CC BY
31
© НИКОЛАЕВ С.М., САМБУЕВА З.Г., РАЗУВАЕВА Я.Г., ЗАНДАНОВ
А.О., МАРХАЕВА Л.Э.
ГЕПАТОПРОТЕКТОРНОЕ ВЛИЯНИЕ ПОЛИФИТОХОЛА ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ЛЕКАРСТВЕННОМ ГЕПАТИТЕ
С.М. Николаев, З.Г. Самбуева, Я.Г. Разуваева, А.О. Занданов, Л.Э. Мар-
хаева
Институт общей и экспериментальной биологии СО РАН, директор -
д.б.н., профессор Л.Л. Убугунов; Бурятский государственный универси-
тет,ректор - член-корр.РАО С.В. Калмыков; Иркутский государственный институт усовершенствования врачей, ректор - д.м.н., профессор
В.В. Шпрах.
Резюме. В работе показано гепатозащитное действие полифитохола в дозе 0,25 г/кг при курсовом внутрижелудочном введении белым крысам линии Wistar с тетрациклиновым гепатитом.
Ключевые слова: полифитохол, лекарственный (тетрациклиновый) гепатит, гепатозащитное влияние.
Николаев Сергей Матвеевич - д. м. н., проф., зав. лабораторией экспериментальной фармакологии ИОЭБ СО РАН (г. Улан-Удэ), e-mail: smniko-laev@ mail.ru, тел. (3012)433463.
Самбуева Зинаида Гомбожаповна - к.б.н., страший научный сотрудник лаборатории экспериментальной фармакологии Института общей и экспериментальной биологии СО РАН ; ТЕЛ. 8(3012)434743.
Разуваева Янина Геннадьевна - к.б. н., научный сотрудник лаборатории безопасности биологически активных веществ ИОЭБ СО РАН (г. Улан-Удэ); е-mail: tatur75@ mail.ru, тел. (3012)433713.
Известно, что антибиотики тетрациклинового ряда, в частности тетрациклин, относятся к средствам с прямым повреждающим действием на печень и приводящих к внутрипеченочному холестазу и в патогенезе “тетрациклинового” гепатита преобладает синдром холестаза [1, 2, 7].
В связи с этим, актуальным является поиск средств, способных повышать резистентность печени к повреждающему действию лекарственных препаратов. Особого внимания заслуживают средства природного происхождения, отличающиеся, как правило, широтой терапевтического действия, малой токсичностью и связанной с этим возможностью их длительного применения. В соответствии с этим на основе прописей тибетской медицины разработано комплексное растительное средство условно названное полифитохол. Полифитохол получен в форме экстракта сухого из бессмертника песчаного (Helichrysum arena-rium L.), пижмы обыкновенной (Tanacetum vulgare L.), мяты перечной (Mentha x piperita L.), солодки уральской (Glycyrrhiza uralensis Fisch.), крапивы двудомной (Urtica dioica L.) и шиповника (Rosa sp.). Данное средство, оказывающее желчегонное, умеренное противовоспалительное и спазмолитическое действие, рекомендовано ФК Минздрава РФ (РК 001301/02-2002) для лечения и профилактики заболеваний органов гепатобилиарной системы.
Целью настоящей работы явилось определение влияния полифитохола на течение экспериментального лекарственного гепатита.
Материалы и методы Лекарственный экспериментальный тетрациклиновый гепатит воспроизводили на 52 белых крысах линии Wistar обоего пола с исходной массой 180200 г путем внутрижелудочного введения тетрациклина гидрохлорида в дозе 40 мг/кг массы один раз в сутки в течение одного месяца - 30 дней [11]. Животным опытной группы одновременно вводили per os полифитохол в дозе
0,25 г/кг (экспериментально-терапевтическая доза) в виде водного раствора 1 раз в сутки в течение 30 дней. Животным контрольной группы одновременно с тетрациклином вводили эквиобъемное количество очищенной воды в ана-
логичном режиме. Отдельной группе крыс в качестве препарата сравнения вводили отвар антилитогенного сбора, состоящего из коры крушины, листьев мяты перечной, трав зверобоя и чистотела [12] по аналогичной схеме. Интервалы между введениями тетрациклина гидрохлорида и лекарственных веществ, а также воды в соответствующих группах животных составляли 5 часов. Исследования проводили на 15-е и 30-е сутки с начала опыта. Функциональное состояние печени оценивали по скорости секреции и общему количеству выделенной желчи у наркотизированных крыс, а также по содержанию в желчи основных ее ингредиентов: билирубина [10], желчных кислот и холестерина [3]. Кроме того, в сыворотке крови определяли содержание холестерина, триацилглицеридов, активность щелочной фосфатазы и концентрацию белка [4]. Для патоморфологических исследований кусочки печени крыс фиксировали в 10 % растворе нейтрального формалина, заливали в парафин. Гистологические срезы окрашивали гематоксилином-эозином, азур-эозином [4]. На микропрепаратах печени крыс в 10 полях зрения подсчитывали количество (%) гепатоцитов «нормальных», гипертрофированных, дву-ядерных, с зернистой и жировой дистрофиями и некротизированных) отдельно в области портальных трактов (ПТ) и центральной вены (ЦВ).
