CC BY
9
Вестник Пермского университета. Серия Биология. 2023. Вып. 2. С. 166-171. Bulletin of Perm University. Biology. 2023. Iss. 2. P. 166-171.
МИКРОБИОЛОГИЯ
Научная статья
УДК 575.113/.118:577.112:579.843.1 doi: 10.17072/1994-9952-2023-2-166-171
Гены и белки холодового шока у Vibrio cholerae различных
серогрупп
С. О. Водопьянов1, А. А. Герасименко1, А. С. Водопьянов1, А. М. Горох1, Р. В. Писанов1, В. Д. Кругликов1
I Ростовский-на-Дону противочумный институт Роспотребнадзора, Ростов-на-Дону, Россия Автор, ответственный за переписку: Сергей Олегович Водопьянов, [email protected]
Аннотация. Исследовано 553 полногеномных сиквенса штаммов Vibrio cholerae O1, О139 и неО1/неО139 серогрупп на наличие генов холодового шока cspA, cspV и cshl. Гены cspA и cspV присутствовали практически у всех изученных штаммов. Ген cshl присутствовал у 99 штаммов Vibrio cholerae серогруппы О1 из 449 изученных и у 21 штамма холерных вибрионов неО1/неО139 из 86, взятых в исследование. Обнаружено отсутствие гена cshl у всех штаммов серогруппы O139 и штаммов О1 серогруппы с генами ctxAB и tcpA. На основании изучения нуклеотидного состава выявлено 13 различных вариантов гена cshl, обусловливающих структурные различия белка холодового шока Cshl. Два основных типа белка Cshl были представлены референс-типом (68 геномов) и мажорным типом (35 геномов),
II минорных вариантов включали единичные геномы. По данным базы данных NCBI за рубежом циркулируют преимущественно представители минорных типов белка Csh1. Референс тип Csh1 в основном выявляли у штаммов серогруппы О1, при этом если до 2000 г. идентифицировали 10 штаммов с протеином Csh1 референс-типа, то в период 2001-2022 гг. их число составило уже 55. Предполагается, что новый ген холодового шока cshl дает вибрионам селективное преимущество путем обеспечения выживания при низких температурах водоемов.
Ключевые слова: секвенирование, ген холодового шока cshl, протеины Csh1, стресс, Vibrio cholerae Для цитирования: Гены и белки холодового шока у Vibrio cholerae различных серогрупп / С. О. Водопьянов, А. А. Герасименко, А. С. Водопьянов, А. М. Горох, Р. В. Писанов, В. Д. Кругликов // Вестник Пермского университета. Сер. Биология. 2023. Вып. 2. С. 166-171. http://dx.doi.org/10.17072/1994-9952-2023-2-166-171.
MICROBIOLOGY
Original article
The cold-shock gene's protein complex of different serogroups
of Vibrio cholerae
S. O. Vodopyanov 1, A. A. Gerasimenko1, A. S. Vodopyanov1, A. M. Gorokh1, R. V. Pisanov1, V. D. Kruglikov1
1 Rostov-on-Don Antiplague Research Institute, Rostov-on-Don, Russia Corresponding author: Sergey O. Vodopyanov, [email protected]
Abstract. 553 whole genome sequences of Vibrio cholerae strains O1, O139 and nonO1/nonO139 serogroups were studied for the presence of cold-shock genes cspA, cspV and cshl. The cspA and cspV genes were present in almost all strains. The cshl gene was present in 99/449 strains of the serogroup O1 and in 21/86 cultures of nonO1/nonO139 taken in the study. The absence of the cshl gene was revealed in strains of the O139 serogroup and strains of the O1 serogroup with ctxAB and tcpA genes. The study of the nucleotide composition identified 13 different variants of the cshl gene which cause structural differences in the cold-shock protein Csh1. The two main types of Csh1 protein were represented by the reference type (68 genomes) and the major type (35 genomes), 11 minor variants included single genomes. According to the NCBI database, mainly representatives of minor types of Csh1 protein circulate abroad. The reference type Csh1 was mainly detected in O1 serogroup strains, while 10 strains with the reference type Csh1 protein were identified before 2000, then in 2001-2022 their number reached 55 strains. It is assumed that the new cold shock gene cshl gives vibrions a selective advantage by ensuring survival at low temperatures in reservoirs.
