CC BY
69
© Коллектив авторов, 2008 УДК 616-007.17-018.1575.191
ГЕНЕТИЧЕСКИЕ МАРКЕРЫ СОСУДИСТОЙ пАТОлОГИИ У ДЕТЕЙ С НЕДИФФЕРЕНЦИРОВАННОЙ ДИСплАЗИЕЙ соединительной ткани
И.А. Костик1, М.л. Чухловина2, В.И. ларионова2, Т.И. Кадурина1 1 Санкт-петербургская медицинская академия последипломного образования
2Санкт-петербургская государственная педиатрическая медицинская академия
Недифференцированная дисплазия соединительной ткани (ДСТ) - это гетерогенная группа заболеваний, оказывающая влияние на функционирование различных органов и систем [1,2]. Пациенты с недифференцированной ДСТ предъявляют большое количество жалоб и состоят на учете у врачей многих специальностей. Известно, что эти больные имеют повышенный риск развития сосудистой патологии, в связи с чем представляется интересным поиск различных генетических маркеров, ассоциированных с данной патологией. Для нашей работы в качестве исследуемых маркеров были выбраны гены ответственные за вазодилатацию (ген эндотелиальной NO-синтетазы) и вазоконстрикцию (ген ангио-тензинконвертирующего фермента). В настоящее время данные гены рассматриваются в качестве генов-кандидатов для развития инсульта.
Имеется большое количество работ, посвященных изучению влияния полиморфизма генов N0-синтета-зы на развитие сосудистой патологии [3]. Ген эндотелиальной NO-синтетазы (eNOS) локализован в длинном плече 7 хромосомы ^35-36).
Полиморфизм в интроне 4 представлен 2 аллелями: Ь, в котором имеются 5 повторяющихся фрагментов 27 Ьр, и а , в котором только 4 таких повтора. Полиморфизм не является структурным. В европейской белой популяции более распространенным является аллель Ь, а частота распространения генотипов составляет соответственно ЬЬ-0,41, аЬ-0,46, аа-0,13 [5]. В различных исследованиях было показано, что у носителей генотипа аа отмечен максимальный уровень базального N0, тогда как у носителей генотипа ЬЬ уровень N0 приблизительно в 2 раза ниже, у гетерозигот (аЬ) уровни N0 занимают промежуточное положение [20]. По данным Ю.В. Котовской и соавт., носительство аллеля 4а (генотипы 4а/4а, 4а/4Ь) ассоциируется с высоким риском развития острого нарушения мозгового кровообращения и инфаркта миокарда у больных сахарным диабетом второго типа, при этом аллель Ь и генотип ЬЬ обладают защитными свойствами [2]. Существуют данные о большей часто-
те аллеля а у больных с артериальной гипертензией и гипертрофией левого желудочка по сравнению со здоровыми людьми [17]. В исследовании X.L. Wang показана ассоциация аллеля а с развитием ИБС, инфаркта миокарда и предрасположенностью к эндотелиальной дисфункции [17].
Структурный полиморфизм в 7 экзоне формируется в результате однонуклеотидной замены гуанина на тимин в 894 позиции гена NOS-III, что приводит к замене глутамина аспарагином в 298 позиции самого фермента. В исследовании К. Berger и соавт. [6] выявлена ассоциация ТТ генотипа с развитием ишемического инсульта, не зависящая от возраста, пола, наличия артериальной гипертензии, диабета и гиперхолесте-ринемии. В другом исследовании авторы обнаружили большую частоту распространенности аллеля Т у пациентов, страдающих артериальной гипертензией, по сравнению со здоровыми, а также их резистентность к общепринятой терапии [12]. В европейской популяции общая частота данной мутации достаточно высока и составляет до 10% у здоровых и до 36% у больных острым инфарктом миокарда [11]. Носители аллеля Т имеют повышенный риск развития церебрального атеросклероза [15].
