тестирование свиней на стрессовую чувствительность скипидарным методом, разработанным А. И. Кузнецовым и Ф. А. Сунагатулли-ным (1991). Затем мы сформировали 2 группы из числа стрессустойчивых и стрессчувствительных свинок по 30 голов в каждой и случили их гомогенным типом с учетом стрессовой чувствительности с хряками. После опороса свиноматок нами были сформированы две группы свинок, полученных от стрессустойчивых и стрессчув-ствительных животных, по 10 голов в каждой. У животных в каждой группе в холостом, супоросном и лактирующем состоянии брали кровь и суточную мочу для анализа. В моче определяли количественное содержание гормонов, участвующих в ОАС (общий адаптационный синдром), адреналин, норадре-налин, 17-оксикортикостероидов. Адреналин и норадреналин определяли флюорометрическим методом, 17-ок-сикортикостеройдов - по реакции с фенилгедразином после ферментативного гидролиза (метод [Silber, Porter, 1957] в модификации [Н. А. Юдаев, М. А. Креховой, 1960]). В крови исследовали морфологические и биохимичес-

Таблица 2

Содержание гормонов в суточной моче у свинок, имеющих разную степень стрессовой чувствительности в холостом состоянии

П оказатель Группы животных

Стресс-устоучивые Стресс- % к стресс-чувствительные устой чи вы м

1 7-оксикортикостероиды общие мкмоль/мл 1,0 8±0,3 5 1,2 3±0,2 2 І 13,8

Конъюгированные 17-оксикортикостероиды м км о ль/мл 0,9 1± 0,2 7 0,9 3±0,1 8 І 02,2

Свободные 17-оксикортикостероиды мкм оль/мл 0,2 2±0,0 7 0,2 9±0,0 6 131,8

Адреналин нмоль/мл І І ,26±6 0 5 9 І8,0 8± 20І5 І 60,5

Норадреналин нмоль/мл І І ,90±3 ,6 4 17,84±1,87 І 50,0

Таблица 3

Морфологические и биохимические показатели крови у свинок с разной степенью стрессовой чувствительности во втором периоде супоросности

П оказатель Группы животных % к стресс-устойчивым

Стресс-устойчивые Стресс- чувствительные

Эритроциты 1012/л 7,5 6±0,58 6,8 3± 0,61 90,3

Лейкоциты, 109/л 9,82±1,90 1 1,5 0± 0,86 1 17,10

Г емоглоби н, г/л 10 3,8 3± 0,8 8 7 0,8 3± 0,4 1 68,2

Р езервная щ елочность 7 6,16± 4,76 7 3,17± 1,27 96,0

Г люкоза, моль/г 4,79±0,83 4,5 8±0,50 95,6

Общий белок, г/л 7 9,27± 0,57 7 6,2 3± 0,62 96,1

Альбуми ны 3 6,90± 0,75 3 4,6 6± 0,99 94,0

Г лобулины,%

а 18,3 8± 0,44 2 0,17± 0,82 109,7

В 12,22± 0,58 2 0,6 8± 0,75 169,2

У 2 2,1 1± 0,83 3 6,9 9± 1,86 167,3

Кальций, моль/л 2,65±0,07 3 ,5 0±0,20 132,0

Креатинин, моль/л 1 4 6,0± 1,46 17 8,4 5± 1,02 122,2

Мочевина, моль/л 4,93±1,11 6,2 7±0,75 127,2

Фосф ор н еоргани ческий, м о ль /л 1,28±0,06 2,2 7±0,09 177,3

Холестерин, ммоль/л 3,80±0,15 3,23±0,15 85

АлАТ, мкмоль/л 0,69±0,09 0, 1 4±0,24 20,3

АсАТ, мкмоль/л 0,90±0,11 0,8 9±0,10 98,9

Таблица 4

Содержание гормонов в суточной моче у свиноматок с разной степенью стрессовой чувствительности во второй половине супоросности

Показате ль Группы животных

Стресс-устойчивые С трес с-чувств ительные % к стресс -устойчивым

17- ок сикортикостероиды общие мкмоль/сут 1,20±0,1 3 2,25±0,22 187,5

Конъюгированные 17- ок сикортикостероиды м км оль/сут 0,87 ±0,10 1,27±0,05 1 46,0