166_
© Водопьянов С. О., Герасименко А. А., Водопьянов А. С., Горох А. М., Писанов Р. В., Кругликов В. Д., 2023
Keywords: sequencing, csh1 cold-shock gene, Csh1 proteins, stress, Vibrio cholerae
For citación: Vodopyanov S. O., Gerasimenko A. A., Vodopyanov A. S., Gorokh A. M., Pisanov R. V., Kruglikov V. D. [The cold-shock gene's protein complex of different serogroups of Vibrio cholerae]. Bulletin of the Perm University. Biology. Iss. 2 (2023): рр. 166-171. (In Russ.). http://dx.doi.org/10.17072/1994-9952-2023-2-166-171.
Введение
Постоянное выделение Vibrio cholerae различных штаммов в процессе мониторинговых исследований из водных объектов на территории РФ представляет потенциальную опасность возбудителя для общественного здравоохранения [Москвитина и др., 2012; Носков и др., 2021]. При этом факты преимущественного выделения в ходе мониторинга штаммов вибрионов ctxAB- tcpA- О1 и неО1/неО139 серогрупп могут указывать на существование у этих культур дополнительных факторов, обусловливающих их пер-систенцию [Титова и др., 2015; Монахова, Архангельская, 2016]. Поскольку для большинства территорий Российской Федерации, в отличие от эндемичных по холере регионов, характерна низкая температура осенне-зимнего периода, то в число потенциальных детерминант персистенции могут входить факторы, обусловливающие выживание возбудителя при низкой температуре.
Микроорганизмы в целом однотипно реагируют на понижение температуры; адаптация включает в себя изменения в составе мембран, в механизме трансляции и транскрипции. Происходит индукция набора специфических белков, помогающих перестроить клеточный метаболизм [Barria, 2013]. Например, на модели Escherichia coli установлено, что понижение температуры приводит к синтезу ряда белков, называемых белками холодового шока (Csps). При этом протеины CspA, CspB, CspG и CspI играют главную роль в защите клетки при холодовом шоке. Кроме того, важно, что Csps придают организму способность адаптироваться к различным стрессам, таким как лишение питательных веществ, окислительный, тепловой, кислотный и антибиотический стрессы [Cardoza, 2021]. На этом фоне механизмы, обусловливающие устойчивость холерных вибрионов к низким температурам, изучены недостаточно. Показано существование у холерных вибрионов двух белков холодового шока, кодируемых генами cspA и cspV, причем эти генетические структуры присутствовали у токсигенных и нетоксигенных штаммов [Carroll et al., 2001; Datta, Bhadra, 2003; Заднова и др., 2014].
Ранее нами при изучении нуклеотидной последовательности ctxAB- tcpA- штамма Vibrio cholerae O1 20000 (GenBank: CP036500.1), выделенного из водоема Ростовской обл. в 2016 г., в составе второй хромосомы был идентифицирован дополнительный ген холодового шока csh1 [Бородина и др., 2021]. Данный геном был использован в последующем как референс.
В последние годы значительно возросла возможность секвенирования полных геномов бактериальных изолятов. Использование этих данных открывает перспективы для нового понимания особенностей биологии бактериальных патогенов [Didelot, Parkhill, 2022].
Цель исследования - изучение распространения генов семейства холодового шока у холерных вибрионов О1, O139 и неО1/неО139 серогрупп различного происхождения по данным анализа полногеномных нуклеотидных последовательностей, полученных на базе ФКУЗ Ростовского-на-Дону противочумного института Роспотребнадзора.
