CC BY
0Ключевые слова
глиобластома, рецидив, темозоломид, дексаметазон, гепарансульфат
Актуальность
Глиобластома (ГБМ) относится к наиболее агрессивным опухолям головного мозга. Общепринятая терапия ГБМ включает в себя темозоломид (ТМЗ) и дексаметазон (ДЕКС), воздействующие на организм пациента системно, в том числе и на здоровую ткань головного мозга, ключевыми внеклеточными компонентами которой являются гликозилированные макромолекулы, в том числе гепарансульфат (ГС). Известно, что ГС играет важную роль в межклеточных взаимодействиях, передаче сигнальной информации, а также участвует в патологических процессах, в частности в канцерогенезе. Однако влияние ТМЗ и ДЕКС на содержание ГС в нормальной ткани головного мозга практически не изучено.
Цель
Изучение влияния ТМЗ и ДЕКС на содержание ГС в нормальной, околоопухолевой и опухолевой ткани головного мозга мышей SCID на модели рецидива ГБМ in vivo.
Материалы и методы
Модель рецидива ГБМ представляет из себя ортотопическую инокуляцию клеток U87 в головной мозг мышей SCID, предварительно получавших препараты ТМЗ и/или ДЕКС. Содержание ГС в нормальной, околоопухолевой и опухолевой ткани головного мозга оценивали методами дот-блот анализа и иммуноги-стохимического (ИГХ) окрашивания с использованием специфических антител на углеводный эпитоп ГС. Результаты были проанализированы с использованием ANOVA с критерием Фишера (LSD).
Результаты
Введение ТМЗ экспериментальным животным не оказывало воздействия на содержание ГС как в нормальной и околоопухолевой ткани головного мозга, так и в ткани самой опухоли. Однако применение ДЕКС значительно влияло на содержание ГС в ткани мозга: во внекорковых структурах нормальной ткани головного мозга мышей, по данным дот-блот анализа, наблюдалось снижение в 3,5 раза (p<0,05), по данным ИГХ, содержание ГС в нормальной и околоопухолевой ткани снижалось в 6-10 раз (p<0,05), а в ткани иноку-лированной опухоли U87 в 2 раза (p<0,05). Изменения в содержании ГС в ткани головного мозга мышей, получавших ДЕКС, были ассоциированы с увеличенным объемом ксенографтных опухолей, развившихся в нем из инокулированных клеток U87, что указывает на возможное участие ГС в развитии рецидива ГБМ.
Выводы
ДЕКС значительно снижает содержание ГС в нормальной, околоопухолевой и опухолевой ткани головного мозга мышей, в то время как влияние ТМЗ на содержание ГС незначительно. Изменения в содержании ГС под воздействием ДЕКС могут вносить вклад в рост, развитие и пролиферативные свойства ГБМ при рецидиве заболевания.
Работа выполнена при финансовой поддержке РНФ (грант № 21-15-00285).
Список литературы
1. Hottinger AF, Stupp R, Homicsko K . Standards of care and novel approaches in the management of glioblastoma multiforme
// Chin J Cancer. 2014 Jan;33(1):32-9 . DOI: 10 . 5732/cjc . 013 .10207 . PMID: 24384238; PMCID: PMC3905088 .
2 . Karachi A, Dastmalchi F, Mitchell DA, Rahman M . Temozolomide for immunomodulation in the treatment of glioblastoma //
Neuro Oncol . 2018 Nov 12;20(12):1566-1572 . doi: 10 ,1093/neuonc/noy072 . PMID: 29733389; PMCID: PMC6231207 .
3 . Li JP, Kusche-Gullberg M . Heparan Sulfate: Biosynthesis, Structure, and Function . Int Rev Cell Mol Biol . 2016;325:215-73 .
DOI: 10 . 1016/bs. ircmb. 2016 . 02 . 009 . Epub 2016 Apr 13 . PMID: 27241222 .
