CC BY
86
Оригинальные исследования
Original Researches
МЕДИЦИНА
НЕОТЛОЖНЫХ состояний
®
УДК 616.132.2-008.64-036.11-037-07
ПАРХОМЕНКО А.Н.1, ЛУТАЙ Я.М.1, ИРКИН О.И.1, КОЖУХОВ С.Н.1, СКАРЖЕВСКИЙ A.A.1, ДОСЕНКО В.Е.2, МОЙБЕНКО A.A.2
1ННЦ «Институт кардиологии имени академика Н.Д. Стражеско» НАМН Украины, г. Киев 2Институт физиологии им. А.А. Богомольца НАН Украины, г. Киев
КЛИНИКО-ПРОГНОСТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ ПОЛИМОРФИЗМА ГЕНА ЭНДОТЕЛИАЛЬНОЙ NO-СИНТЕТАЗЫ У БОЛЬНЫХ С ОСТРЫМИ КОРОНАРНЫМИ СИНДРОМАМИ
Резюме. Оксид азота (NO) производится эндотелиальной синтетазой оксида азота (eNOS) и играет важную роль в поддержании сосудистого гомеостаза. Были определены различные полиморфизмы гена eNOS. - 786С полиморфизм промотора гена модулирует экспрессию гена eNOS, а значит, синтез NO. Обследованы 325 больных с острым коронарным синдромом (ОКС) и 83 здоровых пациента (контрольная группа). Полиморфизм eNOS был проанализирован с помощью методов полимеразной цепной реакции и полиморфизма длинрестрикционных фрагментов. У украинцев генотип C/C промотора гена eNOS встречается чаще, чем у японцев, и реже, чем у жителей Западной Европы, Северной Америки и Австралии. Значительная разница в распределении генотипа наблюдалась между исследуемыми пациентами и группой контроля. Патологический C/C генотип значительно чаще определяется у больных с ОКС, особенно у мужчин моложе 55 лет.
Наличие -786CC генотипа было связано с увеличением артериальной жесткости и снижением поток-опосредованного расширения плечевой артерии. Реперфузионная терапия была эффективнее у пациентов с -786^ вариантом промотора гена eNOS. Наличие -786^ генотипа обусловливало меньшее количество осложнений в период госпитализации.
Ключевые слова: полиморфизм гена, эндотелиальная NO-синтетаза, эндотелиальная дисфункция, скорость распространения пульсовой волны, острый коронарный синдром, тромболитическая терапия.
Эндотелий сосудистой стенки играет важную роль в поддержании сосудистого гомеостаза. Посредством синтеза эндотелийзависимых факторов релаксации и констрикции происходит контроль тонуса сосудистой стенки, тромбообразования, клеточной пролиферации и атерогенеза [3, 4, 25]. Ключевое значение в реализации защитных функций эндотелия имеет оксид азота (N0), который синтезируется эндотелиальной N0-синтетазой [2, 17, 32]. N0-синтетаза принадлежит к семейству оксидо-редуктаз. В настоящее время описаны три изофор-мы N0-синтетаз: нейрональная изоформа ^N08, N081), макрофагальная, или индуцибельная, изоформа ^N08, N082) и эндотелиальная изоформа ^N08, N083) [9, 28, 30, 31]. Эти ферменты только на 50—60 % гомологичны по своему аминокислотному составу и кодируются разными генами, находящимися в разных хромосомах [29, 30, 41]. Эн-дотелиальная и нейрональная изоформы являются конституциональными разновидностями фермента, а индуцибельная N0-синтетаза экспрессирует-ся в основном при воспалении или инфекционном процессе [28].
Ген, кодирующий eN0S, находится в хромосоме 7 ^35-36) и состоит из 26 экзонов [23, 30]. Промотор
гена eN0S содержит несколько доменов, то есть может регулироваться рядом факторов транскрипции [27, 30, 31, 49]. В 1995 году Нт§огаш е1 а1. было высказано предположение о наличии полиморфизма гена, кодирующего эндотелиальную N0-синтетазу [18, 19]. Наиболее изученными являются 4а/Ь полиморфизм четвертого интрона, 0894Т (01и298А?р) полиморфизм седьмого экзона и Т-786С полиморфизм промотора гена эндотелиальной N0-синтетазы [10, 19, 35].
Наша работа посвящена изучению распространенности полиморфизма промотора Т-786С гена eN0S и его патогенетического значения у больных с острым коронарным синдромом (ОКС).
Материалы и методы
В исследование включались пациенты, поступившие в отделение реанимации и интенсивной терапии ННЦ «Институт кардиологии
© Пархоменко А.Н., Лутай Я.М., Иркин О.И., Кожухов С.Н., Скаржевский А.А., Досенко В.Е., Мойбенко А.А., 2014 © «Медицина неотложных состояний», 2014 © Заславский А.Ю., 2014
им. Н.Д. Стражеско» с диагнозом НС или ОИМ. Обследовано 325 пациентов с острыми коронарными синдромами (113 пациентов без элевации сегмента ST на ЭКГ и 212 пациентов с элевацией ST). Диагнозы острого ИМ и НС устанавливали на основании данных клинических, электрокардиографических и биохимических обследований согласно существующим рекомендациям [7, 8]. В исследование не включались больные с хронической сердечной недостаточностью 11Б — III ст., истинным кардиогенным шоком, тяжелой формой сахарного диабета, выраженной почечной и печеночной недостаточностью, бронхиальной астмой, нарушениями в системе гемостаза, острым нарушением мозгового кровообращения, травмой или большим хирургическим вмешательством, острыми воспалительными процессами или обострением хронических, онкологическими и системными заболеваниями. Контрольную группу составили 83 практически здоровых донора, у которых отсутствие сердечно-сосудистой патологии подтверждали путем сбора анамнестических данных, снятия электрокардиограммы и измерения артериального давления. Контрольная группа и группа больных не отличались по возрасту и соотношению полов, P > 0,05 по %2-критерию.