Материалы и методы
В работе использованы данные о 553 полногеномных сиквенсах штаммов Vibrio cholerae О1, О139 и неО1/неО139 из лаборатории «Коллекция патогенных микроорганизмов» ФКУЗ «Ростовский-на-Дону противочумный институт» Роспотребнадзора. Секвенирование проведено в ходе выполнения стратегической инициативы социально-экономического развития Российской Федерации до 2030 г. «Санитарный щит страны - безопасность для здоровья (предупреждение, выявление, реагирование)». Выборка была представлена 449 штаммами серогруппы О1, 18 штаммами О139, а также 86 штаммами неО1/неО139 серогруппы.
Библиотеку фрагментов ДНК готовили с использованием набора реагентов Nextera DNA Flex (Illumina, США) согласно инструкции производителя. Ампликоны метили с применением Nextera Index Kit (Illumina, США) также согласно инструкции. Секвенирование проводили на платформе MiSeq (Illumina, США) с набором реагентов MiSeq Reagent Kit v2. Сборка геномов осуществлялась программой Spades v. 3.15.4 [Bankevich et al., 2012]. Поиск генов проводился авторскими программами. Аминокислотные замены были вычислены с помощью модифицированного авторского скрипта [Герасименко, Водопьянов, Писанов, 2021]. Расчет статистических показателей был проведен с помощью Libre Office Calc. Необходимая информация о свойствах культур, месте и сроках их выделения получена из паспортов коллекционных штаммов.
Результаты и обсуждение
Первоначально установлено присутствие в выборке двух описанных ранее белков холодового шока, кодируемых генами cspA и cspV. Ген cspA присутствовал у 552 штаммов и отсутствовал лишь у одного штамма О1 серогруппы, ген cspV присутствовал у 548 культур и отсутствовал у пяти штаммов (три культуры О1 и два вибриона неО1/неО139). Полученные результаты согласуются с литературными данными
0 крайне широком распространении генов холодового шока cspA и cspV [Datta, Bhadra, 2003].
Ген холодового шока csh1, по данным биоинформационного анализа, относился к семейству CspA и был идентифицирован в 120 нуклеотидных последовательностях. 99 (22.0%) из изученных 449 штаммов
01 серогруппы содержали ген csh1. При этом 98 штаммов csh1+ имели генотип ctxAB- tcpA-. Из изученных культур 86 представляли вибрионы неО1/неО139 (ctxAB- tcpA-), а 21 геном содержал ген csh1 (24.4%). У представителей серогруппы О139 независимо от наличия генов ctxAB и tcpA отсутствовал ген csh1 (табл. 1).
Таблица 1
Встречаемость генотипа csh1+ у штаммов Vibrio cholerae [Occurrence of the csh1+ genotype in Vibrio cholerae strains]
Серогруппы Наличие гена csh1, кол-во штаммов Всего штаммов Встречаемость, %
V. cholerae O1 99 449 22.0
V. cholerae O139 0 18 0.0
V. cholerae неО!/неО!39 21 86 24.4
Всего 120 553 21.7
При анализе источника выделения csh1+ вибрионов серогруппы О1 установлено, что 300 штаммов были выделены из различных поверхностных водоемов Российской Федерации, при этом 94 из 99 имели в своем составе искомый ген (95.0%). Полученный результат, на наш взгляд, может быть объяснен очевидным селективным преимуществом csh1+ культур О1 серогруппы в водоемах по сравнению с csh1— вариантами. Наиболее вероятно, что csh1+ варианты лучше переносят низкую температуру водоемов, характерную для нашей страны.
При анализе места изоляции csh1+ вибрионов неО1/неО139 серогруппы, выделенных из поверхностных водоемов, установлено, что из 23 штаммов 5 имели в своем составе искомый ген (21.7%). Отсутствие гена csh1 у 18 изученных представителей серогруппы О139, несущих гены холодового шока cspA и cspV, можно рассматривать как отсутствие дополнительного эффективного фактора выживаемости в стрессовых условиях или наличии у данной серогруппы других факторов адаптации к холодовому стрессу. Данные предположения нуждаются в дальнейшей проверке.