Глюкокортикоидный рецептор как один из параметров гетерогенности глиом высокой степени злокачественности
Авторы:
(1) Строкотова Анастасия Владимировна, anastasia.strokotova@gmail.com, НИИ молекулярной биологии и биофизики ФГБНУ «Федеральный исследовательский центр фундаментальной и трансляционной медицины» Минобрнауки России, Новосибирск
(2) Казанская Галина Михайловна, kazanskaya10101958@gmail.com, НИИ молекулярной биологии и биофизики ФГБНУ «Федеральный исследовательский центр фундаментальной и трансляционной медицины», Новосибирск
(3) Волков Александр Михайлович, a_volkov@meshalkin.ru, ФГБУ «НМИЦ им. академика Е.Н. Мешалкина» Минздрава России, Новосибирск
(4) Кливер Евгений Эдуардович, ee_kliver@meshalkin.ru, ФГБУ «НМИЦ им. академика Е.Н. Мешалкина» Минздрава России, Новосибирск
(5) Киселев Роман Сергеевич, r_kiselev@meshalkin.ru, ФГБУ «НМИЦ им. академика Е.Н. Мешалкина» Минздрава России, Новосибирск
(6) Айдагулова Светлана Владимировна, s.aydagulova@gmail.com, ФГБОУ ВО «Новосибирский государственный медицинский университет» Минздрава России; НИИ молекулярной биологии и биофизики ФГБНУ «Федеральный исследовательский центр фундаментальной и трансляционной медицины», Новосибирск
(7) Григорьева Эльвира Витальевна, elv_grig@mail.ru, НИИ молекулярной биологии и биофизики ФГБНУ «Федеральный исследовательский центр фундаментальной и трансляционной медицины», Новосибирск
Ключевые слова
глюкокортикоидный рецептор, гетерогенность, глиома, дексаметазон
Актуальность
Природа межопухолевой и внутриопухолевой гетерогенности первичных опухолей ЦНС по различным параметрам активно изучается [1, 2]. Одним из факторов, вносящих вклад в гетерогенность опухолей ЦНС, может быть глюкокортикоидный рецептор (ГР), широко экспрессирующийся в головном мозге и вовлеченный во многие процессы, такие как гомеостаз, адаптация к стрессу, модуляция иммунной системы и функций головного мозга [3]. Дексаметазон (ДЕКС), используемый в качестве вспомогательного препарата в лечении глиом высокой степени злокачественности и являющийся агонистом ГР, рассматривается как один из факторов, который приводит к гетерогенности экспрессии этого рецептора.
Цель
Изучение гетерогенности экспрессии ГР в глиомах высокой степени злокачественности, в том числе в зависимости от приема ДЕКС.
Материалы и методы
В рамках когортного ретроспективного исследования был использован материал 36 пациентов с гистологическим диагнозом «глиома высокой степени злокачественности, глиобластома NOS, Grade 4 (согласно классификации ICD-O), получавших лечение на базе НМИЦ им. академика Е.Н. Мешалкина с 2019 по 2023 г. На основании данных иммуногистохимического анализа распространенности и интенсивности экспрессии ГР для каждого образца был определен интегральный показатель экспрессии ГР.
Результаты
Было показано, что согласно интегральному показателю в 54% глиобластом преобладает высокая экспрессия ГР, у 29% пациентов — умеренная, а у 17% наблюдалась слабая экспрессия ГР или отсутствовала. Эти первые пилотные данные подтверждают, что уровень экспрессии ГР индивидуален, и когорта пациентов в данном исследовании условно разделяется на подгруппы с различным базовым уровнем экспрессии ГР. Экспрессия ГР между всеми подгруппами имеет статистически значимые отличия при попарном сравнении (p<0,05). Интегральный показатель экспрессии ГР был также изучен у пациентов, получавших и не получавших ДЕКС в ходе лечения. Показано, что разделение пациентов на три подгруппы с высокой, умеренной и низкой экспрессией ГР не зависит от приема ДЕКС.
Выводы
Экспрессия ГР является одним из факторов, вносящих вклад в межопухолевую гетерогенность глиом высокой степени злокачественности, при этом в исследуемой выборке пациенты разделяются на подгруппы с высоким, умеренным и низким уровнем экспрессии. ДЕКС не оказывает влияния на формирование подгрупп пациентов с различной экспрессией ГР.
Работа выполнена при финансовой поддержке Российского научного фонда (грант № 21-15-00285).
Список литературы
1. Perrin S . L . , Samuel M . S . , Koszyca B . et al . Glioblastoma heterogeneity and the tumour microenvironment: implications for
preclinical research and development of new treatments // BiochemSoc Trans . 2019 Vol . 47(2) . P 625-638 . DOI: 10 .1042/
BST20180444.