Мутация Т786-С в 5'-конце гена NOS-III приводит к значительному угнетению промоторной активности гена и, соответственно, к снижению синтеза эндотелиального NO. Отмечено, что у пациентов, носителей данного (C) аллеля, выше риск возникновения выраженного вазоспазма после перенесенного субарах-ноидального кровоизлияния [14]. В исследовании G. Ghilardi и соавт. [9] генотип СС обнаруживали у больных, прооперированных по поводу стеноза внутренней сонной артерии, в два раза чаще, чем в группе контроля (соответственно 26% и 13 %, р=0,018). Считают что носительство аллеля С в гомозиготном состоянии является независимым фактором риска развития тяжелого стеноза внутренней сонной артерии.
Ген ангиотензинконвертирующего фермента (АСЕ) в настоящее время рассматривается в качестве одного из генов-кандидатов в развитии ишемического инсульта [10], но данные о влиянии полиморфизма гена АСЕ
Таблица 1
Распределение полиморфных 4a/4b генотипов и аллелей гена eNOS III у детей с недифференцированной дисплазией соединительной ткани (нДСТ) и у здоровых детей Санкт-Петербурга
Генотипы x2 Аллели x2
4a4a 4a4b 4b4b p 4a 4b p
Мальчики с нДСТ 1 (1,6%) 12 (19,0%) 50 (79,4%) 5,12 14 (11,1%) 112 (88,9%) 4,31
Здоровые мальчики 3 (4,1%) 25 (34,3%) 45 (61,6%) 0,077 31 (21,2%) 115 (78,8%) 0,038
Девочки с нДСТ 0 (0,0%) 10 (26,3%) 28 (73,7%) 3,17 10 (13,2%) 66 (86,8%) 1,84
Здоровые девочки 5 (7,2%) 20 (29,0%) 44 (63,8%) 0,21 30 (21,7%) 108 (78,3%) 0,18
Дети с нДСТ 1 (1,0%) 22 (21,8%) 78 (77,2%) 7,36 24 (11,9%) 178 (88,1%) 6,88
Здоровые дети 8 (5,6%) 45 (31,7%) 89 (62,7%) 0,025 61 (21,5%) 223 (78,5%) 0,009
противоречивы. Ген картирован в длинном плече 17 хромосомы (17q 23). В качестве маркера полиморфизма гена АСЕ используется отсутствие или присутствие (делеция-D или инсерция-I) фрагмента, состоящего из 287 bp в 16 интроне гена. Szolnoki Z. и соавт. сообщают что аллель D усиливает вазоконстрикцию, отвечает за утолщение стенки сосудов, пролиферацию гладкомышечных клеток, что в свою очередь ведет к развитию инсульта [19]. В исследовании Ю.В. Котовской и соавт [2] показано, что аллель I и генотип II полиморфизма гена АСЕ играют защитную роль в отношении развития инсульта, тогда как другие авторы показали связь аллеля I с развитием интракраниальных аневризм [13].
А. Slowik и соавт. изучали I/D полиморфизм гена АСЕ в польской популяции и выявили, что D аллель является независимым фактором риска развития геморрагического инсульта; для ишемического инсульта таких закономерностей не выявлено [18].
Целью нашей работы явилось изучение частоты встречаемости генетических маркеров сосудистой патологии у детей с недифференцированной ДСТ, сравнение распределения полиморфных генотипов гена АСЕ и гена eNOS у пациентов с недифференцированной ДСТ и здоровыми детьми Санкт-Петербурга.
Материал и методы. Обследовано 119 человек с недифференцированной ДСТ в возрасте от 2 до 18 лет (средний возраст 12,71 ±4,88 года), из них 41 девочка (34,4%) и 78 мальчиков (65,6%). Группу контроля составили 146 практически здоровых детей Санкт-Петербурга. Критериями включения пациентов в исследование явилось наличие отягощенного семейного анамнеза, 6-8 и более клинико-инструментальных признаков недифференцированной ДСТ, биохимических маркеров резорбции и синтеза коллагена, катаболизма межклеточного вещества соединительной ткани. Степень вовлечения в патологический процесс отдельных органов и систем оценивалась в баллах, суммарная величина которых явилась основанием для определения тяжести недифференцированной ДСТ
Легкая степень тяжести выявлена у 58 (48,7%). средняя степень определена у 45 (37,8%), тяжелая степень диагностирована у 16 (13,5%) пациентов. По
характеру течения клинической картины были выделены следующие подтипы дисплазии соединительной ткани:
- больные с преимущественно фенотипическими проявлениями дисплазии соединительной ткани («фенотипическая» форма) без существенных органных изменений;
- больные с преимущественно органными изменениями при умеренных и даже незначительных фенотипических проявлениях - «висцеральная» форма;
- больные, имеющие в равной степени как фенотипические, так и органные изменения - «смешанная» форма.