Свободны е 17-ок сикортикостероиды м км оль/сут 0,33±0,10 0,98±0,26 297,0

Адреналин нмоль/сут 6,90±0,34 11,02±1,76 159,7

Н орадреналин н м о ль /с ут 1 6,48±1,21 20,1 7±2,17 1 22,4

Таблица 5

Морфологические и биохимические показатели крови у свиноматок с разной степенью стрессовой чувствительности в первые сутки лактации

Показатель Группы животных % к стресс-устойчивым

Стресс- усто йчив ы е Стресс-ч ув ств ител ьны е

Эритроциты 1012/л 7,5 3±0,47 4,83±0,43 64,1

Лейкоциты, 109/л 1 5,82±2,9 8 10,5 0± 1,86 66,3

Г емоглобин, г/л 11 9,83±0,88 87,8 3± 0,41 73,3

Резервная щелочность 76,16± 1,76 73,1 7± 1,37 96,0

Глюкоза, ммоль/г 5,7 9±0,23 3,5 8±0,30 61,8

О бщий белок, г/л 8 6,27± 1,47 70,23± 1,68 81,4

Альбумины 45,90±0,65 33,66± 0,83 73,3

Г лобулины,%

а 1 7,3 8±0,42 23,1 7± 0,22 133,3

В 1 1, 2 2± 0,1 1 22,68±0,7 202,1

У 21,11± 0,3 46,99±1,63 222,6

Кальций, ммоль/л 2,75±0,7 2,99±0,29 108,7

Креатинин, моль/л 1 66,0±0,46 189,4 5± 1,02 1 14,1

Мочевина, ммоль/л 5,9 3 ±0,71 7,27±1,55 122,6

Фосфор неорганический, м о ль /л 1,5 8±0,06 2,87±0,09 1 81,6

Холестерин, ммоль/л 2,90±1,45 1,23± 0,5 42,4

АлАТ , мкмоль/л 0,49±1,01 0,1 6±0,34 32,6

АсАТ, мкмоль/л 0,5 6±0,11 0,1 2 ±0, 15 21,4

Таблица 6

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

Содержание гормонов в суточной моче у свиноматок с разной степенью стрессовой чувствительности в первые сутки лактации

Показатель Группы животных

Стресс-устоучивые Стресс- чувствительные % к стресс-устойчивым

17-оксикортикостероиды общие мкмоль/мл 1,13±0,06 1,97±0,44 174,3

Конъюгированные 17-оксикортикостероиды м км о ль/мл 0,92±0,06 1,45±0,І І 157,6

Свободные 17- оксикортикостероиды мкмоль/мл 0,22±0,05 0,63±0,34 286,3

Адреналин нмоль/сут І 5,25 ± 1,21 27,48±5,63 180,2

Норадреналин нмоль/мл 2І,20±І,21 30,75±3,20 І45

кие показатели, такие как количественное содержание эритроцитов, лейкоцитов, гемоглобина, резервная щелочность, глюкоза, общий белок, альбумины, глобулины-а, р, Y, кальция, креатинина, мочевины, фосфора неорганического, холестерина, АлАТ, АсАТ. Морфологические и биохимические исследования крови проводили общепринятыми методами.

Из приведенных в таблице 1 данных видно, что у холостых стрессус-тойчивых свиноматок содержание эритроцитов в крови было больше, чем у стрессчувствительных, на 3,5, лейкоцитов - на 43,6, гемоглобина - на 8,6, глюкозы - на 29,2, общего белка - на

22,9, альбуминов - на 38,6 %. Однако содержание глобулинов у стрессустой-чивых оказалось ниже а на 45,1, р - на

23,4, Y- на 19 %. Вместе с этим содержание кальция у стрессустойчивых было выше на 25,7 %. Содержание кре-атинина у стрессустойчивых по сравнению со стрессчувствительными оказалось ниже на 70, мочевины - на 7, фосфора неорганического - на 10,3 %, холестерина выше по сравнению со стрессчувствительными на 47,9, АлАТ

- на 4,2, АсАТ - на 14 %.

Содержание гормонов в суточной моче у свиноматок с разной стрессовой чувствительностью в супоросном состоянии представлено в таблице 2.

Полученные данные позволяют судить о том, что содержание гормонов, участвующих в реализации ОАС, в суточной моче у стрессустойчивых холостых свиноматок ниже по сравнению со стрессчувствительными. Так, общих 17-оксикортикостероидов оказалось меньше на 13,8, конъюгированных

- на 2,2, свободных - на 31,8, адреналина - на 60,5, норадреналина - на 50 %.