Значимость различий между указанными параметрами среди опытной и контрольной групп животных оценивали с помощью непараметрического критерия Манна-Уитни. Различия считали достоверными при Р<0,05 [9].
Результаты и обсуждение
В результате проведенных исследований установлено, что введение тетрациклина гидрохлорида в значительной степени угнетает функциональное состояние печени, о чем свидетельствовало снижение интенсивности секреции желчи, а также уменьшение содержания в ней желчных кислот и билирубина (табл. 1). На этом фоне отмечено повышение содержания холестерина, триа-цилглицеридов и активности щелочной фосфатазы в сыворотке крови животных (табл. 2).
Курсовое применение полифитохола ограничивало повреждающее влияние тетрациклина гидрохлорида. Так, на 15-е сутки опыта у крыс, получавших по-лифитохол, скорость секреции желчи сохранялась на уровне таковой у интакт-ных животных и превышала данный показатель у крыс контрольной группы на 46, 49, 40 и 22 % соответственно на 1 - 4 часы наблюдения. Общее количество выделенной желчи превышало контроль на 39 %. При биохимическом исследовании желчи установлено, что полифитохол предотвращает нарушение хола-тосинтетической функции печени, о чем свидетельствовало сохранение уровня концентрации холатов в желчи. На этом фоне содержание билирубина в желчи было выше контроля на 20%. На 30-е сутки опыта сохранялась положительная динамика изменений желчевыделения. У крыс, получавших полифитохол, содержание билирубина в желчи превышало таковое у крыс контрольной группы, у которых продолжалось снижение уровня содержания билирубина в желчи. Наряду с этим, ускорялась экскреция холестерина с желчью. При исследовании сыворотки крови животных (табл. 2) на 15-е сутки опыта у крыс, получавших полифитохол, снижение содержания холестерина и триацилглицеридов, а также активности щелочной фосфатазы составило 8, 17 и 35 % соответственно, а на 30-е сутки снижение активности щелочной фосфатазы составило 43%. Отвар сбора оказывал менее выраженное действие (табл.1, 2)
При патоморфологическом исследовании печени животных контрольной группы на 30 сутки опыта были выявлены полнокровие центральных и портальных вен и синусоидальных капилляров, диффузное расширение синусоидальных пространств и отложение в них желчных пигментов. В зоне ПТ отмечали мезенхимально-клеточную инфильтрацию, а также участки гепато-цитов с зернистой, мелко- и среднекапельной жировой дистрофией. Данные морфометрических исследований показали (табл. 3), что для тетрациклино-вого гепатита характерно увеличение доли гепатоцитов, подверженных жировой дистрофии. Количество их в области ЦВ увеличивалось в 1,2 раза, а в области ПТ - в 20,8 раз, по сравнению с данными в интактной группе крыс. Это обусловлено тем, что тетрациклины подавляют выработку транспортных
белков, обеспечивающих выведение фосфолипидов из гепатоцита, что приводит к развитию жировой дистрофии [13]. В области ЦВ наблюдали увеличение в 7,0 раз количества гепатоцитов, подверженных зернистой дистрофии, по сравнению с таковым у интактных животных.
На микропрепаратах печени животных, получавших полифитохол в указанной дозе и препарат сравнения, выявлялись нарушения микроциркуляции: кровенаполнение центральных и портальных вен, расширение синусоидального пространства и стаз эритроцитов в капиллярах. На фоне введения исследуемых средств желчные пигменты в капиллярах встречались значительно реже, и они были значительно меньших размеров по сравнению с таковыми у контрольных животных. Морфометрические исследования показали (табл. 3), что на фоне введения полифитохола в областях ЦВ и ПТ количество гепатоцитов с зернистой дистрофией снижается в 2,0 и 1,5 раза; с жировой дистрофией - в 11,0 и 1,5 раза, число некротизированных гепатоцитов - в 2,0 и 2,2 раза соответственно по сравнению с таковыми показателями у животных контрольной группы. Более того, на фоне введения полифитохола (табл.3) наблюдали увеличение количества двуядерных и гипертрофированных гепатоцитов по сравнению с контролем, как в области ПТ, так и ЦВ, что свидетельствует об усилении репаративных процессов в печени. Отвар сбора в отдельной группе крыс уступал по действию.