Применялись генеалогический и молекулярно-генетический методы исследования. При анализе родословных детей с недифференцированной ДСТ особое внимание уделялось наличию неврологической и сосудистой патологии в семьях пробанда. Генетический риск развития сосудистой патологии оценивался на основании специальных таблиц эмпирического риска. Полученные результаты сравнивались с группой контроля, состоящей из родословных 50 здоровых пробандов сопоставимых по полу и возрасту.
Молекулярно-генетическое исследование включало: определение инсерционно-делеционного (I/D) полиморфизма гена АСЕ, определение 4a/4b, T-786C, Glu298Asp полиморфизмов гена eNOS методом полимеразной цепной реакции с последующим рестрикционным анализом.
Статистические исследования выполнены при помощи пакета программ для персонального компьютера Microsoft Excel и пакета статистических программ SPSS 14.0. Использовались методы описательной статистики, критерий Стьюдента, критерий Фишера, X2 критерий.
Результаты. При изучении родословных семей пробандов выявлена сегрегация признаков соединительнотканной дисплазии, гипертонической болезни (ГБ), инсульта, ишемической болезни сердца (ИБС), остеохондроза позвоночника, варикозного расширения вен нижних конечностей. В результате анализа родословных пациентов с недифференцированной ДСТ и
Таблица 2
Распределение ^786^ полиморфных генотипов и аллелей гена eNOS III у детей с недифференцированной дисплазией соединительной ткани и у здоровых детей Санкт-Петербурга
Генотипы X2 Аллели X2
ТТ ТС СС p Т С p
Мальчики с нДСТ 19 (30,6%) 33 (53,2%) 10 (16,2%) 0,25 71 (57,3%) 53 (42,7%) 0,001
Здоровые мальчики 24 (32,0%) 37 (49,3%) 14 (18,7%) 0,89 85 (56,7%) 65 (43,3%) 0,98
Девочки с нДСТ 6 (16,2%) 26 (70,3%) 5 (13,5%) 8,44 38 (51,4%) 36 (48,6%) 4,93
Здоровые девочки 31 (44,3%) 33 (47,1%) 6 (8,6%) 0,015 95 (67,9%) 45 (32,1%) 0,026
Дети с нДСТ 25 (25,3%) 59 (59,6%) 15 (15,1%) 4,39 109 (55,1%) 89 (44,9%) 2,12
Здоровые дети 55 (37,9%) 70 (48,3%) 20 (13,8%) 0,11 180 (62,1%) 110 (37,9%) 0,15
Таблица 3
Распределение Glu298Asp полиморфных генотипов и аллелей гена eNOS III у детей с недифференцированной дисплазией соединительной ткани и у здоровых детей Санкт-Петербурга
Генотипы X2 Аллели X2
GG TG TT Р G T Р
Мальчики с нДСТ Здоровые мальчики 15 (23,8%) 39 (51,3%) 31 (49,2%) 31 (40,8%) 17 (27,0%) 6 (7,9%) 14,84 0,000 61 (48,4%) 109 (71,7%) 65 (51,6%) 43 (28,3%) 14,78 0,000
Девочки с нДСТ Здоровые девочки 11 (29,0%) 38 (54,3%) 14 (36,8%) 26 (37,1%) 13 (34,2%) 6 (8,6%) 12,69 0,002 36 (47,4%) 102 (72,9%) 40 (52,6%) 38 (27,1%) 12,79 0,000
Дети с нДСТ Здоровые дети 26 (25,7%) 77 (52,7%) 45 (44,6%) 57 (39,1%) 30 (29,7%) 12 (8,2%) 27,01 0,000 97 (48,0%) 211 (72,3%) 105 (52,0%) 81 (27,7%) 28,86 0,000
контрольной группы выявлено, что пациенты с недифференцированной ДСТ имеют достоверно (р<0,05) более высокий обобщенный генетический риск развития таких заболеваний, как ГБ (в 2,1 раза), ИБС (в 6,4 раза), нарушения мозгового кровообращения (в 3,3 раза), сахарного диабета (в 6,4 раза и выше).