Для генотипирования венозную кровь набирали в стерильных условиях в моноветы объемом 2,7 мл с калиевой солью этилендиаминте-трауксусной кислоты в качестве антикоагулянта (Sarstedt, Германия), замораживали и сохраняли при температуре —20 °С. ДНК выделяли из цельной крови с использованием наборов изо-ген (Россия). Методом полимеразной цепной реакции с последующим анализом длины ре-стрикционных фрагментов определяли Т-786С полиморфизм промотора по G. Ghilardi et al. с модификациями [13]. Для этого амплифициро-вали участок промотора указанного гена с помощью пары специфических праймеров: прямой (sense) — 5-CAC CTG CAT TCT GGG AAC TGTA-3' и обратный (antisense) — 5-GCC GCA GTA GCA GAG AGAC-3\ Праймеры были синтезированы фирмой «Синтол» (Россия). Для амплификации брали 1 мкл ДНК (концентрация от 3 до 4 нг/мкл) и добавляли к смеси, содержащей 5 мкл пятикратного РСЯ-буфера, 1,5 мМ сульфата магния, 200 мкМ смеси четырех нуклеотид-трифосфатов, по 20 рМ каждого из праймеров и 0,5 ЕД Taq-полимеразы (амплисенс, Россия), объем доводили до 25 мкл деионизированной водой. PCR проводили в термоциклере Applied Biosystems 2700 (PerkinElmer, США). Амплификация фрагмента промотора состояла из 35 циклов: денатурация — 94 °С (1 мин), отжиг праймеров — 63 °С (50 с) и элонгация — 74 °С (1 мин). В дальнейшем 6 мкл продукта амплификации фрагмента промотора инкубировали при 37 °С в течение 18 часов с 5 ЕД рестриктазы PdiI («Фер-ментас», Латвия) в буфере /// Y+/Tango следующего состава: 33 мМ трисацетата (рН 7,9), 10 мМ
ацетата магния, 66 мМ ацетата калия, 0,1 мг/мл альбумина. Наличие в -786 положении промотора тимидина препятствует рестрикции, а при замене на цитозин PdiI расщепляет амплифи-цированный участок промотора (размер 125 пар оснований) на два фрагмента — 95 и 30 пар оснований. Амплификаты фрагмента промотора после рестрикции разделяли в 2,5% агарозном геле, содержащем бромистый этидий. Визуализация ДНК после горизонтального электрофореза (160 V на протяжении 40 мин) проводилась с помощью трансиллюминатора («Биоком», Россия).
Тест с реактивной гиперемией проводился на аппарате для ультразвуковой диагностики Sono-Ace PICO (компания Medison) при помощи сосудистого датчика HL5-9ED (7,5 МГц/40 мм). Пациенту за сутки до проведения пробы отменялись нитропрепараты (исключая короткодействующие нитраты для купирования приступов стенокардии). Проба проводилась утром натощак, после 10-минутного отдыха в положении лежа. После измерения исходного диаметра плечевой артерии (среднее значение 4 измерений с расстоянием 1 см между точками) пациенту на плечо выше участка измерения накладывалась манжета от манометра и создавалось давление в 200 мм рт.ст., которое удерживалось в течение 5 минут. Через 80 секунд после декомпрессии проводилось повторное измерение диаметра артерии и рассчитывался показатель эндотелийзависимой вазодилатации как процент прироста диаметра артерии от исходного размера [12]. Проба с реактивной гиперемией проведена у 63 больных.
Жесткость сосудистой стенки оценивалась путем измерения скорости распространения пульсовой волны (СРПВ) на аппарате Complior® SP (ARTECH médical, Франция) [6].
Клиническое течение ОИМ оценивали по числу осложнений госпитального периода заболевания. ОЛЖН регистрировали согласно классификации T. Killip. Нарушения сердечного ритма регистрировали путем суточного мониторирова-ния ЭКГ по методу Холтера с использованием кар-диорегистратора «Ритм» (НТО «Бета», Украина) и прикроватных кардиомониторов Sirecust 342R фирмы Siemens, Германия. Пациентам проводилось серийное определение активности сывороточной КФК и МВ-КФК в периферической венозной крови в первые трое суток заболевания. При развитии рецидива или затяжном течении ОИМ длительность исследования КФК и ее МВ-фракции увеличивалась. О наступлении реканали-зации ИОКА свидетельствовало достижение пика активности МВ-КФК в первые 12 часов от начала заболевания [20].
Статистический анализ результатов проводили с использованием электронных таблиц Microsoft® Excel 2000 и статистических программ SPSS (версия 12, США). При этом достоверность отличий определяли по %2-критерию. Значение p < 0,05 считали достоверным.
Результаты
Проведенное генотипирование Т-786С промотора гена эндотелиальной МО-синтетазы выявило распределение генотипов -786ТТ, -786ТС и -786СС как 42,5; 41,2 и 16,3 % у больных с ОКС и как 48,2; 45,8 и 6,0 % в группе контроля (табл. 1). Наблюдаемое распределение частот различных генотипов в группе обследованных больных и группе контроля соответствовало равновесию Харди — Вейнберга.
Таким образом, полиморфизм промотора гена эндотелиальной МО-синтетазы в позиции 786 определялся у 57,5 % пациентов с ОКС, а 16,3 % больных были гомозиготами с наличием патологического -786СС генотипа. При отсутствии отличий между группами по частоте встречаемости генотипов ТТ и ТС вероятность определения СС генотипа промотора была достоверно выше у больных с ОКС, чем в группе контроля (16,3 % у больных с ОКС против 6,0 % в группе контроля, р < 0,01). Среди больных с ОКС без элевации сегмента БТ примерно в 4 раза чаще, чем в группе контроля (22,2 % против 6,0 %, р < 0,01), и в 2 раза чаще, чем среди больных с элевацией сегмента БТ (22,2 % против 13,2 %, р < 0,05), выявляли гомозигот с патологическим СС генотипом промотора гена еМОБ. Полученные данные позволяют предположить патогенетическое значение данного полиморфизма в развитии острых форм ишемической болезни сердца, особенно у больных без стойкой элевации сегмента БТ на электрокардиограмме.
Дальнейший анализ этой категории больных выявил тенденцию к увеличению частоты выявления носителей аллели С в младших возрастных группах (рис. 1).
Эта зависимость была более характерна для мужчин (табл. 2).
Так, у мужчин с ОКС без элевации БТ в возрасте до 55 лет (с преждевременным развитием ИБС) достоверно чаще выявляли патологическую аллель С (генотипы СС + ТС), чем у больных более пожилого возраста (77,8 и 51,9 % соответственно, Р < 0,01). Именно для этой категории больных характерно участие вазоспастических реакций в патогенезе острых форм ИБС, развитие которых, по данным литературы, отмечалось при мутации промотора гена еМОБ [7, 8, 37].
Различий в частоте выявления полиморфизма промотора гена еМОБ в других клинико-анамнести-ческих подгруппах пациентов с ОКС не отмечено (Р > 0,05).
Согласно данным метаанализа, основанного на результатах 7 исследований, были отмечены достоверные отличия по частоте встречаемости гомозигот СС промотора гена еМОБ среди здорового населения в различных этнических группах (1,1 % — для азиатского, 15,36 % — для неазиатского населения, Р < 0,0001) [10]. Данные литературы относительно роли этого полиморфизма в развитии ИБС и ее острых проявлений противоречивы [5, 10, 11, 14, 36-38, 43, 48].