Таким образом, результаты проведенных исследований свидетельствуют о гепатозащитном действии полифитохола, под влиянием которого ограничивается негативное действие тетрациклина гидрохлорида на функциональное состояние печени. Установленное влияние полифитохола обусловлено широким спектром его фармакологических свойств, что связано с содержанием в нем различных классов биологически активных веществ, преимущественно поли-фенольной природы [6]. Известно, что процессы желчеобразования являются ферментозависимыми, а блокада многих ферментов приводит к нарушению желчеобразования [8]. В данном случае улучшение процессов желчеобразования и желчевыделения связано со свойством биофлавоноидов - активизировать
Na+, К+-АТФ-азу. Определенно, биофлавоноиды, ингибируя процессы перекис-ного окисления липидов, предотвращают дезинтеграцию холестерингидрокси-лазы - основного фермента утилизации холестерина в желчные кислоты. Наряду с этим, биофлавоноиды повышают сократительную способность околока-нальцевых микрофиламентов и тем самым способствуют транспорту холатов, экскреции билирубина и холестерина, а также ускоряют регенерацию и восстановление функциональной активности гепатоцитов. Выраженная фармакотера-певтическая эффективность полифитохола обусловлена не только его воздействием на патологический процесс в гепатобилиарной системе, но и регулирующим его влиянием на различные функциональные системы и организма в целом. Сочетание холеретических и гепатопротекторных свойств полифитохола аргументируют целесообразность его широкого применения для профилактики и лечения повреждений органов гепатобилиарной системы.
HEPATOPROTECTION INFLUENCES OF POLYPHITOHOL IN MODEL DRUG-INDUCED HEPATITIS
S.M. Nikolaev, Sambueva Z.G., Pazuvaeva YA.G., A.O. Zandanov,
L.E. Marhaeva Institute of theoretical and experimental biology SB RAS,
Buryatsky State University Irkutsk State Institute of doctors’ improvement Abstract. The study presents hepatoprotection effect of polyphotohol in dose of 0,25 g/kg during at intragastric injection into white rats Wistar line with tetracycline hepatitis.
Key words: polyphitohol, drug- induced (tetracycline) hepatitis, hepatoprotection effect.
Литература
1. Белоусов Ю.Б. Общая и частная клиническая фармакокинетика. - М., 2006. - 807 с.
2. Болезни печени и желчевыводящих путей: Руководство для врачей / Под редакцией В. Т. Ивашкина. - М., 2002. - 416 с.
3. Мирошниченко В.П., Громашевская Л.Л., Касаткина М.Г. и др. Определение содержания желчных кислот и холестерина в желчи // Лаб. дело. -1978. - № 3. - С.149 - 153.
4. Меньшиков В.В., Делекторская Л.Н., Золотницкая Р.П. и др. Лабораторные методы исследования в клинике: Справочник. - М., 1987. - 368 с.
5. Микроскопическая техника: Руководство / Под ред. Д.С. Саркисова и Ю.Л. Перова. М., 1996. - 544 с.
6. Николаев С.М., Самбуева З.Г., Цыренжапов А.В. и др. Фармакологические свойства комплексного фитосредства // Вестн. Бурятского универстите-та. Серия 11: Медицина. - Вып 3. - Улан-Удэ, 2003. - С. 173-178.
7. Полунина Т.Е., Маев И.В. Медикаментозные гепатиты // Фарматека. -2006. - № 12 (127)
8. Саратиков А.С., Скакун Н.П. Желчеобразование и желчегонные средства. - Томск, 1991. - 260 с.
9. Сергиенко В.И., Бондарева И.Б. Математическая статистика в клинических исследованиях. М., 2006. - 253 с.
10. Скакун Н.П. Нейрогуморальный механизм желчегонного действия инсулина // Проблемы эндокринологии. - 1956. - № 6. - С. 75-78.
11. Скуя Н. А. Хронические заболевания желчных путей (патогенез и лабораторная диагностика). - Л., 1972. - 229 с.
12. Соколов С.Я. Фитотерапия и фитофармакология: Руководство для врачей. - М., 2000. - 976 с.
13. Шерлок Н., Дули Дж. Заболевания печени и желчных путей. - М., 1999. - 925 с.
PDF created with pdfFactory Pro trial version www. pdffactory. com