При изучении первичной нуклеотидной последовательности гена csh1 у Vibrio cholerae О1 и неО1/неО139 была выявлена значительная вариабельность изучаемой структуры. При использовании в качестве референс-последовательности гена csh1 размером 213 нуклеотидов ранее изученный штамм Vibrio cholerae О1 20000 [Бородина и др., 2021], у вибрионов О1 и неО1/неО139 также установлена вариабельность нуклеотидной структуры. Общая длина гена у всех изученных штаммов была стабильна и составила 213 нуклеотидов, но в 17 позициях были выявлены замены: 17 (C^-A), 20 (G^-A), 74 (G^-T), 77 (G^A), 83 (C^A), 105 (T^A), 112 (G^A), 113 (C^G), 122 (G^A), 143 (G^A/T), 144 (T^C), 153 (C^T), 165 (C^T), 166 (G^A), 183 (C^T), 197 (A^G) и 208 (G^A/C). В структуре протеина Csh1 размером 70 аминокислотных остатков было выявлено 12 замен, сформировавших в итоге 13 типов белкового продукта. При этом 68 геномов относились к референс-типу, белковая последовательность которых совпадала с последовательностью штамма Vibrio cholerae О1 20000. Замены аминокислот в позиции 38 (A^-T), 70 (A^-T) приводили к формированию мажорного типа 1 (35 структур). Остальные варианты были представлены в единичном количестве (табл. 2).
Таблица 2
Варианты белка, кодируемого геном холодового шока cshl различных типов у Vibrio cholerae О1 и
неО1/неО139
[Protein's variation, encoded by variative cshl cold-shock types of Vibrio cholerae O1 and nonO1/nonO139]
Кол-во штаммов Тип Cshl Замена аминокислоты белка Csh1, позиция
6 7 25 26 28 35 38 41 48 56 66 70
68 референс T G S G S N A G G E N A
35 1 - - - - - - T - - - - T
4 2 S -
2 3 P -
2 4 - - - - - - - - V - - -
Окончание табл. 2
Кол-во штаммов Тип Cshl Замена аминокислоты белка Cshl, позиция
6 7 25 26 28 35 38 41 48 56 66 70
2 5 K - I
1 6 - D - - - - T - - - - T
1 7 - - - - - - S - - K - T
1 8 - - - D - - - - D - - -
1 9 - - - - - - - - D - - -
1 10 - - - - - K - - - - - -
1 11 - - - - Y - - - - - - -
1 12 - - I - - - - - - - - -
Поиск по базе данных NCBI позволил выявить 10 геномов Vibrio cholerae, содержащих в своем составе ген cshl (табл. 3), совпадающий с таковым у штамма Vibrio cholerae 20000 (референс-тип). Примечательно, что превалирующие типы у штаммов из международной базы данных - минорные, по вышеприведенной классификации, типы 9 (замена G48D) и 12 (замена S25I). Например, доминирующий тип на территории США - 12, а на территории Гаити - 9. Один штамм от человека из Японии имел референс-тип, преобладающий среди штаммов нашей выборки. На наш взгляд, подобное различие может быть следствием влияния определенных условий внешней среды на возбудителя.
Таблица 3
Типы протеина Csh1 у штаммов из международной базы данных [Protein types of strains from the international database according to the cshl gene]
Номер штамма в GenBank Источник выделения Страна Мутации в белке Cshl Тип белка Cshl
CP053807.1 вода США S25I 12
CP053745.1 вода США S25I 12
CP104357.1 - США S25I 12
CP104355.1 - США S25I 12
CP042300.1 - Гаити G48D 9
CP013013.1 - Гаити G48D 9
CP012997.1 вода Гаити G48D 9
CP010812.1 человек Филиппины A38T, A70T 1
AP024968.1 человек Япония референс
Анализ происхождения штаммов, несущих типовой белок Cshl штамма Vibrio cholerae 20000 О1 (ре-ференс-тип) и первого типа, показал, что они преимущественно выявляются у штаммов серогруппы О1 (65 из 68 и 33 из 35 соответственно). При этом до 2000 г. выявлено 10 протеинов Cshl референс-типа, а с 2001 по 2022 г. их число составило уже 55. Для мажорного протеина Cshl первого типа была характерна иная динамика: до 2000 г. им обладало всего два штамма, далее следует своеобразный «провал», а начиная с 2011 г., этот тип идентифицирован уже у 31 штамма. Столь «взрывное» распространение протеина Csh1 первого типа может указывать на селективное преимущество, сообщаемое этим типом белка холо-дового шока. В этом случае 10 минорных типов белка Csh1, представленных одной или двумя последовательностями, можно рассматривать как фактор приспособления к температурным условиям места оби-тания/персистенции вибрионов путем вариационной изменчивости гена холодового шока. Это предположение отчасти согласуется с данными о выявлении протеинов Csh1 типов 9 и 12 у штаммов на территориях Гаити и США, для которых не характерны низкие температуры окружающей среды в противовес более «холодным» регионам.