Проведен сравнительный анализ частоты встречаемости полиморфных вариантов гена АСЕ среди пациентов с недифференцированной ДСТ и здоровых детей Санкт-Петербурга, а также сравнение с европейской популяцией. Не получено достоверных различий в частотном распределении между вышеописанными группами. При сравнении частоты встречаемости полиморфных генотипов и аллелей гена АСЕ не получено половых различий как среди здоровых детей Санкт-Петербурга, так и среди пациентов с дисплазией соединительной ткани. При анализе связи I/D полиморфизма гена АСЕ и степени тяжести недифференцированной ДСТ не получено достоверных различий ни в группе девочек, ни среди мальчиков, а также в общей группе. Также не удалось выявить ассоциации между полиморфными аСе генотипами и аллелями и разными типами недифференцированной ДСТ
При сравнении частоты встречаемости 4a/4b полиморфных генотипов гена eNOS между здоровыми детьми Санкт-Петербурга и пациентами с недифференцированной ДСТ получены достоверные различия (р=0,025). При сравнении частоты распределения полиморфных а и b аллелей гена eNOS получены достоверные различия: так у мальчиков с недифференцированной ДСТ чаще встречался аллель b по сравнению со здоровыми мальчиками (88,9% и 78,8% соответственно, р=0,038). Аллель b достоверно чаще встречался в общей группе пациентов с недифференцированной ДСТ (мальчики и девочки) по сравнению со здоровыми детьми Санкт-Петербурга (88,1% и 78,5% соответственно, р=0,009, табл. 1).
Не выявлено ассоциации между 4а/4Ь полиморфными генотипами eNOS и степенью тяжести недифференцированной ДСТ как среди мальчиков, так и среди девочек, а также в общей группе. При сравнении частот распределения 4a/4b полиморфных вариантов eNOS среди разных типов недифференцированной ДСТ достоверных различий не получено.
При изучении распределения Т-786С полиморфных генотипов и аллелей гена eNOS получены достоверные различия: у девочек с недифференцированной ДСТ достоверно чаще встречались генотипы, содержащие мутантный аллель С, по сравнению со здоровыми девочками Санкт-Петербурга (генотипы ТТ - 1б,2% и 44,3, ТС - 70,3% и 47,1%, СС - 13,5% и 8,6%, р=0,015 и аллель С - 48,6% и 32,1% соответственно, р=0,025) (табл. 2). При проведении сравнительного анализа не выявлено ассоциации между степенями тяжести недифференцированной ДСТ и Т-786С полиморфными
генотипами и аллелями гена eNOS в группах мальчиков и девочек, а также в общей группе (р>0,05). При сравнении частоты встречаемости Т-786С полиморфных генотипов и аллелей гена eNOS получены достоверные различия между пациентами «висцеральной» группы недифференцированной ДСТ и пациентами «смешанной» группы. Отмечается достоверное увеличение частоты генотипов, содержащих патологический аллель С (ТС, СС), в смешанной группе (мальчики р=0,027; девочки р=0,018) по сравнению с «висцеральной» группой.
При исследовании распределения Glu298Asp полиморфных генотипов и аллелей гена eNOS получены достоверные различия среди мальчиков, девочек и общей группы детей с недифференцированной ДСТ и здоровыми детьми Санкт-Петербурга. Так, во всех группах детей с недифференцированной ДСТ достоверно чаще встречался мутантный генотип ТТ и аллель Т (табл. 3).