Популяционное исследование, проведенное в 9 различных регионах Великобритании, показало, что соотношение нормальных гомозигот, гетерози-гот и патологических гомозигот при анализе полиморфизма Т-786С промотора гена еМОБ составило соответственно 37,7; 47,8 и 14,5 %. Не было отмечено влияния данного полиморфизма на развитие ИБС [24]. Распространенность различных вариан-
Таблица 1. Распределение генотипов Т-786Спромотора гена эндотелиальной NO-синтетазы
у больных с ОКС и здоровых доноров
Генотип Контроль(n = 83) ОКС (n = 325) ОКС без элевации ST (n = 113) ОКС с элевацией ST (n = 212)
ТТ 48,2 42,5 42,5 42,5
ТС 45,8 41,2 35,4 44,3
СС 6,0 16,3** 22 1** 13,2*
Примечания: * — р < 0,05 по сравнению с группой контроля; ** — р < 0,01 по сравнению с группой контроля.
50 40 30 20 10 0
Частота аллели С, %
80
60
40
20
—I---1---1—
< 50 51-60 61-70 > 70 Лет
Носители аллели С (СС + СТ), %
1 Р < 0,1
<50 51-60 61-70
> 70 Лет
А
Б
0
Рисунок 1. Полиморфизм промотора гена еNOS у больных с ОКС без элевации ST разных возрастных групп. А. Частота выявления аллели С. Б. Распространенность аллели С
тов этого полиморфизма у итальянцев соответствует таковому в Великобритании [11, 14]. При этом риск развития ИБС был достоверно выше у пациентов с -786СС, чем с -786ТТ генотипом (0Я = 2,5 (1,3—4,8), Р < 0,01). Генотип СС был также независимым фактором риска развития коронарного атеросклероза [11]. Сам факт наличия патологической аллели С являлся фактором риска ИБС (0Я = 1,7 (1,1—2,8), Р = 0,02 при сравнении с генотипом ТТ), а среди больных с ИБС носители этой аллели имели более выраженное поражение венечных артерий по данным коронароангиографии [11]. В исследовании О. ОЫ1аг& и соавторов у больных, прооперированных по поводу стеноза внутренней сонной артерии, генотип СС обнаруживали в два раза чаще, чем в группе контроля (26 и 13 % соответственно, Р = 0,018), а у больных со стенозом сонной артерии генотип СС был более распространен в группе с изъязвленной атеросклеротической бляшкой (44 и 17 % соответственно, Р = 0,003) [14]. Встречаемость патологических гомозигот СС у испанцев моложе 60 лет составляет 14,3 %, в то же время среди курящих мужчин моложе 50 лет с ИБС этот генотип обнаруживали в 21,8 % случаев (Р = 0,039) [5]. Это послужило основанием предположить, что генотип СС промотора гена еN0S определяет повышенный риск преждевременного развития атеросклероза в условиях воздействия неблагоприятных факторов внешней среды (курение). Соотношение различных вариантов генотипа (ТТ, ТС и СС) промотора гена eN0S у канадцев среднего возраста без ИБС в анамнезе было близким к таковому у европейцев и распределялось как 38,9; 46,1 и 15,0 % [21]. У лиц с генотипом СС отмечали достоверно более высокие уровни систолического артериального давления, а также чаще диагностировали артериальную гипер-тензию. В японской популяции встречаемость аллели С, по данным исследования 8иИа, достаточно низкая (20,2 % населения), а встречаемость патологических гомозигот (СС) составляет около 1 % всего населения [22]. У больных с ИМ распространен -ность различных вариантов промотора не отличалась от таковой в общей популяции, что позволило сделать вывод об отсутствии роли этого полиморфизма в патогенезе острого ИМ у японцев [43]. Однако в исследованиях М. №кауаша и соавторов
мутация Т-786С ассоциировалась с коронарным спазмом и чаще выявлялась у больных с ИМ, особенно без органического стеноза венечных артерий по данным ангиографии [36, 37].
Таким образом, патологический генотип СС промотора гена еN0S встречается у 6,0 % здоровых доноров в Украине, что достоверно больше, чем в японской популяции, и меньше, чем у западных европейцев (итальянцев, англичан, испанцев, французов), белых североамериканцев и австралийцев (табл. 3).
Для уточнения механизмов реализации мутант-ного генотипа в патогенезе ИБС, и ОКС в частности, мы изучили степень жесткости артериальной сосудистой стенки и выраженность эндотелиальной дисфункции у части обследованных больных.
Степень эндотелиальной дисфункции у обследованных больных с ОКС оценивалась по результатам манжеточной пробы с реактивной гиперемией. Обследованы 63 больных. Распределение -786ТТ, -786ТС и -786СС генотипов промотора гена eN0S соответствовало 46,0; 36,5 и 17,5 %. По основным вариантам генотипа и анамнестическим данным данная выборка больных не отличалась от общей группы.
Выявлена достоверно более высокая степень прироста диаметра плечевой артерии у больных с -786ТТ генотипом (8,03 ± 0,71 % у больных с генотипом ТТ по сравнению с 5,55 ± 0,92 % у больных с генотипом ТС (р < 0,05) и 5,30 ± 1,21 % у больных с генотипом СС (р < 0,05)). Таким образом, полиморфизм гена эндотелиальной N0-синтетазы ассоциируется со снижением эндотелийзависимой вазодилатации после манжеточной пробы, что может свидетельствовать о более выраженной эндо-телиальной дисфункции у этой категории больных (рис. 2).
Жесткость сосудистой стенки оценивалась путем измерения скорости распространения пульсовой волны на участках сонной — бедренной и сонной — лучевой артерий неинвазивным методом (аппарат СошрИог®). СРПВ на участке сонной — лучевой артерий в большей степени отражает изменения жесткости в артериях мышечного типа, а на участке сонной — бедренной артерий — в артериях эластического типа. Обследовано 73 больных с ОКС. По
Таблица 2. Распределение генотипов промотора гена eNOS у больных с ОКС без элевации ST
в зависимости от возраста и пола
Мужчины < 55 лет (n = 27) > 55 лет (n = 52)
Возраст 50,1 ± 0,8 65,1 ± 0,9*
Носители Т-аллели 20 (74,1 %) 43 (82,7 %)
Носители С-аллели 21 (77,8 %) 27 (51,9 %)*
Женщины < 65 лет (n = 19) > 65 лет (n = 15)
Возраст 58,6 ± 1,5 69,6 ± 1,1**
Носители Т-аллели 14 (73,7 %) 11 (73,3 %)
Носители С-аллели 9 (47,4 %) 8 (53,4 %)
Примечание: различия показателей достоверны по сравнению с таковыми: * — у мужчин в возрасте до 55 лет; ** — у женщин в возрасте до 65 лет (P < 0,01).
основным клинико-анамнестическим характеристикам, а также частоте распределения различных вариантов генотипа промотора гена еМОБ данная выборка больных соответствовала общей совокупности обследованных пациентов. Распределение -786ТТ, -786ТС и -786СС генотипов соответствовало 41,1; 46,6 и 12,3 %.