Заключение
Исследовано 553 полногеномных сиквенсов штаммов Vibrio cholerae O1, О139 и неО1/неО139 на наличие генов холодового шока cspA, cspVи cshl. Гены cspA и cspVприсутствовали практически у всех изученных штаммов. Ген cshl присутствовал у 99 штаммов серогруппы О1 из 449 изученных и у 21 культуры из 86 вибрионов неО1/неО139. Штаммов csh1+ генотипа среди представителей O139 серогруппы не выявлено. Обнаружены различные варианты гена cshl, обусловливающие структурные различия белка холодового шока Csh1.
Учитывая, что 95% нетоксигенных штаммов О1 серогруппы, выделенных из различных водоемов, со-
держат в себе ген холодового шока csh1, предполагается, что данный ген сообщает вибрионам селективное преимущество путем обеспечения выживания при низких температурах водоемов. Вместе с тем, это предположение относительно штаммов О139 и неО1/неО139 серогрупп требует дальнейших исследований на увеличенных выборках штаммов.
Вариационная изменчивость аминокислотной структуры протеина Cshl является фактором приспособления холерного вибриона к изменчивым температурным условиям среды обитания. Не исключено, что эволюционно с геном холодового шока могут соседствовать и другие факторы, обеспечивающие персистенцию вибрионов. Данные положения нуждаются в дальнейшей проверке.
Список источников
1. Бородина О.В. и др. Изучение встречаемости гена холодового шока csh1 у штаммов Vibrio cholerae, циркулирующих на территории Российской Федерации // Бактериология. 2021. Т. 6, № 3. С. 22-23.
2. Герасименко А.А., Водопьянов А.С., Писанов Р.В. Типирование штаммов SARS-COV-2 с помощью новой компьютерной программы «CovAnalyzer» // Российская наука в современном мире: сб. статей XXXVII междунар. науч.-практ. конф. М., 2021. С. 19-22.
3. Заднова С.П. и др. Сравнительная устойчивость типичных и генетически измененных штаммов Vibrio cholerae биовара El Tor к действию неблагоприятных факторов внешней среды // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2014. № 2. С. 11-17.
4. Монахова Е.В., Архангельская И.В. Холерные вибрионы неО1/неО139 серогрупп в этиологии острых кишечных инфекций: современная ситуация в России и в мире // Проблемы особо опасных инфекций. 2016. № 2. С. 14-23.
5. Москвитина Э.А. и др. Холера в начале XXI века. Прогноз на глобальном уровне // Проблемы особо опасных инфекций. 2012. № 1. С. 11-16.
6. Носков А.К. и др. Результаты мониторинга холеры на административных территориях России в период с 2013 по 2019 год // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2021. № 2. С. 163-175.
7. Титова С.В. и др. Анализ динамики выделения и биологических свойств штаммов V. cholerae О1 El Tor, изолированных из водных объектов на территории Ростовской области в 2003-2014 гг. // Здоровье населения и среда обитания. 2015. № 2. С. 39-41.
8. Bankevich A. et al. SPAdes: a new genome assembly algorithm and its applications to single-cell sequencing // Journal of computational biology. 2012. Vol. 19, № 5. P. 455-477.
9. Barria C., Malecki M., Arraiano C.M. Bacterial adaptation to cold // Microbiology. 2013. Vol. 159, № Pt_12. P. 2437-2443.