Обсуждение. Распространенность частот полиморфных вариантов гена аСе у пациентов с недифференцированной ДСТ практически не отличается от здоровых детей Санкт-Петербурга и Европейской популяции. Данные о взаимосвязи полиморфизма гена АСЕ противоречивы: в исследовании Z. Szolnoki и соавт. [19] выявлена связь аллеля D с последующим развитием инсульта, J.P Casas и соавт. [8] также показали связь DD генотипа с развитием ишемического инсульта, M. Keramatipour и соавт. [13], напротив, показали связь аллеля I с развитием интракраниальных аневризм.
В нашей работе получены достоверные отличия по частотам встречаемости 4a/4b генотипов у пациентов с недифференцированной ДСТ (aa-0,01; ab-0,22; bb-0,77) и здоровой популяции Санкт-Петербурга (aa-0,05; ab-0,32; bb-0,63), наши данные также отличаются от Европейской популяции (aa-0,13; ab-0,46; bb-0,41). Следует заметить, что распространенность генотипов здоровых детей Санкт-Петербурга и Европейской популяции также различается. У пациентов с недифференцированной ДСТ наблюдается меньшая частота встречаемости генотипа аа по сравнению со здоровыми детьми Санкт-Петербурга и московской популяции (аа-0,02; ab-0,34; bb-0,64). В исследовании К.Т. Мое получена достоверная ассоциация генотипа bb гена eNOS с развитием первичной гипертензии в сингапурской популяции [16].
При изучении распределения Glu298Asp полиморфных генотипов и аллелей гена eNOS получены достоверные различия в частоте генотипов среди мальчиков, девочек и общей группы детей с недифференцированной ДСТ и здоровыми детьми Санкт-Петербурга. Так, во всех группах детей с недифференцированной ДСТ достоверно чаще встречался мутантный генотип ТТ (мальчики: 0,27 vs 0,08, девоч-
ки: 0,34 vs 0,09) и аллель Т. Наши данные отличаются от данных других исследователей: в австралийской здоровой популяции мутантный генотип встречался с частотой 0,16 у мужчин и 0,12 у женщин, а у пациентов, страдающих ИБС, 0,11 и 0,14 соответственно [6].
По литературным данным распределение Т-786С полиморфных генотипов и аллелей гена eNOS в отдельных популяциях различается. Так, у азиатского населения генотип сС встречается с частотой 0,01, у неазиатского населения - 0,15 [6]. Наше исследование показало такую же частоту встречаемости мутантного генотипа (0,15), при этом получены достоверные различия: среди девочек с недифференцированной ДСТ достоверно чаще, по сравнению со здоровыми девочками Санкт-Петербурга, встречались генотипы, содержащие мутантный аллель С (р=0,025).
Заключение. Результаты генеалогического и молекулярно-генетического исследования выявили повышенный риск сосудистой патологии у пациентов с недифференцированной ДСТ, что необходимо учитывать в практической деятельности для проведения ранней целенаправленной диагностики, профилактики и терапии патологии сосудистой системы, что могло бы повлиять на качество, продолжительность жизни пациентов с недифференцированной ДСТ и снижение риска их инвалидизации.
литература
1. Кадурина, ТИ. Наследственные коллагенопатии (клиника, диагностика, лечение и диспансеризация) / Т.И. Кадурина. - СПб.: “Невский диалект”, - 2000. - 271 с.
2. Котовская, Ю.В. Полиморфизм генов ренин-ангиотен-зиновой системы и гена эндотелиальной NO-синтазы и макрососудистые осложнения при сахарном диабете типа 2 / Ю.В. Котовская, Ж.Д. Кобалава, ТВ. Сергеева, В.В. Носиков, В.С. Моисеев // Артериальная гипертензия. - 2002. - Т. 8, №3. - С.11-14.
3. Минушкина, Л.О. Генетические аспекты регуляции эндотелиальной функции при артериальной гипертонии / Л.О. Минушкина, Д.А. Затейщиков, Б.А. Сидоренко // Кардиология. - 2000. - Т. 40, №3. - С. 68-76.
4. Ягода, А.В. Малые аномалии сердца / А.В. Ягода, Н.Н. Гладких. -Ставрополь, - 2005. - 248 с.