Пациенты с генотипом СС промотора гена еМОБ характеризовались достоверно более высокой СРПВ на участке как сонной — лучевой, так и сонной — бедренной артерий по сравнению с таковой у больных с генотипом ТТ. СРПВ у больных с нормальным (-786ТТ) генотипом и гетерозигот (-786ТС) по данному генотипу не отличались, однако суммарно носители измененной С-аллели (-786ТС и -786СС) характеризовались более высокой СРПВ на участке сонной — лучевой артерий (табл. 4).
10
Р < 0,05
ТТ
ТС
СС
ТТ + ТС
Рисунок 2. Результаты пробы с реактивной гиперемией у больных с ОКС и различными генотипами
Оксид азота (N0) не только активно участвует в регуляции тонуса сосудистой стенки, ее проницаемости для липидов и клеток крови, интенсивности клеточной пролиферации, но и контролирует активность внутрисосудистого тромбообразования и фибринолиза [4, 17, 32]. Нами проведена оценка влияния полиморфизма промотора гена еМОБ на эффективность тромболитической терапии у больных с острым ИМ.
Отобрано 97 пациентов с ОКС со стойкой эле-вацией сегмента БТ на ЭКГ, которым проводилась системная фибринолитическая терапия путем внутривенной инфузии стрептокиназы в дозе 1,5 млн МЕ в течение 30—45 минут. Среднее время от начала болевого синдрома до госпитализации в стационар составило 3,0 ± 0,1 часа, а время до начала проведения тромболитической терапии — 3,5 ± 0,1 часа. В данной выборке больных частота регистрации различных вариантов генотипа промотора гена еМОБ соответствовала таковой в общей группе больных ОКС с элевацией сегмента БТ (-786ТТ/-786ТС/ -786СС как 44,3/44,3/11,4 %).
Исходная характеристика обследованных больных представлена в табл. 5.
Больные с различным генотипом промотора гена еМОБ не отличались по основным клинико-анам-нестическим характеристикам, однако в группе пациентов с -786СС генотипом достоверно чаще выявлялись женщины и больные с избыточной массой тела (табл. 5).
При анализе динамики вымывания МВ-фракции КФК отмечено, что больные с -786ТТ генотипом характеризовались достоверно более высоким пиковым уровнем данного фермента, чем у пациентов с
Таблица 3. Сравнительный анализ распределения частот генотипов гена Т-786С промотора эндотелиальной NO-синтетазы у здоровых доноров разных этнических групп, п (%)
8
6
4
2
0
Исследование Группа контроля Colombo M. et al., 2003 [10] Ghilar-di G. et al., 2002 [11] Jeeroobur-khan N. et al., 2001 [20] Alvarez R. et al., 2001 [5] Poirier O. et al., 1999 [37] Poirier O. et al., 1999 [37] Hynd-man M.E. et al., 2002 [17] Iwai N. et al., 1999 [18]
N 83 138 133 2720 300 155 421 705 3918
Популяция Украина Италия Италия Великобритания Испания Северная Ирландия Франция Канада Япония
т/т 40 (48,2) 47 (34,1)* 54 (40,6) 1026 (37,7)* 120 (40) 57 (36,8) 126 (29,9)** 274 (38,9) 3127 (79,8)***
т/с 38 (45,8) 71 (51,4) 61 (45,9) 1300 (47,8) 137 (45,7) 64 (41,3) 220 (52,3) 325 (46,1) 748 (19,1)***
с/с 5 (6,0) 20 (14,5)* 18 (13,5)* 394 (14,5)* 43 (14,3)* 34 (21,9)** 75 (17,8)** 106 (15,0)* 43 (11)***
Примечания: * — p < 0,05; ** — p < 0,01; *** — p < 0,001 по сравнению с группой контроля.
Таблица 4. Скорость распространения пульсовой волны на участках сонной — лучевой и сонной — бедренной артерий в зависимости от генотипа eNOS у больных c ОКС
СРПВ ТТ (n = 30) ТС (n = 34) СС (n = 9) ТС + СС (n = 43)
Сонная — лучевая артерии 9,10 ± 0,15 9,38 ± 0,18 9,71 ± 0,22* 9,45 ± 0,15*
Сонная — бедренная артерии 8,68 ± 0,26 8,74 ± 0,21 10,02 ± 0,71* 9,01 ± 0,23
Примечание: * — р < 0,05 по сравнению с группой больных с генотипом ТТ.
полиморфизмом гена eN0S. У этой категории больных были отмечены также более быстрое достижение пиковых значений и более ранняя нормализация уровня МВ-КФК (табл. 6). Быстрое вымывание МВ-фракции КФК указывает на наличие восстановленного коронарного кровотока и отсутствие дальнейшего повреждения жизнеспособных кардио-миоцитов, а также свидетельствует о стабильности зоны некроза за наблюдаемый период. По данным ряда авторов, продолжительная гиперферментемия является маркером увеличения зоны некроза или возникновения дополнительных очагов поражения в сердечной мышце [1]. В первые 12 часов от начала болевого синдрома пик МВ-КФК был достигнут у 30 (69,8 %) больных с -786ТТ генотипом, 18 (41,9 %) больных с -786ТС генотипом и у 4 (36,4 %) больных с -786СС генотипом. Полученные данные свидетельствуют, что открытие ИОКА достоверно более часто регистрировалось у больных с -786ТТ генотипом, чем у больных с полиморфизмом промотора гена eN0S. Данные результаты подтверждались также другими неинвазивными маркерами открытия ИОКА (наличие реперфузионных аритмий, динамика сегмента 8Т на электрокардиограмме, купирование болевого синдрома). При этом больные выделенных групп не отличались между собой по частоте использования основных групп антикоагулянтных, антитромбоци-тарных и антиишемических препаратов как при проведении тромболитической терапии, так и в течение всего госпитального периода заболевания. Таким образом, в нашем исследовании -786ТТ генотип промотора гена eN0S ассоциировался с более частым открытием ИОКА при проведении тромболитиче-
ской терапии у больных с ОКС со стойкой элевацией сегмента ST на электрокардиограмме, чем у больных с полиморфизмом гена eNOS.
Проведена оценка течения госпитального периода заболевания у больных с ОКС в зависимости от генотипа промотора гена eNOS. Отмечена тенденция к более частому развитию желудочковых нарушений ритма у больных с -786ТТ генотипом. Подобное увеличение регистрации желудочковой экстрасистолии и идиовентрикулярного ритма связано с большей эффективностью тромболитиче-ской терапии у этой категории больных и является следствием реперфузионного повреждения миокарда. Однако по частоте развития жизнеопасных аритмий (желудочковая тахикардия и фибрилляция желудочков), а также блокад сердца достоверных отличий между группами получено не было. Вероятность развития других осложнений в течение первых суток заболевания у больных выделенных групп также достоверно не отличалась (табл. 7).