10. Cardoza E., Singh H.C Group-Mediated Antibiotic Stress Mimics the Cold Shock Response // Current Microbiology. 2021. Vol. 78, № 9. P. 3372-3380.
11. Carroll J.W. et al. Response and tolerance of toxigenic Vibrio cholerae O1 to cold temperatures // Antonie Van Leeuwenhoek. 2001. Vol. 79, № 3. P. 377-384.
12. Datta P.P., Bhadra R.K. Cold shock response and major cold shock proteins of Vibrio cholerae // Applied and Environmental Microbiology. 2003. Vol. 69, № 11. P. 6361-6369.
13. Didelot X., Parkhill J. A scalable analytical approach from bacterial genomes to epidemiology // Philosophical Transactions of the Royal Society B. 2022. Vol. 377, № 1861. P. 20210246.
References
1. Borodina O.V., Vodopyanov S.O., Vodopyanov A.S., Oleinikov I.P., Chemisova O.S., Poleeva M.V. [Study of csh1 cold-shock gene's occurrence of Vibrio cholerae strains circulating in the Russian Federation]. Bakteriologija. V. 6(3) (2021): pp. 22-23. (In Russ.).
2. Gerasimenko A.A., Vodopyanov A.S., Pisanov R.V. [Typing of SARS-COV-2 strains using a new computer program 'CovAnalyzer']. Rossijskaja nauka v sovremennom mire [Russian science in the modern world: collection of articles]. Moscow, 2021, pp. 19-22. (In Russ.).
3. Zadnova S.P., Agafonov D.A., Shashkova A.V., Smirnova N.I. [Comparative resistance of typical and genetically modified strains of Vibrio cholerae biovar El Tor to adverse environmental factors]. Zurnal mikrobiologii, epidemiologii i immunobiologii. No 2 (2014): pp. 11-17. (In Russ.).
4. Monakhova E.V., Arkhangel'skaya I.V. [Vibrio cholerae nonO1/non139 serogroups in the etiology of acute intestinal infections: the current situation in Russia and in the world]. Problemy osobo opasnych infekcij. No 2 (2016): pp. 14-23. (In Russ.).
5. Moskvitina Eh. A., Mazrukho A.B., Adamenko O.L., Kruglikov V.D. [Cholera at the beginning of the XXI century. Forecast at the global level]. Kholera v nachale XXI veka. Prognoz na global'nom urovne. Problemy osobo opasnykh infektsii. No 1 (2012): pp. 11-16. (In Russ.).
6. Noskov A.K., Kruglikov V.D., Lopatin A.A., Chemisova O.S., Levchenko D.A., Ivanova S.M., Monakhova E.V., Arkhangel'skaya I.V., Vodopyanov A.S., Gaevskaya N.E., Podoinitsyna O.A., Ezhova M.I. [Results of cholera monitoring in the administrative territories of Russia in the period from 2013 to 2019]. Zurnal mikrobiologii, epidemiologii i immunobiologii.No 2 (2021): pp. 163-175. (In Russ.).
7. Titova S.V., Kruglikov V.D., Ezhova M.I., Vodopyanov A.S., Arkhangel'skaya I.V., Vodopyanov S.O., Moskvitina Eh.A. [Analysis of the dynamics of isolation and biological properties of V. cholerae O1 El-Tor strains isolated from water bodies in the Rostov region in 2003 -2014]. Zdorov'e naselenija i sreda obitanija. No 2(263) (2015): pp. 39-41. (In Russ.).
8. Bankevich A. et al. SPAdes: a new genome assembly algorithm and its applications to single-cell sequencing. Journal of computational biology. V. 19(5) (2012): pp. 455-477.
9. Barria C., Malecki M., Arraiano C. M. Bacterial adaptation to cold. Microbiology. V. 159(Pt_12) (2013): pp. 2437-2443.
10. Cardoza E., Singh H. C Group-Mediated Antibiotic Stress Mimics the Cold Shock Response. Current Microbiology. V. 78(9) (2021): pp. 3372-3380.