Результаты определений морфологических и биохимических показателей крови у свиноматок с разной стрессовой чувствительностью во второй половине супоросности представлены в таблице 3.

Из полученных данных видно, что морфологические и биохимические показатели крови у свиноматок с разной стрессовой чувствительностью в период глубокой супоросности существенно отличаются. Сравнительный анализ показал, что у стрессустойчи-вых животных количество эритроцитов больше на 9,7; содержание гемоглобина - 31,8, глюкозы - 4,4, общего белка - 3,9, альбуминов - 6 %, холестерина - 15,0, АлАт - 79,7, АсАт - 1,1 %. Вместе с этим установлено, что количество глобулинов у стрессчув-ствительных было выше (а - на 9,7, р

- 69,2, Y - 67,3, кальция - 32, креатини-на - 22, мочевины - 27,2, фосфора неорганического - 77,3 %), чем у стрес-сустойчивых. Количество лейкоцитов у животных с высокой стрессовой чувствительностью оказалось на 17,1 % больше, чем у свиноматок с низким уровнем чувствительности.Из данных, приведенных в таблице 4, видно, что содержание гормонов, участвующих в реализации ОАС, в моче у стрес-сустойчивых свиноматок во второй половине супоросности ниже по сравнению со стрессчувствительными. Общие 17-оксикортикостероиды - на

87.5, конъюгированные - 46, свободные - 197, адреналин - 59,7, норадре-налин - 22,4%. Морфологические и биохимические показатели крови у свиноматок в период лактации представлены в таблице 5.

Из полученных данных видно, что у стрессустойчивых животных в первые сутки после опороса количество эритроцитов в крови выше, чем у стрессчувствительных, на 35,9, лейкоцитов - 33,7, содержание гемоглобина - на 26,7, резервной щелочности

- 4, глюкозы - 38,2, общего белока -

18.6, альбуминов - 26,7 %. Вместе с этим установлено, что содержание глобулинов у стрессчувствительных было выше: а- на 33,3, р - 102,1, Y -

122.6, кальция - 8,7, креатинина - 14,1, мочевины - 22,6, фосфора неорганического - 81,6 %, холестерина - 57,6.

АлАТ - 67,4, АсАТ - 78,6 %.

stressful sensitivity, productivity pig.

Таблица 7

Морфологические и биохимические показатели крови у свиноматок с разной степенью стрессовой чувствительности на 30-е сутки лактации

Показатель Группы животных % к стресс-устойчивым

Стресс-устойчив ы е Стресс-чув ств ительны е

Эритроциты 1012/л 7,43±0,07 5,1 ±0,03 69,6

Лейкоциты, 109/л 14,22±0,17 9,3 0±0,06 65,4

Г емоглобин, г/л 11 8,91±0,88 97,22±0,1 1 81,7

Р езервная щ елочность 7 5,7 6±0,42 7 2,1 7±0,7 4 95,2

Глюкоза, ммоль/л 4,1 9±0,53 2,91 ±0,31 69,4

Общий белок, г/л 8 5,09±0,7 60,21±0,43 70,7

Альбумины 4467±0,21 3 2,89±0,3 4 73,6

Г лобулины,%

а 16,8 8±0,42 21,1 8± 0,1 2 1 25,4

В 11,02±0,21 21,23±0,47 1 92,6

У 20,99±0,65 3 8,46± 1,63 1 83,2

Кальций, ммоль/л 2,45±0,19 2,43±0,19 99,2

Креатинин, ммоль/л 15 4,0±0,26 190,1 5±0,5 7 1 23,4

Мочевина, ммоль/л 5,43±0,71 6,57±0,31 1 21,0

Фосфор неорг анический, м о ль /л 1,28±0,10 1,8 9±0,19 1 47,6

Холестерин, ммоль/л 2,30±0,28 0,97±0,34 42,1

АлАТ , мкмоль/л 0,41 ±0,01 0,1 2±0,83 29,2

АсАТ, мкмоль/л 0,40±0,29 0,1 0±0,11 25

Таблица 8

Содержание гормонов в суточной моче у свиноматок с разной степенью стрессовой чувствительности на 30-е сутки лактации

Показатель Группы животных

Стресс-устоучивые Стресс- чувствительные % к стресс -устойчивым

17-оксикортикостероиды общие мкмоль/мл 1,09±0,06 1,3 5± 0,24 123,8

Конъюгированные 17-оксикортикостероиды м км о ль/мл 0,9 1±0,23 1,1 0± 0,15 120,8

С вободные 1 7-оксикортикостероиды м км о ль/мл 0,22±0,06 0,34±1,23 154,5

Адреналин нмоль/сут 18,20±2,11 1 9,34±1,77 106,2

Норадреналин нмоль/мл 19,30±2,64 29,36±1,8 7 152,1

Результаты исследований выделения гомонов в суточной моче у свиноматок с разной стрессовой чувствительностью в состоянии лактации представлены в таблице 6.