Частота внутригоспитальных осложений (после 1-х суток) была выше у больных с полиморфизмом гена eNOS. В этой группе (носители измененной аллели С — суммарно -786ТС и -786СС генотипы) достоверно чаще регистрировалась желудочковая экстрасистолическая аритмия на 10-е сутки и была отмечена тенденция к более частой регистрации ОЛЖН (Killip II—III) на 5-е сутки от развития ИМ. Не было выявлено статистически достоверных различий между группами по частоте развития смерти, нефатального инфаркта миокарда и острого нарушения мозгового кровообращения (ОНМК). Однако у больных с наличием генетического поли-
Таблица 5. Характеристика больных с острым ИМ, которым проводилась тромболитическая терапия, п (%)
Показатель Исходная группа больных (n = 97)
Возраст, годы 55,0 ± 0,9
Пол: — мужчины — женщины 87 (89,7) 10 (10,3)
Артериальная гипертония 46 (47,4)
Сахарный диабет II типа 8 (8,2)
Курение 63 (64,9)
Перенесенный инфаркт миокарда 13 (13,4)
Избыточная масса тела (индекс массы тела более 30 кг/м2) 25 (25,8)
Время от начала заболевания до поступления, ч 3,0 ± 0,1
Передняя локализация инфаркта 46 (47,4)
Генотип промотора eNOS -786ТТ 43 (44,3)
-786ТС 43 (44,3)
-786СС 11 (11,4)
Показатель__-786ТТ (п = 43) -786ТС (п = 43) -786СС (п = 11) -786ТС + -786СС (п = 54)
Пик МВ-КФК, мккат/ч 0,32 ± 0,06__0,23 ± 0,05__0,31 ± 0,04__0,25 ± 0,03
Время достижения 12,57 ± 1,14 14,25 ± 1,58 16,36 ± 2,01 14,80 ± 1,36 пика МВ-КФК, ч
Время нормализации 44,43 ± 4,73 51,50 ± 5,60 51,60 ± 4,39 52,00 ± 3,89 МВ-КФК, ч
Таблица 6. Динамика кардиоспецифических ферментов у больных ОИМ исследуемых групп (M ± m)
морфизма более часто отмечалось развитие комбинированной конечной точки «смерть/нефатальный ИМ/ОНМК», а также ранней постинфарктной стенокардии, что имело статистическую силу в виде тенденции.
Таким образом, больные с ОКС со стойкой эле-вацией сегмента ST и -786ТТ генотипом промотора гена eNOS, которым проводилась терапия стреп-токиназой с целью реперфузии, характеризуются более благоприятным течением госпитального периода заболевания, что может быть связано как с большей эффективностью фибринолитической терапии, так и с другими NO-зависимыми механизмами.
Обсуждение
В эксперименте было показано, что наличие аллели С в положении 786 промотора гена eNOS приводит к снижению его активности на 52 ± 11 %, что было впоследствии подтверждено в исследовании in vivo [13]. Формирующийся в результате уменьшения экспрессии гена недостаток eNOS является причиной уменьшения синтеза и высвобождения
оксида азота и дисфункции эндотелия [36, 39, 40, 42, 44—46]. В нашем исследовании обнаружено, что полиморфизм гена эндотелиальной МО-синтетазы ассоциируется со снижением эндотелийзависимой вазодилатации после манжеточной пробы, что подтверждает наличие эндотелиальной дисфункции у этой категории больных. Нами также впервые продемонстрирована связь между полиморфизмом гена еМОБ и жесткостью артерий эластического и мышечного типа. Этот показатель в настоящее время используется как интегральный маркер состояния сосудистой стенки, поэтому его повышение у больных с полиморфизмом N0 свидетельствует о более выраженных и длительных структурных и функциональных изменениях сосудистой системы у данной категории больных. Эти изменения в клинике могут реализоваться увеличением тонуса венечных артерий, повышенной склонностью к коронароспазму и извращенной реакции венечных артерий на введение ацетилхолина, повышенным риском ресте-нозов после стентирования венечных артерий, что было описано в литературе [15, 26, 33, 35, 36, 47, 48]. В дополнение к своей общеизвестной роли в регу-
Таблица 7. Осложнения госпитального периода заболевания (1-е сутки), n (%)
Показатель -786ТТ (n = 43) -786ТС (n = 43) -786СС (n = 11) -786ТС + -786СС (n = 54)
ОЛЖН Killip II Killip III 11 (25,6) 1 (2,3) 14 (32,6) 1 (2,3) 2 (18,2) 1 (9,1) 16 (29,6) 2(3,7)
ЖЭС (Lown 2-5) 30 (69,8)* 28 (65,1) 5 (45,5) 33 (61,1)
Идиовентрикулярный ритм 22 (51,2)* 19 (44,2) 3 (27,3) 22 (40,7)
Желудочковая тахикардия 10 (23,3) 8 (18,6) 1 (9,1) 9 (16,7)
Фибрилляция желудочков 2 (4,6) 0 1 (9,1) 1 (1,9)
АВ-блокада (2-3-й ст.) 7 (16,3) 7 (16,3) 0 7 (13,0)
Рецидивирование болевого синдрома 7 (16,3) 6 (14,0) 3 (27,3) 9 (16,7)
Примечание: * — p < 0,1 по сравнению с группой больных с -786СС генотипом.
Таблица 8. Осложнения госпитального периода заболевания (после 1-х суток), п (%)
Показатель -786ТТ (n = 43) -786ТС (n = 43) -786СС (n = 11) -786ТС + -786СС (n = 54)
ОЛЖН (Killip II-III) 3-и сутки 14 (32,6) 14 (32,6) 3 (27,3) 17 (31,5)
5-е сутки 1 (2,3) 5 (11,9)* 0 5 (9,4)*
7-е сутки 0 2 (4,8) 0 2 (3,8)
ЖЭС 3-и сутки 24 (55,8) 27 (64,3) 5 (45,5) 32 (60,4)
5-е сутки 10 (23,3) 12 (29,3) 2 (18,2) 14 (26,9)
10-е сутки 1 (2,3) 6 (14,6)* 2 (18,2) 8 (15,4)**
Желудочковая тахикардия 0 2 (4,7) 0 2(3,7)
Фибрилляция желудочков 0 1 (2,3) 0 1 (1,9)
АВ-блокада (2-3-й ст.) 1 (2,3) 1 (2,3) 0 1 (1,9)
Постинфарктная стенокардия 4 (9,3) 7 (16,3) 3 (27,3) 10 (18,5)*
Нефатальный рецидив ИМ 1 (2,3) 3 (7,0) 1 (9,1) 4 (7,4)
Смерть 1 (2,3) 2 (4,7) 0 2(3,7)
ОНМК 0 1 (2,3) 0 1 (1,95)
Смерть/ИМ/ОНМК 2 (4,6) 6 (14,0)* 1 (9,1) 7 (13,0)*
Острая аневризма ЛЖ (10-е сут.) 4 (9,3) 5 (11,6) 5 (45,4)** 10 (18,5)
ляции сосудистого тонуса оксид азота также предупреждает агрегацию тромбоцитов, повышает высвобождение тканевого активатора плазминогена, является модулятором активности симпатического и парасимпатического звеньев вегетативной нервной системы [3, 4, 16, 36, 39, 44]. Приведенные данные литературы и результаты нашего исследования свидетельствуют о более выраженной сосудистой и автономной дисфункции у больных с полиморфизмом гена еМОБ и таким образом определяют категорию больных с высоким риском развития осложнений.