2 . Мацко Д . Е . , Мацко М . В ., Бакшеева А . О . , Имянитов Е . Н ., Улитин А . Ю ., Моисеенко В . М ., Шелехова К . В ., Волков Н . М . ,
Иевлева А . Г и др . Внутриопухолевая морфологическая и молекулярно-генетическая гетерогенность в астроцитомах разной степени злокачественности в материале от первой операции // Сибирский онкологический журнал . 2021. Т 20 . №6 . С . 55-68 . doi . org/10 . 21294/1814-4861-2021-20-6-55-68 .
3 . Kellendonk C ., Eiden S ., Kretz O . , Schtz G ., Schmidt I . , Tronche F, Simon E . Inactivation of the GR in the nervous system
affects energy accumulation // Endocrinology. 2002 . Vol . 143(6) . P. 2333-40 . DOI: 10 ,1210/endo .143. 6 .8853.
Исследование цитотоксического действия наночастиц LаF3 на культуре опухолевых клеток глиобластомы человека
Авторы:
(1) Ходакова Дарья Владиславовна, KhodakovaDV@yandex.ru, ФГБУ «НМИЦ онкологии» Минздрава России, Ростов-на-Дону
(2) Положенцев Олег Евгеньевич, olegpolozhentsev@mail.ru, Международный исследовательский институт интеллектуальных материалов Южного федерального университета, Ростов-на-Дону
(3) Кузнецова Наталья Сергеевна, kyznet.nat@gmail.com, ФГБУ «НМИЦ онкологии» Минздрава России, Ростов-на-Дону
(4) Гончарова Анна Сергеевна, fateyeva_a_s@list.ru, ФГБУ «НМИЦ онкологии» Минздрава России, Ростов-на-Дону
(5) Панкин Илья Андреевич, ipankin92@gmail.com, Международный исследовательский институт интеллектуальных материалов Южного федерального университета, Ростов-на-Дону
(6) Галина Анастасия Владимировна, volkovaav58@mail.ru, ФГБУ «НМИЦ онкологии» Минздрава России, Ростов-на-Дону
(7) Романова Мария Вадимовна, m.v.mindar@gmail.com, ФГБУ «НМИЦ онкологии» Минздрава России, Ростов-на-Дону
(8) Гурова Софья Валерьевна, gurova.sophie@gmail.com, ФГБУ «НМИЦ онкологии» Минздрава России, Ростов-на-Дону
(9) Максимов Алексей Юрьевич, d.m.n.maksimov@yandex.ru, ФГБУ «НМИЦ онкологии» Минздрава России, Ростов-на-Дону
(10) Росторгуев Эдуард Евгеньевич, ed.rost@mail.ru, ФГБУ «НМИЦ онкологии» Минздрава России, Ростов-на-Дону
Ключевые слова
глиобластома, опухолевая культура клеток, наночастицы, LaF3, цитотоксичность
Актуальность
Глиобластома является наиболее распространенным первичным злокачественным новообразованием головного мозга, которое характеризуется высокой заболеваемостью и смертностью из-за инвазивного роста и высокой резистентности к терапии [1]. Кроме стандартных способов лечения злокачественных опухолей, в том числе и глиального происхождения, в последние десятилетия все большее внимание привлекает фотодинамическая терапия как избирательный способ устранения опухолевых клеток [2]. Применение наночастиц в качестве переносчика противоопухолевого препарата и фотоактивной субстанции может помочь преодолеть ряд недостатков данного метода и повысить его эффективность.
Цель
Провести оценку цитотоксического действия наночастиц LaF3 на культуре опухолевых клеток глиобластомы человека Ш7 с помощью МТТ-теста.
Материалы и методы
Клеточную линию глиобластомы человека Ш7 культивировали в среде DMEM с добавлением 10% FBS при температуре 37 °С и атмосфере 5% СО2, затем высевали в 96-луночный планшет (4-104 клеток/лунку) и инкубировали в течение 24 ч. Далее в лунки вносили тестируемые наночастицы LaF3 в следующих концентрациях: 20, 50, 100, 150, 200, 400, 1000 и 2000 мкг/мл. Далее планшеты помещали в СО2-инкубатор на 24 и 48 ч. Затем в каждую лунку добавляли по 50 мкл МТТ в фосфатно-солевом буфере с концентрацией 5 мг/ мл. Через 4 ч добавляли по 100 мкл диметилсульфоксида в каждую лунку. Оптическую плотность определяли при 540 нм на ридере для микропланшетов.