5. Яковлева, О.И. Полиморфизм гена эндотелиальной NO-синтазы и структурно-функциональное состояние крупных сосудов у больных гипертонической болезнью с гипертрофией левого желудочка / О.И. Яковлева, Н.В. Вахрамеева, В.И. Ларионова, М.А. Богданова, А.О. Кон-ради // Артериальная гипертензия. - 2005. -Т. 11, №3.
- С. 195-200.
6. Berger, K. The glu298asp polymorphism in the nitric oxide synthase 3 gene is associated with the risk of ischemic stroke in two large independent case-control studies/ K. Berger, F. Stogbauer, M. Stoll [et al.] // Нит Genet. - 2007.
- Vol. 121, №2. - P. 169-178.
7. Cai, H. The Glu-298-->Asp (894G-->T) mutation at exon 7 of the endothelial nitric oxide synthase gene and coronary artery disease / H. Cai, D.E. Wilcken , X.L. Wang // J. Mol. Med. - 1999. -Vol. 77, №6. - P. 511-514.
8. Casas, J.P Meta-analysis of genetic studies in ischemic stroke: thirty-two genes involving approximately 18000 cases and 58000 controls / J.P. Casas, A.D. Hingorani, L.E. Bautista, P Sharma // Arch. Neurol. - 2004. -Vol. 61. - P 1652-1662.
9. Ghilardi, G. Independent risk factor for moderate to severe internal carotid artery stenosis: T786C mutation of endothelial nitric oxide synthase gene / G. Ghilardi, M.L. Biondi, M. DeMonti [et al.] // Clin. Chem. - 2002. - Vol. 48, №7. - P. 989-993.
10. Hassan, A. Genetics and ischaemic stroke / A. Hassan, H.S. Markus // Brain. - 2000. - Vol. 123, №9. - P. 1784-1812.
11. Hingorani, A.D. A common variant of the endothelial nitric oxide synthase (Glu298-Asp) is a major risk factor for coronary artery disease in the UK / A.D. Hingorani, C.F. Liang, J. Fatibene [et al.] // Circulation. - 1999. - Vol. 100. - P 15151520.
12. Jachymova, M. Association of the glu298-to-asp polymorphism in the endothelial nitric oxide synthase gene with essential hypertension resistant to conventional therapy / M. Jachymova, K. Horky, J. Bultas [et al.] // Biochem. Biophys. Res. Commun. - 2001. - Vol. 284. - P. 426-430.
13. Keramatipour, M. The ACE I allele is associated with increased risk for ruptured intracranial aneurysms / M. Ker-amatipour, R.S. McConnell, P. Kirkpatrick [et al.] // J. Med. Genet. - 2000. - Vol. 37. - P. 498-500.
14. Khurana, V.G. Update on evidence for a genetic predisposition to cerebral vasospasm/ V.G. Khurana, D.J. Fox, I. Meiss-ner [et al.] // Neurosurg Focus. - 2006. - Vol. 21, №3.- E 3.
15. Leeson, C.P Glu298Asp endothelial nitric oxide synthase gene polymorphism interacts with environmental and dietary factors to influence endothelial function / C.P. Leeson, A.D. Hingorani, M.J. Mullen [et al.] // Circ Res. - 2002.- Vol. 90.
- P 1153-1158.
16. Moe, K.T. Association analysis of endothelial nitric oxide synthase gene polymorphism with primary hypertension in a Singapore population / K.T Moe, S.T. Lim, P. Wong [et al.] // J. Hum. Hypertens. - 2006. - Epub.
17. Nakayama, T. Association analysis of CA repeat polymorphism of Endothelial Nitric Oxide Synthase Gene with Essential Hypertension / T. Nakayama, M. Soma, Y. Takahashi [et al.] // Clin. Genet. - 1997. - Vol. 51. - P. 26-30.
18. Slowik, A. DD genotype of ACE gene is a risk factor for intracerebral hemorrhage / A. Slowik, W. Turaj, T Dziedzic [et al.] // Neurology. - 2004. - Vol. 63, №2. - P 359-361.
19. Szolnoki, Z. Evaluation of the roles of the Leiden V mutation and ACE I/D polymorphism in subtypes of ischaemic stroke / Z. Szolnoki, F. Somogyvri, A. Kondacs, M. Szaby, F. Lajos // J. Neurol. - 2001. - Vol. 248. - P. 756-761.