Нами впервые (по данным доступной литературы) выполнена фармакогенетическая оценка эффективности проведения тромболитической терапии в зависимости от генотипа промотора гена еМОБ. У больных с ОКС со стойкой элевацией сегмента БТ на электрокардиограмме показано, что -786ТТ генотип промотора гена еМОБ ассоциируется с более частым открытием ИОКА при проведении тромболитической терапии. Объяснением данного факта может служить связь между функцией эндотелия и высвобождением тканевого активатора плазминогена. Было показано, что внутриартериальная инфузия ацетилхолина (аго-нист эндотелия) вызывает быстрое высвобождение тканевого активатора плазминогена, а блокада эндотелиальной МО-синтетазы (№-монометил — Ь-аргинин) приводит к значительному снижению его уровня. МО также является активным регулятором процесса тромбообразования: при агрегации тромбоцитов включается МО-зависимый механизм отрицательной обратной связи, ограничивающий этот процесс. Первое звено данного механизма состоит в высвобождении МО, инги-бирующего агрегацию и адгезию, из самих агрегирующих тромбоцитов. Второе звено представляет собой взаимодействие между тромбоцитами и эн-дотелиальными клетками. Агрегирующие тромбоциты высвобождают АДФ, который активирует эн-дотелиальную МО-синтазу (еМОБ). Образующийся эндотелиальный МО предупреждает агрегацию тромбоцитов и противодействует вазоконстрик-торному эффекту тромбоксана А2 и серотонина, которые продуцируются тромбоцитами. В условиях дефицита эндотелиального МО этот защитный механизм не работает, и, соответственно, создаются условия, способствующие вазоконстрикции, тромбозам и ишемии. Считается также, что дисфункция эндотелия приводит к снижению уровня тромбомодулина — белка, который блокирует способность тромбина расщеплять фибриноген и активирует протеин С [16]. Описанные выше патогенетические механизмы, по всей вероятности, явились причиной более благоприятного течения острого периода ИМ у больных с -786ТТ генотипом промотора гена еМОБ.
Выводы
1. Встречаемость генотипа -786СС промотора гена эндотелиальной МО-синтетазы в украинской
популяции достоверно выше, чем в японской, и меньше, чем у западноевропейцев, белых североамериканцев и австралийцев.
2. Генотип -786СС промотора примерно в 3,5 раза чаще встречается у больных с острым коронарным синдромом, чем у здоровых лиц. Полученные данные указывают на патогенетическое значение данного полиморфизма в развитии острых форм ишемической болезни сердца, особенно у мужчин с преждевременным развитием атеросклероза (до 55 лет).
3. Полиморфизм гена эндотелиальной NO-синтетазы ассоциируется со снижением эндоте-лийзависимой вазодилатации и повышенной жесткостью артерий мышечного и эластического типа у больных с ОКС, что может указывать на возможные механизмы реализации измененного генотипа.
4. У больных с ОКС со стойкой элевацией сегмента ST на электрокардиограмме -786ТТ генотип промотора гена eNOS ассоциируется с более частым открытием инфарктобусловливающей коронарной артерии при проведении тромболи-тической терапии стрептокиназой, а также более благоприятным течением госпитального периода заболевания.
Список литературы
1. Гватуа Н.А., Солоненко И.Н., Шкляр Л.В. Особенности формирования зоны некроза при крупноочаговом и мелкоочаговом инфаркте миокарда // Кардиология. — 1988. — № 11. — С. 112-114.
2. Досенко В.6., Загорш В.Ю., Мойбенко О.О., Пархоменко О.М. Патофiзiологiчнi аспекти генетичного nолiморфiзму ендотелiальноi NO-синтази // ФЫзюл. журн. — 2002. — Т. 48, № 6. — С. 86-102.
3. Мойбенко О.О., Павлюченко В.Б., Даценко В.В. та т. До-слiдження ролi ендотелшзалежних факторiв у реалiзацüкардю-генних рефлекав за нормальних та nатологiчних умов// ФЫзюл. журн. — 2000. — Т. 46, № 2. — С. 19-32.
4. Мойбенко О.О., Сагач В.Ф., Шаповал Л.М. та т. Роль ендотелю та бiологiчно-активних речовин ендотелiального по-ходження в регуляци кровообщ та дiяльностi серця // Фiзiол. журн. — 1997. — Т. 43, № 1-2. — С. 3-18.
5. Alvarez R., Gonzalez P., Batalla A. et al. Association between the NOS3 (-786 T/C) and the ACE (I/D) DNA genotypes and early coronary artery disease // Nitric. Oxide. — 2001. — Vol. 5, № 4. — P. 343-348.
6. Asmar R., Topouchian J., Pannier B. et al. Pulse wave velocity as endpoint in large-scale intervention trial (The Complior Study) // J. Hypertens. — 2001. — 19. — 813-18.
7. Bertrand M.E., Simoons M.L., Fox K.A.A. et al. Management of acute coronary syndromes in patients presenting without persistent ST-segment elevation. The Task Force on the Management of Acute Coronary Syndromes of the European Society of Cardiology // Eur. Heart J. — 2002. — Vol. 23. — P. 1809-1840.
8. Braunwald E., Antman E.M., Brooks N.H. et al. ACC/AHA guidelines for the management of patients with unstable angina and non ST-elevation myocardial infarction: Executive summary and Recommendations. A report of the American College of Cardiology/ American Heart Association task force on practice guidelines (Committee on management of patients with unstable angina) // Circulation. — 2000. — Vol. 102. — P. 1193-1209.
9. Bredt D.S., Hwang P.M., Glatt C.E., Lowenstein C. et al. Cloned and expressed nitric oxide synthase structurally resembles cytochrome P-450reductase//Nature. — 1991. — Vol. 351. — P. 714718.
10. Casas J.P., Bautista L.E., Humphries S.E., Hingorani A.D. Endothelial nitric oxide synthase genotype and ischemic disease. Me-
ta-analysis of 26 studies involving 23028 subjects // Circulation. — 2004. — Vol. 109. — P. 1359-1365.
11. Colombo M.G., Paradossi U, Andreassi M.G. et al. Endothelial nitric oxide synthase gene polymorphisms and risk of coronary artery disease //Clin. Chem. — 2003. — Vol. 49. — P 389-395.