11. Carroll J.W. et al. Response and tolerance of toxigenic Vibrio cholerae O1 to cold temperatures. Antonie Van Leeuwenhoek. V. 79(3) (2001): pp. 377-384.
12. Datta P.P., Bhadra R.K. Cold shock response and major cold shock proteins of Vibrio cholerae. Appliedand Environmental Microbiology. V. 69(11) (2003): pp. 6361-6369.
13. Didelot X., Parkhill J. A scalable analytical approach from bacterial genomes to epidemiology. Philosophical Transactions of the Royal Society B. V. 377(1861) (2022): p. 20210246.
Статья поступила в редакцию 07.02.2023; одобрена после рецензирования 21.03.2023; принята к публикации 02.06.2023.
The article was submitted 07.02.2023; approved after reviewing 21.03.2023; accepted for publication 02.06.2023. Информация об авторах
Сергей Олегович Водопьянов - [email protected], https://orcid.org/0000-0003-4336-0439, д-р. мед. наук,
главный научный сотрудник отдела микробиологии холеры и других острых кишечных инфекций; Артем Александрович Герасименко - [email protected], https://orcid.org/0000-0002-7700-3483, младший научный сотрудник лаборатории молекулярной биологии природно-очаговых и зоонозных инфекци; Алексей Сергеевич Водопьянов - [email protected], https://orcid.org/0000-0002-9056-3231, канд. мед. наук,
ведущий научный сотрудник лаборатории молекулярной биологии природно-очаговых и зоонозных инфекций; Алевтина Михайловна Горох - [email protected], https://orcid.org/0000-002-2017-7992, младший научный
сотрудник отдела микробиологии холеры и других острых кишечных инфекций; Руслан Вячеславович Писанов - [email protected], https://orcid.org/0000-0002-7178-8021, канд. биол. наук,
ведущий научный сотрудник лаборатории молекулярной биологии природно-очаговых и зоонозных инфекций; Владимир Дмитриевич Кругликов - [email protected], https://orcid.org/0000-0002-6540-2778, д-р. мед. наук,
главный научный сотрудник отдела микробиологии холеры и других острых кишечных инфекций. Information about the authors
Sergey O. Vodopyanov - [email protected], https://orcid.org/0000-0003-4336-0439, doctor of medical sciences, chief researcher of the department of microbiology of cholera and other acute intestinal infections; Artem A. Gerasimenko - [email protected], https://orcid.org/0000-0002-7700-3483, junior researcher of the
laboratory of molecular biology, natural focal and zoonotic infections; Alexey S. Vodopyanov - [email protected], https://orcid.org/0000-0002-9056-3231, candidate of medical
sciences, leading researcher of the laboratory of molecular biology, natural focal and zoonotic infections; Alevtina M. Gorokh - [email protected], https://orcid.org/0000-002-2017-7992, junior researcher of the department of microbiology of cholera and other acute intestinal infections; Ruslan V. Pisanov - [email protected], https://orcid.org/0000-0002-7178-8021, candidate of biological sciences, leading researcher of the laboratory of molecular biology, natural focal and zoonotic infections; head of the laboratory; Vladimir D. Kruglikov - [email protected], https://orcid.org/0000-0002-6540-2778, doctor of medical sciences, chief researcher of the department of microbiology of cholera and other acute intestinal infections.
Вклад авторов:
Водопьянов C. O. - научное руководство, концепция исследования, написание текста.
Герасименко А. А. - статистическая обработка материала, анализ, написание текста.
Водопьянов А. С. - предоставление исходных данных, концепция исследования.
Горох А. М. - написание текста.
Писанов Р. В. - доработка текста, итоговые выводы.
Кругликов В. Д. — доработка текста, рецензирование.
Contribution of the authors:
Vodopyanov S. O. - scientific management, research concept, writing the draft. Gerasimenko A. A. - statistical processing of the material, analysis, writing the draft. Vodopyanov A. S. - providing sources, research concept. Gorokh A. M. - writing the draft.
Pisanov R. V. - followon revision of the text, final conclusions. Kruglikov V. D. - followon revision of the text, final conclusions.
Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов. The authors declare no conflicts of interests.