20. Wang, X.L. A smoking-dependent risk of coronary artery disease associated with a polymorphism of the endothelial nitric oxide synthase gene / X.L. Wang, A.S. Sim, R.F. Badenhop, R.M. McCredie, D.E.L. Wilcken // Nature Med.
- 1996. - Vol. 2. - P. 41-45.
ГЕНЕТИЧЕСКИЕ МАРКЕРЫ СОСУДИСТОЙ патологии У ДЕТЕЙ
С НЕДИФФЕРЕНЦИРОВАННОЙ ДИСПлАЗИЕЙ
соединительной ткани
И.А. КОСТИК, М.л. чухловина,
В.И. лАРИОНОВА, Т.И. КАДУРИНА
Цель: изучение частоты встречаемости генетических маркеров сосудистой патологии у детей с недифференцированной ДСТ
Обследовано 119 детей с недифференцированной ДСТ и 146 практически здоровых детей Санкт-Петербурга. Применяли генеалогический и молекулярно-генетический методы исследования. Определяли инсерционно-делеционный (1/Р) полиморфизм гена АСЕ, 4а/4Ь, Т-786С, 01и298Авр полиморфизмы гена eNOS методом полимеразной цепной реакции.
Пациенты с недифференцированной ДСТ имеют достоверно более высокий по сравнению с контрольной группой обобщенный генетический риск развития таких заболеваний, как гипертоническая болезнь (в 2,1 раза), ишемическая болезнь сердца (в 6,4 раза), нарушения мозгового кровообращения (в 3,3 раза), сахарного диабета (в 6,4 раза и выше).
Не выявлено достоверных различий в распределении полиморфных вариантов гена АСЕ между детьми с недифференцированной ДСТ и здоровыми. В общей группе детей с недифференцированной ДСТ достоверно чаще встречаются следующие генотипы: ЬЬ генотип 4а/4Ь, ТТ генотип 01и298Авр, а также генотипы, содержащие аллель С, Т-786С полиморфных маркеров гена eN0S среди девочек с недифференцированной ДСТ.
Таким образом, у детей с недифференцированной ДСТ выявлена более высокая частота генетических маркеров сосудистой патологии по сравнению со здоровыми детьми.
Ключевые слова: недифференцированная диспла-
зия соединительной ткани, дети, полиморфизм генов АСЕ и eNOS
GENETIC MARKERS OF THE VASCULAR PATHOLOGY IN CHILDREN WITH NONDIFFERENTIATED CONNECTIVE TISSUE DYSPLASIA
KOSTIK I.A., CHUKHLOVINA M.L.,
LARIONOVA V.I., KADURINA T.I.
The purpose: studying of frequency of occurrence of vascular pathology genetic markers in children with nondifferentiated connective tissue dysplasia (NCTD).
119 children with NCTD and 146 practically healthy children of Saint Petersburg are surveyed. Genealogic and molecular-genetic research methods are applied. Insertionic-deletionic (I/ D) polymorphism of the ACE-gene, 4a/4b, T-786C, Glu298Asp polymorphisms of the eNOS-gene by polymerase chain reaction method are determined.
Patients with NCTD have authentically higher generalized genetic risk of development of such diseases, as hypertonic diseases (in 2,1 times), heart ischemic diseases (in 6,4 times), infringements of brain blood circulation (in 3,3 times), diabetes (in 6,4 times and more) in comparison with control group.
Authentic distinctions in distribution of polymorphic variants of the ACE-gene between children with NCTD and healthy children are not revealed. In the general group of children with NCTD, the following genotypes are authentically more often: bb-genotype 4a/4b, TT-genotype Glu298Asp, and also the genotypes containing allele C, T-786C of polymorphic markers of eNOS-gene among girls with NCTD.
Thus, higher frequency of genetic markers of a vascular pathology is revealed in children with NCTD in comparison with healthy children.
Key words: nondifferentiated connective tissue dysplasia (NCTD), children, polymorphism of ACE and eNOS-genes