12. Corretti M, Anderson T., Benjamin E. et al. Guidelines for the Ultrasound Assessment ofEndothelial-Dependent Flow-Mediated Vasodilatation of the Brahial Artery // J. Am. Coll. Cardiol. — 2002. — Vol. 39. — P. 257-265.
13. Doshi A., Lesinski A., Binkley P. A Promoter Polymorphism of the Endothelial Nitric Oxide Synthase Gene Reduces Endothelial Nitric (Oxide Synthase Expression in Patients With Heart Failure // Circulation. — 2006. — Vol. 114. — P. 802.
14. Ghilardi G., Biondi M.L., DeMonti M. et al. Independent risk factor for moderate to severe internal carotid artery stenosis: T786C mutation of endothelial nitric oxide synthase gene // Clin. Chem. — 2002. — Vol. 48, № 7. — P. 989-993.
15. Gomma A.H., Elrayess M.A., Knight C.J. et al. The endothelial nitric oxide synthase (Glu298Asp and -786T > C) gene polymorphisms are associated with coronary in-stent restenosis// Eur. Heart J. — 2002. — Vol. 23. — P. 1955-1962.
16. Gregory Y.H. Effects of hormone-replacement therapy on hemostatic factors, lipid factors and endothelial functions in women undergoing surgical menopause: implications for prevention for atherosclerosis //Am. Heart J. —1997. — Vol. 134(4). — P. 164-771.
17. Harrison D.G. Cellular and molecular mechanisms of endothelial cell dysfunction // J. Clin. Invest. — 1997. — Vol. 19. — P. 23-27.
18. Hingorani A.D. Polymorphisms in endothelial nitric oxide synthase and atherogenesis: John French Lecture 2000// Atherosclerosis. — 2001. — Vol. 154. — P. 521-527.
19. Hingorani A.D., Jia H., Stevens P.A. et al. A common variant in exon 7 of the endothelial constitutive nitric oxide synthase gene // Clin. Sci. — 1995. — Vol. 88. — P. 21.
20. Hohnloser S.H., Label M, Kasper W. et al. Assessment of coronary artery patency after thrombolytic therapy: accurte prediction utilizing the combined analysis of three noninvasive markers// J. Am. Coll. Cardiol. — 1991. — Vol. 18, № 1. — P. 44-49.
21. Hyndman M.E., Parsons H.G., Verma S. et al. The T-786® C mutation in endothelial nitric oxide synthase is associated with hypertension //Hypertension. — 2002. — Vol. 39. — P. 919-925.
22. Iwai N., Katsuya T., Ishikawa K. et al. Human prostacyclin synthase gene and hypertension: the Suita Study // Circulation. — 1999. — Vol. 100. — P. 2231-2236.
23. Janssens S.P., Shimouchi A., Quetermous T. et al. Cloning and expression of cDNA encoding human endothelium-derived relaxing factor/nitric oxide synthase // J. Biol. Chem. — 1992. — Vol. 267. — P. 14519-14522.
24. Jeerooburkhan N., Jones L.C., Bujac S. et al. Genetic and environmental determinants of plasma nitrogen oxides and risk of ischemic heart disease//Hypertension. — 2001. — Vol. 38. — P. 10541061.
25. Koenig W. Atherosclerosis involves more than just lipids: focus on inflammation //Eur. Heart J. — 1999. — Vol. 1 (suppl. T). — P. 19-26.
26. Kugiyama K., Yasue H., Ohgushi M. et al. Deficiency in nitric oxide bioactivity in epicardial coronary arteries of cigarette smokers// J. Amer. Coll. Cardiology. — 1996. — Vol. 28. — P. 1161-1167.
27. Lamas S., Marsden P.A., Li G.K. et al. Endothelial nitric oxide synthase: molecular cloning and characterization of a distinct constitutive enzyme isoform//Proc. Natl. Acad. Sci. USA. — 1992. — Vol. 89. — P. 6348-6352.
28. Lowenstein C.J., Glatt C.E., Bredt D.S., Snyder S.H. Cloned and expressed macrophage nitric oxide synthase contasts with the brain enzyme//Proc. Natl. Acad. Sci. USA. — 1992. — Vol. 89. — P. 67116715.
29. Luscher T.F., Tschudi M.R.., Wenzel R..R., Noll G. Endotheliale dysfunktion und stickst off monoxid (NO; Nitric Oxide) //Inter-nist. — 1997. — Vol. 38. — P. 411-419.
30. Marsden P.A., Heng H.H., Scherer S.W. et al. Structure and chromosomal localization of the human constitutive endothelial nitric oxide synthase gene // J. Biol. Chem. — 1993. — Vol. 268. — P. 17478-17488.
31. Marsden P.A., Schappert K.T., Chen H.S. et al. Molecular cloning and characterization of human endothelial nitric oxide synthase //FEBS Lett. — 1992. — Vol. 307. — P. 287-293.
32. Moncada S., Palmer R.M.J., Higgs E.A. Nitric oxide: physiology, pathology and pharmacology // Pharmacol. Rev. — 1991. — Vol. 43. — P. 109-142.
33. Motoyama T., Kawano H., Kugiyama K. et al. Endothelium-dependent vasodilation in the brachial artery is impaired in smokers: effect of vitamin C // Amer. J. Physiology. — 1997. — Vol. 273. — P. 1644-1650.
34. Naber C.K., Siffert W, Erbe R., Heusch G. Genetics of human coronary vasomotion//Arch. Mal. Coeur. — 2004. — Vol. 97. — P. 255-260.
35. Naber C.K., Oldenburg O., Frey U. et al. Relevance of the T-786C and Glu298Asp variants in the endothelial nitric oxide synthase gene for cholinergic and adrenergic coronary vasomotor responses in man // Circulation. — 2003. — Vol. 106 (suppl. L). — P. 1042 (Abstract).
36. Nakayama M., Yasue H, Yoshimura M. et al. T-786®C mutation in the 5'-flanking region of the endothelial nitric oxide synthase gene is associated with coronary spasm // Circulation. — 1999. — Vol. 99. — P. 2864-2870.
37. Nakayama M., Yasue H., Yoshimura M. et al. T(-786)®C mutation in the 5'-flanking region of the endothelial nitric oxide synthase gene is associated with myocardial infarction, especially without coronary organic stenosis//Amer. J. Cardiology. — 2000. — Vol. 86, № 6. — P. 628-634.
38. Poirier O., Mao C, Mallet C. et al. Polymorphisms of the endothelial nitric oxide synthase gene — no consistent association with myocardial infarction in the ECTIMstudy // Eur. J. Clin. Invest. — 1999. — Vol. 29. — P. 284-290.
39. Ross R. Atherosclerosis — an inflammatory disease // New Engl. J. Med. — 1999. — Vol. 340. — P. 115-126.
40. Rossi G.P., Taddei S., Virdis A. et al. The T-786C and Glu-298Asp polymorphisms of the endothelial nitric oxide gene affect the forearm blood flow responses of Caucasian hypertensive patients // J. Amer. Coll. Cardiology. — 2003. — Vol. 41. — P. 938-945.