Из приведенных данных в таблице 6 видно, что содержание гормонов, участвующих в реализации ОАС, в моче у стрессустойчивых свиноматок н а перв ы е с ут ки л ак т ац ии ни же п о сравнению со стрессчувствительны-ми. Общие 17-оксикортикостероиды -на 74,3, конъюгированные - на 57,6, свободные - на 186,3, адреналин - на

80.2, норадреналин - на 45 %.

Морфологические и биохимические

показатели крови у свиноматок с разной стрессовой чувствительностью на 30-е сутки лактации представлены в таблице 7.

Из полученных данных видно, что у стрессустойчивых свиноматок на 30-ые сутки лактации содержание эритроцитов в крови по сравнению со стрессчувствительными было выше на 30,4, лейкоцитов - 34,6, содержание гемоглобина - на 18,3, резервной щелочности - 4,8, глюкозы - 30,6, общего белока - 29,3, альбуминов - 26,4, кальция - 0,8, холестерина - 59,7, АлАТ

- 70,8, АсАТ - 75 %. Вместе с этим содержание глобулинов у стрессчув-ствительных было выше: а - 25,4, р -

92,6, Y- 83,2, креатинина - 23,4, мочевины - 21,0, фосфора неорганического

- 47,6 %.

Содержание гормонов в суточной моче у свиноматок с разной стрессовой чувствительностью на 30-е сутки лактации представлены в таблице 8.

Из приведенных данных в таблице 8 видно, что содержание гормонов, участвующих в реализации ОАС, в моче у стрессустойчивых свиноматок во второй половине супоросности ниже по сравнению со стрессчувстви-тельными: 17-оксикортикостероидов общих - на 23,8, конъюгированных -20,8, свободных - 54,5, адреналина -

6.2, норадреналин - 52,1 %.

Таким образом, исследования, проведенные нами на стрессустойчивых и стрессчувствительных свиноматках в период лактации, холостом и супоросном состоянии, свидетельствуют о том, что содержание энергетических и пластических веществ достоверно выше у стрессустойчивых свиноматок, а количество гормонов, участвующих в ОАС, в суточной моче значительно ниже. Это говорит о том, что у стрессустойчивых свиноматок орга-

низм более приспособлен и легче адаптируется к условиям существования и, как следствие, менее подвержен производственному стрессу.

В связи с этим, на наш взгляд, для воспроизводства следует использовать стрессустойчивых хряков и свинок путем организации гомогенного их спаривания с последующим тестиро-

ванием потомства на чувствительность к стрессовому синдрому. Для проведения селекции свиней по степени стрессовой чувствительности эффективно использовать скипидарный метод определения стрессовой чувствительности свиней, разработанный А. И. Кузнецовым и Ф. А. Суна-гатуллиным (А. С. №1153680 от 8.02.1991 г).

Литература

1.Селье Г. Очерки об адаптационном синдроме. М.: Медгиз, 1960. С. 124.

2. Селье Г. Концепция стресса как мы ее представляем в 1976 году // Новое о гормонах и механизме их действия. Киев: Наукова думка, 1977. С.27.

3. Горизонтов П. Д. Гомеостаз, его механизмы и значение // Гомеостаз. М.: Медицина, 1973. С. 12.

4. Кузнецов А. И., Сунагатуллин Ф. А. Тест и стресс // Уральские нивы. 1991. №1. С. 20.

5. Мазгаров И. Р. Стресс: механизм развития, влияние его на физиологическое состояние и продуктивность животных,

пути и способы предупреждения. Троицк, 2005. С. 29.

6. Холод В. М., Ермолаев Г. Ф. Справочник по ветеринарной биохимии. Минск: Урожай, 1988. 168 с.

ммм/. т-а vu. пагоб. ги

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.