41. Sessa W.C. The nitric oxide synthase family of proteins // J. Vasc. Res. — 1994. — Vol. 31. — P. 131-143.
42. Song J., Yoon Y, Park K.U. et al. Genotype-specific influence on nitric oxide synthase gene expression, protein concentration, and enzyme activity in cultured human endothelial cells// Clin. Chem. — 2003. — Vol. 49, № 6. — P. 847-852.
43. Takagi S., Goto Y., Nonogi H. et al. Genetic Polymorphisms of angiotensin converting enzyme (I/D) and endothelial nitric oxide synthase (T(-788)C) genes in Japanese patients with myocardial infarction // Thromb Haemost. — 2001. — Vol. 86. — P. 1339-1340.
44. Tanus-Santos J.E., Desai M., Deak L.R. et al. Effects of en-dothelial nitric oxide synthase gene polymorphisms on platelet function, nitric oxide release, and interactions with estradiol//Pharmaco-genetics. — 2002. — Vol. 12. — P. 407-413.
45. Tsukada T., Yokoyama K., Arai T. et al. Evidence of association of the ecNOS gene polymorphism with plasma NO metabolite levels in humans // Biochem. Biophys. Res. Commun. — 1998. — Vol. 245. — P. 190-193.
46. Yoon Y., Song J., Hong S.H., Kim J.Q. Plasma nitric oxide concentrations and nitric oxide synthase gene polymorphisms in coronary artery disease// Clin. Chem. — 2000. — Vol. 46, № 10. — P. 1626-1630.
47. Yoshimura M., Nakayama M, Shimasaki Y. et al. A T-786C mutation in the 5'-flanking region of the endothelial nitric oxide synthase gene and coronary arterial vasomotility // Amer. J. Cardiology. — 2000. — Vol. 85. — P. 710-714.
48. Yoshimura M, Yasue H., Nakayama M. et al. Genetic risk factors for coronary artery spasm: significance of endothelial nitric oxide synthase gene T-786C and missense Glu298Asp variants // J. In-vestig. Med. — 2000. — Vol. 48, № 5. — P. 367-374.
49. ZhangR., Min W., Sessa W.C. Functional analysis of the human endothelial nitric oxide synthase promoter. Sp1 and GATA factors are necessary for basal transcription in endothelial cells// J. Biol. Chem. — 1995. — Vol. 270. — P. 15320-15326.
Получено 16.02.14 ■
Пархоменко А.Н.1, ЛутайЯ.М.1, IpidH О.!.1, Кожухов С.Н.1, Скаржевський А.А.1, Аосенко В.Е.2, Мойбенко А.А.2 1ННЦ «Нститут карАЬлогП iменi академика М.Д. Стражеска» НАМН Украни, м. Кив Институт фiзiолопí iM. О.О. Богомольця НАН Украни, м. Ки1в
КЛШкО-ПРОГНОСТИЧНЕ ЗНАЧЕНИЯ nOAiMOPOi3My ГЕНА EHAOTEAiAAbHOI NO-СИНТЕТАЗИ В ХВОРИХ i3 ГОСТРИМИ КОРОНАРНИМИ СИНАРОМАМИ
Резюме. Оксид азоту (NO) виробляеться ендотелiаль-ною синтетазою оксиду азоту (eNOS) i вiдiграе важливу роль у пщтримщ судинного гомеостазу. Було визначено pi3Hi полiморфiзми гена eNOS. -786С полiморфiзм промотора гена модулюе експресiю гена eNOS i вщповщно — синтез NO.
Обстеженi 325 хворих iз гострим коронарним синдромом (ГКС) i 83 здорових пащенти (контрольна група). Полiморфiзм eNOS проаналiзовано за допомогою методiв полiмеразноi ланцюгово'1 реакци й полiморфiзму довжин рестрикцшних фрагментiв. В украiнцiв генотип C/C промотора гена eNOS зус^чаеться частше, нiж у японцiв, i рщше, нiж у мешканцiв Захiдноi бвропи, Пiвнiчноi Америки й Австрали. Значна рiзниця в розподш генотипу спостерiгалася мiж дослщжуваними пащентами й групою контролю. Патологiчний C/C генотип значно частше ви-значаеться у хворих iз ГКС, особливо в чоловтв молодше 55 ротв.
Наявнiсть -786CC генотипу була пов'язана iз збшьшен-ням артерiальноi жорсткосп й зниженням потш-опосе-редкованого розширення плечовоi артери. Реперфузiйна терапiя була ефектившшою в пацiентiв iз -786TT варiан-том промотора гена eNOS. Наявшсть -786TT генотипу обумовлювала меншу к1льк1сть ускладнень у перiод гост-талiзацii.
Ключовi слова: полiморфiзм гена, ендотелiальна NO-синтетаза, ендотелiальна дисфункцiя, швидкiсть поши-рення пульсовоi хвил^ гострий коронарний синдром, тромболiтична терапiя.
Parkhomenko A.N.1, Lutay Ya.M.1, Irkin O.I.1, KozhukhovS.N.1,
SkarzhevskyA.A.1, Dosenko V.Ye.2, Moybenko A.A.2
1State Institution National Scientific Center «Institute
of Cardiology named after N.D. Strazhesko» of National
Academy of Medical Sciences of Ukraine»
2Institute of Physiology named after A.A. Bogomolets, Kyiv,
Ukraine
CLINICAL AND PROGNOSTIC VALUE OF ENDOTHELIAL NO-SYNTHETASE GENE POLYMORPHISM IN PATIENTS WITH ACUTE CORONARY SYNDROMES
Summary. Nitric oxide (NO) is produced by endothelial nitric oxide synthetase (eNOS) and plays important role in normal vascular homeostasis. In the eNOS gene various polymorphisms have been identified. The -786T>C polymorphism in the gene promoter has been demonstrated to modulate the eNOS gene expression and so the synthesis of NO.
325 patients with ACS and 83 healthy controls were investigated. The eNOS polymorphism has been analyzed by poly-merase chain reaction and restriction fragment length polymorphism. In Ukrainians the C/C genotype in the eNOS gene promoter was more common than in Japanese and less common than in west Europeans, north Americans and Australians. A significant difference in genotype distribution was observed between patients and controls. Pathological C/C genotype was significantly more often determined in ACS patients, especially in men younger than 55 years old.
-786CC genotype was associated with increase in arterial stiffness and lower flow-mediated brachial artery dilatation. -786TT variant of the eNOS gene promoter in investigated patients was associated with better efficacy of reperfusion therapy. Patients with -786TT genotype had fewer complications during the period of hospitalization.
Key words: gene polymorphism, endothelial NO-synthetase, endothelial dysfunction, pulse ware velocity, acute coronary syndrome, thrombolytic therapy.
